BEWO-solulinja
BeWo on ihmisen koriokarsinoomasta peräisin oleva solulinja, jota käytetään laajalti biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Se toimii arvokkaana in vitro -mallina, jonka avulla voidaan tutkia istukan kehityksen monimutkaista prosessia ja ihmisen trofoblastien synkytialisointia. Tutkijat käyttävät näitä soluja myös trofoblastisolujen käyttäytymisen, hormonituotannon ja aineiden kuljetuksen tutkimiseen istukan läpi. Lisäksi BeWo-soluja voidaan soveltaa toksikologian, infektioiden ja tautien leviämisen tutkimuksessa.
Tämä artikkeli sisältää perustietoa BeWo-soluista, joka voi auttaa sinua käsittelemään niitä tutkimuksessasi. Artikkeli sisältää:
- BeWo-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
- BeWo-solulinja: viljelyohjeet
- BeWo-solulinjan edut ja haitat
- BeWo-solujen tutkimussovellukset
- BeWo-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut
- BeWo-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
BeWo-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Solulinjan alkuperää ja yleisiä ominaisuuksia koskeva ennakkotieto on ratkaisevan tärkeää sen käytön kannalta tutkimuksessasi. Tässä artikkelin osassa tarkastellaan BeWo-solulinjan alkuperää, ominaispiirteitä ja paljon muuta. Täältä saat tietoa seuraavista aiheista: Mikä on BeWo-koriokarsinoomasolulinja? Mitä on BeWo-syncytialisaatio? Mistä BeWo-solut ovat peräisin? Mikä on BeWo-solujen morfologia? Mikä on BeWo-solujen ploidi?
- Istukkasolulinja BeWo on peräisin vuonna 1968 todetusta pahanlaatuisesta raskauden koriokarsinoomasta, joka esiintyi poikavauvan istukassa [1]. Siksi se on korvaamaton malli istukkatutkimuksessa.
- BeWo-solut ovat epiteelin kaltaisia.
- BeWo-solut ovat suhteellisen pieniä, kooltaan 20–30 µm [2].
- BeWo-soluilla on vakaa karyotyyppi. Niiden kantasolulinjan lukumäärä on hypotetraploidinen. BeWo-solujen modaalinen kromosomiluku on 86. Se voi vaihdella välillä 71–178.
- BeWo-solut tuottavat useita hormoneja, kuten ihmisen korion-somatomammotropiinia, ihmisen koriongonadotropiinia (hCG) ja steroidihormoneja.
- BeWo-solut ilmentävät molekyylimarkkereita, kuten CK 7:ää, E-kadheriinia ja VE-kadheriinia.
B30-alalinja
B30 on BeWo-solujen alalinja. Sitä käytetään ravinteiden ottoa ja kuljetusta koskeviin tutkimuksiin. Tämä johtuu niiden voimakkaasta kasvusta huokoisilla kalvoilla.
BeWo ja JEG-3
BeWo- ja JEG-3-solulinjat ovat peräisin koriokarsinoomista, ja niitä käytetään istukan tutkimuksessa. BeWo-solut tuottavat hormoneja, kuten ihmisen koriongonadotropiinia (hCG) ja estradiolia, vähemmän kuin JEG-3-solut.
BeWo-solulinja: Viljelyohjeet
Soluviljelmän ylläpito voi olla haastavaa, ellei tunne keskeisiä yksityiskohtia. Esimerkiksi: Mikä on BeWo-solujen kaksinkertaistumisaika? Mikä on BeWo-solujen viljelyalusta? Miten BeWo-solulinjaa viljellään? Ja miten BeWo-solut pakastetaan?
BeWo-solujen viljelyn avainkohdat
Kaksinkertaistumisaika:
BeWo-solujen populaation kaksinkertaistumisaika on noin 30 tuntia.
Adherenssi- vai suspensio-solulinja:
BeWo on kiinnittyvä solulinja.
Solujen kylvötiheys:
BeWo-soluille suositeltu kylvötiheys on 1 x 10⁴ solua/cm². Kylvöä varten vanha elatusaine poistetaan soluista ja solut huuhdellaan 1x PBS:llä. Sen jälkeen lisätään Accutase (siirto-liuos) ja soluja inkuboidaan 8–10 minuuttia huoneenlämmössä. Sitten irronneet solut lisätään viljelyalustaan ja sentrifugoidaan. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen ja kaadetaan uuteen pulloon.
