Κύτταρα 4T1 – Βασικές πληροφορίες για την έρευνα και τις εφαρμογές των κυττάρων του καρκίνου του μαστού

Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς 4T1

Η κυτταρική σειρά καρκίνου του μαστού 4T1 προσφέρει εκτεταμένες ερευνητικές εφαρμογές στον τομέα της βιοϊατρικής. Για την καλλιέργεια αυτών των κυττάρων, θα πρέπει να λάβετε υπόψη τα ακόλουθα βασικά σημεία που περιγράφουν: τι είναι ο χρόνος διπλασιασμού του 4T1; Πώς καλλιεργούνται τα κύτταρα 4T1; Ποια είναι η πυκνότητα σποράς κυττάρων για το 4T1;

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων 4T1

Χρόνος διπλασιασμού:

Ο μέσος χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού που έχει αναφερθεί για τα κύτταρα καρκίνου του μαστού 4T1 είναι 14 ώρες.

Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:

Το 4T1 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.

Αναλογία υποκαλλιέργειας:

Συνιστάται αναλογία διαίρεσης 1:6 και 1:8 για τη σειρά κυττάρων τριπλά αρνητικού καρκίνου του μαστού 4T1. Για τη διαίρεση, τα κύτταρα ξεπλένονται με PBS και επωάζονται με το ένζυμο Accutase για 8 έως 10 λεπτά. Τα αποσυνδεδεμένα κύτταρα συλλέγονται μέσω φυγοκέντρησης και επαναδιαλύονται σε φρέσκο μέσο. Τα επαναδιαλυμένα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη για ανάπτυξη.

Μέσο ανάπτυξης:

Για την καλλιέργεια των κυττάρων 4T1 χρησιμοποιείται μέσο RPMI 1640. Για την ιδανική ανάπτυξη των κυττάρων, προστίθενται στο μέσο καλλιέργειας 10% εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS), 2,0 g/L NaHCO3 και 2,1 mM σταθερή γλουταμίνη.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Τα καρκινικά κύτταρα 4T1 διατηρούνται σε υγραντικό επωαστήρα στους 37 °C με παροχή 5% CO₂.

Αποθήκευση: 

Τα κύτταρα 4T1 πρέπει να αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C, π.χ. σε ηλεκτρικό καταψύκτη ή σε ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου, για τη διατήρηση της βιωσιμότητας των κυττάρων.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Για τη σειρά κυττάρων 4T1 συνιστάται η χρήση CM-1 ή CM-ACF. Προτιμάται η μέθοδος αργής κατάψυξης, καθώς προστατεύει τη βιωσιμότητα των κυττάρων επιτρέποντας μια σταδιακή πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C.

Διαδικασία απόψυξης:

Το φιαλίδιο με τα κατεψυγμένα κύτταρα διατηρείται σε υδατόλουτρο στους 37 °C για λίγα δευτερόλεπτα, έως ότου τα κύτταρα αποψυχθούν και απομείνει μόνο ένας μικρός σβώλος πάγου. Τα κύτταρα αυτά επαναδιαλύονται στο φρέσκο μέσο και μεταφέρονται στη φιάλη για καλλιέργεια. Μετά από 24 ώρες επώασης, το μέσο αντικαθίσταται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Για την καλλιέργεια κυττάρων καρκίνου του μαστού 4T1 συνιστάται εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1.

Κυτταρική σειρά T1: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα

Αυτό το τμήμα του άρθρου θα καλύψει τα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με το μεταστατικό μοντέλο 4T1.

Πλεονεκτήματα

Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς 4T1 είναι:

• Ογκογένεση:

  Η 4T1 είναι μια κυτταρική σειρά με υψηλή ογκογένεση. Αυτά τα κύτταρα έχουν την ικανότητα να σχηματίζουν ένα συγγενικό μοντέλο ποντικού 4T1 για τη μελέτη του καρκίνου του μαστού όταν εγχέονται σε ποντίκι. Επομένως, το μοντέλο 4T1 χρησιμοποιείται ιδανικά για τη μελέτη της ανάπτυξης, της αύξησης και της μετάστασης του όγκου. Επιπλέον, είναι χρήσιμο για τον έλεγχο και την αξιολόγηση θεραπευτικών φαρμάκων.

