B16-F10-solut - B16-F10-melanoomasolulinjan tutkiminen etäpesäkkeiden tutkimuksessa

B16-F10-solut ovat C57BL/6J-hiirestä peräisin oleva melanoomasolulinja. Niitä käytetään laajalti ihosyöpätutkimuksessa. Tutkijat käyttävät näitä soluja kasvainten kehityksen ja etenemisen sekä terapeuttisten toimenpiteiden tutkimiseen. Tässä artikkelissa käsitellään B16-F10-melanoomasolujen perusnäkökohtia. Se sisältää erityisesti seuraavat asiat:

B16-F10-solulinjan alkuperä ja yleiset ominaisuudet
B16-F10-solujen viljelyä koskevat tiedot
B16-F10-solut: F16B16-kokoonpano: edut ja haitat
B16-F10-solujen tutkimussovellukset
Julkaisut, joissa esiintyy B16-F10-solulinja
B16-F10-solulinjan resurssit: B161016: protokollat, videot ja paljon muuta

1. B16-F10-solulinjan alkuperä ja yleiset ominaisuudet

Tässä osiossa tutustutaan B16F10-melanooman kasvainsolujen alkuperään ja erityispiirteisiin. Se auttaa sinua käyttämään solulinjaa tehokkaasti tutkimustyössäsi. Pääasiassa opit: Mitä B16-F10-solut ovat? Mistä B16F10-solut ovat peräisin? Mikä on B16F12-solulinjan morfologia? Mikä on B16F10-solun koko?

B16-F10 on C57BL/6J-hiirten ihokudoksesta peräisin olevan B16-kasvainsolulinjan alaklooni. B16F10-melanoomasoluja kehitettiin sen jälkeen, kun B16-linja ruiskutettiin suonensisäisesti immuunipuutteisiin tai syngeenisiin hiiriin. Nämä solut valittiin sen perusteella, että ne kykenivät muodostamaan metastasoituneita keuhkokolonioita in vivo, ja sitten ne vakiinnutettiin kymmenen syklin jälkeen keuhkokolonioiden muodostamiseksi in vitro [1]. Fidler ja kollegat kehittivät sen vuonna 1976.
B16-F10-solulinjoilla on epiteelin kaltainen ja karamellimainen ulkonäkö.
B16-F10-solujen likimääräinen koko on 15,4 ± 1,4 μm [2].

B16-F1- ja B16-F10-solut

B16-F1- ja B16-F10-solut on johdettu B16-alkuperäsolulinjasta. Molemmat ovat peräisin samasta ja niillä on lähes samanlaiset ominaisuudet. Tärkein ero on kuitenkin niiden etäpesäkekyky. B16-F10-soluilla on korkea, kun taas B16-F1-soluilla on alhainen metastaattinen potentiaali [3].

Pahanlaatuisen melanoomakasvaimen suurennettu poikkileikkaus mikroskoopilla.

2.b16-F10-solujen viljelytiedot

Ennen solulinjan käsittelyä ja viljelyä sinun on tiedettävä sen kaksinkertaistumisaika, kasvualusta, olosuhteet ja soluviljelyprotokollat. Tässä jaksossa käsitellään: Mikä on b16-f10-solujen kaksinkertaistumisaika? Miten b16F10-soluja viljellään? Mikä on B16-F10-solujen kasvatusmedia? Mitä viljelyolosuhteita suositellaan B16-F10-soluille?