Kasvatusväliaine:
BeWo-solujen kasvatukseen käytetään Ham’s F12K -kasvatusliuosta, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2,0 mM L-glutamiinia, 2,0 mM natriumpyruvaattia ja 2,5 g/l NaHCO₃:ta. BeWo-solujen kasvatusliuos tulee vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet:
BeWo-soluja pidetään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on asetettu 37 celsiusasteeseen ja jossa on 5 %:n CO₂-pitoisuus.
Säilytys:
Jäädytetyt BeWo-solut säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä ultra-matalalämpötilapakastimessa tai nestemäisen typen höyryvaiheessa.
Jäädytysprosessi ja -alusta:
BeWo-soluja suositellaan pakastettavaksi CM-1- tai CM-ACF-pakastusväliaineessa. Solut pakastetaan hitaalla pakastusmenetelmällä. Tämä menetelmä sallii vain 1 asteen lämpötilan laskun minuutissa, mikä estää soluja kärsimästä lämpöshokista ja suojaa solujen elinkelpoisuutta.
Sulatusprosessi:
Jäädytetyt solut sulatetaan upottamalla ne ennalta asetettuun 37 °C:n vesihauteeseen 40–60 sekunniksi, kunnes jäljellä on vain pieni jääpalas. Sen jälkeen lisätään tuoretta kasvualustaa, ja solut sentrifugoidaan pakastusaineen komponenttien poistamiseksi. Kerätty solupelletti suspendoidaan uudelleen ja annostellaan viljelypulloon kasvattamista varten.
Bioturvallisuustaso:
BeWo-soluviljelmien käsittelyyn ja ylläpitoon tarvitaan bioturvallisuustason 1 laboratorio.
Julkaistu: 2023 | Viimeksi tarkistettu: toukokuu 2026
BeWo-solulinjan edut ja haitat
BeWo-soluilla on ainutlaatuisia ominaisuuksia sekä erityisiä etuja ja haittoja. Tässä osiossa tarkastelemme joitakin merkittävimpiä niistä.
Edut
BeWo-koriokarsinoomasolulinjan tärkeimmät edut ovat:
-
In vitro -istukkasolumalli
BeWo-solut tarjoavat in vitro -mallin trofoblastisolujen käyttäytymisen ja istukan synkytialisaation tutkimiseen, jäljittelemällä prosesseja, joita on vaikea havaita in vivo.
-
Hormonituotanto
BeWo-solut erittävät hormoneja, kuten hCG:tä ja istukan laktogeenia, mikä tekee niistä arvokkaita hormonien säätelyä koskevissa tutkimuksissa ja lisääntymisbiologian tutkimuksessa.
Haitat
BeWo-trofoblastisolujen haitat ovat:
-
Syöpäsolulinja
BeWo-solut on peräisin koriokarsinoomasta, joka on istukan kasvain. Tämä alkuperä ei välttämättä edusta täysin normaalia istukkasolujen toimintaa.
BeWo-solujen tutkimuskäyttö
BeWo-solulinjaa käytetään laajasti istukan tutkimuksessa. Tässä mainitaan muutamia tämän solulinjan erityisiä sovelluksia:
- Istukka- ja raskausaiheinen tutkimus: BeWo-solut ovat keskeisiä istukka- ja raskausaiheisessa tutkimuksessa. Tutkijat käyttävät näitä soluja esimerkiksi tutkiakseen aineiden, kuten lääkkeiden, ravintoaineiden ja toksiinien, kulkeutumista istukan läpi. Lisäksi he tutkivat hormonien tuotantoa ja säätelyä, mukaan lukien ihmisen koriongonadotropiini (hCG), istukan laktogeeni ja steroidihormonit. Tämä on tärkeää raskauden aikana tapahtuvien hormonaalisten muutosten ymmärtämiseksi. Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa selvitettiin bromattujen palonestoaineiden (BFR) vaikutusta sulfotransferaasin aktiivisuuteen ihmisen trofoblastisoluviivassa (BeWo). Tämä entsyymi osallistuu kilpirauhashormonin solunsisäisten pitoisuuksien säätelyyn [3].
