NCI-H460-solut – Keuhkosyövän tutkimuksen edistäminen NCI-H460-solulinjan avulla
NCI-H460-solut ovat ihmisestä peräisin olevia ei-pienisoluista keuhkosyöpäsoluja, joita käytetään yleisesti keuhkosyövän ja toksikologian tutkimuksessa. Tämä solulinja on arvokas työkalu erilaisten syöpäbiologian näkökohtien tutkimiseen, kuten kasvaimen kehittymiseen, kasvuun ja lääkeresistenssiin. Lisäksi NCI-H460-solut ovat sopiva malli syöpälääkkeiden kehittämiseen.
- Kasvatusväliaine
- NCI-H460-solulinjan viljelyalustana käytetään RPMI 1640 -kasvatusliuosta. Sitä täydennetään 10 %:lla naudan sikiöseerumia, 2,1 mM:lla stabiilia glutamiinia ja 2,0 g/l:lla NaHCO3:ta. Kasvatusliuos tulee vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
- Kaksinkertaistumisaika
- NCI-H460-solulinjan kaksinkertaistumisaika on noin 33 tuntia.
- Kasvutyyppi
- NCI-H460-keuhkosyöpäsolut ovat adheesiivisia.
- Bioturvallisuustaso
- BSL-4
- Saatavana
- Cytion — Tilaa NCI-H460
NCI-H460-solut: Alkuperä ja yleiset ominaisuudet
Solulinjan alkuperä ja yleiset ominaisuudet vaikuttavat merkittävästi sen tutkimuskäyttöön. Tämän artikkelin osio auttaa sinua tutustumaan NCI-H460-keuhkosyöpäsolujen alkuperään ja keskeisiin ominaisuuksiin. Tulet oppimaan: Mitä ovat NCI-H460-solut? Minkä tyyppinen solulinja NCI-H460 on? Mikä on NCI-H460-solujen morfologia?
- NCI-H460-solulinja on peräisin suurisoluista keuhkosyöpää sairastavan eurooppalaisen miehen keuhkopussin nestekertymästä. Sen perustivat vuonna 1982 A.F. Gazdar ja hänen kollegansa.
- NCI-H460-keuhkosyöpäsoluilla on epiteelinen morfologia.
- NCI-H460 on kasvaimia muodostava solulinja, jolla on hypotriploidi karyotyyppi. Näiden solujen modaalinen kromosomiluku on 57. NCI-H460-soluilla esiintyy myös 58 modaalista kromosomilukua yhtä usein.
- Näissä keuhkosyöpäsoluissa on monia ei-pienisoluisten keuhkosyöpien kaltaisia mutaatioita, kuten NCI-H460-KRAS-mutaatio, jotka liittyvät solujen proliferaatioon, kasvuun, invaasioon ja etäpesäkkeiden muodostumiseen.
NCI-H460-solujen viljelyohjeet
NCI-H460-solulinjan asianmukaista käsittelyä ja ylläpitoa varten on syytä tuntea seuraavat keskeiset seikat. Tässä esitellään NCI-H460-solulinjan kaksinkertaistumisaika, NCI-H460-viljelyalusta sekä NCI-H460-keuhkosyöpäsolujen perusviljelymenetelmät.
NCI-H460-solujen viljelyn avainkohdat
Kaksinkertaistumisaika:
NCI-H460-solulinjan kaksinkertaistumisaika on noin 33 tuntia.
Adheesio- vai suspensiokulttuuri:
NCI-H460-keuhkosyöpäsolut ovat kiinnittyviä.
Aliviljelysuhde:
NCI-H460-solulinjalle suositeltu jakosuhde on 1:2 ja 1:4. Vanhan elatusaineen poistamisen jälkeen kiinnittyneet solut huuhdellaan 1 x fosfaattipuskurisuolaliuoksella. Sen jälkeen soluja inkuboidaan Accutase-siirto-liuoksessa 8–10 minuuttia huoneenlämmössä. Irronneet solut suspendoidaan uudelleen viljelyväliaineeseen ja sentrifugoidaan. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen ja kaadetaan uuteen pulloon viljelyä varten.
Kasvatusväliaine:
NCI-H460-solujen viljelyväliaineena käytetään RPMI 1640:tä. Sitä täydennetään 10 %:lla naudan sikiöseerumia, 2,1 mM:lla stabiilia glutamiinia ja 2,0 g/l NaHCO3:lla. Viljelyväliaine tulisi vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet:
NCI-H460-viljelmiä pidetään 37 °C:n lämpötilassa kostutetussa inkubaattorissa, johon syötetään jatkuvasti 5 % CO₂:ta.
