CTX TNA2-solut
550,00 €*
Tuotteet toimitetaan jäädytettyinä kuivajäässä kryoputkissa. Jokainen kryoputki sisältää tyypillisesti 3 × 10 6 solua adheesiivisille soluille tai 5 × 106 solua suspensiosoluille (katso lisätietoja erän CoA-todistuksesta).
Yleisiä tietoja
| Kuvaus | CTX TNA2 on rotan astrosyyttisolulinja, joka on perustettu kortikaalisten astrosyyttien primaariviljelmistä. Sitä käytetään usein keskushermoston (CNS) toimintojen tutkimiseen, erityisesti gliabiologian, neurotoksisuuden ja hermosuojan osalta. Astrosyytit ovat ratkaisevassa asemassa CNS:n homeostaasin ylläpitämisessä, ne tarjoavat rakenteellista ja metabolista tukea neuroneille ja välittävät vasteita vammoihin ja oksidatiiviseen stressiin. CTX TNA2-soluja on käytetty useissa tutkimuksissa neurotoksisuuden mallintamiseen, erityisesti glutamaatin kaltaisten aineiden aiheuttaman eksitotoksisuuden mallintamiseen. Esimerkiksi altistuminen glutamaatille CTX TNA2 -soluissa käynnistää apoptoosin ja autofagian mekanismeilla, joihin osallistuvat reaktiiviset happilajit (ROS) ja glykogeenisyntaasikinaasi-3β (GSK-3β) -reitti. Nämä reitit ovat keskeisiä solujen vasteessa oksidatiiviseen stressiin ja mitokondrioiden toimintahäiriöihin erityisesti traumaattisen aivovamman tai muiden neurodegeneratiivisten tilojen jälkeen. Lisäksi neuroprotektiivisten aineiden, kuten resveratrolin ja kannabidiolin (CBD), on osoitettu vähentävän ROS:n muodostumista ja estävän glutamaatin aiheuttamaa autofagiaa ja apoptoosia näissä astrosyyteissä. CTX TNA2 -solulinja on osoittautunut arvokkaaksi in vitro -malliksi astrosyyttien perustoiminnan lisäksi myös antioksidanttisten ja neuroprotektiivisten yhdisteiden terapeuttisen potentiaalin tutkimiseen keskushermoston vammojen ja sairauksien yhteydessä. |
|---|---|
| Organismi | Rotta |
| Kudos | Aivot, otsalohko |
Ominaisuudet
| Rotu/alalaji | Sprague Dawley |
|---|---|
| Ikä | 1 päivä |
| Morfologia | Fibroblastit |
| Solutyyppi | Astrosyytit |
| Kasvuominaisuudet | Tarttuva |
Sääntelytiedot
| Viittaus | CTX TNA2 (Cytionin luettelonumero 305358) |
|---|---|
| Bioturvallisuustaso | 2 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| CellosaurusLiittyminen | CVCL_3670 |
Biomolekyylitiedot
| Virukset | Transformantti: Simian virus 40 (SV40) |
|---|
Käsittely
| Viljelyalusta | DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a) |
|---|---|
| Lisäravinteet | Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä |
| Dissosiaatioreagenssi | Accutase |
| Alakulttuuri | Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreessa väliaineessa ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita. |
| Jäädytä väliaine | Kryosäilytysmediana käytämme 50 % perusmediaa + 40 % FBS + 10 % DMSO:ta eli CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytysstressiä. |
| Solujen sulattaminen ja viljely |
|
| Inkubaatioilmapiiri | 37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä. |
| Pullon pinnoite | Optimaalisen kiinnittymisen ja elinkelpoisuuden saavuttamiseksi sulatuksen jälkeen suosittelemme kollageenipinnoitettujen pullojen tai levyjen käyttöä. |
| Jäädytysmenettely | Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon. |
| Toimitusehdot | Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon. |
| Varastointiolosuhteet | Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen. |
Laadunvalvonta / Geneettinen profiili / HLA
| Steriliteetti | Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä. Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti. |
|---|
Materiaalin siirtosopimus
Jos aiot käyttää Cytion-solulinjoja ainoastaan sisäiseen tutkimukseen yhdessä tutkimuspaikassa, täytä ja allekirjoita materiaalinsiirtosopimuksemme (MTA) ja lähetä se tilauksen mukana.
Kaikkia kaupallisia sovelluksia varten - mukaan lukien mutta ei rajoittuen maksulliseen työhön, laadunvalvontatestaukseen, tuotteen vapauttamiseen, diagnostiseen käyttöön tai viranomaistutkimuksiin - täytä Intended Use Form - lomake, jotta voimme laatia sopivan, projektillesi räätälöidyn sopimuksen.
Huomaa: MTA-sopimus koskee vain tiettyjä solulinjoja. Jos tämä ilmoitus ja MTA-asiakirja näkyvät tuotesivulla, sopimusta sovelletaan. Niissä solulinjoissa, jotka eivät kuulu MTA:n piiriin, ei ole viittausta sopimukseen. MTA ei ole voimassa asiakkaille Amerikassa, Kiinassa tai Taiwanissa. Ota yhteyttä Yhdysvaltain yksikköömme saadaksesi asianmukaisen sopimuksen.
-
Tarvittavat tuotteet
Tarvittavat tuotteet
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattiaDMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) on erittäin monipuolinen ja laajalti käytetty perusmedium, joka on suunniteltu tukemaan erilaisten nisäkässolujen kasvua biologisessa tutkimuksessa. Se on ihanteellinen väliaine primaaristen fibroblastien, neuronien, gliasolujen, HUVEC-solujen, sileiden lihassolujen sekä suosittujen solulinjojen, kuten HeLa-, 293-, Cos-7
- ja PC-12-solujen, viljelyyn.
DMEM erottuu muista väliaineista sen ainutlaatuisen koostumuksen ansiosta. Sen aminohappo
- ja vitamiinipitoisuudet ovat nelinkertaistuneet alkuperäiseen Eagle's Minimal Essential Mediumiin verrattuna. DMEM kehitettiin alun perin matalalla glukoosipitoisuudella (1 g/l) ja natriumpyruvaatilla, mutta sitä käytetään usein korkeammilla glukoosipitoisuuksilla joko natriumpyruvaatin kanssa tai ilman sitä. DMEM ei kuitenkaan sisällä proteiineja, rasvoja tai kasvutekijöitä, joten sitä on täydennettävä. Optimaalisen kasvun saavuttamiseksi DMEM:ää täydennetään yleensä 10 %:lla naudan sikiöseerumia (FBS). Lisäksi DMEM:ssä käytetään natriumbikarbonaattipuskurijärjestelmää, joka vaatii 5-10 % CO2-ympäristöä fysiologisen pH:n ylläpitämiseksi.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) on erittäin arvostettu solu
- ja kudosviljelyssä käytettävien määriteltyjen väliaineiden joukossa, sillä se vastaa erilaisten tarttuvien solujen fenotyyppien kasvutarpeisiin. Se ylittää alkuperäisen, 1950-luvulla kanasolujen viljelyyn kehitetyn Eagle's Medium -mediumin Dulbecco's Modification -nimellä tunnetun parannetun lisäravinteen avulla. Tämä modifikaatio nostaa valittujen aminohappojen ja vitamiinien pitoisuutta merkittävästi jopa nelinkertaiseksi alkuperäiseen väliaineeseen verrattuna.
Soluviljelyn alalla DMEM:llä on tärkeä rooli kasvualustana eri solutyypeille, kuten primaarisoluille, kantasoluille ja muunnetuille soluille. Tutkijat käyttävät DMEM:n modifioitua versiota myös monenlaisiin tutkimussovelluksiin, kuten lääkkeiden löytämiseen, kudostekniikkaan ja solujen signaalireittien tutkimiseen.
Laadunvalvonta
Steriilisuodatettu
Varastointi ja säilyvyys
Säilytetään +2°C
- +8°C:ssa valolta suojattuna.
Kun se on avattu, säilytä 4°C:ssa ja käytä 6-8 viikon kuluessa.
Toimitusolosuhteet
Ympäristön lämpötila
Huolto
Säilytettävä jääkaapissa +2°C
- +8°C:ssa pimeässä. Vältä pakastamista ja usein tapahtuvaa lämmittämistä +37°C:seen, koska se heikentää tuotteen laatua.
Älä lämmitä väliaineen lämpötilaa yli 37°C äläkä käytä kontrolloimattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltolaitteita.
Jos väliaineesta käytetään vain osa, poista tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpöiseksi ennen käyttöä.