- Infektio- ja tautitutkimus: BeWo-soluja käytetään myös patogeenien ja istukkasolujen välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen. Tämä tutkimus on arvokasta äidiltä sikiölle tarttuvien sairauksien ymmärtämisen ja sikiön terveyden suojelemiseksi kehitettävien strategioiden kannalta. Lisäksi tämä solulinja auttaa tutkijoita selvittämään raskauden aikana ilmeneviä komplikaatioita, kuten pre-eklampsiaa. Esimerkiksi Michalina Bralewskalla vuonna 2023 tekemässä tutkimuksessa hyödynnettiin BeWo-trofoblastisolumallia ja havaittiin, että sekä kromograniini A (CgA) että siitä johdettu peptidi, katestatiini (CST), voivat olla osallisina pre-eklampsian (PE) monimutkaisessa patogeneesiprosessissa [4]. Myöhemmin toisessa tutkimuksessa tutkittiin trikosantiinin syöpälääkkeen potentiaalia käyttämällä BeWo-koriokarsinoomasolulinjaa. Tutkimuksessa pyrittiin myös löytämään biomarkkereita suorittamalla vertaileva proteomianalyysi ennen ja jälkeen kokeen [5].
5. BeWo-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on esitetty joitakin merkittäviä BeWo-trofoblastisoluja käsitteleviä tutkimusjulkaisuja.
Tässä Frontiers in Bioscience-Landmark -lehdessä (2022) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että AMPK-signalointi aktivoi mitofagian BeWo-trofoblastisoluissa FUNDC1:n ja PRKN:n välittämien mitofagiareittien kautta. Tämän seurauksena mitofagia auttaa ylläpitämään ATP:n tuotantoa ja mitokondrioiden kalvopotentiaalia.
Tämä artikkeli julkaistiin Animal Cells and Systems -lehdessä (2020). Tutkimuksessa esitettiin, että etyyliparabeeni välittää BeWo-solujen apoptoosia säätelemällä kaspaasi 3 -reittiä.
Tässä Drug Metabolism and Disposition -lehdessä (2023) julkaistussa tutkimuksessa käytettiin istukkakudoslinjoja, mukaan lukien BeWo, JAR, JEG-3 ja HTR-8/SVneo, tutkimaan vierasaineiden ja steroidien kertymistä soluihin.
Tässä International Journal of Molecular Medicine -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimusartikkelissa esitettiin, että APJ-reseptorin ligandi apeliini edistää BeWo-solujen proliferaatiota APJ- ja ERK1/2-, stat3- ja AMPK-signalointireittien kautta. Siten se voisi olla istukan kehitystä säätelevä välttämätön adipokiini.
Tämä Epilepsia-lehdessä (2021) julkaistu tutkimus selvitti sikiön ravintoaineiden ja epilepsialääkkeiden vaikutuksia koliinikuljettajaproteiineihin ihmisperäisessä trofoblastisoluviivassa BeWo.
BeWo-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
Tässä on joitakin BeWo-soluista saatavilla olevia online-resursseja:
- In vitro -transfektio: Tämän videon avulla opit in vitro -plasmidi-DNA-transfektio-ohjeen adheesiivisille soluille.
Seuraava linkki sisältää soluviljelytietoja BeWo-soluista:
- BeWo-solut: Tämä verkkosivusto sisältää olennaista soluviljelytietoa BeWo-solulinjasta. Tähän sisältyy tietoa soluviljelyalustoista ja viljelyolosuhteista. Sivustolla on myös protokollia aliviljelyyn sekä kryokonservoitujen ja proliferaatiokulttuurien käsittelyyn.
Viitteet
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: s. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Characteristics of trophoblasts in long-term culture. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: s. 259–265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt ja H.M. Stapleton, Bromattujen palonestoaineiden aiheuttama kilpirauhashormonisulfotransferaasiaktiivisuuden häiriö ihmisen koriokarsinooma-istukkasolulinjassa BeWo. Chemosphere, 2018. 197: s. 81–88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha ja A. Sakowicz, Preeklampsian aiheuttama CgA-peräisen CST-proteiinipitoisuuden lasku HTR-8/SVneo- ja BeWo-trofoblastisoluviivoissa. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): s. 7124.
- Hu, Y. ym., Vertaileva proteomianalyysi trikosantiini-lääkkeen lisäämisestä BeWo-solulinjaan. Molecules, 2022. 27(5): s. 1603.