PANC1-solut: niiden keskeisen roolin selvittäminen haimasyövän tutkimuksessa
PANC1 on ihmisen epiteelinen kasvainsolulinja, jota käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa. Sitä käytetään in vitro -mallina haimasyövän biologian, karsinogeneesin sekä taustalla olevien solu- ja molekyylimekanismien tutkimiseen sekä potentiaalisten syöpähoitojen arviointiin.
- Kasvatusväliaine
- PANC1-solujen viljelyyn käytetään DMEM-kasvatusliuosta, johon on lisätty 10 % naudan sikiöseerumia (FBS), 4,5 g/l glukoosia, 4 mM L-glutamiinia, 1,5 g/l NaHCO3:ta ja 1,0 mM natriumpyruvaattia. PANC1-soluviljelyalusta tulisi vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
- Kaksinkertaistumisaika
- Haiman solulinja PANC 1 lisääntyy kohtuullisen nopeasti, ja sen kaksinkertaistumisaika on 25,83 ± 2,03 tuntia.
- Kasvutyyppi
- PANC1 on epiteelisolulinja, joka kiinnittyy alustaan.
- Bioturvallisuustaso
- BSL-1
- Saatavana
- Cytion — Tilaa PANC1
PANC1-solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Tässä artikkelin osiossa annetaan perustietoa PANC1-solulinjasta. Esimerkiksi: mitä PANC-1 tarkoittaa? Mitä ovat PANC-1-solut? Mikä on PANC1:n alkuperä? Millainen on PANC 1:n morfologia? Mikä on PANC 1 -solujen koko?
- PANC1-haimasyöpäsolulinja saatiin 56-vuotiaalta valkoihoiselta mieheltä, jolla oli haimakanavan karsinooma. Tämän jatkuvan kasvainsolulinjan perustivat Michael Lieber ja hänen kollegansa vuonna 1975 [1].
- PANC1-soluilla on heikko erilaistumiskyky, mutta ne voivat mahdollisesti metastasoitua.
- Näillä ihmisen haimasyöpäsoluilla on epiteelisolujen kaltainen morfologia.
- PANC 1:llä on hypertriploidinen karyotyyppi. PANC 1 -solulinjalle raportoitu modaalinen kromosomiluku on 63. Genomissa on pieni rengaskromosomi ja kolme erillistä merkkikromosomia.
PANC1-soluviljelyä koskevat tiedot
Tässä osiossa käsitellään PANC1-soluviljelyä koskevia tietoja. Solulinjan viljelyolosuhteiden tunteminen helpottaa sen käsittelyä. Käsittelemme seuraavia aiheita: Mikä on PANC-1-solujen kaksinkertaistumisaika? Miten PANC1-soluja viljellään? Ovatko PANC1-solut adheesiivisia? Mikä on PANC1-solujen viljelyalusta?
PANC1-solujen viljelyn avainkohdat
Kaksinkertaistumisaika:
Haiman solulinja PANC 1 lisääntyy kohtuullisen nopeasti, ja sen kaksinkertaistumisaika on 25,83 ± 2,03 tuntia.
Adheesiivinen vai suspensiossa:
PANC-1 on epiteelisolulinja, joka kiinnittyy alustaan.
Kylvötiheys:
PANC1-solut kylvetään tiheydellä 1 x 104 solua/cm2. Kylvöä varten solut pestään PBS:llä (fosfaattipuskuriliuoksella) ja inkuboidaan dissosiaatioliuoksessa, eli Accutase-entsyymiliuoksessa, 8–10 minuuttia huoneenlämmössä. Irronneet solut suspendoidaan uudelleen tuoreeseen viljelyalustaan ja sentrifugoidaan. Solupelletti suspendoidaan huolellisesti viljelyalustaan, ja solut kaadetaan uusiin pulloihin kasvattamista varten.
Kasvatusliuos:
PANC1-solujen viljelyyn käytetään DMEM-kasvatusliuosta, johon on lisätty 10 % sikiön naudan seerumia (FBS), 4,5 g/l glukoosia, 4 mM L-glutamiinia, 1,5 g/l NaHCO3:ta ja 1,0 mM natriumpyruvaattia.
PANC1-solujen viljelyliuos on vaihdettava 2–3 kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet:
PANC1-soluja viljellään kostutetussa inkubaattorissa 37 °C:n lämpötilassa ja 5 %:n CO₂-pitoisuudessa.
