Células de Ramos - Investigación sobre el linfoma de células B: La importancia de las células de Ramos
Las células deRamos son una línea celular de linfocitos B muy utilizada en la investigación biomédica. En particular, encuentran aplicaciones primarias en estudios de inmunología y cáncer. Los investigadores emplean estas células para evaluar fármacos citotóxicos y estudiar antígenos de superficie de células B, mutaciones y mecanismos apoptóticos.
Origen y atributos generales de las células Ramos s
Comprender el origen y los atributos esenciales de una línea celular desempeña un papel crucial a la hora de decidir su idoneidad para su investigación. Por lo tanto, es aconsejable evaluar a fondo esta información antes de iniciar cualquier trabajo con ella. En esta sección se tratan las siguientes preguntas frecuentes: ¿Qué es la línea celular Ramos? ¿Qué es la línea celular Ramos CD19? ¿Qué es la línea celular Ramos CD20? ¿Cuál es el origen de las células Ramos? ¿Cuáles son los marcadores de la línea celular Ramos? ¿Cuál es el tamaño de las células Ramos? ¿Cuál es la morfología de la línea celular Ramos?
- La línea celular Ramos se creó en 1972. Estas células se derivaron del líquido ascítico de un niño caucásico de 3 años con linfoma de Burkitt de tipo americano [1].
- Expresan marcadores clave de células B, incluyendo inmunoglobulina M (IgM), CD19, CD20 y CD22.
- Las células de Ramos son células negativas al virus de Epstein bar. Sin embargo, pueden transformarse permanentemente en células positivas para el virus de Epstein-Barr.
- Estos linfoblastos B poseen una morfología redondeada.
Células azules de Ramos frente a células B de Ramos
Tanto las células azules de Ramos como las células B de Ramos son células de linfoma de Burkitt humano. Ambas son negativas para el virus de Epstein bar. La diferencia entre estas células es que las células azules de Ramos expresan un gen reportero inducible por NF-κB/AP-1 llamado SEAP (fosfato alcalino embrionario secretado), mientras que las células blancas de Ramos no lo hacen.
Cultivo de células Ramos
Esta sección del artículo está dedicada a ayudarle a aprender información imperativa sobre el cultivo de células de Ramos. Aquí conocerá: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las líneas celulares? ¿Cuál es el medio recomendado? ¿Cómo se cultivan las células Ramos?
Puntos clave para el cultivo de células de Ramos
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Tiempo de duplicación: |
El tiempo de duplicación de las células Ramos es de aproximadamente 20,4 ± 1,5 horas. No obstante, puede variar en función de las condiciones de cultivo de las células. |
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Adherentes o en suspensión: |
Las células Ramos crecen en suspensión. |
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Densidad celular: |
La densidad celular óptima para la línea celular Ramos es de 3 x105 células/ml . Para el subcultivo, las células en suspensión se recogen mediante centrifugación. Las células se añaden con medio fresco y se resuspenden cuidadosamente. A continuación, las células se vierten en un nuevo matraz a una densidad de 3 a 9 x 105células/ml . |
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Medio de crecimiento: |
RPMI 1640 suplementado con 10% de suero fetal bovino, 2.1 mM de Glutamina estable, y 2.0 g/L de NaHCO3 se utiliza para cultivar células Ramos. el medio debe ser reemplazado 2 veces por semana. |
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Condiciones de crecimiento: |
La línea celular de linfoma de Burkitt humano (Ramos) se mantiene en un incubador humidificado al 5% de CO2 y a 37°C de temperatura. |
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Almacenamiento: |
Las células Ramos congeladas se mantienen a una temperatura inferior a -150 grados centígrados o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para proteger la viabilidad de las células durante plazos más largos. |
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Proceso y medio de congelación: |
Para las células de Ramos se recomienda el medio de congelación CM-1 o CM-ACF. Se utiliza un proceso de congelación lento que permite un descenso gradual de la temperatura de 1 grado centígrado por minuto. Esta congelación lenta protege a las células de cualquier choque y mejora su viabilidad. |
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Proceso de descongelación: |
Para la descongelación, las célulascongeladas se mantienen en un baño de agua precalentada a 37°C durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño grumo de hielo. A continuación, se añade medio fresco y se centrifugan las células para eliminar los elementos del medio de congelación. El precipitado se vuelve a resuspender y las células se dispensan en un nuevo matraz que contiene medio de cultivo. |
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Nivel de bioseguridad: |
El laboratorio de nivel de bioseguridad 1 es esencial para mantener cultivos celulares Ramos negativos al virus de Epstein-Barr. Sin embargo, el nivel de bioseguridad pasa a 2 cuando las células Ramos se convierten permanentemente en positivas al virus de Epstein-Barr. |
Ramos: Ventajas y limitaciones
Al igual que otras líneas celulares, las células Ramos también tienen ventajas y limitaciones. En esta sección se analizan algunas de las más destacadas, que pueden influir significativamente en su uso en investigación.
