Wilms10M rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300418

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	Wilms10M rakuliin loodi Wilmsi kasvaja (nefroblastoom) patsiendi metastaatilisest kopsukoldest. Sarnaselt oma primaarse tuumori vastandiga Wilms10T on Wilms10M rakuliinile iseloomulik WT1 geeni homosügootne deletsioon, mille tulemuseks on WT1 valgu täielik puudumine. WT1 on oluline normaalseks neeru arenguks ja selle deletsioon on seotud agressiivsema kasvajakäitumisega, eriti metastaatiliste kasvajate puhul. Lisaks sellele esineb Wilms10M rakkudes heterosügootia kadu (LOH) kromosoomi 11p15 piirkonnas, mis sisaldab IGF2 geeni, mis aitab veelgi kaasa nende rakkude pahaloomulistele omadustele. Wilms10M rakud säilitavad stabiilse karüotüübi, kus ei esine suuremaid kromosoomiümberkorraldusi, välja arvatud WT1 piirkonna spetsiifiline deletsioon. See metastaatilisest koest saadud rakuliin on eriti väärtuslik Wilmsi kasvaja metastaasi põhjustavate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. Rakkudel on mesenhüümilised omadused, mis väljendavad selliseid markereid nagu vimentiin, kuid neil puuduvad epiteeli markerid nagu tsütokeratiin, mis viitab nende päritolule kasvaja stromaalsest komponendist. Wilms10M uuringutes on keskendutud signaaliradadele, mis on nendes metastaatilistes rakkudes aktiivsed. Proteoomilised analüüsid on näidanud mitmete retseptoritürosiini kinaaside (RTK), sealhulgas IGF1R, PDGFRβ ja AXL aktiveerimist, mis on seotud rakkude ellujäämise, proliferatsiooni ja metastaatilise potentsiaali edendamisega. Aktiveeritud on ka allavoolu MAPK ja PI3K/AKT signaaliteed, mis mängivad olulist rolli Wilms10M rakkude invasiivse ja metastaatilise fenotüübi säilitamisel. Arvestades Wilms10M metastaatilist päritolu, on Wilms10M oluline mudel Wilmsi kasvaja metastaasi aluseks olevate molekulaarsete sündmuste mõistmiseks ja metastaatilise haiguse vastu suunatud ravistrateegiate väljatöötamiseks.
Organism	Inimene
Kude	Neerud
Haigus	Wilmsi kasvaja
Rakendused	In vitro rakukultuuri mudel. Biokeemilised uuringud
Sünonüümid	Wilms10

Vanus	2 aastat
Sugu	Naised
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Morfoloogia	Spindlikujuline
Raku tüüp	Wilmsi rakud
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	Wilms10M (Cytioni katalooginumber 300418)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SL

Mutatsiooniprofiil	WT1 mutatsiooni staatus: homosügootne del WT1 del11p13 piires. LOH: puudub 11p13-s, kuid UPD 11p15-s. CTNNB1 mutatsiooni staatus: homosügootne del TCT, p.DS45, UPD 3p

Kultuurikeskkond	MSCGM komplekt (Lonza)
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
300418-030325	Analüüsitunnistus	26. May. 2025	300418
300418-110324	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300418

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

Wilms10M rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping