Células NIH-3T3: avances en los estudios sobre fibroblastos y aplicaciones de las células NIH-3T3
La línea celular NIH-3T3, establecida a partir del tejido de un embrión de ratón albino suizo de 17 días de edad en 1962 por Howard Green y George Todaro en la Facultad de Medicina de la Universidad de Nueva York, se ha convertido en un recurso fundamental en la investigación biomédica. Reconocidas por su alta receptividad a la formación de focos del virus de la leucemia y del virus del sarcoma, las células NIH-3T3 constituyen una herramienta fundamental para una gran variedad de investigaciones científicas, entre las que se incluyen los estudios de oncología viral, el análisis de la expresión génica y la exploración de la dinámica del crecimiento celular. La nomenclatura «3T3» refleja el método de cultivo celular, que indica un intervalo de «transferencia cada 3 días» con una densidad de siembra inicial de 3 × 10^5 células, lo que pone de relieve las condiciones estandarizadas en las que estas células se cultivaron y expandieron por primera vez.
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- Adherente
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- BSL-1
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Diversas morfologías y aplicaciones de las células NIH-3T3
Una de las características distintivas de las células NIH-3T3 es su adaptabilidad morfológica, que varía significativamente en función de la confluencia del cultivo. A densidades más bajas, estos fibroblastos presentan una estructura celular solitaria en forma de huso, que evoluciona hacia patrones densos y arremolinados a medida que la población alcanza la confluencia. Con un diámetro medio de unos 18 μm, las células NIH-3T3 constituyen un modelo versátil para estudios en profundidad de biología celular, que abarcan desde los mecanismos de reparación tisular hasta las complejas vías de regulación del ciclo celular.
Información sobre el cultivo
Datos clave sobre el cultivo:
Tiempo de duplicación de la población: Aproximadamente 20 horas.
Tipo de crecimiento: Cultivos adherentes.
Densidad de siembra: Recomendada: de 3 a 4 × 10⁴ células/cm².
Medio de cultivo: DMEM o Ham's F12, suplementado con un 5 % de suero fetal bovino (FBS) y 2,5 mM de L-glutamina.
Condiciones de cultivo: Mantener a 37 °C en una incubadora humidificada con un 5 % de CO₂.
Almacenamiento: Conservar a temperaturas inferiores a -195 °C en la fase de vapor de nitrógeno líquido.
Método de congelación: utilizar medio CM-1 o CM-ACF; emplear un método de congelación lenta (descenso de temperatura de 1 °C).
Protocolo de descongelación: calentamiento rápido en un baño de agua a 37 °C, seguido de centrifugación para eliminar el medio de congelación y, a continuación, resuspensión en medio de cultivo.
Nivel de bioseguridad: El cultivo requiere un entorno de nivel de bioseguridad 1.

Ratón albino suizo en un laboratorio.
Ventajas e inconvenientes del uso de células NIH 3T3
Ventajas
Eficacia de la transfección: Conocidas por sus elevadas tasas de transfección, las células NIH-3T3 son excelentes tanto para estudios de expresión génica transitoria como estable, y se adaptan a diversas técnicas de transfección.
Utilidad como capa de apoyo: Estas células suelen servir como capa de apoyo en cocultivos con células como los queratinocitos y las células madre, gracias a la liberación de factores de crecimiento que favorecen el crecimiento de las células en cocultivo.
Investigación con células madre: Las células NIH-3T3 son la opción preferida en la investigación con células madre para inducir la pluripotencia sin modificación genética y proporcionar un entorno propicio para la diferenciación de las células madre.
Estabilidad del cultivo: Las células NIH-3T3 son conocidas por su estabilidad y su baja frecuencia de transformación espontánea. Sin embargo, en determinadas condiciones o tras la exposición a oncogenes o mutágenos específicos, las células NIH-3T3 pueden sufrir una transformación espontánea. Esta transformación puede dar lugar a la adquisición de propiedades cancerosas, como el crecimiento descontrolado, la pérdida de la inhibición por contacto y la capacidad de formar tumores cuando se inyectan en huéspedes susceptibles.
Desventajas
Tamaño celular variable: La morfología alargada y en forma de huso de las células NIH-3T3 puede variar, lo que complica los análisis de imágenes en los ensayos.
Susceptibilidad a las infecciones: Estas células son propensas a sufrir infecciones bacterianas y por micoplasmas si no se mantienen en condiciones asépticas estrictas, lo que podría afectar a la integridad experimental.
Aplicaciones de investigación de las células NIH-3T3
Estudios de transfección de ADN: La robustez de las células NIH-3T3 las hace ideales para introducir y estudiar la función de diversos genes, como se ha demostrado en investigaciones que examinan proteínas como NAB2-STAT6 y su papel en los procesos celulares.
Ensayos basados en células: Su fiabilidad se extiende a diversos ensayos, incluidos los de viabilidad, apoptosis y formación de focos, lo que permite obtener información sobre las respuestas celulares en diferentes condiciones experimentales.