Ventajas
- Modelo celular de linfoma de Burkitt: Las células Ramos se desarrollaron a partir de un paciente con linfoma de Burkitt, lo que las convierte en un modelo celular relevante para el estudio de neoplasias linfoides
- Facilidad de cultivo: Las células Ramos son fáciles de cultivar y mantener en el laboratorio. Sus requisitos y condiciones de cultivo son sencillos
Limitaciones
- Modelo in vitro: Es posible que las células Ramos no representen completamente la complejidad genética de los tumores de pacientes, lo que limita su aplicabilidad. Además, es posible que los resultados de los experimentos realizados con la línea celular Ramos no reflejen totalmente las condiciones in vivo, lo que podría plantear problemas de traslación
aplicaciones de las células Ramos en la investigación
Ramos ofrece aplicaciones prometedoras en el campo biomédico. Algunos de los usos imperativos de las células Ramos en la investigación incluyen
- Biología del linfoma: Las células de Ramos se utilizan ampliamente para estudiar la biología del linfoma. Se utilizan para explorar los factores genéticos y moleculares que subyacen a las neoplasias linfoides. Además, los investigadores obtienen información sobre el inicio, la progresión y la heterogeneidad de la enfermedad utilizando estas células de linfoma de Burkitt. También se investigan las mutaciones genéticas y las vías de señalización, lo que podría conducir al desarrollo de enfoques diagnósticos y terapéuticos más precisos. Un estudio realizado en 2019 descubrió que la inhibición de la histona acetiltransferasa GCN5 (General control non-depressible 5) disminuye la tumorigenicidad de las células de linfoma de Burkitt humano (Ramos) mediante la interrupción de la señalización BCR. Por lo tanto, se sugiere que GCN5 es una diana factible para desarrollar una terapia farmacológica contra el linfoma [2].
- Cribado y ensayo de fármacos: La línea celular Ramos se utiliza ampliamente para el cribado y ensayo de fármacos. Los investigadores evalúan la eficacia de posibles compuestos terapéuticos para inhibir la proliferación y el crecimiento celular e inducir la muerte celular en células de linfoma. Esto ayuda a identificar fármacos candidatos prometedores, facilitando así el desarrollo de tratamientos específicos para pacientes con linfoma. La investigación demostró que el extracto metanólico de la piel, la pulpa y las semillas del fruto de Annona ejercía efectos moderados, mientras que el extracto de cloroformo mostraba efectos contundentes sobre la proliferación de las células Ramos. Así pues, el estudio propuso que los frutos de Annona podrían resultar eficaces en la prevención y el tratamiento del linfoma [3].
Células Ramos para su investigación
Publicaciones sobre células Ramos
En esta sección del artículo se enumeran algunas publicaciones de investigación interesantes sobre la línea celular Ramos:
Esta investigación se publicó en la revista The EMBO en 2018. El estudio descubrió que las células B Ramos requieren la expresión de los marcadores de células Ramos CD19 y CD79b (componente de señalización BCR Igβ) para su aptitud y crecimiento competitivo.
Este estudio publicado en Neoplasia (2021) utilizó células Ramos y propuso que el dominio quinasa de linaje mixto (MLKL) está regulado epigenéticamente en células de linfoma de Burkitt (Ramos). Por lo tanto, es un marcador pronóstico prometedor para el éxito del tratamiento de las terapias relacionadas con la necroptosis.
La fosforilación de PBK/TOPK Tyr74 por JAK2 promueve el crecimiento tumoral del linfoma de Burkitt
Este artículo de investigación publicado en Cancer Letters (2022) sugiere que el eje de señalización JAK2/TOPK/histona H3 desempeña un papel crucial en la proliferación de líneas celulares de linfoma B in vitro.
Este artículo se publicó en 2020 en Toxins. El estudio propone que el tratamiento con verotoxina-1 induce estrés del retículo endoplásmico (RE) en las células B de Ramos. Esto conduce al inicio de la señalización apoptótica o de supervivencia en las líneas celulares de linfoma.
Este estudio publicado en el Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) informa de que un compuesto natural, la silimarina, suprime la expresión del gen TLR8 (Toll-like receptor 8) y la apoptosis en la línea celular Ramos.
Recursos para la línea celular Ramos: Protocolos, vídeos y más
A continuación se presentan algunos recursos en línea sobre las células Ramos:
- Transfección de células Ramos: Este documento le ayudará a conocer el protocolo de transfección de la línea celular Ramos.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de células de Ramos:
- Células Ramos: Este sitio web contiene información básica sobre la línea celular Ramos. También contiene un protocolo para el subcultivo de células Ramos y la manipulación de cultivos proliferantes y crioconservados. Además, también se ofrece información sobre los medios de cultivo de células Ramos, el tiempo de duplicación y la densidad celular.
Claves sobre las células de Ramos: Preguntas frecuentes
Referencias
- Kerntke, C.G., Análisis de la organización y capacidad de señalización de la IgE de membrana durante su interacción con CD19 y CD23 en linfocitos B. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al., La inhibición de GCN5 HAT reduce la supervivencia de las células de linfoma de Burkitt humano mediante la reducción de la expresión del gen diana MYC y el impedimento de las vías de señalización BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al., Perfil fitoquímico y actividad antioxidante de la fruta annona y su efecto sobre la proliferación de células de linfoma. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): p. 58-68.