Wilms11 rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300420

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping

Kirjeldus	Wilms11 rakuliin on saadud pediaatrilise patsiendi primaarsest Wilmsi kasvajast (nefroblastoom). Erinevalt paljudest teistest Wilmsi kasvajate rakuliinidest on Wilms11-le iseloomulik, et selles esineb metsikut tüüpi WT1, mis tähendab, et selles ei esine mutatsioone WT1 geenis, mis tavaliselt on seotud Wilmsi kasvajatega, millel on agressiivsem või stromaalsem fenotüüp. Wilms11 kasvajal oli siiski märkimisväärne stroomaalne diferentseerumine koos suurte rabdomüoomilise diferentseerumise aladega, mis viitab mesenhüümsetele elementidele kasvajas. Metsikut tüüpi WT1 esinemine koos kasvaja stromaalse diferentseerumisega annab ainulaadse mudeli Wilmsi kasvaja bioloogia mõistmiseks juhtudel, kus WT1 mutatsioonid puuduvad. Wilmsi11 geneetilised uuringud on näidanud, et sellel rakuliinil on kasvaja-spetsiifiline mutatsioon CTNNB1-s, mis kodeerib β-kateniini, millel on oluline roll Wnt-signaaliteedis. Wilms11 puhul mõjutab see mutatsioon seriini 45, mis on β-kateniini lagundamises osalev oluline fosforüleerimiskoht. CTNNB1 mutatsiooni tulemuseks on β-kateniini stabiliseerumine, mis põhjustab selle akumuleerumist ja Wnt-signaaltee konstitutiivset aktiveerimist, mis on rakkude proliferatsiooni ja kasvajate tekke mootoriks. See muudab Wilms11 oluliseks mudeliks Wnt-signalisatsiooni ja Wilmsi kasvaja arengu vastastikuse mõju uurimiseks, eriti juhtudel, kui WT1 jääb puutumata. Wilms11 proteoomilised analüüsid on näidanud mitme retseptoritürosiini kinaasi (RTK), sealhulgas PDGFRβ ja AXL, aktiveerimist, mis on seotud kasvajarakkude kasvu ja ellujäämise juhtimisega. Wilms11 rakkudes on aktiveeritud ka allavoolu signaaliradasid, nagu MAPK ja PI3K/AKT, mis aitavad kaasa nende kasvajakäitumisele. Wilms11 rakkude võime läbida mesenhüümset diferentseerumist, eriti rabdomüoomset diferentseerumist, rõhutab nende potentsiaali Wilmsi kasvaja mesenhüümiliste komponentide uurimise mudelina. Kokkuvõttes on Wilms11 väärtuslik vahend Wilmsi kasvajate teket juhtivate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks WT1-mutatsioonide puudumisel, kuid Wnt-tee aktiveerimise kontekstis.
Organism	Inimene
Kude	Neerud
Haigus	Wilmsi kasvaja
Rakendused	In vitro rakukultuuri mudel. Biokeemilised uuringud

Vanus	22 kuud
Sugu	Mees
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Morfoloogia	Spindlikujuline
Raku tüüp	Wilmsi rakud
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	Wilms11 (Cytioni katalooginumber 300420)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SM

Mutatsiooniprofiil	WT1 mutatsiooni staatus: homosügootne WT1 c.901c>T, p.R301x. LOH: . CTNNB1 mutatsiooni staatus: metsikut tüüpi

Kultuurikeskkond	MSCGM komplekt (Lonza)
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külmutage keskkond	Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
300420-221	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300420
300420-240226	Analüüsitunnistus	25. Mar. 2026	300420

Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.

Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.

Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.

Wilms11 rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Materjali üleandmise leping