KG-1-solulinja
KG-1-solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Solulinjan alkuperä ja yleiset ominaisuudet auttavat tutkijaa päättämään sen käytöstä omassa työssään. Voit tutkia näitä tietoja ennen kuin aloitat sen parissa työskentelyn. Tämän artikkelin osio käsittelee KG-1-makrofaagien alkuperää ja ominaisuuksia. Täältä saat selville: Mitä ovat KG-1-solut? Mikä on KG-1a-solulinja? Mikä on KG-1-solulinjan alkuperä? Millainen on KG-1-solujen morfologia?
- KG-1 on lymfoblastien kaltainen solulinja, joka on peräisin akuuttia myelooista leukemiaa sairastavan valkoihoisen miehen (59-vuotias) luuydinnäytteestä. Sen perustivat Koeffler ja Golde vuonna 1978. Nämä solut ovat pääasiassa promyelosyytti- tai myeloblastivaiheessa [1].
- KG-1-soluilla on lymfoblastimainen morfologia.
- KG-1-solulinjan karyotyypissä kromosomien modaaliluku on pseudodiploidinen.
KG-1 ja KG-1a
KG-1a on emosolulinjan KG-1 alalinja. Se kehitettiin KG-1-solulinjan 35. passagointikerran jälkeen. Se on vähemmän erilaistunut verrattuna KG-1-solulinjaan. Lisäksi tämä alalinja on sytokemiallisesti, morfologisesti ja toiminnallisesti vähemmän kypsä kuin emosolulinja (KG-1).
KG-1-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
Tässä artikkelin osiossa käsitellään kaikkia KG-1-solujen viljelyyn liittyviä välttämättömiä tietoja, jotka voivat helpottaa työtäsi. Täältä saat selville: Mikä on KG-1-solulinjan kaksinkertaistumisaika? Mitkä ovat KG-1-makrofaagien viljelyolosuhteet? Miten KG-1-soluja viljellään?
KG-1-solujen viljelyn avainkohdat
Kaksinkertaistumisaika:
KG-1-solulinjan kaksinkertaistumisaika on noin 45 tuntia. Se voi kuitenkin vaihdella viljelyolosuhteiden mukaan.
Adherenssi- vai suspensio-viljely:
KG-1-solut kasvavat suspensiossa.
Solutiheys:
KG-1-solulinjan optimaalinen solutiheys on 1–3 × 105 solua/ml. Uudiskultivointia varten solususpensio siirretään steriiliin putkeen ja sentrifugoidaan. Kerätyt solut lisätään sitten tuoreeseen elatusaineeseen ja suspendoidaan huolellisesti. Sen jälkeen solut annostellaan uusiin pulloihin ja viljellään optimaalisella solutiheydellä. Solut voidaan jakaa, kun ne saavuttavat maksimisolutiheyden 1–2 × 10⁶ solua/ml.
Kasvatusväliaine:
IMDM (Iscove’s Modified Dulbecco’s Medium), joka sisältää 10 % FBS:ää, 4,5 g/l glukoosia, 4 mM L-glutamiinia, 1,0 mM natriumpyruvaattia ja 3,0 g/l NaHCO3:ta. Kasvatusliuosta tulee vaihtaa kolmen päivän kuluttua.
Kasvatusolosuhteet:
KG1-AML-solulinjaa viljellään kostutetussa inkubaattorissa 37 °C:n lämpötilassa ja 5 %:n CO₂-pitoisuudessa.
Säilytys:
Jäädytetyt solut säilytetään nestemäisen typen höyryvaiheessa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä erittäin matalan lämpötilan pakastimessa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi.
Jäädytysprosessi ja elatusaine:
CM-1 tai CM-ACF sopii KG-1-solujen pakastamiseen. Solut pakastetaan hitaalla pakastusmenetelmällä, jotta ne eivät altistu lämpöshokille. Tällä menetelmällä lämpötila laskee asteittain 1 °C minuutissa.
Sulatusprosessi:
Solut sulatetaan esilämmitetyssä 37 °C:n vesihauteessa, kunnes jäljellä on vain pieni jääpalas. Sulatettuihin soluihin lisätään tuoretta elatusainetta ja ne sentrifugoidaan pakastusaineen komponenttien poistamiseksi. Solupelletti suspendoidaan huolellisesti uudelleen ja kaadetaan uusiin, kasvualustaa sisältäviin pulloihin.