B16-F10-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat

Kaksinkertaistumisaika:	B16-F10-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 20,1 tuntia. Se voi vaihdella 17 ja 21 tunnin välillä viljelyolosuhteista riippuen.
Adheesiossa tai suspensiossa:	B16-F10 on tarttuva solulinja. Solut kasvavat nopeasti ja muodostavat monokerroksia.
Jakosuhde:	B16-F10-soluja viljellään jakosuhteella 1:2-1:4. Solut pestään fosfaattipuskurisuolaliuoksella (1x) ja inkuboidaan sitten Accutase passaging -liuoksella 8-10 minuuttia huoneenlämmössä. Soluihin lisätään tuoretta elatusainetta ja ne sentrifugoidaan. Kerätty solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut annostellaan uuteen pulloon, joka sisältää tuoretta elatusainetta jaetun suhteen mukaisesti.
Kasvualusta:	B16-F10-soluja viljellään DMEM-mediassa. Väliaineeseen lisätään 10 % FBS:ää, 4 mM L-Glutamiinia, 1,5 g/l NaHCO3:a, 4,5 g/l glukoosia ja 1,0 mM natriumpyruvaattia solujen ihanteellisen kasvun varmistamiseksi. Väliaine on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa.
Kasvuolosuhteet:	B16-F10-soluja kasvatetaan kostutetussa inkubaattorissa 37 °C:n lämpötilassa, jossa on 5 % CO2.
Varastointi:	Jäädytetyt solut säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä ultramatalan lämpötilan pakastimessa tai nestemäisen typen höyryfaasissa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi.
Pakastusprosessi ja väliaine:	B16-F10-solut pakastetaan CM-1- tai CM-ACF-mediassa säilytystä varten. Tätä varten suositellaan hidasta pakastusprosessia, jossa lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa, jotta solut eivät joudu sokkiin.
Sulatusprosessi:	Pakastettuja B16-F10-soluja sulatetaan esisäädetyssä 37 °C:n vesihauteessa 40-60 sekunnin ajan. Seuraavaksi solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen ja sentrifugoidaan pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen kasvualustaan ja kaadetaan pulloihin viljelyä varten.
Bioturvallisuustaso:	B16-F10-solulinjan käsittelyyn ja ylläpitoon tarvitaan bioturvallisuustason 1 laboratorio.

Puoliksi juoksevia B16-F10-soluja 20-kertaisella ja 10-kertaisella suurennoksella.

3.b16-F10-solut: B101610: Edut ja haitat

Kuten muillakin solulinjoilla, myös B16-F10-soluilla on joitakin etuja ja haittoja. Tässä jaksossa käsitellään joitakin tämän ihomelanoomasolulinjan merkittäviä etuja ja haittoja.

Edut

B16-F10-solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuksessa. B16-F10-solulinjan etuja ovat:

Metastaattinen potentiaali	Ihomelanooma B16F10-soluilla on suuri metastaattinen potentiaali, mikä tekee niistä arvokkaita syövän metastaasin ja sen taustalla olevien mekanismien tutkimisessa.
In vitro kasvainmalli	B16-F10-solut toimivat in vitro -mallina syövän etenemisen ja kasvun tutkimisessa, mikä auttaa tutkijoita ymmärtämään syövän taustalla olevia solu- ja molekyylimekanismeja.

Haitat

B16-F10-solulinjaan liittyviä haittoja ovat:

Hiirestä peräisin oleva solulinja

B16-F10 on hiirestä peräisin oleva solulinja, mikä rajoittaa sen soveltuvuutta ihmiskohtaisiin tutkimuksiin. Näillä soluilla tehdyt tutkimustulokset eivät välttämättä aina ole aidosti siirrettävissä ihmisen biologiaan.

4.b16-F10-solujen tutkimussovellukset

B16-F10-solulinjaa käytetään laajasti syöpätutkimuksessa. Tässä käsitellään muutamia tämän solulinjan lupaavia sovelluksia.

Syöpätutkimus: B16-F10-solulinja on arvokas malli syöpäsoluprosessien, kuten proliferaation, invasiivisuuden, migraation ja solukuoleman tai apoptoosin tutkimiseen. Lisäksi se auttaa tutkijoita saamaan tietoa näitä soluprosesseja ohjaavista molekyylimekanismeista ja -reiteistä. Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa tutkittiin CCR5:n (C-C-kemokiinireseptori tyyppi viisi) roolia melanoomasolujen epiteelistä mesenkyymisoluihin siirtymisessä ja metastaasissa. Tulokset osoittivat, että CCR5:n puute rajoittaa kasvaimen kasvua ja metastaasia, kun taas korkea ilmentyminen johtaa B16-F10-solujen tehostuneeseen kasvuun ja metastaasiin. Jatkotutkimuksissa raportoitiin, että CCR5 säätelee TGFβ1:n ilmentymistä, joka säätelee PI3K/AKT/GSK3β-signalointia edistääkseen epiteelin siirtymistä mesenkymaaliseksi ja solujen migraatiota [4].
Lääkkeiden testaus ja kehittäminen: B16F10-melanooman kasvainsolut ovat erittäin aggressiivisia ja soveltuvat siten mahdollisten kasvainlääkkeiden ja -hoitojen testaamiseen. Tutkijat käyttävät näitä soluja ja arvioivat eri yhdisteiden vaikutusta solujen kasvuun, proliferaatioon ja metastaasiin, mikä auttaa lääkekehitystä. Valentina Nannin ja kollegoiden vuonna 2018 tekemässä tutkimuksessa tutkittiin Spartium junceum kukkien hydroalkoholiuutteen terapeuttisia vaikutuksia. Tutkimuksessa ehdotettiin, että kukkauute oli tehokas indusoimaan senesenssiä B16-F10-soluissa, mikä johtaa solujen kasvun ja melanogeneesin tukahduttamiseen, joten se voi harjoittaa potentiaalisia syövänvastaisia vaikutuksia [5].

