4T1-solut - olennainen oivallus rintasyöpäsolujen tutkimuksesta ja sovelluksista
4T1 on siirrettävä hiiren rintasyöpäsolulinja. Sitä käytetään laajalti geneettisesti identtisenä in vitro -kasvainmallina ihmisen rintasyövän tutkimiseen. 4T1-solut ovat erittäin invasiivisia ja tuumorigeenisiä; niillä on taipumus metastasoida primaarikasvaimesta rintarauhasessa sijaitsevasta primaarikasvaimesta muihin paikkoihin, kuten maksaan, imusolmukkeisiin, keuhkoihin, luihin ja aivoihin, joten ne soveltuvat erinomaisesti rintasyövän etäpesäkkeiden tutkimiseen [1].
4T1-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Tieto solulinjan alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista on olennaisen tärkeää ennen sen kanssa työskentelyä. Tässä jaksossa olemme maininneet 4T1-rintasyöpäsolujen perusasiat. Esimerkiksi, mitä ovat 4T1-solut? Mitkä ovat 4t1-solulinjan ominaisuudet? Mikä on 4T1-solulinjan alkuperä? Mikä on 4T1-solulinjan morfologia?
- 4T1 on rintakasvainsolulinja, joka on peräisin hiiren BALB/c-kannassa spontaanisti syntyneestä rintakasvaimesta. Nämä erittäin invasiiviset ja tumorigeeniset solut jäljittelevät läheisesti ihmisen rintasyövän käyttäytymistä kasvun ja metastaattisen leviämisen suhteen. Erityisesti 4T1-kasvainmallilla tutkitaan kolmoisnegatiivista rintasyöpää (TNBC).
- 4T1-solut ovat tarttuvia ja niillä on epiteelisolujen kaltainen morfologia.
4T1 Vs. EMT-6-solulinja
4T1 ja EMT-6 ovat ei-immunogeenisia, hiiren solumalleja kolmoisnegatiivisen rintasyövän tutkimuksiin. Tässä 4T1 on aggressiivisempi ja invasiivisempi kasvainsolu kuin EMT-6, jolla on vähemmän invasiivisia ominaisuuksia [2].
4T1 Vs. 4T07-solut
4T07 on myös hiiren syöpäsolulinja. Tärkein ero 4T1- ja 4T07-solujen välillä on se, että 4T1-solut voivat poistua primaarikasvaimen kohdasta ja levitä muodostaen näkyviä sekundaarisia etäpesäkkeitä, kun taas 4T07-solut eivät voi muodostaa näkyviä etäpesäkkeitä huolimatta siitä, että ne ovat poistuneet primaarikasvaimen kohdasta [3].
4T1-solulinjan viljelytiedot
4T1-rintasyöpäsolulinja tarjoaa laajoja tutkimussovelluksia biolääketieteen alalla. Näiden solujen viljelyä varten sinun on käytävä läpi seuraavat keskeiset kohdat, joissa kuvataan; mikä on 4T1:n kaksinkertaistumisaika? Miten 4T1-soluja viljellään? Mikä on 4T1-solujen kylvötiheys?
4T1-solujen viljelyn avainkohdat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
4T1-rintasyöpäsolujen keskimääräinen populaation kaksinkertaistumisaika on 14 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
4T1 on tarttuva solulinja. |
|
Osaviljelysuhde: |
Kolmi-negatiivisen rintasyövän 4T1-solulinjalle suositellaan jakosuhdetta 1:6 ja 1:8. Jakamista varten solut huuhdellaan PBS:llä ja inkuboidaan Accutase-entsyymin kanssa 8-10 minuuttia. Dissosioituneet solut kerätään sentrifugoimalla ja resuspendoidaan tuoreeseen väliaineeseen. Resuspendoidut solut annostellaan uuteen kolviin kasvua varten. |
|
Kasvualusta: |
4T1-solujen viljelyyn käytetään RPMI 1640 -mediaa. kasvatusmediumiin lisätään 10 % naudan sikiöseerumia (FBS), 2,0 g/l NaHCO3:a ja 2,1 mM stabiilia glutamiinia solujen ihanteellisen kasvun varmistamiseksi. |
|
Kasvuolosuhteet: |
4T1-kasvainsoluja pidetään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, jossa on 5 %CO2-lisäys. |
|
Varastointi: |
solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi 4T1-solut on säilytettävä alle -150 °C:n lämpötilassa eli sähköpakastimessa tai nestemäisen typen höyryfaasissa. |
|
Pakastusprosessi ja väliaine: |
CM-1 tai CM-ACF suositellaan 4T1-solulinjalle. Hidas jäädytysmenetelmä on suositeltavampi, koska se suojaa solujen elinkelpoisuutta sallimalla asteittaisen 1 °C:n lämpötilan laskun. |
|
Sulatusprosessi: |
Jäädytettyjä soluja pidetään 37 °C:n vesihauteessa muutaman sekunnin ajan, kunnes solut sulavat ja jäljellä on vain pieni jääpalanen. Solut suspendoidaan uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja kaadetaan pulloon viljelyä varten. 24 tunnin inkubaation jälkeen väliaine vaihdetaan, jotta jäädytysmedian komponentit saadaan poistettua. |
|
Bioturvallisuustaso: |
Bioturvallisuustason 1 laboratoriota suositellaan 4T1-rintasyöpäsolujen viljelyyn. |
4T1-solulinja: T4T1T: Edut ja haitat: Edut ja haitat
Tässä artikkelin osassa käsitellään 4T1-metastaattiseen malliin liittyviä etuja ja haittoja.
Edut
4T1-solulinjan tärkeimmät edut ovat seuraavat:
- Kasvainvaikuttavuus:
4T1 on erittäin tumorigeeninen solulinja. Nämä solut pystyvät muodostamaan 4T1-syngeenisen hiirimallin rintasyövän tutkimista varten, kun ne ruiskutetaan hiireen. Siksi 4T1-mallia käytetään ihanteellisesti kasvainten kehityksen, kasvun ja etäpesäkkeiden tutkimiseen. Lisäksi se on hyödyllinen terapeuttisten lääkkeiden seulontaan ja arviointiin.
- In vitro -metastaattimalli:
4T1-mallilla on luonnollinen metastaasitaipumus, jonka avulla tutkijat voivat tehokkaasti tutkia metastaasiprosessin taustalla olevia mekanismeja ja reittejä. Lisäksi 4T1-solut ovat 6-tioguaniinille resistenttejä. Tämä auttaa havaitsemaan mikrometastaattiset solut tehokkaasti ja tarkemmin kuin muissa malleissa, koska kohde-elimiä ei tarvitse punnita eikä kyhmyjä laskea.
Haitat
4T1-solulinjaan liittyvä haitta on:
- Aggressiivisuus/nopea kasvunopeus:
4T1-solulinja on erittäin aggressiivinen kolmoisnegatiivinen rintasyöpäsolulinja. Nopean kasvunopeuden vuoksi tämän solulinjan käyttäminen pitkäaikaisissa kokeissa ja kokeellisten muuttujien kontrolloiminen on haastavaa.
Osta 4T1-solulinja: korkealaatuinen rintasyöpämalli
4T1-solulinja: Syöpätutkimuksen sovellukset
Hiiren 4T1-solulinja on arvokas tutkimusväline syövän biologian tutkimiseen ja uusien hoitojen arviointiin. Tässä luetellaan 4T1-solujen tärkeimmät sovellukset:
Syöpäbiologia
4T1-solulinjaa käytetään laajalti syövän kehityksen ja kasvun tutkimiseen. Se on ihanteellinen in vitro -malli, jonka avulla voidaan tutkia ja tutkia erilaisia solu- ja molekyylimekanismeja, jotka liittyvät kasvaimen etenemiseen ja etäpesäkkeisiin. Lisäksi se voi paljastaa solujen signaalireittien, mikroympäristön ja geeniekspression roolin näissä prosesseissa. Vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin 4T1-soluja syöpäsolujen invaasion ja migraation taustalla olevien ajavien mekanismien selvittämiseen. Tulokset paljastivat, että STAT3-, MMP2- ja MMP9-geenit ovat osallisina, ja näiden geenien estäminen voi rajoittaa huomattavasti syöpäsolujen migraatiota ja invasiota [4]. Samankaltaiset tutkimukset ovat osoittaneet myös useita muita signaalireittejä, jotka osallistuvat kasvainten kehitykseen ja etäpesäkkeisiin.
