Células COS-1: Un caballo de batalla celular en los estudios de expresión génica

La línea celular COS-1 es una célula parecida a un fibroblasto que se origina en el tejido renal de un mono y que los investigadores emplean con frecuencia para investigar el virus del mono, el SV40. Estas células se transfectan fácilmente y a menudo se utilizan para crear proteínas recombinantes para diversos experimentos bioquímicos, moleculares y de biología celular.

Este artículo le proporcionará información detallada sobre la línea celular COS-1, cubriendo toda la información esencial que necesita. En concreto, obtendrá conocimientos sobre lo siguiente:

  1. Línea celular COS-1: Origen e información general.
  2. Ventajas e inconvenientes de las células COS-1
  3. Aplicaciones de investigación de las células COS-1
  4. Células COS-1: Publicaciones
  5. Recursos para la línea celular COS-1, incluidos protocolos, vídeos y mucho más
  6. Cultivo de células COS-1

1.línea celular COS-1: Origen e información general.

Antes de iniciar cualquier trabajo con una línea celular, es esencial tener un conocimiento fundamental de la propia línea celular. Esto incluye información como el origen de las células, cómo se aislaron y sus características. En esta sección, profundizaremos en los aspectos básicos de las células COS-1.

¿Qué es la línea celular COS-1?

La línea celular COS-1 está formada por células similares a fibroblastos que J.W.F. Cowell y sus colegas crearon por primera vez en 1981. Estas células se generaron transformando una línea celular epitelial de mono verde conocida como CV-1 con una forma mutante del virus simio SV40. Posteriormente, se caracterizó minuciosamente la línea celular COS-1 establecida para restaurar la región del genoma del SV40 que se había eliminado previamente del origen de replicación. Estas células expresan antígenos T grandes y otras proteínas necesarias para replicar correctamente genomas circulares, como los plásmidos.

Chlorocebus aethiops (mono verde africano)

Las células COS-1 tienen una morfología similar a la de los fibroblastos y se adhieren a las superficies, extendiéndose en forma de monocapa. Actualmente no se conocen variantes genéticas de la línea celular COS-1. Sin embargo, una línea celular relacionada, COS-7, también se originó a partir de células CV-1 y presenta características similares.

2.ventajas e inconvenientes de las células COS-1

La línea celular COS-1 tiene ventajas y limitaciones únicas, que discutiremos a continuación.

Ventajas

  • Facilidad de transfección: La línea celular COS-1 se transfecta fácilmente utilizando varios métodos, incluidos los enfoques físicos y químicos.
  • Producción de lentivirus: La línea celular COS-1 es un huésped de empaquetamiento adecuado para producir partículas lentivirus recombinantes de alta calidad sin pasos adicionales de purificación. Estas células se adhieren firmemente a las superficies de plástico, lo que evita la contaminación de los sobrenadantes de transfección que contienen partículas virales [1].
  • Expresión génica: La línea celular COS-1 se utiliza ampliamente para estudios de análisis de expresión transitoria y estable, produciendo muchas proteínas recombinantes mediante transfección con plásmidos circulares que contienen el origen de replicación SV40 [2].

Limitaciones

  • Línea celular no humana: Dado que las células COS-1 proceden de primates no humanos, las proteínas recombinantes producidas por esta línea celular sólo son adecuadas para experimentos de laboratorio y no pueden recomendarse para uso humano.

3.aplicaciones de las células COS-1 en investigación

Una de las consideraciones más importantes a la hora de analizar una línea celular son sus aplicaciones en investigación. Esta sección explorará las aplicaciones de investigación más destacadas de las células COS-1.