Säilytys:
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja voidaan säilyttää pitkäaikaisesti nestemäisen typen höyryvaiheessa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä erittäin matalan lämpötilan pakastimessa.
Jäädytysprosessi ja elatusaine:
NCI-H460-solujen pakastamiseen ja säilyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-kasvatusainetta. Solujen elinkelpoisuuden maksimoimiseksi suositellaan hidasta pakastusmenetelmää.
Sulatusprosessi:
Jäädytetyt NCI-H460-solut sulatetaan esilämmitetyssä vesihauteessa (37 °C:ssa) 40–60 sekuntia, kunnes jäljellä on vain pieni jääpalas. Sulatetut solut lisätään tuoreeseen elatusaineeseen ja sentrifugoidaan jäädytysaineen komponenttien poistamiseksi. Kerätty solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut siirretään uusiin, kasvua varten elatusainetta sisältäviin pulloihin. NCI-H460-solujen kiinnittyminen pullon pintaan voi kestää lähes 24 tuntia.
Bioturvallisuustaso:
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja käsitellään ja ylläpidetään bioturvallisuustason 1 laboratorioissa.
Julkaistu: 2023 | Viimeksi tarkistettu: toukokuu 2026
NCI-H460-solujen edut ja haitat
NCI-H460 on laajalti käytetty solulinja keuhkosyövän tutkimuksessa. Tässä osiossa käsitellään NCI-H460-keuhkosyöpäsoluihin liittyviä yleisiä etuja ja haittoja.
Edut
NCI-H460-epäpienisoluista keuhkosyöpäsolulinjan edut ovat:
-
Kasvaimen alkuperä
NCI-H460-solulinja on peräisin suurisoluista keuhkosyöpää sairastaneelta potilaalta, ja se edustaa tätä erityistä keuhkosyöpätyyppiä. Soluja käytetään mallina keuhkosyövän biologian tutkimiseen sekä uusien ja tehokkaiden hoitomenetelmien kehittämiseen. NCI-H460-soluilla on tuumorigeeninen potentiaali, ja niitä voidaan injektoida immuunipuutteisiin hiiriin in vivo -kasvainmallien luomiseksi, joiden avulla tutkitaan kasvaimen kasvua, kehitystä ja potentiaalisten lääkkeiden tehoa.
-
Korkeat proliferaatioasteet
NCI-H460:n kasvunopeus on suurempi kuin muiden ei-pienisoluisten keuhkosyöpäsolulinjojen, kuten A549:n. Tämä etu lisää solujen saatavuutta ja auttaa tutkijoita suorittamaan toistettavia ja ajallisesti kriittisiä kokeita.
Haitat
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluihin liittyvät haitat ovat:
-
Homogeenisuus
NCI-H460-solut ovat homogeenisia, koska ne on saatu yhden potilaan kasvaimesta. Siksi niiltä puuttuu yleensä potilaiden kasvaimissa havaittava monimutkaisuus ja heterogeenisyys.
NCI-H460-solujen tutkimuskäyttö
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja käytetään laajasti keuhkosyöpään liittyvissä tutkimuksissa. Seuraavassa on esitetty joitakin NCI-H460-solujen tärkeitä tutkimuskäyttötarkoituksia:
- Keuhkosyöpätutkimus: NCI-H460-solut ovat korvaamaton malli kasvaimen kehittymiseen, kasvuun ja etäpesäkkeiden muodostumiseen liittyvien solu- ja molekyylimekanismien tutkimiseen. Lisäksi niitä käytetään tutkimaan keuhkosyövän etenemiseen liittyviä keskeisiä signalointireittejä, molekyylikohteita ja erilaisia geneettisiä mutaatioita. NCI-H460-soluilla on tehty useita tutkimuksia näiden tekijöiden tehokkaaksi selvittämiseksi. Vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa ehdotettiin, että yliekspressoitu NUCKS (nuclear ubiquitous casein and cyclin-dependent kinases substrate) osallistuu kasvainsolujen kasvuun säätelemällä PI3K/AKT-signaalireittiä [1]. Vastaavasti in vitro- ja in vivo -tutkimuksessa käytettiin NCI-H460-soluja eIF4E-geenin roolin selvittämiseen. Tulokset osoittivat, että eIF4E-geeni on mukana keuhkosyövän kasvussa ja angiogeneesissä, ja sitä voidaan käyttää kohteena lupaavien keuhkosyöpälääkkeiden kehittämisessä [2].
