AGS-solut - Mahalaukun adenokarsinooman AGS-solujen tutkiminen syöpätutkimuksissa
AGS-solut muodostavat ihmisen mahalaukun adenokarsinooman solulinjan, jota käytetään laajalti biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Sitä käytetään erityisesti mahasyövän biologian tutkimiseen, mukaan lukien kasvaimen kasvu, kehitys, eteneminen ja terapeuttiset interventiot. Lisäksi sitä käytetään isännän ja patogeenin vuorovaikutusten tutkimiseen.
Tässä artikkelissa käsitellään mahalaukun epiteelisolujen AGS-solujen perusteita. Erityisesti käsitellään seuraavia asioita:
- AGS-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
- AGS-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
- AGS-solulinja: AGS AGS AGS-kasvattamo: edut ja rajoitukset
- AGS-solujen sovellukset
- AGS-solulinjaa koskevat tutkimusjulkaisut
- AGS-solulinjaa koskevat resurssit: AGS AGS: protokollat, videot ja paljon muuta: protokollat, videot ja paljon muuta
1.aGS-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Solulinjan alkuperän ja yleisten ominaisuuksien tunteminen on välttämätöntä, ennen kuin aloitat työskentelyn sen kanssa. Tässä jaksossa käsitellään seuraavia asioita: Mitä AGS-solut ovat? Mikä on AGS-solun alkuperä? Mikä on AGS-syöpäsolulinjan morfologia?
- AGS-solulinja on peräisin 54-vuotiaan valkoihoisen naisen, jolla oli mahalaukun adenokarsinooma, mahakudoksesta. Se eristettiin vuonna 1979 [1].
- AGS-soluilla on epiteelin kaltainen morfologia.
- AGS:n mahalaukun epiteelisolut ovat hyperdiploidisia. AGS-solujen modaalinen kromosomiluku on 49, ja sitä esiintyy lähes 60 prosentissa soluista. Polyploidiaa esiintyy myös noin 3,6 prosentissa soluista.
2.aGS-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
Solulinjan asianmukaista käsittelyä ja hoitoa varten sinun on tunnettava sen viljelyn peruskäsitteet. Erityisesti sinun on opittava: Mikä on AGS-solujen kaksinkertaistumisaika? Mikä on AGS-solulinjan solualusta? Miten AGS-soluja subkultivoidaan? Mitä pakastusmedioita käytetään mahalaukun epiteelin AGS-soluille?
AGS-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
AGS-solujen kaksinkertaistumisaika on 24-48 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
AGS-solut ovat tarttuvia. Ne kasvavat yksikerroksisina. |
|
Kylvötiheys: |
AGS-solut kylvetään solutiheydellä 1 x104 solua/cm2. Solut muodostavat konfluentin monokerroksen tällä tiheydellä 3-5 päivässä. Vanhan väliaineen poistamisen jälkeen solut huuhdellaan 1 x PBS:llä ja inkuboidaan Accutase-dissosiaatioliuoksella. Irronneet solut suspendoitiin uudelleen elatusaineeseen ja sentrifugoitiin. Solupelletti suspendoitiin uudelleen, ja AGS-solujen laskemisen jälkeen ne annosteltiin uuteen pulloon kasvattamista varten. |
|
Kasvualusta: |
AGS-solujen viljelyyn käytetään DMEM-mediaa, joka sisältää 10 % FBS:ää, 4 mM L-Glutamiinia, 4,5 g/l glukoosia, 1,5 g/l NaHCO3:a ja 1,0 mM natriumpyruvaattia. Väliaine on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
AGS-soluja pidetään kostutetussa inkubaattorissa (37 °C:n lämpötilassa), jossa on 5 % hiilidioksidia. |
|
Varastointi: |
Jäädytetyt AGS-solut säilytetään sähköpakastimissa alle -150 °C:n lämpötilassa tai nestemäisen typen höyryfaasissa pidempään. |
|
Jäädytysprosessi ja väliaine: |
AGS-solujen jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-mediaa. Solujen jäädyttäminen tapahtuu hitaan jäädytysprosessin avulla, joka sallii vain 1 °C:n lämpötilan laskun minuutissa ja suojaa solujen elinkelpoisuutta. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastettuja mahalaukun epiteelisoluja sekoitetaan nopeasti 37 °C:n vesihauteessa 40-60 sekunnin ajan. Sulatetut solut suspendoidaan uudelleen tuoreeseen elatusaineeseen ja kaadetaan uusiin pulloihin kasvua varten. Vuorokauden inkubaation jälkeen väliaine uusitaan jäädytetyn väliaineen komponenttien poistamiseksi. Sitä vastoin sulatetut solut sentrifugoidaan ja pakastusmedian osat poistetaan. Sitten kerätyt solut suspendoidaan uudelleen ja annostellaan kasvatusmediaa sisältävään kolviin. |
|
Bioturvallisuustaso: |
Bioturvallisuustaso 2 on välttämätön AGS-soluviljelyssä. |
3.aGS-solulinja: AGS AGS: Edut ja rajoitukset
Tässä artikkelissa valotetaan joitakin AGS-soluihin liittyviä keskeisiä etuja ja rajoituksia.
