Wilms6 rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300415

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	Wilms6 rakuliin loodi Wilmsi primaarsest kasvajast pediaatrilisel patsiendil, kellel oli WT1 mutatsioon. See rakuliin on määratletud homosügootse nonsense-mutatsiooniga WT1 geenis (c.1168 C>T, p.R390X), mille tulemuseks on kärbitud ja mittefunktsionaalne WT1 valk. WT1 on neerude arengu kriitiline regulaator ja selle kadumine on tugevalt seotud Wilmsi kasvajaga, eriti juhul, kui esineb mesenhüümiline diferentseerumine. Wilms6 rakuliin on oluline mudel WT1 täieliku kadumise tumorigeensete mõjude uurimiseks, eriti selliste kasvajate puhul, millel on nii epiteliaalsed kui ka mesenhüümilised omadused. Wilms6 rakud kannavad ka mutatsiooni CTNNB1 geenis, mis mõjutab konkreetselt seriini 45 (p.S45F), mis on β-kateniini lagunemist reguleeriva fosforüleerimise võtmekoht. See mutatsioon viib β-kateniini stabiliseerumiseni ja tuuma akumuleerumiseni, mille tulemuseks on Wnt-signaaltee konstitutiivne aktiveerumine. Wnt-signalisatsiooni kõrvalekalduv aktiveerimine on teadaolevalt Wilmsi kasvajate rakkude proliferatsiooni ja kasvajate tekke ajendiks, mistõttu Wilms6 on väärtuslik vahend WT1-mutatsiooniga kasvajate Wnt-tee düsregulatsiooni rolli uurimiseks. Fenotüübiliselt on Wilms6 rakud mesenhüümilise morfoloogiaga, vimentiini tugeva ekspressiooniga ja epiteeli markerite, nagu tsütokeratiini, puudumisega, mis peegeldab algse kasvaja stromaalset olemust. On näidatud, et neil rakkudel on piiratud, kuid märkimisväärne diferentseerumispotentsiaal, sealhulgas võime diferentseeruda eritingimustes lihasarnasteks rakkudeks, mis peegeldab mõnes Wilmsi kasvajas täheldatud mesenhüümset diferentseerumist. Wilmsi6 proteoomilised uuringud on tuvastanud mitmete retseptori türosiini kinaaside (RTK), sealhulgas PDGFRβ ja AXL aktiveerimise, mis on seotud rakkude ellujäämise, proliferatsiooni ja migratsiooni edendamisega. Selliste signaaliradade nagu MAPK ja PI3K/AKT allavoolu aktiveerimine rõhutab veelgi selle rakuliini agressiivsust. Üldiselt on Wilms6 rakuliin oluline mudel Wilmsi kasvajate arengu aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks, eriti juhul, kui WT1 on täielikult kadunud koos Wnt-signaalide aktiveerimisega. Selle geneetilised ja fenotüüpilised omadused teevad sellest suurepärase platvormi WT1 puuduse ja kõrvalekalduvate signaaliradade vahelise koostoime uurimiseks, mis annab ülevaate selle agressiivse kasvajatüübi potentsiaalsetest terapeutilistest sihtmärkidest.
Organism	Inimene
Kude	Neerud
Haigus	Wilmsi kasvaja
Rakendused	In vitro rakukultuuri mudel. Biokeemilised uuringud

Vanus	15 kuud
Sugu	Mees
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Morfoloogia	Spindlikujuline
Raku tüüp	Wilmsi rakud
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	Wilms6 (Cytioni katalooginumber 300415)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SI

Mutatsiooniprofiil	WT1 mutatsiooni staatus: homosügootne c.1168C>T, p.R390x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutatsiooni staatus: homosügootne del TCT, p.DS45

Kultuurikeskkond	MSCGM komplekt (Lonza)
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
HLA alleles	A: '02:05:01, '29:01:01 B: '07:05:01, '13:02:01 C: '06:02:01, '15:05:02 DRB1: '07:01:01, '10:01:01 DQA1: '01:05:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:01:01 DPB1*: '04:02:01, '17:01:01 E: '01:01:01

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
300415-221	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300415

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

Wilms6 rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping