Wilms3 rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300414

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	Wilms3 rakuliin loodi pediaatrilise patsiendi primaarsest Wilmsi kasvajast, mida iseloomustab somaatiline WT1-mutatsioon. Erinevalt paljudest teistest Wilmsi tuumori rakuliinidest on Wilms3-l heterosügootne frameshift-mutatsioon WT1 geenis (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), mis põhjustab kärbitud WT1 valgu tootmist. See WT1 funktsiooni osaline kadumine on seotud stromaalse või mesenhüümse fenotüübiga kasvajate tekkega. Wilms3 puhul ei ole WT1 mutatsioon siiski homosügootne, mis muudab selle uurimise keerulisemaks, kuna see säilitab osa WT1 funktsioonist, mis võib mõjutada kasvaja bioloogiat erinevalt võrreldes rakuliinidega, kus WT1 on täielikult kadunud. Wilms3 kannab ka mutatsiooni CTNNB1 geenis, mis mõjutab konkreetselt 41. treoniini (p.T41A), mis mängib kriitilist rolli Wnt-signaaliteedis. See mutatsioon stabiliseerib β-kateniini, takistades selle lagunemist ja põhjustades Wnt-tee konstitutiivset aktiveerimist. Wnt-signalisatsiooni püsiv aktiveerimine põhjustab rakkude proliferatsiooni ja aitab kaasa Wilms3 kasvajate tekkimisele, mistõttu on see peamine mudel CTNNB1-mutatsioonide mõju uurimiseks osaliselt toimiva WT1-fooni kontekstis. Fenotüübiliselt on Wilms3 rakkudel mesenhüümilaadne morfoloogia, mis ekspresseerib vimentiini ja millel puudub tsütokeratiin, mis on kooskõlas algses kasvajas täheldatud stroomi omadustega. Nende rakkude diferentseerumispotentsiaal on piiratud, kusjuures nad suudavad teatud tingimustel diferentseeruda mesenhüümseks. Wilms3 proteoomilised analüüsid on näidanud mitmete retseptori türosiini kinaaside (RTK), sealhulgas PDGFRβ ja AXL aktiveerimist, mis toetavad rakkude ellujäämist ja proliferatsiooni. Lisaks on aktiveeritud sellised allavoolu signaalirajad nagu MAPK ja PI3K/AKT, mis tugevdavad Wilms3 rakkude pahaloomulisi omadusi. Üks ainulaadne aspekt Wilms3 puhul on selle osaline WT1 funktsionaalsus, mis annab erilise perspektiivi, kuidas WT1 mutatsioonid aitavad kaasa Wilmsi kasvaja bioloogiale, kui mutatsioon ei ole täielik. WT1 ja Wnt-signalisatsiooni koostoime Wilms3-s annab väärtusliku võimaluse uurida nende radade nüansirikkaid rolle kasvaja arengus. Üldiselt on Wilms3 oluline mudel Wilmsi kasvaja aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks osalise WT1 kao ja konstitutiivse Wnt-tee aktiveerimise korral.
Organism	Inimene
Kude	Neerud
Haigus	Wilmsi kasvaja
Rakendused	In vitro rakukultuuri mudel. Biokeemilised uuringud

Vanus	11-12 kuud
Sugu	Mees
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Morfoloogia	Spindlikujuline
Raku tüüp	Wilmsi rakud
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	Wilms3 (Cytioni katalooginumber 300414)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SF

Mutatsiooniprofiil	WT1 mutatsiooni staatus: homosügootne c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutatsiooni staatus: metsikut tüüpi

Kultuurikeskkond	MSCGM komplekt (Lonza)
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
HLA alleles	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
300414-221	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300414

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

Wilms3 rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping