A375-solulinja - Melanoomatutkimuksen opas

A375 on ihmisen melanoomasolulinja, jota käytetään laajasti toksikologisessa ja immuno-onkologisessa tutkimuksessa. Tutkijat käyttävät tätä solulinjaa syövän biologian ja signaalireittien tutkimiseen, mahdollisten syöpälääkkeiden testaamiseen tai seulontaan sekä uusien ja tehokkaiden terapioiden kehittämiseen.

A375-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet

Tieto solulinjan alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista voi auttaa sinua suunnittelemaan sen käyttöä tutkimuksessa. Tässä artikkelin osassa käsitellään A375-solulinjan alkuperää ja ominaisuuksia. Mikä on esimerkiksi A375-solulinja? Mitkä ovat A375-solulinjan ominaisuudet? Mistä A375-solut ovat peräisin? Mikä on A375-melanoomasolujen morfologia? Mikä on A375-solujen koko?

Ihosyöpäsolulinja A375 on peräisin pahanlaatuista melanoomaa sairastavan 54-vuotiaan naisen kiinteän kasvaimen eksplanttiviljelmästä [1].
A375-soluilla on epiteelin kaltainen morfologia.
A375-solujen koko on suhteellisen pieni verrattuna muihin solulinjoihin. Niiden halkaisija on noin 12 µm.
A375-melanoomasolut ovat hypotriploideja. Tämän solulinjan modaalinen kromosomiluku on 62. Tavallisesti jokaisella solulla on yhdeksän merkkikromosomia ja yksi kopio normaaleista N2-, N6- ja N22-kromosomeista.

Lääkäri tutkii aikuisen ihokasvaimet ihosyövän varalta.

A375-solut: Soluviljelyä koskevat tiedot

A375-soluviljelmiä on helppo ylläpitää. Niillä ei ole mitään hankalia soluviljelyvaatimuksia. Tämä jakso auttaa sinua oppimaan tarvittavat soluviljelytiedot. Kuten mikä on A375-solujen kaksinkertaistumisaika. Mikä on A375-solulinjan väliaine? Mikä on A375:n kylvötiheys? Ovatko A375-melanoomasolut tarttuvia?

A375-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat

Populaation kaksinkertaistumisaika:	A375:n kaksinkertaistumisaika on 20 tuntia.
Tarttuvat tai suspensiossa:	A375 on tarttuva ihmisen melanoomasolulinja.
Kylvötiheys:	1 x¹⁰⁴ solua/cm2^solutiheyson ihanteellinen A375-soluviljelmille. Tarttuvat solut huuhdellaan 1 x fosfaattipuskurisuolaliuoksella (PBS) ja inkuboidaan passaging-liuoksella (Accutase). Tämän jälkeen soluihin lisättiin kasvatusmediaa ja ne sentrifugoitiin. Kerätyt solut resuspendoitiin kasvatusmediumiin ja annosteltiin uusiin pulloihin kasvua varten.
Kasvualusta:	DMEM suositellaan ihanteelliseksi A375-mediaksi, kun sitä täydennetään 10 %:lla naudan sikiöseerumilla (FBS), 4,5 g/l glukoosilla, 1,5 g/l NaHCO3:lla, 4 mM:lla L-glutamiinilla ja 1,0 mM:lla natriumpyruvaatilla. A375-media on uusittava 2-3 päivänä viikossa.
Kasvuolosuhteet:	A375-melanoomasoluja kasvatetaan kostutetussa inkubaattorissa (37 °C), jossa on 5 % CO2-tulo.
Varastointi:	Pakastetut A375-solut on säilytettävä alle -150 °C:n lämpötilassa nestemäisen typen höyryfaasissa tai sähköpakastimessa.
Pakastusprosessi ja väliaine:	A375-solulinjan jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-mediaa. Solujen elinkelpoisuuden suojelemiseksi on valittu hidas pakastusprosessi, jossa lämpötila laskee asteittain 1 °C:n verran.
Sulatusprosessi:	Jäädytettyä A375-melanoomasolupulloa sekoitetaan nopeasti vesihauteessa 40-60 sekunnin ajan, kunnes jäljellä on vain pieni jäämöhkäle. Solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen ja sentrifugoidaan jäädytysmedian osien poistamiseksi. Saatu solupelletti suspendoidaan uudelleen ja kaadetaan uusiin pulloihin.
Bioturvallisuustaso:	A375-viljelmiä käsitellään ja ylläpidetään bioturvallisuustason 1 laboratorioympäristöissä.

Konfluentti kerros adheesiivisia A375-soluja 20-kertaisella suurennoksella.

A375-solulinjan edut ja rajoitukset

Muiden solulinjojen tavoin A375-melanoomasolulinjaan liittyy ainutlaatuinen yhdistelmä etuja ja rajoituksia, mikä tekee siitä arvokkaan työkalun melanoomasyöpätutkimukseen. Tässä jaksossa on lueteltu vain muutamia A375-solulinjan merkittäviä etuja ja haittoja.

Edut

A375-solulinjan merkittävät edut mainitaan jäljempänä:

Melanooman kasvainmalli: A375-solulinja on peräisin pahanlaatuisesta melanoomakasvaimesta, joten se toimii korvaamattomana kasvainmallina melanooman biologian ja terapeuttisten toimenpiteiden tutkimisessa. Näillä soluilla on melanooman kaltaisia ominaisuuksia, kuten korkea proliferaatiovauhti ja invasiivisuus.
Tumorigeenisyys: A375-solut ovat erittäin tumorigeenisiä, eli ne voivat muodostaa kasvaimia. A375-solujen on raportoitu tuottavan aggressiivisia amelanoottisia melanoomia NIH Swiss -hiirissä, joita on hoidettu anti-tymosyyttiseerumilla (immuniteettia alentava aine).
Hyvin karakterisoitu: A375 on geneettisesti hyvin karakterisoitu solulinja. Sillä on erityisiä geneettisiä mutaatioita, kuten melanoomalla. A375-mutaatioihin kuuluu A375 BRAF-geenin muutos, mikä tekee siitä herkän BRAF-spesifisille inhibiittoreille. Tämä geneettinen profiili tekee A375-soluista erinomaisen syöpätutkimusvälineen, jolla voidaan tutkia taustalla olevia molekyylireittejä ja kohdennettuja hoitoja.

Rajoitukset

A375-soluihin liittyvät rajoitukset ovat:

In vitro -rajoitukset: A375 on in vitro -kasvainmalli. Vaikka se jäljittelee melanooman ominaisuuksia, se ei voi täysin edustaa melanoomakasvainten monimutkaisuutta. Siksi on oltava varovainen, kun in vitro -löydöksiä yleistetään kliinisiin tutkimuksiin.

Osta A375-kennot nyt

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300110

A375-solulinjan tutkimussovellukset

A375-solulinjalla on laajoja tutkimussovelluksia syöpätutkimuksessa. Seuraavassa on lueteltu joitakin yleisiä alueita, joilla A375-soluja hyödynnetään.

Syöpätutkimus: A375-soluilla on laajalti sovelluksia melanoomatutkimuksessa. Tutkijat käyttivät näitä soluja ihosyövän biologian, prosessien ja taustalla olevien solusignaalimekanismien, kuten solujen lisääntymisen, migraation ja invaasion, tutkimiseen. Tämä voi myös auttaa tutkijoita tunnistamaan uusia molekulaarisia hoitokohteita. Lin Zhun ja kollegoiden vuonna 2019 tekemässä tutkimuksessa käytettiin erittäin aggressiivisia melanoomasoluja A375 ja havaittiin mikroRNA-3662:n rooli A375-melanoomasolujen kasvussa ja invasiossa. Tutkimustulosten mukaan microRNA-3662 kohdistuu ZEB1-geeniin ja säätelee melanoomasolujen kasvua in vitro ja in vivo A375-kasvainmallissa [2]. Vastaavasti vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa havaittiin, että PI3K/AKT- ja MAPK/ERK-reitit osallistuvat A375-solulinjan proliferaatioon ja metastaasiin [3].
Lääkkeiden löytäminen ja testaus: A375-solulinja on hyödyllinen in vitro -kasvainmalli mahdollisten syöpälääkkeiden testaamiseen ja seulontaan. Tutkijat arvioivat uusien kemoterapeuttisten lääkkeiden, yhdisteiden ja muiden hoitomuotojen toksisuutta ja tehoa käyttämällä näitä A375-melanoomasoluja. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa tutkittiin greippiperäisten mikro- ja nanohiukkasten syöpää ehkäiseviä ominaisuuksia A375-ihmisen melanoomasyöpäsoluissa. Tulokset osoittivat, että mikro- ja nanohiukkaset indusoivat solusyklin pysähtymistä ja apoptoosia ja haittaavat geeniekspressiota solujen proliferaatiossa, migraatiossa ja invaasiossa [4].

A375-solut: A375 A375: Julkaisut

Seuraavassa mainitaan joitakin merkittäviä tutkimusjulkaisuja, joissa A375-solut ovat mukana.

D-vitamiini ja sen vähäkalsiumiset analogit moduloivat sisplatiinin ja dakarbatsiinin syöpää ehkäiseviä ominaisuuksia ihmisen melanooma A375-solulinjassa

Tämä tutkimus julkaistiin Journal of Oncology -lehdessä vuonna 2019. Tutkimuksessa ehdotettiin, että D-vitamiinin ja sen analogien yhteiskäyttö parantaa sisplatiinin ja dakarbatsiinin syöpää ehkäisevää vaikutusta A375-melanoomasoluissa.

In vitro -arviointi valittujen aloe-lajien geeli- ja kokolehtiuutteiden melanoomavastaisista vaikutuksista (A375-solulinja)

Tämä tutkimus julkaistiin Journal of Herbal Medicine -lehdessä vuonna 2022. Tässä tutkimuksessa tutkittiin aloe vera -geelin melanoomavastaisia vaikutuksia A375-melanoomasoluissa.

Fermitiiniperheen jäsen 2 edistää melanooman etenemistä tehostamalla p-α-Pixin sitoutumista Rac1:een MAPK-reitin aktivoimiseksi

Tässä Oncogene-lehdessä (2021) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että fermitiniperheen jäsen 2 (FERMT2 tai kindlin-2) edistää melanooman etenemistä aktivoimalla MAPK:ta sitoutumalla p-α-Pixiin ja Rac1:een.

FARP1 helpottaa solujen leviämistä moduloimalla MAPK-signalointireittiä ihon melanoomassa

Tässä The American Journal of Dermatopathology -lehdessä (2019) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että FARP1 voi helpottaa ihon melanooman kehittymistä ja etenemistä. Näin ollen se voi olla hyödyllinen terapeuttinen kohde.

Phyllodium elegans -uutteiden sytotoksinen ja apoptoottinen potentiaali ihmisen syöpäsolulinjoissa

Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Bioengineered-lehdessä (2019). Tässä tutkimuksessa tutkittiin kasvin Phyllodium elegans -uutteen sytotoksista ja apoptoottista vaikutusta ihmisen syöpäsolulinjoihin, mukaan lukien A375.

A375-solulinjan resurssit: A375: protokollat, videot ja muuta

Seuraavassa on muutamia verkkolähteitä, joissa on A375-soluja.

A375-solujen transfektio: A375-solujen transfektio: Tämä video-opas auttaa sinua oppimaan A375-solujen transfektiota vaihe vaiheelta.
Solujen viljely: Tällä videolla on erittäin hyödyllistä tietoa solulinjojen viljelystä.

A375-solujen soluviljelyprotokollat on lueteltu tässä.

A375-solulinja: Tämä linkki sisältää hyödyllistä tietoa A375-solulinjan viljelystä ja ylläpidosta, mukaan lukien A375-mediat ja jäädytettyjen ja lisääntyvien A375-viljelmien käsittely.

Usein kysytyt kysymykset (FAQ) A375-soluille

Viitteet

Avram, S., et al., Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 kohdistuu ZEB1:een ja heikentää erittäin aggressiivisen melanoomasolulinjan A375 invasiota. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C estää melanoomasolujen A375-solujen proliferaatiota ja metastaasia tukahduttamalla PI3K/Akt- ja MAPK/ERK-reittejä. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Grapefruit-peräiset mikro- ja nanohiukkaset osoittavat erillisiä metaboliaprofiileja ja syövänvastaisia vaikutuksia A375-ihmisen melanoomasolulinjassa. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.