Bioturvallisuustaso:
Bioturvallisuustason 1 laboratorio on välttämätön KG-1-soluviljelmien ylläpitämiseksi.
Julkaistu: 2023 | Viimeksi tarkistettu: toukokuu 2026
KG-1-solulinja: edut ja rajoitukset
Muiden solulinjojen tavoin myös KG-1-myelooisen leukemian solulinjaan liittyy monia etuja ja rajoituksia. Tässä osiossa perehdymme joihinkin merkittävimpiin seikkoihin, jotka voivat olla ratkaisevia sen käytön valinnassa tutkimuksessasi.
Edut
KG-1-solujen tärkeimmät edut ovat:
-
Helppo viljely
KG-1-soluja on helppo viljellä tutkimuslaboratorioissa, sillä niiden viljelyvaatimukset ovat yksinkertaiset. Niiden helppo ylläpito ja kasvun edellytykset tekevät niistä helposti saatavilla laajalle joukolle tutkijoita, joilla on käytössään perusvarustetut soluviljelytilat.
-
Akuutin myelooisen leukemian (AML) malli
Akuuttia myelooista leukemiaa (AML) sairastavalta miespotilaalta peräisin oleva KG-1-AML-solulinja on arvokas työkalu AML:n biologian tutkimiseen ja potentiaalisten hoitomenetelmien kehittämiseen, sillä se tarjoaa tietoa taudin taustalla olevista mekanismeista ja hoitostrategioista.
Rajoitukset
KG1-solulinjaan liittyvät rajoitukset ovat seuraavat:
-
In vitro -malli
KG-1-solut ovat arvokas in vitro -malli AML-tutkimuksessa; on kuitenkin tärkeää huomata, että ne eivät välttämättä täysin jäljittele taudin monimutkaisuutta in vivo, vaan toimivat yksinkertaistettuna solumallina, joka ei välttämättä kata kaikkia AML:n biologian näkökohtia.
KG-1-solujen sovellukset tutkimuksessa
KG-1 tarjoaa useita lupaavia sovelluksia biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Tärkeitä KG1-makrofaagien käyttökohteita tutkimuksessa ovat muun muassa:
- Syöpätutkimus: KG-1-solut on peräisin akuutista myelooisesta leukemiasta kärsivältä potilaalta, ja niitä pidetään siksi arvokkaana tutkimusvälineenä AML:n biologian tutkimuksessa. Tutkijat käyttävät näitä soluja tutkiakseen solutason ja molekyylitason mekanismeja, jotka ohjaavat AML:n kehittymistä, kasvua ja lääkeresistenssiä. Tähän liittyy myös AML:ään liittyvien uusien biomarkkerien, geneettisten mutaatioiden ja signalointireittien tunnistaminen ja löytäminen. Esimerkiksi vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa selvitettiin, että pitkä ei-koodaava RNA linc00239 edistää doksorubisiiniresistenssiä ja pahanlaatuista käyttäytymistä akuutin myelooisen leukemian soluissa, KG-1:ssä. Lisätutkimukset paljastivat, että lncRNA aktivoi PI3K/Akt/mTOR-signalointireitin aiheuttaakseen nämä vaikutukset AML-soluissa [2].
- Toksikologia: KG1-solulinjaa käytetään laajalti toksikologisessa tutkimuksessa. Tutkijat testaavat potentiaalisten terapeuttisten aineiden, kuten kemoterapeuttisten lääkkeiden ja kohdennettujen hoitojen, toksisuutta ja tehoa KG1-myelooisen leukemian soluilla tunnistaakseen lupaavia lääkeaineita tulevia prekliinisiä ja kliinisiä arviointeja varten. Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa analysoitiin doksorubisiinia sisältävien nano-niosomien toksisuutta KG1-AML-solulinjalla. Tutkimuksessa ehdotettiin, että nano-niosomi on sopiva kantaja lääkeaineen annosteluun, koska se parantaa hoidon tehokkuutta [3]. Toisessa tutkimuksessa tutkijat selvittivät Urtica dioica -kasvin lehdistä valmistetun nokkosteen terapeuttisia vaikutuksia. Tutkimus paljasti, että tällä kasvin lehdistä valmistetulla vesipitoisella uutteella on kasvaimia estäviä vaikutuksia akuutin myelooisen leukemian soluissa, KG-1 ja U937 [4].
