BxPC-3-solulinja
BxPC-3 on ihmisestä peräisin oleva haimasyöpäsolulinja. Sitä käytetään laajalti syöpätutkimuksissa. Tutkijat käyttävät näitä soluja pääasiassa haimasyövän biologian tutkimiseen, hoitokohteiden tunnistamiseen ja syöpälääkkeiden kehittämiseen.
- Kasvatusväliaine
- BxPC-3-solulinjan viljelyyn käytetään RPMI 1640 -kasvatusainetta. Sitä täydennetään 10 %:lla naudan sikiöseerumia, 2,1 mM:lla stabiilia glutamiinia ja 2,0 g/l:lla NaHCO3:ta ihanteellisen solujen kasvun saavuttamiseksi. Elatusaine tulisi vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
- Kaksinkertaistumisaika
- BxPC-3-solujen kaksinkertaistumisaika on 48–60 tuntia.
- Kasvutyyppi
- BxPC-3 on adheesiivinen solulinja.
- Bioturvallisuustaso
- BSL-3
- Saatavana
- Cytion — Tilaa BxPC-3
Tämä artikkeli sisältää tärkeää tietoa BxPC-3-solulinjasta, joka voi olla suureksi avuksi sen käytössä. Artikkelissa käsitellään pääasiassa seuraavia aiheita:
- BxPC-3-solulinjan yleiset tiedot ja alkuperä
- BxPC-3-solujen viljely
- BxPC-3-solulinja: edut ja rajoitukset
- BxPC-3-solujen sovellukset tutkimuksessa
- BxPC-3-soluja koskevat tutkimusjulkaisut
- BxPC-3-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
Yleistä tietoa ja BxPC-3-solulinjan alkuperä
Solulinjan alkuperän tunteminen on ratkaisevan tärkeää sen tutkimuskäytön kannalta. Solulinjan ominaisuuksien, kuten morfologian, solukoon ja ploidian, tunteminen tekee sen käytöstä suoraviivaisempaa ja helpompaa. Tässä artikkelissa kerrotaan BxPC-3-solujen alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista: Mitä ovat BxPC-3-solut? Mikä on BxPC-3-solulinja? Mikä on BxPC-3-solulinjan alkuperä? Mikä on BxPC-3-solujen morfologia?
- BxPC-3, ihmisen haimasyöpäsolut, on peräisin 61-vuotiaalta eurooppalaiselta naiselta, jolla oli haiman adenokarsinooma vuonna 1986. Näiden solujen tuumorigeenisyys vahvistettiin, vaikka potilas oli käynyt läpi useita säde- ja kemoterapiahoitoja. Siten vakiintunut solulinja on korvaamaton malli syövän kehittymisen ja etenemisen tutkimiseen.
- BxPC-3-soluilla on epiteelisolujen kaltainen morfologia.
- BxPC-3:n tyypillinen kromosomiluku on 59. Näissä soluissa on homotsygoottinen deleetio kromosomissa 18q, joka koodaa SMAD4/DPC4-proteiinia. Lisäksi solulinjasta puuttuu haimasyövissä yleinen BxPC-3-kras-mutaatio. Näissä haimasyöpäsoluissa esiintyy myös BxPC-3-braf-deleetio.
Mikä on ero BxPC3:n ja PANC-1:n välillä?
BxPC-3 PADC (haiman duktaalinen adenokarsinooma) ja PANC-1-solut ovat primaarisia haimasyöpäsolulinjoja, joilla on epiteelimorfologia. Tässä yhteydessä edelliset solut omaavat enemmän epiteelimäisiä ominaisuuksia, kun taas jälkimmäiset osoittavat enemmän mesenkymaalisia piirteitä [1].
BxPC-3-solujen viljely
BxPC-3-solulinjaa käytetään laajalti syöpätutkimuslaboratorioissa. Sinun on tiedettävä seuraavat avainkohdat tämän haimasyöpäsolulinjan tehokkaaseen viljelyyn. Opit: Mikä on bxpc3:n kaksinkertaistumisaika? Miten BxPC-3-solulinjaa viljellään?
BxPC-3-solujen viljelyn avainkohdat
Populaation kaksinkertaistumisaika:
BxPC-3-solujen kaksinkertaistumisaika on 48–60 tuntia.
Adherentti vai suspensiossa:
BxPC-3 on kiinnittyvä solulinja.
Jakosuhde:
BxPC-3-solut viljellään uudelleen suhteessa 1:2–1:4. Solut pestään 1 x PBS:llä ja inkuboidaan accutase-nimisellä siirto-liuoksella. 8–10 minuutin kuluttua soluihin lisätään tuoretta elatusainetta ja solut sentrifugoidaan. Peletti suspendoidaan uudelleen elatusaineeseen, ja solut kaadetaan uuteen viljelyastiaan kasvattamista varten.
Kasvatusväliaine:
BxPC-3-solulinjan viljelyyn käytetään RPMI 1640 -kasvatusliuosta. Sitä täydennetään 10 %:lla naudan sikiöseerumia, 2,1 mM:lla stabiilia glutamiinia ja 2,0 g/l:lla NaHCO3:ta ihanteellisen solujen kasvun saavuttamiseksi. Elatusaine tulisi vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
Kasvuolosuhteet:
BxPC-3-soluviljelmiä pidetään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, joka on kytketty 5 %:n CO2-syöttöön.
Säilytys:
Jäädytetyt solut säilytetään yleensä alle -150 °C:n lämpötilassa tai nestemäisen typen höyryvaiheessa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi.
Jäädytysprosessi ja väliaine:
BxPC-3-soluviljelmien pakastamiseen voidaan käyttää CM-1- tai CM-ACF-alustaa. Solujen shokin estämiseksi noudatetaan hidasta pakastusprosessia, jossa lämpötila laskee vain 1 °C kerrallaan.
Sulatusprosessi:
Jäädytetyt BxPC-3-solut sulatetaan ennalta asetetussa 37 °C:n vesihauteessa 40–60 sekunnin ajan. Kun jäljellä on pieni jääpalanen, soluihin lisätään tuoretta viljelyväliainetta ja ne sentrifugoidaan pakastusväliaineen poistamiseksi. Sitten solupelletti suspendoidaan uudelleen ja solut annostellaan kasvatuskolviin.
Bioturvallisuustaso:
BxPC-3-soluviljelmiä ylläpidetään bioturvallisuustason 1 laboratorioissa.
BxPC-3-solulinja: Edut ja rajoitukset
BxPC-3 on tunnettu haiman adenokarsinooman solulinja, johon liittyy useita etuja ja rajoituksia. Solulinjan tärkeimmät edut ja haitat on lueteltu tässä.
Edut
BxPC-3-solujen tärkeimmät edut ovat:
-
Haimasyövän in vitro -malli
Haimasyöpäpotilaista peräisin olevat BxPC-3-solut osoittavat merkityksellisiä ominaisuuksia, mikä tekee niistä sopivan mallin haimasyövän käyttäytymisen tutkimiseen in vitro.
-
Tuumorigeeninen solulinja
BxPC-3-soluilla on tuumorigeenisiä ominaisuuksia, ja ne voivat muodostaa kasvaimia, kun ne injektoidaan alastomille tai immuunipuutteisille hiirille. Nämä kasvaimet muistuttavat läheisesti primaarisia haiman adenokarsinoomakasvaimia, mikä tekee BxPC-3-ksenotransplantaattimallista ihanteellisen syövän kasvun ja etenemisen tutkimiseen.
Rajoitukset
BxPC-3-solulinjaan liittyvät rajoitukset ovat:
-
Ristikontaminaatio
BxPC-3-solulinjaan liittyy, kuten muihinkin solulinjoihin, ristikontaminaation riski. Tutkijoiden tulee noudattaa varovaisuutta ja tiukkoja kontaminaation ehkäisyprotokollia käsitellessään näitä soluja.
-
Hidas kasvuvauhti
BxPC-3-solujen lisääntymisnopeus on suhteellisen hidas, ja niiden kaksinkertaistumisaika on 48–60 tuntia. Tämän ominaisuuden vuoksi tietyt kokeet saattavat vaatia pidempiä inkubointiaikoja, mikä voi viivästyttää tutkimuksen etenemistä.
BxPC-3-solujen sovellukset tutkimuksessa
BxPC-3-soluilla on monia sovelluksia syöpätutkimuksessa. Yleisimmät sovellukset ovat:
- Haimasyövän tutkimus: BxPC-3-solut jäljittelevät haiman adenokarsinoomaa, ja niitä käytetäänkin tutkimaan kasvaimen kehittymisen ja kasvun taustalla olevia geneettisiä ja molekyylimekanismeja. Lisäksi tutkijat löytävät näiden solujen avulla uusia biomarkkereita ja terapeuttisia kohteita. Lisäksi BxPC-3-solut ilmentävät merkittävästi angiogeenisiä tekijöitä, kuten interleukiini-8:aa (IL-8), prostaglandiini E2:ta (PGE2) ja verisuonten endoteelin kasvutekijää (VEGF), minkä vuoksi ne soveltuvat angiogeneesin tutkimiseen. Angiogeneesi on tässä yhteydessä keskeinen prosessi, joka liittyy syövän kasvuun ja etäpesäkkeiden muodostumiseen. Vuonna 2022 julkaistussa tutkimuksessa todettiin, että laminiini-5 gamma-2:n (LAMC2) yli-ilmentyminen BxPC3 PDAC:ssa (haiman duktaalinen adenokarsinooma) tehostaa sen tuumorigenesiä säätelemällä BxPC3:n EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR-signalointireitin säätelyn kautta [2].