Säilytys:
PANC1-soluja säilytetään nestemäisen typen höyryvaiheessa tai sähköisessä ultrapakastimessa (alle -150 °C:n lämpötilassa) solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi.
Jäädytysprosessi ja elatusaine:
PANC1-solut jäädytetään CM-1- tai CM-ACF-kasvatusliuoksessa. PANC1-solujen jäädyttämiseen käytetään hidasta jäädytysmenetelmää, jossa lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa.
Sulatusprosessi:
Solut sulatetaan 37 °C:n vesihauteessa, kunnes jäljellä on vain pieni jääpalanen. Sulatetut solut suspendoidaan uudelleen elatusaineeseen ja sentrifugoidaan jäädytysaineen poistamiseksi. Solupala suspendoidaan huolellisesti uudelleen, ja solut annostellaan tiheydellä 5 x 10⁴ solua/cm² uusiin viljelypulloihin. PANC1-solujen kiinnittyminen kestää lähes 48 tuntia.
Bioturvallisuustaso:
PANC1-soluviljelyyn suositellaan bioturvallisuustasoa 1.
PANC1-solujen edut
Jokaiseen solulinjaan liittyy tiettyjä etuja ja haittoja, jotka erottavat sen muista. Tässä osiossa selostetaan PANC1-solulinjaan liittyviä etuja ja haittoja.
Edut
PANC1-solujen tärkeimmät edut ovat:
-
In vitro -haimasyöpämalli
PANC1 edustaa ihmisen haimakanavan adenokarsinooman ominaisuuksia. Siksi sitä käytetään in vitro -mallina haimasyövän kehittymisen, kasvun ja siihen liittyvien molekyylimekanismien tutkimiseen.
-
Geneettiset mutaatiot
PANC1-soluissa esiintyy monia haimasyövissä havaittuja mutaatioita, minkä vuoksi ne ovat arvokkaita sairauteen liittyvien signalointireittien tutkimuksessa. Näihin mutaatioihin kuuluvat pääasiassa PANC1 KRAS ja PANC1 P53.
PANC1-solujen tutkimussovellukset
Ihmisen syöpäsolulinjaa PANC1 käytetään usein haimasyövän tutkimuksessa. Tässä on mainittu joitakin yleisiä tutkimusalueita.
- Syöpäbiologia: PANC1-soluja käytetään haimasyövän kehittymisen, kasvun ja monien muiden soluprosessien, kuten proliferaation, invaasion, migraation ja solukuoleman, tutkimiseen. Lisäksi tutkitaan erilaisia solusignalointireittejä, geneettisiä mutaatioita ja molekyylimekanismeja, jotka liittyvät haimasyövän syntyyn. Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin PANC1-soluja, ja siinä havaittiin, että omepratsoli estää haimasyöpäsolujen invaasiota aryylihiilivetyreseptorin välittämän JNK:n induktion kautta. JNK:n aktivaatio puolestaan säätelee muita solugeenejä ja estää syöpää edistävien tekijöiden toimintaa [3]. Samoin toisessa tutkimuksessa paljastui, että AKT- ja ERK-signalointireitit osallistuvat ihmisen haimasyövän PANC1-solujen proliferaatioon, invaasioon ja migraatioon [4].
- Lääkeaineiden seulonta: PANC1-solulinja toimii arvokkaana työkaluna potentiaalisten syöpälääkkeiden tai -hoitojen seulonnassa. Tutkijat selvittävät yleensä lääkeresistenssiä ja tutkivat potentiaalisten lääkeaineiden vaikutusmekanismeja. Samira Alipourin ja hänen kollegoidensa vuonna 2022 tekemässä tutkimuksessa esitettiin, että Portulaca oleracea -uutteella on apoptoottisia ja sytotoksisia vaikutuksia PANC1-soluissa, minkä vuoksi se voi olla potentiaalinen haimasyövän hoitomuoto. Kasvi tuottaa nämä kasvainten vastaiset vaikutukset säätelemällä CDK1- ja P53-geenejä [5].
Hanki PANC-1-soluja: porttisi haimasyövän tutkimukseen
PANC1-soluja käsittelevät julkaisut
Tässä osiossa mainitaan joitakin mielenkiintoisia ja usein siteerattuja tutkimusjulkaisuja, joissa käsitellään PANC1-soluja.