Koostumus
Luokka
Ainesosat
Pitoisuus (mg/l)
Aminohapot
Glysiini
30.00
L-arginiini HCl
84.00
L-kystiini 2 HCl
62.57
L-Glutamiini
584.00
L-histidiini HClH2O
42.00
L-isoleusiini
105.00
L-leusiini
105.00
L-lysiini HCl
146.00
L-metioniini
30.00
L-Fenyylialaniini
66.00
L-Seriini
42.00
L-treoniini
95.00
L-tryptofaani
16.00
L-tyrosiini 2 Na 2H2O
103.79
L-valiini
94.00
Vitamiinit
Koliinikloridi
4.00
D-kalsiumpantotenaatti
4.00
Foolihappo
4.00
myo-Inositoli
7.20
Nikotiiniamidi
4.00
Pyridoksaali-HCl
4.00
Riboflaviini
0.40
Tiamiini HCl
4.00
Epäorgaaniset suolat
CaCl2 2H2O
265.00
Fe(NO3)3 9H2O
0.10
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
NaCl
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
Muut komponentit
D-glukoosi
4500.00
Fenolipunainen natriumsuola
15.90
Natriumpyruvaatti
110.0025,00 €*AccutaseVaihtoehdot: 100 mlAccutase Cell Dissociation Reagent
- hellävarainen vaihtoehto trypsiinille
Accutase on solujen irrotusliuos, joka mullistaa soluviljelyteollisuuden. Se on proteolyyttisten ja kollagenolyyttisten entsyymien seos, joka jäljittelee trypsiinin ja kollagenaasin toimintaa. Toisin kuin trypsiini, Accutase ei sisällä nisäkäs
- tai bakteerikomponentteja, ja se on paljon hellävaraisempi soluille, mikä tekee siitä ihanteellisen ratkaisun solujen rutiininomaiseen irrottamiseen tavanomaisista kudosviljelymuovitavaroista ja adheesiopinnoitetuista muovitavaroista. Tässä blogikirjoituksessa tarkastelemme Accutaasin hyötyjä ja käyttötapoja sekä sitä, miten se muuttaa soluviljelyä.
Accutasen edut
Accutaasilla on useita etuja perinteisiin trypsiiniliuoksiin verrattuna. Ensinnäkin sitä voidaan käyttää aina, kun tarvitaan minkä tahansa tarttuvan solulinjan hellävaraista ja tehokasta irrottamista, joten se korvaa suoraan trypsiinin. Toiseksi Accutase toimii erittäin hyvin alkion ja hermoston kantasoluissa, ja sen on osoitettu säilyttävän näiden solujen elinkelpoisuuden passageauksen jälkeen. Kolmanneksi Accutase säilyttää useimmat epitoopit myöhempää virtaussytometria-analyysia varten, joten se on ihanteellinen solupintamarkkerien analysointiin.
Lisäksi Accutasea ei tarvitse neutraloida, kun soluja passageerataan adherenttien solujen kanssa. Lisää väliaineen lisääminen solujen jakamisen jälkeen laimentaa Accutaasia niin, että se ei enää kykene irrottamaan soluja. Tämä poistaa inaktivointivaiheen tarpeen ja säästää soluviljelyteknikoiden aikaa. Accutasea ei myöskään tarvitse annostella, ja pullo säilyy jääkaapissa 2 kuukautta.
Accutaasin sovellukset
Accutase korvaa suoraan trypsiiniliuoksen, ja sitä voidaan käyttää solulinjojen passagointiin. Lisäksi Accutase toimii hyvin, kun soluja irrotetaan monien solujen pintamerkkiaineiden analysoimiseksi virtaussytometrialla ja solujen lajittelussa. Muita Accutase-käsittelyn jatkokäyttösovelluksia ovat solujen pintamarkkereiden analysointi, virusten kasvun määritys, solujen proliferaatio, kasvainsolujen migraatiomääritykset, rutiinisolupassagointi, tuotannon skaalaaminen (bioreaktori) ja virtaussytometria.
Accutaasin koostumus
Accutase ei sisällä nisäkäs
- tai bakteerikomponentteja, ja se on luonnollinen entsyymiseos, jolla on proteolyyttinen ja kollageenilyyttinen entsyymiaktiivisuus. Se on muotoiltu paljon pienemmällä pitoisuudella kuin trypsiini ja kollagenaasi, mikä tekee siitä vähemmän myrkyllisen ja hellävaraisemman, mutta yhtä tehokkaan.