• Μοντέλο μεταστάσεων in vitro:

  Το μοντέλο 4T1 έχει μια φυσική τάση μετάστασης που επιτρέπει στους ερευνητές να διερευνήσουν αποτελεσματικά τους υποκείμενους μηχανισμούς και τις οδούς που εμπλέκονται στη διαδικασία της μετάστασης. Επιπλέον, τα κύτταρα 4T1 είναι ανθεκτικά στη 6-θειογουανίνη. Αυτό βοηθά στην αποτελεσματική ανίχνευση μικρομεταστατικών κυττάρων με βελτιωμένη ακρίβεια σε σύγκριση με άλλα μοντέλα, καθώς εξαλείφει την ανάγκη ζύγισης των οργάνων-στόχων και μέτρησης των οζιδίων.

Μειονεκτήματα

Το μειονέκτημα που σχετίζεται με τη κυτταρική σειρά 4T1 είναι:

• Επιθετικότητα/ταχύς ρυθμός ανάπτυξης:

  Η κυτταρική σειρά 4T1 είναι μια εξαιρετικά επιθετική κυτταρική σειρά τριπλά αρνητικού καρκίνου του μαστού. Λόγω του ταχέως ρυθμού ανάπτυξης, η χρήση αυτής της κυτταρικής σειράς σε μακροχρόνια πειράματα και ο έλεγχος των πειραματικών μεταβλητών καθίστανται δύσκολα.

Αγοράστε τη κυτταρική σειρά 4T1: Μοντέλο υψηλής ποιότητας για τον καρκίνο του μαστού

Κυτταρική σειρά 4T1: Εφαρμογές στην έρευνα για τον καρκίνο

Η κυτταρική σειρά του μοντέλου ποντικού 4T1 αποτελεί ένα πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου και την αξιολόγηση νέων θεραπειών. Οι κύριες εφαρμογές των κυττάρων 4T1 παρατίθενται εδώ:

Βιολογία του καρκίνου

Η κυτταρική σειρά 4T1 χρησιμοποιείται ευρέως για τη μελέτη της ανάπτυξης και της εξάπλωσης του καρκίνου. Αποτελεί ένα ιδανικό in vitro μοντέλο για τη διερεύνηση και την εξερεύνηση διαφορετικών κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που εμπλέκονται στην εξέλιξη του όγκου και στη μετάσταση. Επιπλέον, μπορεί να αποκαλύψει τον ρόλο των οδών κυτταρικής σηματοδότησης, του μικροπεριβάλλοντος και της γονιδιακής έκφρασης σε αυτές τις διαδικασίες. Έρευνα που διεξήχθη το 2019 χρησιμοποίησε κύτταρα 4T1 για να ανακαλύψει τους μηχανισμούς που οδηγούν στην εισβολή και τη μετανάστευση των καρκινικών κυττάρων. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι εμπλέκονται τα γονίδια STAT3, MMP2 και MMP9, και ότι η αναστολή αυτών των γονιδίων μπορεί να περιορίσει σημαντικά τη μετανάστευση και την εισβολή των καρκινικών κυττάρων [4]. Παρόμοιες μελέτες έχουν επίσης υποδείξει διάφορες άλλες οδούς σηματοδότησης που εμπλέκονται στην ανάπτυξη του όγκου και στη μετάσταση.

Επιπλέον, το μοντέλο 4T1 είναι καθοριστικό για την κατανόηση του μικροπεριβάλλοντος του καρκίνου του μαστού, συμπεριλαμβανομένης της διήθησης των ανοσοκυττάρων και της ανάπτυξης του πρωτογενούς όγκου. Μελέτες που εστιάζουν στο μικροπεριβάλλον του όγκου 4T1 έχουν προσφέρει σημαντικές πληροφορίες σχετικά με τον ρόλο των ανοσοκυττάρων και των κυτοκινών, όπως η έκφραση του CXCL13, στην εξέλιξη του όγκου. Το μοντέλο βοηθά επίσης στη διερεύνηση των μεταστατικών θυλάκων και της μετάστασης του όγκου, ιδιαίτερα στον καρκίνο του μαστού σε προχωρημένο στάδιο, όπου επικρατεί η αποικιοποίηση του καρκινώματος του μαστού.