- Lääkekehitys: NCI-H460, ihmisen keuhkosyöpäsolulinja, on laajalti käytössä lääkekehitystutkimuksissa. Tutkijat käyttävät näitä soluja tutkiakseen uusien lääkeaineiden, kohdennettujen hoitojen ja pääasiassa NCI-H460-solujen KRAS-mutaatioihin kohdistuvien hoitojen toksisuutta ja tehoa. Haoyue Hu ja hänen kollegansa tekivät vuonna 2023 tutkimuksen, jossa käytettiin NCI-H460-soluja anlotinibilin syöpälääkkeen vaikutusten tutkimiseen. Tulokset osoittivat, että anlotinibi vaikutti osittain KRAS-mutaatioita sisältävien keuhkosyöpäsolujen kasvuun estämällä MEK/ERK-signaalikaskadia [3]. Samoin fenoliyhdisteen, karnoiinihapon, antiproliferatiivisia ja proapoptoottisia vaikutuksia tutkittiin NCI-H460-soluilla [4].
- Lääkeresistenssi: NCI-H460-solulinja sopii erinomaisesti keuhkosyövän lääkeresistenssimekanismien tutkimiseen. Tutkijat käyttävät näitä soluja lääkeresistenssimallien kehittämiseen, jotta voidaan tunnistaa taustalla olevat geenit, molekyylitekijät ja signalointireitit. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa kehitettiin pemetrexedille, monikohteiselle antifolaattilääkkeelle, resistenttejä NCI-H460-soluja, jotta voitiin tutkia pemetrexed-resistenssin taustalla olevia molekyylimekanismeja ei-pienisoluisten keuhkosyöpäsolujen osalta [5].
Hanki NCI-H460-solulinja: porttisi keuhkosyövän tutkimukseen
NCI-H460-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on esitetty joitakin mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja, jotka käsittelevät NCI-H460-keuhkosyöpäsolulinjaa.
Tässä Molecules-lehdessä (2023) julkaistussa tutkimuksessa esitettiin, että mustapavusta peräisin oleva luonnollinen α-1,6-glukaani, BBWPW, estää NCI-H460-solujen lisääntymistä säätelemällä PI3K/AKT/MAPK-signaalireittiä.
Tässä Phytomedicine-lehdessä (2019) julkaistussa artikkelissa tutkittiin, että dioscin-6′-O-asetaatti, uusi luonnollinen yhdiste, vaikuttaa NCI-H460-keuhkosyöpäsolujen lisääntymistä estävästi.
miRNA-425-5p edistää keuhkosyövän kasvua PTEN/PI3K/AKT-signaalireitin kautta
BMC Pulmonary Medicine -lehdessä (2020) julkaistun tutkimuksen mukaan mikroRNA-425-5p edistää keuhkosyövän tuumorigenesiä PTEN/PI3K/AKT-signaalireitin kautta.
Tässä Molecular Medicine Reports -lehdessä (2017) julkaistussa artikkelissa esitettiin kinalitsariiniyhdisteen kasvainten vastaisen potentiaalin ja sen taustalla olevat mekanismit NCI-H460- ja muissa keuhkosyöpäsoluissa.
Tämä Food and Function -lehdessä (2019) julkaistu tutkimus korostaa Eucalyptus globulus Labill. -uutteen potentiaalista syöpää estävää vaikutusta NCI-H460-soluilla. Tulokset osoittivat, että kasviuute tuotti nämä vaikutukset lisäämällä NCI-H460-solujen p53-ilmentymistä ja muokkaamalla solusyklin profiilia.
NCI-H460-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
Tässä on joitakin NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja käsitteleviä verkkolähteitä.
- NCI-H460-solujen transfektio: Tämä opetusvideo on vaiheittainen opas NCI-H460-solujen transfektioon plasmidi-DNA:lla.
Seuraavat linkit sisältävät välttämätöntä soluviljelytietoa H460-soluista.
- NCI-H460-solut: Tältä verkkosivustolta löytyy tärkeää tietoa NCI-H460-solujen viljelyalustoista sekä solujen siirrostamisesta, pakastamisesta ja sulattamisesta.
