DLD-1-solut: DLD-1-solujen sovellukset ja oivallukset paksusuolisyövän tutkimuksessa: DLD-1-solujen sovellukset ja oivallukset paksusuolisyövän tutkimuksessa
DLD-1 on ihmisen kolorektaalikarsinooman solulinja, jota käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa. Se on arvokas väline paksusuolen syövän eri näkökohtien tutkimiseen, mukaan lukien kasvaimen kehittyminen, eteneminen, taustalla olevat molekyylimekanismit ja vaste terapeuttisille aineille. Näin ollen DLD-1 on erinomainen taudin ymmärtämisessä ja mahdollisten hoitostrategioiden kehittämisessä.
Tässä artikkelissa annetaan tärkeää tietoa DLD-1-solulinjasta, joka sinun tulisi tietää ennen sen kanssa työskentelyä. Se kattaa:
- DLD-1-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
- DLD-1-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
- DLD-1-solulinja: DLD-1D-1: edut ja rajoitukset: edut ja rajoitukset
- DLD-1-solulinjan tutkimussovellukset
- DLD-1-soluja koskevat tutkimusjulkaisut
- DLD-1-solulinjan resurssit: DLD-1D-1: protokollat, videot ja muuta
1. DLD-1-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Ennen kuin tutkija käsittelee solulinjaa, hän kiinnittää ensin huomiota sen alkuperään ja yleisiin ominaisuuksiin. Tässä artikkelin osassa esitellään yksityiskohtaisesti DLD-1-solulinja. Siinä käsitellään seuraavia usein kysyttyjä kysymyksiä: Mitä ovat DLD-1-solut? Mikä on DLD-1-syöpäsolulinja? Mitä ovat DLD-1-solulinjan mutaatiot? Mikä on DLD-1-solun koko? Mikä on DLD-1-solujen morfologia?
- DLD-1, paksusuolen syöpäsolulinja, on peräisin 67-vuotiaan miespotilaan paksusuolen adenokarsinoomasta paksusuolessa. D.L. Dexter ja kollegat eristivät sen vuosina 1977-1979. Tämä solulinja on samaa alkuperää kuin HCT-8-, HCT-15- ja HRT-18-solulinjat.
- DLD-1-soluilla on kolorektaalisyöpien tavoin mikrosatelliitti-instabiiliusfenotyyppi [1].
- DLD-1:n mutaatioita ovat KRAS, P53, BRAF, BRCA1 ja BRCA2. DLD-1:n P53-statuksen, DLD-1:n BRCA-, DLD-1:n BRCA2- ja DLD-1:n KRAS-mutaation vuoksi näitä soluja pidetään ihanteellisina syöpätutkimuksiin.
- Näillä soluilla on epiteelin kaltainen morfologia.
- DLD-1-solulinjan koko on noin 15 µm.
- Ihmisen kolorektaalisyöpäsolulinjalla DLD-1 on pseudodiploidinen karyotyyppi. Noin 86 prosentilla soluista on modaalinen kromosomiluku 46. Polyploidiaa voi kuitenkin esiintyä myös 17,1 prosentissa solupopulaatiosta.
2.dLD-1-solulinjan viljelytiedot
Ennen minkään solulinjan viljelyä sinun on tunnettava sen soluviljelyn perusvaatimukset. Tässä jaksossa korostetaan tärkeitä seikkoja, jotka sinun on opittava ennen DLD-1-solulinjan käsittelyn aloittamista. Näihin kuuluvat: Mikä on DLD-1:n kaksinkertaistumisaika? Mikä on DLD-1-kasvatusalusta? Mikä on DLD-1-solujen kylvötiheys? Miten DLD-1-soluja viljellään?