- Lääkekehitys: BxPC-3-solulinja toimii korvaamattomana syöpälääkkeiden testausmallina. Tutkijat tutkivat potentiaalisten lääkkeiden sytotoksisia, metastaasien estäviä ja apoptoottisia vaikutuksia BxPC3 PDAC:ssa. Alexandria Turnerin ja hänen kollegoidensa vuonna 2020 tekemässä tutkimuksessa selvitettiin Elaeocarpus reticulatus -hedelmäuutteiden apoptoottisia ominaisuuksia BxPC-3-haimasyöpäsoluissa [3]. Vastaavasti vuonna 2020 tehtiin tutkimus, jossa määritettiin Oxialis obtriangulata -kasvin metanoliuutteen syöpälääkepotentiaali BxPC-3-soluissa. Lisäksi tutkijat tutkivat solumekanismia, jonka kautta kasviuute tuotti terapeuttisia vaikutuksia [4].
5. BxPC-3-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut
Tässä osiossa on lueteltu joitakin BxPC-3-solulinjaa käsitteleviä, eniten siteerattuja ja kiinnostavimpia julkaisuja.
Likokumaroni indusoi BxPC-3-haiman adenokarsinoomasolujen kuoleman estämällä DYRK1A:ta
Tämä Chemico-Biological Interactions -lehdessä (2020) julkaistu artikkeli tutki luonnontuotteen, likokumaronin, apoptoottisia vaikutuksia BxPC-3-haimasyöpäsoluihin.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Anticancer Research -lehdessä (2022). Tutkimuksessa esitettiin, että hydroksiklorokiini aiheuttaa BxPC3-solukuolemaa estämällä BCL-XL-geenin toimintaa.
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2020 Journal of Cellular Biochemistry -lehdessä. Tutkimuksessa todetaan, että luonnollinen yhdiste, salidrosidi, osoittaa syöpälääkinnällisiä vaikutuksia BxPC-3-soluissa säätelemällä HIF-1α:ta (hypoksian indusoima tekijä) ja LOXL2-signaalikaskadia.
Tämä Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä julkaistu artikkeli viittaa siihen, että ibrutinibia voidaan käyttää erinomaisena säteilyherkistävänä aineena haimasyöpäpotilailla. In vitro -tutkimus BxPC-3-soluilla osoittaa, että se vähentää BxPC3-solujen EGFR-fosforylaatiota sekä pAKT:n ja sädehoidon vaikutuksesta yliekspressoituvien alavirran geenien ilmentymistä.
Khelidoniini indusoi apoptoosia GADD45a-p53-säätelyn kautta ihmisen haimasyöpäsoluissa
Tämä Integrative Cancer Therapies -lehdessä julkaistu tutkimus ehdottaa, että luonnontuote chelidoniini aiheuttaa apoptoosia ihmisen haimasyöpäsoluissa BxPC-3 säätelemällä BxPC3 p53- ja GADD45a-signalointia.
BxPC-3-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
BxPC-3-solulinjalla on monia kiinnostavia etuja, jotka tekevät siitä sopivan tutkimuskäyttöön. Monissa BxPC-3-solulinjaa käsittelevissä verkkolähteissä mainitaan sen käsittely-, ylläpito- ja transfektioprotokollat.
- BxPC3-transfektio: Tämä video on vaiheittainen opas BxPC-3-solujen transfektioprotokollan oppimiseen.
Tämä artikkelin osa sisältää linkkejä, joissa selitetään BxPC3-soluviljelyprotokollia.
- BxPC3-soluviljely: Tämä verkkosivusto auttaa sinua oppimaan protokollat kryokonservoitujen ja proliferaatioisten BxPC-3-viljelmien aliviljelyyn ja käsittelyyn.
Viitteet
- Kim, Y., et al., Haiman duktaalisen adenokarsinooman solulinjojen vertaileva proteomiprofilointi. Mol Cells, 2014. 37(12): s. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Laminin-5 gamma-2:n yli-ilmentyminen edistää haiman duktaalisen adenokarsinooman tuumorigenesiä EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskadin kautta. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): s. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus -hedelmäuutteet vähentävät elinkelpoisuutta ja indusoivat apoptoosia haimasyöpäsoluissa in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: s. 2073–2084.
- An, E.-J. ym., Oxialis obtriangulatan syöpälääkkeiden potentiaali haimasyöpäsoluissa ERK/Src/STAT3-välitteisen reitin säätelyn kautta. Molecules, 2020. 25(10): s. 2301.