Accutasen tehokkuus
Accutaasin on osoitettu olevan tehokas primääri
- ja kantasolujen irrottamisessa ja solujen korkean elinkelpoisuuden säilyttämisessä verrattuna eläinperäisiin entsyymeihin, kuten trypsiiniin. solut saadaan talteen 100-prosenttisesti 10 minuutin kuluttua, eikä solujen jättämisestä Accutaseen jopa 45 minuutiksi ole haittaa Accutasen automaattisen sulatuksen ansiosta.
Yhteenvetona
Yhteenvetona voidaan todeta, että Accutase on tehokas ratkaisu, joka on muuttamassa soluviljelyä. Hellävaraisen luonteensa, tehokkuutensa ja monipuolisuutensa ansiosta Accutase on ihanteellinen vaihtoehto trypsiinille. Jos etsit luotettavaa ja tehokasta ratkaisua solujen irrottamiseen, Accutase on ratkaisu sinulle.75,00 €*PBSFosfaattipuskuroitu keittosuolaliuos (PBS-liuos)
Fosfaattipuskuroitu suolaliuos (PBS) on laajalti käytetty puskuriliuos biologisessa ja kemiallisessa tutkimuksessa. Sillä on ratkaiseva merkitys pH-tasapainon ja osmolaarisuuden ylläpitämisessä erilaisten kokeellisten toimenpiteiden aikana, mukaan lukien kudosten käsittely ja soluviljely. PBS-liuoksemme on valmistettu huolellisesti erittäin puhtaista ainesosista vakauden ja luotettavuuden varmistamiseksi jokaisessa kokeessa. PBS-liuoksemme osmolaarisuus ja ionipitoisuudet jäljittelevät läheisesti ihmiskehon osmolaarisuutta ja ionipitoisuuksia, joten se on isotoninen ja myrkytön useimmille soluille.
PBS-liuoksemme koostumus
PBS-liuoksemme on pH-säädetty sekoitus erittäin puhdasta laatua olevia fosfaattipuskureita ja suolaliuoksia. Se sisältää 1-kertaisena käyttökonsentraationa:
8000 mg/l natriumkloridia (NaCl)
200 mg/l kaliumkloridia (KCl)
1150 mg/L natriumfosfaattidibasinen vedetön (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumfosfaatti, monobasinen, vedetön (KH2PO4)
Tämä koostumus takaa optimaalisen pH
- ja ionitasapainon, joka soveltuu monenlaisiin biologisiin sovelluksiin.
PBS-liuoksemme käyttökohteet
PBS-liuoksemme soveltuu erinomaisesti erilaisiin biologisen tutkimuksen sovelluksiin. Sen isotonisten ja myrkyttömien ominaisuuksien ansiosta se soveltuu aineiden laimentamiseen ja solusäiliöiden huuhteluun. EDTA:ta sisältävät PBS-liuokset irrottavat tehokkaasti kiinnittyneet ja kyhmyiset solut. PBS:ään ei kuitenkaan pitäisi lisätä kaksiarvoisia metalleja, kuten sinkkiä, sillä ne voivat aiheuttaa saostumista. Tällaisissa tapauksissa suositellaan Goodin puskureita. Lisäksi PBS-liuoksemme on hyväksyttävä vaihtoehto virusten kuljetusalustalle RNA-virusten, kuten SARS-CoV-2:n, kuljetuksessa ja säilytyksessä.
Laadunvalvonta
Steriilisuodatettu
Varastointi ja säilyvyys
Säilytetään +2 °C:n ja +25 °C:n välillä valolta suojattuna.
Kun se on avattu, säilytä 2°C-25°C:ssa ja käytä 24 kuukauden kuluessa.
Kuljetusolosuhteet
Ympäristön lämpötila
Huolto
Säilytettävä jääkaapissa +2°C
- +8°C:ssa pimeässä. Vältä pakastamista ja usein tapahtuvaa lämmittämistä +37°C:een, koska se heikentää tuotteen laatua.
Älä lämmitä väliaineen lämpötilaa yli 37°C äläkä käytä kontrolloimattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltolaitteita.
Jos väliaineesta käytetään vain osa, poista tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpöiseksi ennen käyttöä.
Koostumus
Luokka
Ainesosat
Pitoisuus (mg/l)
Suolat
Kaliumkloridi
200
Kaliumfosfaattimonobasinen vedetön kaliumfosfaatti
200
Natriumkloridi
8000
Vedetön dibasinen natriumfosfaatti
115020,00 €*