Lisäksi 4T1-malli auttaa ymmärtämään rintasyövän mikroympäristöä, mukaan lukien immuunisolujen tunkeutumista ja primaarikasvaimen kasvua. Tutkimukset, joissa keskitytään 4T1-kasvaimen mikroympäristöön, ovat osoittaneet merkittävää tietoa immuunisolujen ja sytokiinien, kuten CXCL13:n ilmentymisen, roolista kasvaimen etenemisessä. Malli auttaa myös metastaattisten kapeikkojen ja kasvaimen etäpesäkkeiden tutkimisessa, erityisesti myöhäisvaiheen rintasyövässä, jossa rintarauhaskarsinooman kolonisaatio on yleistä.
Syöpähoitotutkimus
4T1-solulinjaa käytetään laajasti syöpähoitotutkimuksessa uusien hoitojen seulontaan ja arviointiin. Tutkimuksessa tutkittiin rosmariiniuutteesta vihreällä syntetisoitujen rauta-nanohiukkasten (Rosemary-FeNPs) ja puhtaan rosmariiniuutteen sytotoksista potentiaalia 4T1-solulinjassa. Tutkimustuloksissa ehdotettiin, että Rosemary-FeNPs on lupaavampi kuin puhdas uute [5]. Vastaavasti vuonna 2021 tehdyssä tutkimuksessa tutkittiin inkivääriuutteen kasvainvastaista potentiaalia 4T1-rintasyöpäsoluissa ja 4T1-hiirimallissa [6].
Luonnollisten uutteiden lisäksi 4T1-solulinjaa käytetään perinteisten kemoterapeuttisten aineiden tehon arviointiin. Esimerkiksi tutkimukset, joissa sisplatiinia yhdistettiin muihin hoitomuotoihin, ovat osoittaneet, että kasvainsolujen kuolema on lisääntynyt ja kasvaimen eteneminen vähentynyt 4T1-mallissa. Tulikärpäslukiferaasin lisääminen 4T1-soluihin on mahdollistanut kasvaimen kasvun ja metastaattisen fenotyypin reaaliaikaisen kuvantamisen, mikä helpottaa eri hoitojen vaikutusten arviointia.
Lisäksi 4T1-solulinjan resistenssi 6-tioguaniinille on helpottanut mikro-metastaattisten solujen tutkimista, mikä on parantanut metastaasin havaitsemista ja analysointia. Tällä solulinjalla on myös ratkaiseva merkitys kasvainvastaista immuniteettia ja immunoterapian vaikutuksia tutkittaessa, erityisesti ortotoppisten hiirimallien yhteydessä, joissa tutkijat voivat jäljitellä tarkasti ihmisen syöpää.
Kaiken kaikkiaan 4T1-solulinja on edelleen välttämätön väline onkologisessa tutkimuksessa, joka ulottuu syövän biologian perusmekanismien ymmärtämisestä uusien hoitostrategioiden kehittämiseen ja testaamiseen.
4T1-solut: T1T4T: Tutkimusjulkaisut: Tutkimusjulkaisut
Tässä artikkelijaksossa käsitellään muutamia mielenkiintoisia ja eniten siteerattuja 4T1-soluja koskevia julkaisuja.