Investigación sobre el ciclo celular: La sencilla manipulación del ciclo celular de esta línea celular mediante los niveles de suero la convierte en un potente modelo para estudiar la regulación del ciclo celular y sus alteraciones en contextos patológicos.
Mejora tu investigación con las células NIH-3T3
Resumen de los principales estudios realizados con la línea celular de fibroblastos NIH 3T3
La línea celular NIH-3T3 ha sido fundamental en numerosos proyectos de investigación que abarcan diversas facetas de la biología celular. A continuación se presentan algunos estudios significativos en los que se han utilizado estas células:
- Análisis de la proteína de fusión NAB2-STAT6: Publicado en la revista *Biochemical and Biophysical Research Communications*, este estudio analiza cómo la proteína de fusión NAB2-STAT6 afecta a las células NIH-3T3, concretamente su papel en la potenciación del crecimiento y la migración celular a través de la regulación de EGR-1.
- Investigación sobre APOBEC3 y el virus de la leucemia murina: Esta investigación, publicada en la revista *Virology*, examina la hipermutación del virus de la leucemia murina AKV en células NIH-3T3 que expresan el gen APOBEC3 de ratón.
- Evaluación del potencial antimetastásico de los fármacos epigenéticos: En la revista *Oncotargets and Therapy*, este estudio evalúa los efectos antimetastásicos de la hidralazina y el ácido valproico en células NIH-3T3 transformadas por RAS.
- El impacto de la baicaleína en la proliferación de las células NIH-3T3 y la síntesis de colágeno: Esta investigación utiliza células NIH-3T3 para explorar cómo la baicaleína influye en la proliferación celular y la producción de colágeno a través de la modulación del eje miR-9/factor de crecimiento similar a la insulina-1.
- Estudio de la deficiencia de riboflavina y la tumorigénesis: Este estudio presenta los resultados sobre cómo la deficiencia de riboflavina en las células NIH-3T3 contribuye a la tumorigénesis al promover la proliferación celular y desregular los genes del ciclo celular.
Recursos esenciales para la investigación con células NIH-3T3
Para los investigadores interesados en trabajar con células NIH-3T3, hay disponibles diversos recursos que sirven de guía para los protocolos de cultivo y experimentales:
- Formación de esferoides en células NIH-3T3: Este vídeo ofrece una guía detallada sobre la formación de esferoides, una técnica de cultivo celular en 3D que agrupa las células NIH-3T3 en racimos, lo que proporciona un modelo más relevante desde el punto de vista fisiológico para los estudios.
- Seguimiento del crecimiento de las células NIH-3T3: A través del sistema de imagen de células vivas JuLI Br, este vídeo captura la dinámica de crecimiento de las células NIH-3T3 a lo largo de 65 horas, mostrando la proliferación celular en tiempo real.
Estos recursos tienen como objetivo apoyar sus iniciativas de investigación con células NIH-3T3, proporcionando una base para el éxito de sus experimentos y descubrimientos.
Preguntas frecuentes sobre las células NIH-3T3
Referencias
- Rahimi, A.M., M. Cai y S. Hoyer-Fender, «Heterogeneidad de la línea celular de fibroblastos NIH3T3». Cells, 2022. 11(17): p. 2677.
- Leibiger, C. et al., «Primera caracterización citogenética molecular de alta resolución de la línea celular NIH 3T3 mediante tinción multicolor murina». Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4): p. 306-312.
- Wang, H.-X., et al., «Análisis comparativo de diferentes capas de células alimentadoras con fibroblastos 3T3 para el cultivo de células madre limbares de conejo». International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7): p. 1021.
- Wang, Z., et al., «Diferenciación de células neuronales a partir de fibroblastos NIH/3T3 en condiciones definidas». *Development, growth & differentiation*, 2011. 53(3): p. 357-365.
- Park, Y.-S., et al., La proteína de fusión NAB2-STAT6 media la proliferación celular y la progresión oncogénica a través de la regulación de EGR-1. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020. 526(2): p. 287-292.
- Mattsson, M., «Expresión de la Sloppymerase™ en células NIH/3T3: exploración de la versatilidad de una polimerasa de fusión propensa a errores». 2021.
- Sahinturk, V., et al., «La acrilamida ejerce su citotoxicidad en las células fibroblásticas NIH/3T3 mediante la apoptosis». Toxicology and Industrial Health, 2018. 34(7): p. 481-489.
- Lusi, E. A. y F. Caicci, «Descubrimiento del primer retrovirus gigante humano: descripción de su morfología, su quinasa retroviral y su capacidad para inducir tumores en ratones». bioRxiv, 2019: p. 851063.
- Endo, M., et al., La señalización E2F1-Ror2 media la regulación transcripcional coordinada para promover la transición de la fase G1 a la fase S en fibroblastos NIH/3T3 estimulados con bFGF. The FASEB Journal, 2020. 34(2): p. 3413-3428.
- Long, L., et al., La disminución de riboflavina promueve la tumorigénesis en células HEK293T y NIH3T3 al mantener la proliferación celular y regular la transcripción de genes relacionados con el ciclo celular. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6): p. 834-843.