Έρευνα για τη θεραπεία του καρκίνου

Η κυτταρική σειρά 4T1 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τη θεραπεία του καρκίνου για τον έλεγχο και την αξιολόγηση νέων θεραπειών. Μια μελέτη διερεύνησε το κυτταροτοξικό δυναμικό των πράσινων συνθετικών νανοσωματιδίων σιδήρου από εκχύλισμα δενδρολίβανου (Rosemary-FeNPs) και του καθαρού εκχυλίσματος δενδρολίβανου στην κυτταρική σειρά 4T1. Τα ευρήματα της έρευνας έδειξαν ότι τα Rosemary-FeNPs είναι πιο ελπιδοφόρα από το καθαρό εκχύλισμα [5]. Παρομοίως, μια μελέτη που διεξήχθη το 2021 εξέτασε το αντικαρκινικό δυναμικό του εκχυλίσματος τζίντζερ σε κύτταρα καρκίνου του μαστού 4T1 και σε ένα μοντέλο ποντικιών 4T1 [6].

Εκτός από τα φυσικά εκχυλίσματα, η κυτταρική σειρά 4T1 χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας παραδοσιακών χημειοθεραπευτικών παραγόντων. Για παράδειγμα, έρευνα που αφορούσε τον συνδυασμό της σισπλατίνης με άλλες θεραπείες έδειξε αυξημένο θάνατο καρκινικών κυττάρων και μειωμένη εξέλιξη του όγκου στο μοντέλο 4T1. Η εισαγωγή της λουσιφεράσης πυγολαμπίδας στα κύτταρα 4T1 έχει επιτρέψει την απεικόνιση σε πραγματικό χρόνο της ανάπτυξης του όγκου και του μεταστατικού φαινοτύπου, διευκολύνοντας την αξιολόγηση του αντίκτυπου διαφόρων θεραπειών.

Επιπλέον, η αντοχή της κυτταρικής σειράς 4T1 στη 6-θειογουανίνη έχει διευκολύνει τις μελέτες σχετικά με τα μικρομεταστατικά κύτταρα, βελτιώνοντας την ανίχνευση και την ανάλυση της μετάστασης. Αυτή η κυτταρική σειρά διαδραματίζει επίσης κρίσιμο ρόλο στη μελέτη της αντικαρκινικής ανοσίας και των επιδράσεων της ανοσοθεραπείας, ιδίως στο πλαίσιο ορθοτοπικών μοντέλων ποντικών, όπου οι ερευνητές μπορούν να μιμηθούν πιστά τους καρκίνους του ανθρώπου.

Συνολικά, η κυτταρική σειρά 4T1 παραμένει ένα απαραίτητο εργαλείο στην ογκολογική έρευνα, από την κατανόηση των θεμελιωδών μηχανισμών της βιολογίας του καρκίνου έως την ανάπτυξη και τη δοκιμή νέων θεραπευτικών στρατηγικών.

Κύτταρα 4T1: Ερευνητικές δημοσιεύσεις

Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει μερικές ενδιαφέρουσες και πιο συχνά αναφερόμενες δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα 4T1.

Πιθανή αντιπολλαπλασιαστική δράση των AgNPs που συντέθηκαν χρησιμοποιώντας M. longifolia στη κυτταρική σειρά 4T1 μέσω της παραγωγής ROS και της βλάβης της κυτταρικής μεμβράνης

Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε το 2018 στο Journal of Photochemistry and Photobiology. Η έρευνα πρότεινε ότι τα νανοσωματίδια αργύρου που συντέθηκαν από Madhuca longifolia ασκούν αντιπολλαπλασιαστική δράση στα καρκινικά κύτταρα 4T1 μέσω της αποικοδόμησης του κυτταρικού τοιχώματος και της παραγωγής ROS.

Η κυτταροτοξικότητα και οι αποπτωτικές επιδράσεις της βερβασκοσίδης στη σειρά κυττάρων 4T1 του καρκίνου του μαστού

Αυτή η μελέτη στο περιοδικό BMC Pharmacology and Toxicology (2021) πρότεινε ότι η βερβασκοσίδη, μια φυσική ένωση, προκάλεσε αποπτωτικές επιδράσεις σε κύτταρα καρκίνου του μαστού 4T1 μέσω της σηματοδότησης TLR4.