KG-1-soluja koskevat julkaisut
Tässä artikkelin osiossa luetellaan muutamia mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja KG-1-soluista.
Tämä artikkeli julkaistiin Journal of Cellular Physiology -lehdessä (2019). Tutkimuksessa esitettiin, että kversetiini herkistää KG1-AML-solulinjan TNF:ään liittyvälle apoptoosia indusoivalle ligandille (TRAIL) ja saattaa voimistaa TRAIL:n aiheuttaman sytotoksisuuden vaikutusta soluissa.
KLF8 tehostaa akuutin myelooisen leukemian solujen kasvua ja glykolyysiä AKT/mTOR-reitin kautta
Tässä Tropical Journal of Pharmaceutical Research -lehdessä (2022) julkaistussa artikkelissa esitettiin, että krüppel-tyyppisen transkriptiotekijän 8 ilmentymisen vaimentuminen estää AML-solujen proliferaatiota ja glykolyysiä sekä edistää apoptoosia säätelemällä AKT/mTOR-signaalireittiä.
Sorafenibin ja arseenitrioksidin vaikutukset U937- ja KG-1-solulinjoihin: apoptoosi vai autofagia?
Tässä Cell Journal (Yakhteh) -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa selvitettiin arseenitrioksidin ja sorafenibin mahdollisia vaikutuksia U937- ja KG-1-soluihin.
Tässä Medical Oncology -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa arvioitiin OXPHOS:ia ja glykolyysiä terapeuttisina kohteina akuutin myelooisen leukemian (AML) KG-1-solulinjassa.
Vuonna 2020 Drug Design, Development, and Therapy -lehdessä julkaistussa artikkelissa esitettiin, että kurkumiini- ja talidomidiyhdisteet aiheuttavat synergistisesti apoptoottisia vaikutuksia KG-1-soluissa vähentämällä STAT3:n ja Bcl-xL:n ilmentymistä.
6. KG-1-solulinjan resurssit: ohjeet, videot ja muuta
Seuraavassa on muutamia KG-1-soluja koskevia verkkolähteitä.
- Suspensiosolujen subkultivointi: Tässä videossa kuvataan protokolla KG-1:n kaltaisten suspensiosoluviljelmien subkultivointiin.
Seuraava linkki sisältää KG-1-soluviljelyohjeen:
- KG-1-solulinja: Tällä verkkosivustolla on runsaasti perustietoa KG-1-solulinjan soluviljelystä. Sivusto sisältää tietoa solulinjan viljelyalustoista sekä protokollia soluviljelmien uudelleenviljelystä ja kryosäilytettyjen sekä proliferaatiokulttuurien käsittelystä.
Viitteet
- Pelliccia, F., V. Ubertini ja N. Bosco, Molekyylisytogeneettisen analyysin merkitys ennen solulinjojen käyttöä tutkimuksessa: KG-1a-leukemiasolulinjan tapaus. Oncol Lett, 2012. 4(2): s. 237–240.
- Yang, Y. ym., Pitkä ei-koodaava RNA linc00239 edistää pahanlaatuisia ominaisuuksia ja doksorubisiinille kehittyvää kemoresistenssiä osittain aktivoimalla PI3K/Akt/mTOR-signaalireitin akuuteissa myelooisissa leukemiasoluissa. Oncology Reports, 2019. 41(4): s. 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F. ym., Doksorubisiinia sisältävien nano-niosomien valmistus ja tutkimus sekä niiden toksisuuden arviointi akuutin myeloblastisen leukemian KG-1-solulinjalla. Payavard Salamat, 2018. 12(4): s. 309–323.
- Hodroj, M.H. ym., Nokkostee estää akuutin myelooisen leukemian solujen kasvua in vitro edistämällä apoptoosia. Nutrients, 2020. 12(9): s. 2629.