Wilms1 rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300411

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	Wilms1 rakuliin on saadud Wilmsi primaarse kasvaja proovist, mis saadi patsiendilt, kellel esinesid suured kahepoolsed neerukasvajad, mis viitavad Wilmsi kasvajale, mis on pediaatriline nefroblastoom. Selles rakuliinis on homosügootne nonsense-mutatsioon WT1 geenis (c.149 C>A, p.S50X), mille tulemuseks on kärbitud ja mittefunktsionaalne WT1 valk. WT1-geen, mis on neerude arengu ja funktsiooni jaoks kriitilise tähtsusega, on Wilmsi kasvajate puhul sageli muteerunud, eriti stromaalse alatüübiga kasvajate puhul, millel on ektoopiline mesenhüümiline diferentseerumine. Wilms1 rakud kujutavad seega ainulaadset in vitro mudelit WT1 funktsiooni kaotuse tagajärgede uurimiseks kasvajate bioloogias. Wilms1 rakuliin säilitab stabiilse karyotüübi ilma oluliste kromosoomianomaaliateta, mis võimaldab usaldusväärset pikaajalist kasvatamist. Nendel rakkudel on mesenhüümiline fenotüüp, mida iseloomustab vimentiini ekspressioon ja epiteeli markerite, näiteks tsütokeratiini puudumine, mis on kooskõlas nende stromaalse päritoluga. Lisaks sellele on rakuliinil piiratud, kuid märkimisväärne mesenhüümiline diferentseerumisvõime, sealhulgas võime diferentseeruda sobivatel tingimustel lihasarnasteks rakkudeks. See muudab Wilms1 asendamatuks vahendiks mesenhümaalse diferentseerumise molekulaarsete mehhanismide ja selle dereguleerimise uurimiseks Wilmsi kasvaja patogeneesis. Wilms1 on kasutatud ka tuumori progresseerumises osalevate peamiste signaaliradade aktiveerimise seisundi uurimiseks. Proteoomilised analüüsid on näidanud, et Wilms1 rakkudes esineb mitmete retseptoritürosiini kinaaside, sealhulgas EGFR ja PDGFRβ, fosforüleerimine ja aktiveerimine, samuti allavoolu MAPK-signaaliradade aktiveerimine. Need leiud rõhutavad Wilms1 rakuliini olulisust Wilmsi kasvaja sihtotstarbeliste ravimeetodite uurimisel, uurides nende radade rolli vähirakkude ellujäämises, proliferatsioonis ja diferentseerumises.
Organism	Inimene
Kude	Neerud
Rakendused	In vitro rakukultuuri mudel. Biokeemilised uuringud
Sünonüümid	Wilms1-2l

Vanus	2 aastat
Sugu	Naised
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Morfoloogia	Spindlikujuline
Raku tüüp	Wilmsi rakud
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	Wilms1 (Cytioni katalooginumber 300411)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SC

Väljendatud retseptorid	Retseptoritürosiini kinaasid EGFR, EphA7, PDGFRalpha, FGFR1, PDGFRbeta, AxL
Tumorigeeniline	Jah, alasti hiirtel. Moodustab Wilmsi kasvajale vastavate väikeste rakkudega kasvaja (ksenotransplantaadid ei pruugi täielikult esindada Wilmsi kasvajaid, vt E. Kunce Stroup 2017)
Viruses	HIV-1: negatiivne, HBV: negatiivne, HCV: negatiivne
Mutatsiooniprofiil	WT1 mutatsiooni staatus: homosügootne c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutatsiooni staatus: heterosügootne TCT>TTT, p.S45F
Karyotüüp	46, normaalne

Kultuurikeskkond	MSCGM komplekt (Lonza)
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Aja kahekordistamine	24 tundi
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvi tihedus	1 x 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku uuendamine	1 kuni 2 korda nädalas
Taastumisjärgne taastumine	Kiire
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
HLA alleles	A: '03:01:01, '24:02:01 B: '35:03:01, '38:01:01 C: '12:03:01 DRB1: '07:01:01, '14:54:01 DQA1: '01:04:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:03:01 DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G E: '01:03:01, '01:03:02

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
300411-221	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300411
300411-130524	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300411

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

Wilms1 rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping