B16-solut – Perusopas B16-melanoomasoluihin syöpätutkimuksessa

B16 on hiiristä peräisin oleva ihosyövän (melanooman) solulinja. Tämä solulinja on tehokas in vitro -malli ihmisen ihosyöpien tutkimiseen. Sitä käytetään usein kiinteiden kasvainten muodostumisen ja syöpäsolujen etäpesäkkeiden tutkimiseen.

📋 B16-solulinja — Pikatietoja

Kasvatusväliaine: B16-soluja viljellään EMEM-kasvatusliuoksessa (Eagle's Minimum Essential Medium), joka sisältää 10 % sikiön naudan seerumia (FBS). Kasvatusliuos on vaihdettava 2–3 kertaa viikossa.
Kaksinkertaistumisaika: B16-solujen keskimääräiseksi populaation kaksinkertaistumisaikaksi arvioidaan 24 tuntia.
Kasvutyyppi: B16-solut ovat adheesiivisia ja kasvavat monokerroksina.
Bioturvallisuustaso: BSL-1
Saatavana: Cytion — Tilaa B16

Tämä artikkeli auttaa sinua ymmärtämään B16-melanoomasolulinjan perusteet. Erityisesti siinä käsitellään seuraavia asioita:

📋 Sisältö

B16-solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä
B16-solulinjan viljelyohjeet
B16-solulinja: edut ja haitat
B16-solujen käyttökohteet
5. B16-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut
B16-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
Usein kysyttyjä kysymyksiä

B16-solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä

Tässä artikkelin osiossa käsitellään B16-melanoomasolulinjan ominaispiirteitä. Saat vastaukset seuraaviin usein kysyttyihin kysymyksiin: Mikä on B16-syöpäsolulinja? Mistä B16-solut ovat peräisin? Mikä on B16-solujen koko?

B16-solulinja perustettiin vuonna 1954. Nämä solut ovat peräisin C57BL/6J-hiiristä, joille kehittyi spontaanisti ihokasvain Jackson Laboratories -laboratoriossa Mainessa.
Nämä ovat melaniinia tuottavia epiteelisoluja, joilla on kyky metastasoitua pernaan, maksaan ja keuhkoihin.
Melanooma-B16-solut kasvavat yksikerroksisina ja niiden solumorfologia on epiteelin kaltaista ja sukkulamaista.
B16-solulinjan koko on noin 15,4 μm.
B16-soluista on olemassa erillisiä alaklooneja, kuten B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 ja B16F10. Nämä alalinjat eroavat emosoluista B16 ja säilyttävät joitakin erityispiirteitä. Niillä on esimerkiksi eroja morfologiassa, solukokossa ja muissa ominaisuuksissa. B16F10:llä on suuri kyky muodostaa etäpesäkkeitä keuhkoihin, ja B164A5 on aggressiivisin ihosyöpäsolulinja verrattuna B16F10:een, B16-GMCSF:ään ja B16FLT3:een [1].

3D-animaatio, jossa näkyy lähikuva kasvavasta ihosyövästä, kuten pahanlaatuisesta melanoomasta, joka aiheuttaa tulehdusta ympäröivässä kudoksessa.

B16-solulinjan viljelyohjeet

Ennen solulinjan ylläpitoa tai viljelyä kannattaa etsiä keskeisiä tietoja, kuten kaksinkertaistumisaika, solutyyppi, kasvualustat ja viljelyolosuhteet. Tässä osiossa on kaikki tarvittavat tiedot B16-solujen viljelyyn.

B16-solujen viljelyn avainkohdat

Populaation kaksinkertaistumisaika:: B16-solujen keskimääräiseksi populaation kaksinkertaistumisaikaksi arvioidaan 24 tuntia.
Adherentti vai suspensiossa:: B16-solut ovat adheesiivisia ja kasvavat monokerroksina.
Kylvötiheys:: B16-solujen istutustiheydeksi suositellaan 1–2 x 10⁴ solua/cm². Kiinnittyneet B16-solut huuhdellaan 1 x PBS:llä ja irrotetaan pinnasta Accutase-liuoksella. Solut sentrifugoidaan ja solupelletti suspendoidaan uudelleen kasvualustaan. Myöhemmin nämä solut siirretään uuteen pulloon kasvattamista varten.
Kasvatusväliaine:: B16-soluja viljellään EMEM-alustalla (Eagle's Minimum Essential Medium), joka sisältää 10 % sikiön naudan seerumia (FBS). Kasvatusliuos tulee vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet:: B16-solulinjan kasvattamiseen käytetään kostutettua inkubaattoria, jossa on 5 % CO₂-pitoisuus ja 37 °C:n lämpötila.
Säilytys:: Nämä solut säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa tai nestemäisen typen höyryvaiheessa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi.
Jäähdytysprosessi ja väliaine:: B16-solujen pakastamiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusväliainetta hitaassa pakastusprosessissa.
Sulatusprosessi:: Jäädytetyt B16-solut sulatetaan 37 °C:ssa vesihauteessa, joka sisältää antimikrobista ainetta. Sulatetut solut voidaan viljellä suoraan siirtämällä ne kasvualustaa sisältäviin pulloihin. Lisäksi nämä solut voidaan sentrifugoida jäädytysaineen komponenttien poistamiseksi ja viljellä sitten uudessa kasvualustassa.
Bioturvallisuustaso:: B16-solulinjaa tulee käsitellä ja ylläpitää bioturvallisuustason 1 laboratoriossa.

B16 cells

B16-melanoomasolujen osittain yhtenäinen kerros 10- ja 20-kertaisella suurennuksella.

B16-solulinja: Edut ja haitat

Muiden solulinjojen tavoin B16:lla on ainutlaatuinen yhdistelmä etuja ja haittoja. Tässä osiossa luetellaan joitakin tämän melanoomasolulinjan merkittävimpiä etuja ja haittoja.

Edut

B16 on ensimmäinen tehokas hiirien solulinja, jota käytetään laajalti metastaasitutkimuksessa sen tarjoamien etujen vuoksi. Tässä ihosyöpäsolulinjassa on muun muassa seuraavia etuja:

Helppo kasvattaa: B16-solulinjaa on helppo viljellä tutkimuslaboratorioissa. Sitä käytetään laajalti syöpäsolujen biologian, signalointireittien ja muiden asioiden tutkimiseen.
Nopea kasvu: B16-melanoomasolulinjalla on korkea proliferaatioaste, mikä tekee siitä sopivan solujen jakautumisen ja kasvun prosessien tutkimiseen.
Kasvainmuodostuskyky: B16 on tuumorigeeninen solulinja, jolla on tuumorin kaltaisia ominaisuuksia, kuten invaasio, migraatio ja proliferaatio. Se on arvokas apuväline tuumorin muodostumisen, etenemisen ja etäpesäkkeiden tutkimuksessa.

Haitat

B16-solulinjaan liittyvät haitat ovat:

Ihmiselle merkityksettömyys: Koska B16 on hiiren melanoomisolulinja, se ei välttämättä edusta tarkasti ihmisen ihosyövän biologiaa, mikä rajoittaa tutkimustulosten sovellettavuutta.
Heterogeenisyys: B16-solut ovat heterogeenisiä, ja niillä on vaihtelevia geneettisiä ja fenotyyppisiä ominaisuuksia samassa viljelmässä. Tämä voi vaikuttaa tulosten luotettavuuteen ja toistettavuuteen.

B16-solujen sovellukset

B16-solulinjaa käytetään laajasti tutkimuksissa. Muutama lupaava sovellus tälle solulinjalle on:

Kasvainbiologia: Tämä hiiren ihosyöpäsolulinja on tuumorigeeninen ja sitä käytetään laajalti kasvainbiologian ymmärtämiseen. Useita tutkimuksia on tehty B16-solujen avulla syöpäsolujen kasvun, lisääntymisen ja etäpesäkkeiden muodostumisen taustalla olevien solumekanismien selvittämiseksi. Vuonna 2020 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin B16-soluja pitkän ei-koodaavan RNA:n, LncRNA MEG3:n, roolin selvittämiseen melanooman muodostumisessa, kasvussa ja etäpesäkkeiden muodostumisessa. Tutkimuksessa havaittiin, että ei-koodaava RNA moduloi miRNA-21/E-kadheriini-akselia stimuloidakseen näitä solutapahtumia [2]. Samalla tavoin tehtiin tutkimus, jossa selvitettiin Notch1-signaloinnin mahdollista roolia kasvaimen aiheuttamassa immunosuppressiossa käyttäen B16-soluja [3].
Lääkekehitys: B16-soluja käytetään lääkeainekandidaattien potentiaalisten terapeuttisten vaikutusten validointiin ja testaamiseen. Eräässä tutkimuksessa arvioitiin luonnollisen yhdisteen, neogambogihapon, antituumorivaikutusta B16-solulinjalla. Tutkimustulokset paljastivat, että tämä yhdiste moduloi PI3K/Akt/mTOR-signalointireittiä aiheuttaen syöpäsolujen kuoleman [4]. Toisessa tutkimuksessa tutkittiin saponiinin, ginsenosidi Rg3:n, antimalomaattista vaikutusta B16-solulinjalla. Tutkimuksessa ehdotettiin, että tämä luonnollinen yhdiste aiheutti antituumorivaikutuksen säätelemällä alaspäin ERK- ja Akt-reittejä [5].

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 305154

5. B16-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut

Seuraavassa on esitetty joitakin merkittäviä tutkimusjulkaisuja, joissa käsitellään B16-melanoomasolulinjaa.

