Κατανόηση του "αριθμού διέλευσης"
Η έννοια του "αριθμού διέλευσης" είναι κεντρική στην κυτταροκαλλιέργεια και αναφέρεται στον αριθμό των φορών που μια κυτταρική σειρά έχει υποκαλλιεργηθεί ή μεταφερθεί σε νέο μέσο ανάπτυξης μετά την αρχική αναζωογόνηση από την κρυοσυντήρηση ή την παραλαβή της από μια τράπεζα κυττάρων αναφοράς. Αυτή η μέτρηση είναι ζωτικής σημασίας για την παρακολούθηση της γενεαλογίας και του ιστορικού μιας κυτταρικής καλλιέργειας.
Επισκόπηση διαδικασίας
- Στη συνήθη πρακτική της κυτταροκαλλιέργειας, όταν τα κύτταρα επιτυγχάνουν μια ορισμένη πυκνότητα, μεταφέρονται σε νέο μέσο για τη διατήρηση της ανάπτυξης και την αποφυγή της υπερσυγκέντρωσης. Κάθε τέτοια μεταφορά καταγράφεται ως πέρασμα.
- Παραδοσιακά, όταν παραλάβαμε μια κυτταρική σειρά, για παράδειγμα, στο πέρασμα 60 από τον καταθέτη, συνεχίζαμε από αυτόν τον αριθμό περάσματος, αυξάνοντας με κάθε υποκαλλιέργεια. Αυτή η πρακτική, διατηρώντας ένα ιστορικό νήμα, συχνά οδηγούσε σε υψηλούς αριθμούς διέλευσης από την αρχή. Δεδομένης της εκτεταμένης και συχνά δεκαετούς χρήσης ορισμένων κυτταρικών σειρών, όπως η σειρά HeLa που ιδρύθηκε το 1951, δεν είναι εφικτό να προσδιοριστεί ο συνολικός αριθμός των διελεύσεων από την έναρξη της κυτταρικής σειράς.
- Για να βελτιώσουμε τη σαφήνεια και την ποιότητα των διαδικασιών κυτταροκαλλιέργειας, αναθεωρήσαμε αυτή την προσέγγιση στις αρχές του 2023. Τώρα, όταν ξεκινάμε μια καλλιέργεια από ένα νέο φιαλίδιο, ανεξάρτητα από τον αριθμό διέλευσης από τον καταθέτη, μηδενίζουμε και αρχίζουμε να μετράμε εκ νέου από την πρώτη διέλευση για κάθε κατασκευασμένη παρτίδα
Αιτιολόγηση
Η πάσα είναι μια ζωτικής σημασίας διαδικασία για τη διασφάλιση της υγείας και της χρησιμότητας των κυτταρικών καλλιεργειών για την έρευνα. Όταν τα κύτταρα μεγαλώνουν υπερβολικά, υφίστανται αναστολή επαφής, μειώνοντας τον ρυθμό πολλαπλασιασμού τους, γεγονός που μπορεί να επηρεάσει αρνητικά τα πειραματικά αποτελέσματα. Για να μετριάσει αυτά τα ζητήματα, η Cytion εφαρμόζει αυστηρούς ελέγχους στις πυκνότητες κυττάρων στις οποίες γίνεται η υποκαλλιέργεια, διατηρώντας έτσι χαμηλούς αριθμούς διέλευσης κατά την κατασκευή των κυτταρικών σειρών της. Αυτή η προφύλαξη συμβάλλει στην αποφυγή των δυσμενών επιπτώσεων της υπερβολικής παθητικοποίησης, όπως μορφολογικές ανωμαλίες, αλλαγές στο ρυθμό ανάπτυξης και γενετική παρέκκλιση, οι οποίες μπορεί να προκαλέσουν σημαντική διαφορά των κυττάρων από την αρχική τους κατάσταση. Οι παρατεταμένες περίοδοι υποκαλλιέργειας μπορούν επίσης να αυξήσουν τον κίνδυνο μικροβιακής μόλυνσης.
Η υπόσχεσή μας
Διασφαλίζουμε ότι τα κύτταρα που παρέχονται στους ερευνητές είναι όσο το δυνατόν πιο κοντά στην αρχική γενετική σύσταση και τα φαινοτυπικά χαρακτηριστικά, ενισχύοντας την αξιοπιστία των πειραματικών δεδομένων. Επιπλέον, με τη σχολαστική τεκμηρίωση κάθε διέλευσης, η Cytion συμβάλλει στην ιχνηλασιμότητα και την αναπαραγωγιμότητα της έρευνας, μια δέσμευση που αντικατοπτρίζει τα υψηλά πρότυπα πρακτικής στην κυτταροκαλλιέργεια. Οι ερευνητές ενθαρρύνονται να διατηρούν ακριβή αρχεία των αριθμών διέλευσης, τόσο στα δοχεία καλλιέργειας όσο και στα εργαστηριακά τους τετράδια, ως αναφορά για την υγεία και το ιστορικό των κυτταρικών καλλιεργειών τους.