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2019 kansainvälisessä ”Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology” -lehdessä. Tutkimuksessa esitettiin, että Scutellaria barbata -kasvista vihreällä synteesillä valmistetut kultananohiukkaset vaikuttavat kasvaimen vastaisesti haimasyöpäsolulinjaan PANC1.
Tämä Toxicology and Environmental Health Sciences -lehdessä (2020) julkaistu artikkeli tutki Delonix regia -uutteen ja hopeananohiukkasten syöpälääkinnällistä potentiaalia kahdella ihmisen syöpäsolulinjalla, eli PANC1:llä ja MCF7:llä.
Kultananopartikkelien synteesi Panax notoginseng -kasvin lehdistä ja niiden syöpälääkinnällinen vaikutus haimasyövän PANC-1-solulinjoissa
Tämä artikkeli julkaistiin kansainvälisessä Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology -lehdessä vuonna 2019. Tässä tutkimuksessa tarkasteltiin Panax notoginseng -kasvin lehtiuutteesta syntetisoitujen kultananohiukkasten terapeuttisia vaikutuksia PANC1-haimasyöpäsolulinjaan.
Tämä tutkimus julkaistiin Nature Scientific Reports -lehdessä (2020). Siinä tutkijat kehittivät peptidin KS-58, joka estää selektiivisesti PANC-1-solulinjan KRAS G12D-mutaatiota in vitro.
Isorhamnetiini estää PANC-1-haimasyöpäsolujen proliferaatiota S-vaiheen pysäyttämisen kautta
Tämä tutkimus julkaistiin Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä vuonna 2018. Tutkimuksessa esitettiin, että flavonoidi isorhamnetiini estää PANC-1-solujen proliferaatiota solusyklin S-vaiheen pysäyttämisen kautta.
Uusi LIMK2-estäjä estää Panc-1-kasvaimen kasvua hiiren ksenotransplantaattimallissa
Tämä Oncoscience-lehdessä (2014) julkaistu tutkimus esitti, että uusi LIMK2-estäjä estää kasvaimen kasvua PANC-1-ksenotransplantaattimallissa hiirillä.
PANC1-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
Alla on lueteltu joitakin PANC 1 -soluja koskevia saatavilla olevia resursseja.
- PANC-1-transfektio: Tämä video on opas, jossa opetellaan PANC-1-transfektioprotokollaa.
- Solulinjan subkultivointi: Tässä videossa selitetään yleinen protokolla adheesiivisten solulinjojen subkultivointiin.
Seuraavat linkit sisältävät PANC1-solujen viljelyohjeet.
- PANC1-solut: Tämä linkki sisältää ohjeet PANC1-solulinjan sulattamiseen ja uudelleenviljelyyn.
- PANC 1 -soluviljely: Tältä verkkosivustolta löydät kaikki keskeiset tiedot PANC 1 -soluviljelystä, mukaan lukien PANC 1 -soluviljelyalustat, solujen sulatus, solujen pakastus ja subkultivointiprotokolla.
Usein kysytyt kysymykset: PANC-1-solujen ymmärtäminen ja niiden käyttökohteet
Lähteet
- Lieber, M. ym., Jatkuvan kasvainsolulinjan (PANC-1) perustaminen ihmisen eksokriinisen haiman karsinoomasta. International Journal of Cancer, 1975. 15(5): s. 741–747.
- Kim, Y. ym., Haiman duktaalisen adenokarsinooman solulinjojen vertaileva proteomiprofilointi. Mol Cells, 2014. 37(12): s. 888–98.
- Jin, U.-H. ym., Omepratsolin vaikutus haimasyövän Panc1-solujen migraation estämiseen riippuu JNK:n aryylihiilivetyreseptorin aktivaatiosta. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 501(3): s. 751–757.
- Yuetong, L., ym., Salidrosidi estää ihmisen haimasyövän PANC1- ja SW1990-solujen proliferaatiota, migraatiota ja invaasiota AKT- ja ERK-signalointireittien kautta. Die Pharmazie – An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2020. 75(8): s. 385–388.
- Alipour, S., L. Pishkar ja V. Chaleshi, Portulaca oleracea -uutteen sytotoksinen vaikutus CDK1- ja P53-geenien ilmentymisen säätelyyn haimasyöpäsolulinjassa. Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): s. 1792–1801.