Edut
Mahalaukun epiteelin AGS-solujen tärkeimmät edut ovat:
|
Helppo viljellä |
AGS-mahasyöpäsolulinja on helposti ylläpidettävissä soluviljelylaboratorioissa. Sillä ei ole monimutkaisia ja hankalia soluviljelyvaatimuksia. Lisäksi sillä on hyvät kasvuominaisuudet, joten se on ihanteellinen valinta mahasyövän biologian tutkimiseen. |
|
Merkitys mahasyövän kannalta |
AGS-solut on johdettu ihmisen mahalaukun adenokarsinoomasta, joten niitä käytetään laajalti mahalaukun karsinooman biologian ja terapeuttisten toimenpiteiden tutkimiseen. |
Rajoitukset
AGS-solulinjaan liittyvä rajoitus on:
|
In vitro -solumalli |
AGS-soluja viljellään biolääketieteellisissä tutkimuslaboratorioissa keinotekoisissa olosuhteissa. Siksi ne eivät ehkä täysin jäljennä in vivo -mahasyövän mikroympäristöä ja muita solu- ja molekyylivuorovaikutuksia. |
4.aGS-solujen sovellukset
AGS-soluja käytetään erityisesti mahasyövän biologian tutkimiseen. Niillä on monia muita lupaavia sovelluksia biolääketieteen alalla. Joitakin AGS-solujen mielenkiintoisia tutkimussovelluksia ovat:
- Mahasyövän tutkimus: AGS-solut ovat erinomainen tutkimusväline mahasyövän kasvun, etäpesäkkeiden ja invaasion taustalla olevien solu- ja molekyylimekanismien tutkimiseen. Tutkijat käyttävät mahalaukun epiteelin AGS-soluja myös erilaisten soluprosessien, geneettisten mutaatioiden ja signaalireittien tutkimiseen mahasyövän kehityksessä. Oncology Reportsin (2019) tutkimuksessa havaittiin, että mikroRNA-183-5p.1 edistää kasvainsolujen proliferaatiota, migraatiota ja invasiota estämällä Bcl 2/P53-signalointikaskadia. Lisäksi se myös alentaa TPM1-geenin säätelyä näiden vaikutusten aikaansaamiseksi. Näin ollen sekä mikroRNA:ta että TPM1:tä ehdotetaan tehokkaiksi molekyylikohteiksi kohdennettujen mahasyövän vastaisten hoitojen kehittämiseksi [2].
- Lääkkeiden seulonta: AGS-soluja on yleisesti käytetty uusien ja tehokkaiden mahasyöpälääkkeiden seulontaan. Tutkijat arvioivat mahdollisten lääkkeiden sytotoksisuutta ja tehoa AGS-solulinjan avulla. Tutkimuksia on tehty myös uusien molekyylikohteiden tunnistamiseksi ja uusien kohdennettujen hoitomuotojen kehittämiseksi mahasyöpien torjumiseksi. Vuonna 2021 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin AGS-mahasyöpäsoluja ja tutkittiin paklitakselilääkkeen terapeuttista vaikutusta. Tulokset osoittivat, että paklitakseli saa aikaan mitoosikatastrofin, joka on olennainen apoptoosin eli solukuoleman mekanismi AGS-soluissa. Lisäksi se edisti myös autofagiaa mahasyöpäsoluissa [3].
- Isännän ja patogeenin vuorovaikutukset: AGS-syöpäsolulinjalla tutkitaan myös isännän ja patogeenin välisiä vuorovaikutuksia. Tämä auttaa tutkijoita ymmärtämään infektioon liittyviä solumekanismeja ja -reaktioita. Esimerkiksi vuonna 2020 tehdyssä tutkimuksessa havaittiin, että Helicobacter pylori -bakteerin ulkokalvon vesikkeleissä olevat pienet ei-koodaavat RNA:t vähentävät interleukiini 8:n eritystä ihmisen AGS-soluissa [4].
5.aGS-solulinjaa koskevat tutkimusjulkaisut
Tässä artikkelin osassa käsitellään muutamia mielenkiintoisia ja eniten siteerattuja tutkimusjulkaisuja, joissa käsitellään AGS-soluja.
Tässä Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että salidrosidi, luonnollinen yhdiste, indusoi suojaavaa autofagiaa ja solukuolemaa mahalaukun epiteelisoluissa AGS-soluissa PI3K/AKT/mTOR-signalointireitin moduloinnin kautta.
Tämä tutkimus julkaistiin Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä (2018). Siinä tutkittiin astragaluksen polysakkaridin ja apatinib-lääkkeen synergistisiä syöpälääkkeen vaikutuksia AGS-soluissa. Tutkimustulokset paljastivat, että astragalus tehostaa apatinibin kasvainvastaista vaikutusta AKT-signalointia tukahduttamalla.
Tässä Journal of Ethnopharmacology -lehdessä (2018) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että curcuzedoalidi, Curcuma zedoaria Roscoe -kasvin luonnollinen yhdiste, edistää sen sytotoksisuuspotentiaalia AGS-soluja vastaan.
FOXA1:n yliekspressio estää ihmisen mahasyövän AGS-solujen solujen soluproliferaatiota ja EMT:tä
Tässä Genessä (2018) julkaistussa julkaisussa ehdotettiin, että FOXA1:n ylössäätely estää AGS-mahalaukun adenokarsinoomasolujen AGS-solujen proliferaatiota ja epiteelistä mesenkymaaliseksi siirtymää (EMT) ja invasiota.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin International Journal of Medical Microbiology -lehdessä vuonna 2020. Tässä tutkimuksessa käytettiin AGS-soluja isännän ja patogeenin vuorovaikutuksen tutkimiseen. Tulokset paljastivat, että Helicobacter pylori sisältää ulkokalvon vesikkeleissään jonkin verran koodaamatonta RNA:ta, joka vaikuttaa IL-8-tasoihin AGS-soluissa.
6.aGS-solulinjaa koskevat resurssit: AGS AGS: Protokollia, videoita ja muuta
Seuraavassa on muutamia AGS-soluja esitteleviä resursseja.
- AGS-solujen transfektioprotokolla: Tämä video on vaiheittainen opas mahalaukun epiteelisolujen AGS-solujen transfektioprotokollan oppimiseen.
Seuraava linkki sisältää AGS-soluviljelyprotokollan.
- AGS-soluviljelyprotokolla: Tämä verkkosivusto sisältää hyödyllistä tietoa AGS-solujen elatusaineista ja soluviljelyprotokollista. Lyhyesti sanottuna se tarjoaa protokollan mahalaukun epiteelisolujen AGS-solujen subkultivoimiseksi ja proliferoivien ja kryosäilöttyjen AGS-viljelmien käsittelemiseksi.
- AGS-solujen subkultivointi: Tällä sivustolla selitetään AGS-solujen subkulturointimenettely yksityiskohtaisesti.
Viitteet
- Phuc, B.H., et al., Comparative genomics of two Vietnamese Helicobacter pylori strains, CHC155 from a non-cardia gastric cancer patient and VN1291 from a duodenal ulcer patient. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA-183-5p. 1 edistää mahasyövän AGS-solujen migraatiota ja invasiota kohdistamalla TPM1:een Korjaus in/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., Paklitakselin vaikutus apoptoosiin, autofagiaan ja mitoosikatastrofiin AGS-soluissa. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H., et al., Helicobacter pylori -ulkokalvon vesikkelien pakkaamat sncRNA:t heikentävät IL-8:n eritystä ihmissoluissa. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.