LncRNA MEG3 edistää melanooman kasvua, etäpesäkkeiden muodostumista ja leviämistä moduloimalla miR-21/E-kadheriini-akselia

Tässä Cancer Cell International -lehdessä (2020) julkaistussa artikkelissa esitettiin, että pitkä ei-koodaava RNA MEG3 tehostaa B16-melanoomasolujen muodostumista, kasvua ja etäpesäkkeiden muodostumista moduloimalla miRNA-21/E-kadheriini-akselia.

Uusi psoraleenijohdannainen MPFC tehostaa melaniinituotantoa aktivoimalla p38 MAPK- ja PKA-signalointireittejä B16-soluissa

Tämä artikkeli julkaistiin International Journal of Molecular Medicine -lehdessä vuonna 2018. Tutkimuksessa selvitettiin psoraleenijohdannaisen 4-metyyli-6-fenyyli-2H-furo[3,2-g]kromen-2-onin (MPFC) melanoogeenista vaikutusta ja mekanismeja B16-soluissa. Tutkimuksessa esitettiin, että tämä johdannainen edistää melaniinituotantoa stimuloimalla PKA- ja p38 MAPK -solusignalointia.

Notch1-signalointi melanoomasoluissa edisti kasvaimen aiheuttamaa immunosuppressiota TGF-β1:n ilmentymisen lisääntymisen kautta

Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2018 Journal of Experimental & Clinical Cancer Research -lehdessä. Tutkimustulokset viittaavat siihen, että Notch1-signaloinnin aktivoituminen B16-soluissa saattaa estää kasvaimen vastaista immuniteettia lisäämällä TGF-β1-geenin ilmentymistä.

Neogambogihappo indusoi melanooma-B16-solujen apoptoosia PI3K/Akt/mTOR-signalointireitin kautta

Tämän tutkimuksen tekivät Chunlan Wu ja hänen kollegansa vuonna 2020, ja se julkaistiin Acta Biochimica Polonica -lehdessä. Tutkimuksessa todetaan, että luonnollinen yhdiste neogambogihappo voi aiheuttaa B16-melanoomasolujen kuoleman moduloimalla PI3K/Akt/mTOR-signaalikaskadia.

Iridium(III)-kompleksi tehokkaana syöpälääkkeenä indusoi apoptoosia ja autofagiaa B16-soluissa estämällä AKT/mTOR-reitin

Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin European Journal of Medicinal Chemistry -lehdessä vuonna 2018. Tässä tutkimuksessa tutkijat tutkivat iridium(III)-kompleksin syöpälääkevaikutusta käyttäen B16-melanoomasoluja.

Ailantoni indusoi solusyklin pysähtymistä ja apoptoosia B16- ja A375-melanoomasoluissa

Tässä tutkimuksessa esitettiin, että kasviperäisellä bioaktiivisella aineella, ailanthonilla, on syöpälääkinnällistä potentiaalia, koska se voi indusoida apoptoosia ja solusyklin pysähtymistä B16- ja A375-melanoomasoluissa. Tämä artikkeli julkaistiin Biomolecules-lehdessä vuonna 2019.

B16-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta

B16-solulinjan viljely- ja transfektioprotokollia selittäviä resursseja on rajoitetusti.

Melanoomasolujen viljely: Tämä video tarjoaa arvokkaita vinkkejä melanoomasolulinjojen viljelyyn.
Solulinjan aliviljely: Tässä videossa selitetään solulinjan yleinen aliviljelyprotokolla.
B16F10-solulinjan transfektio: Tässä videossa selitetään B16-melanoomasolujen alalinjan transfektioprotokolla. Se voi auttaa sinua optimoimaan B16-solujen transfektioprotokollan.

Seuraavassa on joitakin B16-solujen viljelyohjeita.

B16-solujen viljely: Tämä verkkosivusto sisältää kaikki tarvittavat tiedot B16-solujen viljelystä, mukaan lukien kasvualustat, aliviljely, solujen sulatus ja pakastaminen.

Viitteet

Danciu, C., et al., Neljän eri B 16 -hiirimalanoomasolulinjan käyttäytyminen: C57 BL/6J-iho. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): s. 73–80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 edistää melanooman kasvua, etäpesäkkeiden muodostumista ja leviämistä moduloimalla miR-21/E-kadheriini-akselia. Cancer cell international, 2020. 20: s. 1–14.
Yang, Z., et al., Notch1-signalointi melanoomasoluissa edisti kasvaimen aiheuttamaa immunosuppressiota TGF-β1:n ilmentymisen lisääntymisen kautta. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): s. 1–13.
Wu, C., et al., Neogambogihappo indusoi melanooma-B16-solujen apoptoosia PI3K/Akt/mTOR-signalointireitin kautta. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): s. 197–202.
Meng, L., et al., Ginsenosidi Rg3:n antituumorivaikutus melanoomassa ERK- ja Akt-reittien alaregulaation kautta. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): s. 2069–2079.