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 305157

5.julkaisut, joissa on mukana B16-F10-solulinja

Tässä on joitakin merkittäviä tutkimusjulkaisuja, joissa käytetään B16-F10-melanoomasolulinjaa:

Sorghum bicolorin etanolisen uutteen antimelanogeeninen vaikutus IBMX:n indusoimaan melanogeneesiin B16/F10-melanoomasoluissa

Tämä tutkimus julkaistiin Nutrients-lehdessä (2020). Siinä ehdotettiin, että Sorghum bicolor -etanoliuutteella on antimelanogeeninen vaikutus ihon melanoomasoluissa B16F10.

Kalsitrioli estää proliferaatiota ja mahdollisesti aiheuttaa apoptoosia B16-F10-soluissa

Medical Science Monitor Basic Research -lehdessä (2022) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että kalsitriol-lääkkeellä on kasvainvastainen vaikutus B16-F10-melanoomasoluissa estämällä proliferaatiota ja indusoimalla apoptoosia.

Kardolien prooksidatiivinen vaikutus on mukana niiden sytotoksisessa aktiivisuudessa hiiren B16-F10-melanoomasoluja vastaan

Tämä artikkeli on julkaistu Biochemical and Biophysical Research Communications -lehdessä (2022). Tulokset paljastivat, että kardolit, resorsinolipidit, harjoittavat voimakasta sytotoksisuutta B16-F10-solulinjassa.

Ginkgo biloba -eksokarppiuute estää B16-F10-melanooman etäpesäkkeitä, joihin liittyy PI3K/akt/NF-κB/MMP-9-signalointireitti

Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine -lehdessä (2018) julkaistussa tutkimuksessa tutkittiin Ginkgo biloba exocarp -uutteen antimetastaattista potentiaalia B16-F10-soluilla.

Tymokinoni indusoi apoptoosia B16-F10-melanoomasoluissa p-STAT3:n estämisen kautta ja estää kasvaimen kasvua hiiren sisäisessä ..

Tässä World Neurosurgery -lehdessä (2018) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että tymokinoni voi olla tehokas hoito aivonsisäisiä metastaattisia leesioita vastaan, koska se estää B16-F10-solujen kasvua ja indusoi apoptoosia.

6.b16-F10-solulinjan resurssit: B1610F16: protokollat, videot ja muuta

B16F10-endoteelisoluja käytetään laajalti ihosyöpätutkimuksessa. Seuraavassa on joitakin verkkolähteitä, joissa selitetään sen viljely- ja transfektioprotokollia:

B16F10-melanoomasolujen transfektio: B16-F10-solujen transfektioprotokollan opettaminen: Tämä opetusvideo voi auttaa sinua oppimaan B16-F10-solujen transfektioprotokollan.
B16-F10-solujen transfektio: Tämä asiakirja selittää ihon melanoomasolujen B16F10-solujen in vitro DNA-transfektioprotokollan.

Seuraava linkki sisältää soluviljelyprotokollan B16-F10-soluille:

B16-F10-solujen subkultivointi: Tämä verkkosivusto sisältää hyödyllistä tietoa B16F10-melanooman kasvainsoluista. Se sisältää kasvualustat, kaksinkertaistumisajan, viljelyolosuhteet ja protokollan solujen subkulturointia varten sekä kryosäilytettyjen ja proliferatiivisten viljelmien käsittelyn.

Viitteet

Poste, G., et al., Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
Nakamura, M., D. Ono ja S. Sugita, B16-melanoomasoluvarianttien mekanofenotyypitys (-)-Epigallokatekiinigallaattihoidon tehokkuuden arvioimiseksi kapenevaa mikrofluidilaitetta käyttäen. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
Danciu, C., et al., Behaviour of four different B16 murine melanoma cell sublines: C57BL/6J:n iholla. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
Liu, J., et al., CCR5:n korkea ilmentyminen melanoomassa lisää epiteeli-mesenkymaalista siirtymää ja metastaasia TGFβ1:n kautta. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
Nanni, V., et al., Spartium junceum L. -kukkien hydroalkoholiuute estää kasvua ja melanogeneesiä B16-F10-soluissa indusoimalla senesenssiä. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.