Tämä artikkeli julkaistiin vuonna 2018 Journal of Photochemistry and Photobiology -lehdessä. Tutkimuksessa ehdotettiin, että Madhuca longifoliasta syntetisoidut hopean nanohiukkaset harjoittavat antiproliferatiivista vaikutusta 4T1-kasvainsoluissa soluseinän hajoamisen ja ROS:n muodostumisen kautta.
Verbaskosidin sytotoksiset ja apoptoottiset vaikutukset rintasyöpäsolulinjan 4T1 solulinjassa
Tässä BMC Pharmacology and Toxicology -lehdessä (2021) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että verbaskosidi, luonnollinen yhdiste, aiheutti TLR4-signaalin välityksellä apoptoottisia vaikutuksia rintasyöpäsoluissa 4T1.
Eupatoriini tukahdutti kasvaimen etenemistä ja paransi immuniteettia 4T1-hiiren rintasyöpämallissa
Tämä tutkimus julkaistiin Integrative Cancer Therapies -lehdessä vuonna 2020. Tässä tutkimuksessa käytettiin 4T1-soluja 4T1-syngeenisen hiirimallin kehittämiseksi ja tutkittiin Eupatoriinin syöpälääkemahdollisuuksia sen avulla. Eupatoriini viivästytti kasvaimen kehittymistä 4T1-hiirimallissa.
Viola odorata -uutteen estävä vaikutus kasvaimen kasvuun ja etäpesäkkeisiin 4T1-rintasyöpämallissa
Tässä Iranian Journal of Pharmaceutical Research -lehdessä (2018) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että lääketieteellisellä yrtillä, Viola odoratalla, on mahdollisia sytotoksisia vaikutuksia 4T1-soluihin.
Tässä tutkimuksessa ehdotettiin, että doketakselilla ladatut kiinteät lipidin nanohiukkaset (DTX-ladatut SLN:t) voivat olla lupaava aine rintasyövän hoitoon ja metastaasien ehkäisyyn, koska ne rajoittavat 4T1-solujen syöpäkasvua ja keuhkometastaasiaa.
Resurssit 4T1-solulinjalle: T4T1T1: protokollat, videot ja muut: protokollat, videot ja muut
Seuraavassa on muutamia 4T1-soluja koskevia resursseja:
- 4T1-transfektio-opas: Tämä video on vaiheittainen opas 4T1-solulinjan transfektion suorittamiseen.
- Solulinjan subkultivointi: Tässä videossa selitetään adheesiosolulinjojen subkultivointiprotokolla.
Seuraavassa linkissä on 4T1-solujen soluviljelyprotokolla:
- 4T1-solulinja: Tämä linkki sisältää kaikki hyödylliset tiedot 4T1-soluviljelmien käsittelystä. Siellä on tietoa viljelyaineista, kryosäilytettyjen viljelmien käsittelyprotokollia ja lisääntyviä viljelmiä koskevia tietoja.
Usein kysytyt kysymykset 4T1-solulinjasta
Viitteet
- Pulaski, B.A. ja S. Ostrand-Rosenberg, Mouse 4T1 breast tumor model. Curr Protoc Immunol, 2001. Luku 20: s. Yksikkö 20.2.
- Maxwell, K.G., Immunomodulation of Breast Cancer Cells for Whole Tumor Vaccination. 2016.
- Walker, I., et al., Mammary tumors induce central pro-inflammatory cytokine expression, but not behavioral deficits in Balb/C mice. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
- Li, Y., et al., Stat3-signalointireitin estäminen luonnontuotteella pektolinarigeniini heikentää rintasyövän etäpesäkkeitä. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Rauta-nanohiukkasten vihreä synteesi ruusunmarjauutteella ja sytotoksisuusvaikutuksen arviointi syöpäsolulinjoille. Biokatalyysi ja maatalouden biotekniikka, 2018. 16: p. 54-62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Inkivääriuutteen vaikutus 4T1-rintasyöpäsolulinjaan Balb/c-hiiressä. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.