Η ευπατορίνη ανέστειλε την εξέλιξη του όγκου και ενίσχυσε την ανοσία σε ένα μοντέλο καρκίνου του μαστού 4T1 σε ποντίκια

Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε στο Integrative Cancer Therapies το 2020. Η μελέτη αυτή χρησιμοποίησε κύτταρα 4T1 για την ανάπτυξη ενός συγγενικού μοντέλου ποντικού 4T1 και διερεύνησε το αντικαρκινικό δυναμικό της ευπατορίνης χρησιμοποιώντας το. Η ευπατορίνη καθυστέρησε την ανάπτυξη του όγκου στο μοντέλο ποντικού 4T1.

Ανασταλτική δράση του εκχυλίσματος Viola odorata στην ανάπτυξη του όγκου και τη μετάσταση σε μοντέλο καρκίνου του μαστού 4T1

Αυτή η έρευνα, που δημοσιεύθηκε στο Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), πρότεινε ότι ένα φαρμακευτικό βότανο, η Viola odorata, έχει πιθανές κυτταροτοξικές επιδράσεις στα κύτταρα 4T1.

Τα στερεά λιπιδικά νανοσωματίδια φορτωμένα με δοκεταξέλη εμποδίζουν την ανάπτυξη του όγκου και τη μεταστατική εξάπλωση στους πνεύμονες των κυττάρων του καρκίνου του μαστού 4T1 σε ποντίκια

Η μελέτη αυτή πρότεινε ότι τα στερεά λιπιδικά νανοσωματίδια φορτωμένα με δοκεταξέλη (DTX-loaded SLNs) μπορούν να αποτελέσουν ένα πολλά υποσχόμενο φάρμακο για τη θεραπεία του καρκίνου του μαστού και την πρόληψη της μετάστασης, καθώς περιορίζουν την ανάπτυξη του καρκίνου και την πνευμονική μετάσταση των κυττάρων 4T1.

Πηγές για τη σειρά κυττάρων 4T1: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Ακολουθούν μερικοί πόροι σχετικά με τα κύτταρα 4T1:

• Εκπαιδευτικό βίντεο για τη μεταμόλυνση 4T1: Αυτό το βίντεο είναι ένας αναλυτικός οδηγός για τη διεξαγωγή της μεταμόλυνσης της κυτταρικής σειράς 4T1.
• Υποκαλλιέργεια κυτταρικής σειράς: Αυτό το βίντεο εξηγεί το πρωτόκολλο υποκαλλιέργειας για προσκολλητικές κυτταρικές σειρές.

Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο κυτταρικής καλλιέργειας για τα κύτταρα 4T1:

• Κυτταρική σειρά 4T1: Αυτός ο σύνδεσμος ιστότοπου περιέχει όλες τις χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τον χειρισμό καλλιεργειών 4T1. Περιλαμβάνει πληροφορίες για τα μέσα καλλιέργειας, πρωτόκολλα χειρισμού για κρυοσυντηρημένες καλλιέργειες και πολλαπλασιαζόμενες καλλιέργειες.

Συχνές ερωτήσεις σχετικά με την κυτταρική γραμμή 4T1

Βιβλιογραφία

1. Pulaski, B.A. και S. Ostrand-Rosenberg, Μοντέλο όγκου μαστού 4T1 σε ποντίκια. Curr Protoc Immunol, 2001. Κεφάλαιο 20: σ. Ενότητα 20.2.
2. Maxwell, K.G., Ανοσορρύθμιση των καρκινικών κυττάρων του μαστού για εμβολιασμό ολόκληρου του όγκου. 2016.
3. Walker, I., et al., Οι όγκοι του μαστού προκαλούν κεντρική έκφραση προφλεγμονωδών κυτοκινών, αλλά όχι συμπεριφορικές διαταραχές σε ποντίκια Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): σ. 1-13.
4. Li, Y., et al., Η αναστολή της οδού σηματοδότησης Stat3 από το φυσικό προϊόν πτεκολιναριγενίνη μετριάζει τη μετάσταση του καρκίνου του μαστού. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: σ. 1195.
5. Farshchi, H.K., et al., Πράσινη σύνθεση νανοσωματιδίων σιδήρου με εκχύλισμα δενδρολίβανου και αξιολόγηση της κυτταροτοξικής δράσης σε καρκινικές κυτταρικές σειρές. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: σ. 54-62.
6. Gholizadeh, A.P., et al., Επίδραση του εκχυλίσματος τζίντζερ στη σειρά καρκινικών κυττάρων μαστού 4T1 σε ποντίκια Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): σ. 43-49.