- NCI-H460-solujen siirto: Tämä asiakirja opastaa sinua NCI-H460-solulinjan siirrossa ja aliviljelyssä. Lisäksi se auttaa sinua oppimaan NCI-H460-solujen transfektioprotokollan.
NCI-H460-solulinjan tutkiminen: usein kysyttyjä kysymyksiä ja havaintoja
NCI-H460-solulinja on peräisin potilaalta, jolla on suurisoluinen keuhkosyöpä, joten se on arvokas malli tämäntyyppisen keuhkosyövän tutkimiseen.
NCI-H460-soluja käytetään keuhkosyövän biologian tutkimiseen, uusien hoitomuotojen kehittämiseen ja mahdollisten lääkkeiden tehokkuuden arviointiin. Niitä voidaan myös ruiskuttaa immuunipuutteisiin hiiriin, jotta voidaan luoda in vivo -kasvainmalleja kasvainten kasvun ja kehityksen tutkimiseksi.
Sekä NCI-H460- että A549-solulinjat ovat peräisin keuhkosyövästä, mutta NCI-H460 edustaa suurisoluista karsinoomaa, kun taas A549 edustaa adenokarsinoomaa. Tämä histologisen alatyypin ero vaikuttaa niiden ominaisuuksiin ja käyttäytymiseen.
Kyllä, NCI-H460-soluilla on tumorigeeninen potentiaali, ja ne voidaan istuttaa immuunipuutteisiin hiiriin ksenograft-mallien luomiseksi, mikä helpottaa suurisoluisen keuhkosyövän tutkimista in vivo.
Paklitakselin yhdistäminen muihin yhdisteisiin voi tehostaa sen sytotoksisia vaikutuksia NCI-H460-soluihin, mikä saattaa parantaa keuhkosyövän hoitotuloksia.
Kyllä, NCI-H460-solut ilmentävät hypoksantiiniguaniinifosforibosyylitransferaasia, joka on välttämätön nukleotidiaineenvaihdunnan ja solujen lisääntymisen kannalta.
NCI-H460-soluja käytetään yleisesti syöpä- ja toksikologisessa tutkimuksessa kasvainten kasvun tutkimiseen, yhdisteiden sytotoksisten vaikutusten arviointiin ja lääkeresistenssimekanismien tutkimiseen.
NCI-H460-solut ilmentävät tyypillisesti neurofilamentti-triplet-proteiineja, jotka osallistuvat sytoskelettirakenteen ylläpitämiseen ja joilla voi olla merkitystä syöpäsolujen migraatiossa ja invasiossa.
Muun muassa κB-reitti osallistuu NCI-H460-solujen proliferaation ja eloonjäämisen säätelyyn, mikä tarjoaa mahdollisia kohteita keuhkosyövän terapeuttiseen hoitoon.
Kyllä, NCI-H460-soluja käytetään yleisesti in vitro -malleina kemoterapeuttisten aineiden, kuten paklitakselin ja karboplatiinin, sytotoksisten vaikutusten arvioimiseksi, mikä auttaa tehokkaiden syöpähoitojen kehittämisessä.
Lähteet
- Hu, C. ym., NUCKS edistää keuhkosyöpäsolujen proliferaatiota, migraatiota ja invaasiota Pi3k/Akt-signalointireitin kautta. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55–61.
- Qi, X. ym., EGPI-1, uusi eIF4E/eIF4G-vuorovaikutuksen estäjä, estää keuhkosyöpäsolujen kasvua ja angiogeneesiä Ras/MNK/ERK/eIF4E-signaalireitin kautta. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: s. 109773.
- Hu, H. ym., Anlotinibilla on syöpää estäviä vaikutuksia KRAS-mutatoituneisiin keuhkosyöpäsoluihin MEK/ERK-signaalireitin estämisen kautta. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579–3587.
- Corveloni, A.C. ym., Karnosihapolla on solujen lisääntymistä estäviä ja solukuolemaa edistäviä vaikutuksia NCI-H460-kasvainsoluissa ja IMR-90-keuhkosoluissa, joissa ei ole kasvainta. Journal of Toxicology and Environmental Health, osa A, 2020. 83(10): s. 412–421.
- Xu, Y.-L. ym., Pemetrexedille resistenttien NCI-H460/PMT-solujen perustaminen ja karakterisointi. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (aiemmin Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): s. 731–739.