  • Producción de proteínas recombinantes: La línea celular COS-1 se utiliza ampliamente para producir proteínas recombinantes mediante transfección transitoria o estable de vectores circulares que contienen el origen de replicación SV40. En un estudio reciente, los biólogos utilizaron la línea celular COS-1 para producir gonadotropina coriónica equina, una hormona reproductiva recombinante para aplicaciones reproductivas [3]. Del mismo modo, en otro estudio se utilizaron células COS-1 para producir un anticuerpo monoclonal recombinante polinizado contra un tipo específico de virus de la gripe [4].
  • Producción de partículas virales: Las células COS-1 sirven como huéspedes de empaquetamiento para la producción de lentivirus de alta calidad y pueden utilizarse para generar vacunas virales. En un estudio se utilizó la línea celular COS-1 para producir partículas similares al virus del dengue no infecciosas pero altamente inmunógenas, que son candidatas eficaces para vacunas [5].

4.células COS-1: Publicaciones

Algunas publicaciones destacadas sobre células COS-1 son

Células COS-1 de alta y baja confluencia

5.recursos para la línea celular COS-1, incluidos protocolos, vídeos y mucho más

Protocolos de cultivo celular

  • Cultivo de células COS-1: Este enlace contiene información valiosa sobre la división, congelación y descongelación de células COS-1.
  • Células COS-1: Este enlace contiene información básica sobre la línea celular COS-1.

Protocolos de transfección

He aquí algunas fuentes que describen el método de transfección de células COS-1.

Vídeos relacionados con la línea celular COS-1

Los siguientes recursos de vídeo pueden ayudar a obtener información general sobre el cultivo, mantenimiento y transfección de células COS-1.

6.cultivo de células COS-1

Características

Información

Tiempo de duplicación

Aproximadamente 48 horas

Adherentes o en suspensión

Adherente crece como una monocapa en la superficie del matraz de cultivo

Densidad de siembra

de 2 a 4 x 10^4 células/cm²; las células adherentes se lavan con 1x PBS, se tratan con Accutase, se centrifugan, se resuspenden y se dispensan en un nuevo matraz

Medio de crecimiento

Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) con un 10% de FBS; el medio debe sustituirse de 2 a 3 veces por semana

Condiciones de crecimiento (temperatura, CO2)

Requiere una incubadora humidificada con 5% de CO2 y 37°C de temperatura

Almacenamiento

Por debajo de -150°C de temperatura en la fase de vapor de nitrógeno líquido

Proceso y medio de congelación

Método de congelación lento con una disminución de temperatura de sólo 1 °C utilizando medios CM-1 o CM-ACF

Proceso de descongelación

Descongelar las células congeladas incubándolas en un baño de agua a 37 °C durante 40-60 segundos con agitación rápida. Centrifugar las células para eliminar el medio de congelación, resuspender el precipitado y verterlo en un matraz de cultivo con medio fresco. La adhesión tarda aproximadamente 24 horas.

Nivel de bioseguridad

Se recomienda un nivel de bioseguridad 1 para la manipulación de células COS-1

Esperamos que este artículo le haya proporcionado una amplia información para ayudarle a empezar a trabajar con células COS-1. Por favor, solicítenosla si desea utilizar esta línea celular para su estudio de investigación.

Referencias

  1. Smith, S.L. y T. Shioda, Advantages of COS-1 monkey kidney epithelial cells as packaging host for small-volume production of high-quality recombinant lentiviruses. Journal of virological methods, 2009. 157(1): p. 47-54.
  2. MacKenzie, C.J. y T. Shioda, COS-1Cells as Packaging Host for Production of Lentiviruses. Protocolos actuales en biología celular, 2011. 50(1): p. 26.7. 1-26.7. 15.
  3. Bhardwaj, A., y otros, Expression analysis of recombinant equine chorionic gonadotropin in three host systems: E. coli BL21C, lisado de células de insecto Sf y células de mamífero COS-1. Indian Journal of Animal Research, 2021. 55(1): p. 40-45.
  4. Wang, F., et al., Generation of a recombinant chickenized monoclonal antibody against the neuraminidase of H9N2 avian influenza virus. AMB Express, 2020. 10: p. 1-7.
  5. Galula, J.U., G.-J.J. Chang, y D.-Y. Chao, Producción y purificación de partículas similares al virus del dengue a partir de células COS-1. Bio-protocolo, 2019. 9(12): p. e3280-e3280.

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