Keskeiset seikat DLD-1-solujen viljelyä varten
|
Kaksinkertaistumisaika: |
DLD-1-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 15 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
DLD-1 on tarttuva ihmisen paksusuolen syöpäsolulinja. Solut kasvavat yksikerroksisina. |
|
Kylvötiheys: |
DLD-1-solut kylvetään tiheydellä 1-2 x104 solua/cm2. Tarttuvat solut pestään 1x fosfaattipuskurisuolaliuoksella (PBS) ja inkuboidaan passage-liuoksella (Accutase) huoneenlämmössä. Kun inkubaatio on kestänyt 8-10 minuuttia, irronneet solut lisätään elatusaineeseen ja sentrifugoidaan. Solupelletti suspendoidaan sitten varovasti uudelleen, ja solut kaadetaan uusiin kasvatusastioihin, jotka sisältävät kasvualustaa. |
|
Kasvualusta: |
DLD-1-solujen kasvattamiseen käytetään RPMI 1640 -nestettä, jossa on väliaineen lisäaineita, mukaan lukien 10 % naudan sikiöseerumia FBS, 2,1 mM stabiilia glutamiinia ja 2,0 g/l NaHCO3. Väliaine on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
DLD-1-viljelmiä pidetään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, jossa on 5 % hiilidioksidia. |
|
Varastointi: |
DLD-1-solut säilytetään nestemäisen typen höyryfaasissa tai sähköisessä ultramatalan lämpötilan pakastimessa (alle -150 °C:n lämpötilassa). |
|
Pakastusprosessi ja väliaine: |
DLD-1-solujen jäädyttämiseen voidaan käyttää CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. Hidas pakastusprosessi on aina suositeltava, jotta lämpötila laskee asteittain 1 °C:n verran, mikä estää solujen sokin ja suojaa niiden elinkelpoisuutta. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastettuja soluja sulatetaan 37 °C:n lämpötilaan esiasetetussa vesihauteessa 40-60 sekunnin ajan, kunnes jäljellä on pieni jääkerrostuma. Tämän jälkeen solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen ja sentrifugoidaan. Tämä vaihe on välttämätön, jotta jäädytysmedian komponentit saadaan poistettua soluista. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen kasvualustaan ja annostellaan kolviin kasvua varten. |
|
Bioturvallisuustaso: |
DLD-1-solulinjaa ylläpidetään bioturvallisuustason 1 laboratorioissa. |
3.dLD-1-solulinja: D-112-1: Edut ja rajoitukset: Edut ja rajoitukset
Tässä artikkelin osassa tarkastelemme DLD-1-paksusuolisyövän solulinjan etuja ja rajoituksia.
Edut
DLD-1-solulinjan tärkeimmät edut ovat:
|
Paksusuolen syöpämalli |
DLD-1-soluilla on mutaatioita, joita esiintyy yleisesti paksusuolisyöpäpotilailla, kuten DLD-1 KRAS-mutaatio, DLD-1 BRCA ja DLD-1 BRCA2. Tämän merkityksen vuoksi ne ovat kliinisesti sopiva solumalli tämän taudin tutkimiseen. |
|
Tumorigeeninen solulinja |
DLD-1-solut ovat tumorigeenisiä. Ne voivat aiheuttaa kasvaimia, kun ne ruiskutetaan alastomiin hiiriin. Siksi tutkijat käyttävät näitä soluja kehittääkseen ksenograft-kasvainmalleja, joiden avulla voidaan tutkia kasvainten muodostumista, kehitystä ja etenemistä in vivo. |
Rajoitukset
DLD-1-soluihin liittyvät rajoitukset ovat seuraavat:
|
Heterogeenisuus |
DLD-1-paksusuolen syöpäsolupopulaatioissa on geneettistä ja fenotyyppistä heterogeenisuutta. Tämä voi vaikuttaa tutkimustulosten yleistettävyyteen. |
4.dLD-1-solulinjan tutkimussovellukset
DLD-1-solulinjalla on useita sovelluksia syöpätutkimuksessa. Tässä jaksossa käsitellään joitakin merkittäviä sovelluksia.
- Syöpätutkimus: DLD-1-solut toimivat arvokkaana in vitro -mallina paksu- ja peräsuolisyövän kasvun, kehityksen ja etenemisen taustalla olevien molekyylimekanismien ymmärtämisessä. Lisäksi niitä käytetään geeniekspression, signaalireittien ja tiettyjen geneettisten mutaatioiden vaikutuksen tutkimiseen syöpäsolujen käyttäytymiseen. Vuonna 2022 tehdyissä tutkimuksissa havaittiin, että PI3K/Akt/YAP-signalointikaskadi säätelee DLD-1-kolorektaalisyöpäsolulinjan migraatiota ja invasiota [2].
- Lääkekehitys: Tutkijat käyttävät DLD-1-solulinjaa testatakseen syöpälääkkeiden tehokkuutta ja arvioidakseen niiden mahdollisuuksia paksusuolisyövän hoidossa. Tämä auttaa lääkekehityksessä ja taudin tehokkaassa torjunnassa. Vuonna 2022 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin DLD-1-syöpäsolulinjaa ja tutkittiin kemiallisesti syntetisoitujen piiftalosyaniinien, pii-ftalosyaanien, syöpää ehkäisevää vaikutusta. Tutkimustulokset viittasivat siihen, että nämä yhdisteet ovat voimakkaita syövänvastaisia aineita [3]. Mielenkiintoista on, että toisessa tutkimuksessa havaittiin probiootista peräisin olevan P8-proteiinin syöpää ehkäisevä potentiaali DLD-1-soluja käyttäen [4].
5.dLD-1-soluja koskevat tutkimusjulkaisut
Tässä osiossa esitellään muutamia mielenkiintoisia ja usein siteerattuja julkaisuja, joissa käsitellään DLD-1-paksusuolen karsinooma-solulinjaa.
Tämä julkaisu on Journal of Biologically Active Products of Nature -lehdessä (2022). Tutkimuksessa havaittiin, että diosmiini, flavonoidi, indusoi solukuolemaa DLD-1-soluissa ja aiheutti myös solusyklin pysähtymisen; näin ollen se voi olla potentiaalinen syövänvastainen aine.
Bromelaiini tukahduttaa tehokkaasti Kras-mutanttien kolorektaalisyöpää stimuloimalla ferroptoosia
Tässä Animal Cells and Systems -lehdessä (2018) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että bromelaiini, entsyymi, tukahduttaa DLD-1:n KRAS-mutaation ja harjoittaa voimakkaita sytotoksisia vaikutuksia.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin vuonna 2019 "Environmental Toxicology" -lehdessä. Tutkimuksessa selvitettiin luonnollisen yhdisteen, bergaptenin, kasvainvastaista vaikutusta DLD-1-ydinsuolisolulinjan avulla.
Tässä Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials -lehdessä (2023) julkaistussa tutkimuksessa havaittiin , että kurkumiini/rautaoksidi-nanokomposiitit ovat erittäin tehokkaita DLD-1-paksusuolen syöpäsoluja vastaan.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin vuonna 2020 Turkish Journal of Biology -lehdessä. Tutkimuksessa ehdotettiin, että luonnontuote, epibrassinolidin välittämä AKT:n aktivointi DLD-1-soluissa, stimuloi polyamiiniin liittyvää autofagiaa.
6.dLD-1-solulinjaa koskevat resurssit: DDLD-1D-1: protokollat, videot ja muuta
Seuraavassa on muutamia DLD-1-soluja koskevia resursseja:
- DLD-1-transfektio: DLD-1 in vitro -transfektioprotokollasta.
- DLD-1-solut: DLD-1-solujen viljelyvaatimukset, mukaan lukien väliaineet ja viljelyolosuhteet, kuvataan lyhyesti tässä tutkimuksessa. Lisäksi se voi auttaa sinua oppimaan DLD-1-soluissa käytettävän transfektioprotokollan.
Seuraavat linkit sisältävät protokollan DLD-1:n, ihmisestä peräisin olevien paksusuolen syöpäsolujen viljelyyn.
- DLD-1-solulinja: Tämä verkkosivusto tarjoaa perustietoa DLD-1-solulinjasta. Sen avulla voit tutustua erilaisiin DLD-1-soluviljelyprotokolliin, mukaan lukien subkultivointi sekä kryosäilöttyjen ja proliferoivien viljelmien käsittely.
Viitteet
- Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptoottiset geenit uusina kohteina resveratrolin ja kurkumiinin yksittäisille ja yhdistelmähoidoille paksusuolen syövässä. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP-signalointi edistääDLD-1-kolorektaalisyöpäsolujen migraatiota ja invasiota. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Uusien piiftalosyaniinien syöpälääkkeiden aktiivisuus paksusuolen adenokarsinoomasolulinjaa (DLD-1) vastaan. New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.