CV-1-solut
Yleisiä tietoja
| Kuvaus | CV-1 on afrikkalaisen vihreän apinan solulinja, joka on peräisin munuaisista vuonna 1964. Tätä fibroblastien kaltaista solulinjaa käytettiin alun perin tutkimuksessa, jossa keskityttiin syöpää aiheuttavan Rousin sarkoomaviruksen (RSV) transformaatioon, ja sitä käytetään laajalti biologisessa tutkimuksessa virustuotantoon, transfektioon ja geenien vaimentamiseen. Nämä solut ovat negatiivisia käänteisen transkriptaasin suhteen ja alttiita useille viruksille, kuten poliovirus 1:lle, herpes simplexille, simian virus 40:lle (SV40), Kalifornian enkefaliitille ja sekä itäiselle että läntiselle hevosenkalvotulehdukselle. CV-1-solulinjalla on nopea kasvu, se kasvaa kiinni muovi- ja lasipinnoilla, ja siinä esiintyy kromosomiluvun siirtymiä korkeilla passage-tasoilla. On havaittu, että CV-1-soluilla on ATG:llä hoidetuilla Wistar-rotilla lisääntynyt kasvainherkkyys sekä lisääntynyt solupesäkkeiden muodostuminen pehmeässä agarissa. Lisäksi CV-1-solut tukevat SV40-viruksen replikaatiota ja osoittavat nopeaa tymidiinikinaasi (TK) -aktiivisuutta simian-, adeno- ja papovirusinfektioiden induktion jälkeen. CV-1-solujen karyotyyppi on 2n = 60, pseudodiploidinen. CV-1-soluja on käytetty monissa biologisen tutkimuksen erityissovelluksissa, kuten tehokkuustestissä, transfektio-isännän testauksessa ja virusmyrkkyjen testauksessa. Niiden tiedetään myös olevan sopiva isäntä transfektiolle, erityisesti SV40-vektoreilla. |
|---|---|
| Organismi | Apina |
| Kudos | Munuaiset |
| Sovellukset | Sopiva isäntä transfektioon, erityisesti SV40-vektoreilla. |
| Synonyymit | Cv-1, CV 1, CV-1.K, CV1 |
Ominaisuudet
| Ikä | 141 päivää |
|---|---|
| Sukupuoli | Mies |
| Solutyyppi | Fibroblastit |
| Kasvuominaisuudet | Tarttuva |
Sääntelytiedot
| Viittaus | CV-1 (Cytionin luettelonumero 605471) |
|---|---|
| Bioturvallisuustaso | 1 |
| NCBI_TaxID | 9534 |
| CellosaurusLiittyminen | CVCL_0229 |
Biomolekyylitiedot
| Virusherkkyys | Poliovirus 1, herpes simplex, itäisen hevoseläinten enkefaliitti, läntisen hevoseläinten enkefaliitti, Kalifornian enkefaliitti, SV40 |
|---|---|
| Käänteinen transkriptaasi | Negatiivinen |
Käsittely
| Viljelyalusta | EMEM, w: 2 mM L-Glutamiinia, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM natriumpyruvaattia, w: NEAA (Cytionin artikkelinumero 820100c) |
|---|---|
| Lisäravinteet | Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä |
| Dissosiaatioreagenssi | Accutase |
| Alakulttuuri | Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreessa väliaineessa ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita. |
| Jakosuhde | Suositellaan suhdetta 1:2-1:3 |
| Kylvötiheys | 3 - 4 x 10^4 solua/cm^2 muodostuu juoksevaksi kerrokseksi noin 4 päivässä |
| Nesteen uusiminen | 2 kertaa viikossa |
| Sulatuksen jälkeinen toipuminen | Sulattamisen jälkeen solut levytetään 5 x 10^4 solua/cm^2 ja annetaan solujen toipua pakastusprosessista ja tarttua vähintään 24 tuntia. |
| Jäädytä väliaine | CM-1 (Cytionin luettelonumero 800100) tai CM-ACF (Cytionin luettelonumero 806100) |
| Solujen sulattaminen ja viljely |
|
Laadunvalvonta / Geneettinen profiili / HLA
| Steriliteetti | Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä. Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti. |
|---|
Analyysitodistus (CoA)
| Erän numero | Todistuksen tyyppi | Päivämäärä | Luettelonumero |
|---|---|---|---|
| 601470-517 | Analyysitodistus | 22. Jan. 2026 | 601470 |