Κύτταρα U87MG - Έρευνα για το γλοιοβλάστωμα με χρήση U87MG και ο αντίκτυπός της στις μελέτες για τον καρκίνο του εγκεφάλου
ΗU-87 MG, η ανθρώπινη πρωτογενής κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος, χρησιμοποιείται ευρέως στη βιολογική έρευνα. Ειδικότερα, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται στους τομείς των νευροεπιστημών και της ανοσο-ογκολογίας.
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση της κυτταρικής σειράς U-87 MG
Στην παρούσα ενότητα θα εξεταστούν η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς U87. Θα μάθετε Τι είναι τα κύτταρα U-87 MG Από πού προέρχονται τα κύτταρα U87 Ποια είναι η πλήρης μορφή της U-87 MG Πόσο μεγάλα είναι τα κύτταρα U87 Ποια είναι η μορφολογία της κυτταρικής σειράς U87
- Η κυτταρική σειρά U87 είναι μια κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος, αστροκυττώματος. Δημιουργήθηκε το 1966 στο Πανεπιστήμιο της Ουψάλα. Τα κύτταρα ελήφθησαν από έναν 44χρονο Καυκάσιο άνδρα που έπασχε από τη νόσο του γλοιοβλαστώματος. Αυτή η κυτταρική σειρά ονομάζεται επίσημα U 87 MG, που σημαίνει Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Τα κύτταρα U 87 MG αντιπροσωπεύουν μορφολογία που μοιάζει με επιθηλιακά κύτταρα.
- Το μέγεθος των κυττάρων U 87 MG κυμαίνεται μεταξύ 12 και 14 μm σε διάμετρο.
- Αυτή η ανθρώπινη κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος είναι υποδιπλοειδής και διαθέτει έναν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 44 σε ποσοστό περίπου 48% του κυτταρικού πληθυσμού. Ωστόσο, υπάρχουν και υψηλότερες πλουδίες στο 5,9% του κυτταρικού πληθυσμού.
Πληροφορίες καλλιέργειας κυττάρων U-87 MG
Πριν εργαστείτε με κύτταρα U 87 MG, θα πρέπει να μάθετε τα ακόλουθα βασικά σημεία για την καλλιέργεια αυτών των κυττάρων γλοιοβλαστώματος. Ειδικότερα, θα πρέπει να γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού των κυττάρων U 87 MG Ποιο μέσο χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια των κυττάρων U87 Ποια είναι η πυκνότητα σποράς της κυτταρικής σειράς U 87 MG
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων U-87 MG
|
Χρόνος διπλασιασμού πληθυσμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού των κυττάρων U 87 MG κυμαίνεται από 18-38 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Η U 87 MG είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά. Τα κύτταρα έχουν επίμηκες σχήμα και αναπτύσσονται ως μονοστρώματα. |
|
Πυκνότητα σποράς: |
Η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος U 87 MG συνιστάται για σπορά σε πυκνότητα κυττάρων 1 x104 κύτταρα/cm2. Τα προσκολλημένα κύτταρα U87 πλένονται με 1 x PBS και επωάζονται με διάλυμα Accutase. Στη συνέχεια, τα διαχωρισμένα κύτταρα φυγοκεντρίζονται και ανακτώνται. Τα κύτταρα ανασυσσωματώνονται προσεκτικά και προστίθενται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Η κυτταρική σειρά U 87 MG καλλιεργείται σε EMEM (Eagle's minimal essential medium) ενισχυμένο με 1,0 g/L L-γλυκόζη, 2,0 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM πυρουβικό νάτριο και 10% διάλυμα FBS. Το μέσο θα πρέπει να ανανεώνεται κάθε 2 έως 3 ημέρες. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Τα κύτταρα U-87 MG απαιτούν υγρό επωαστήρα με παροχή 5% CO2 και θερμοκρασία 37°C για βέλτιστη ανάπτυξη. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κύτταρα U87 διατηρούνται είτε σε φάση ατμών υγρού αζώτου είτε σε θερμοκρασία κάτω των -150°C για τη διατήρηση της μέγιστης βιωσιμότητας των κυττάρων γλοιοβλαστώματος. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF είναι κατάλληλα για την κατάψυξη των κυττάρων U 87 MG. Συνιστάται μια αργή διαδικασία κατάψυξης, καθώς αποτρέπει τα κύτταρα από οποιοδήποτε σοκ και προστατεύει τη βιωσιμότητα των κυττάρων. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα φιαλίδια της κυτταρικής σειράς U-87 MG αποψύχονται σε υδατόλουτρο 37°C. Τα κύτταρα προστίθενται με θρεπτικό υλικό ανάπτυξης, αναδιαλύονται και διανέμονται για καλλιέργεια σε νέες φιάλες. Σε αντίθεση με αυτό, τα κύτταρα U87 μπορούν να φυγοκεντρηθούν για την απομάκρυνση του μέσου κατάψυξης και στη συνέχεια να καλλιεργηθούν. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Απαιτείται επίπεδο βιοασφάλειας 1 για το χειρισμό καλλιεργειών κυττάρων U 87 MG. |
Πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα των κυψελών U-87 MG
Όταν σκεφτόμαστε μια κυτταρική σειρά, το πρώτο πράγμα που μας έρχεται στο μυαλό είναι: Ποια είναι τα πλεονεκτήματα της χρήσης κυττάρων U-87 MG Ποια είναι τα μειονεκτήματα των κυττάρων U87
Πλεονεκτήματα
Οι κυτταρικές σειρές U 87 MG χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα. Μερικά πλεονεκτήματα που σχετίζονται με αυτή την κυτταρική γραμμή είναι τα εξής:
Πλεονεκτήματα
- Εύκολη ανάπτυξη: U 87 MG είναι εύκολο να διατηρηθούν σε καλλιέργεια. Δεν απαιτούν περίπλοκες ή περίπλοκες απαιτήσεις καλλιέργειας κυττάρων
- Ομοιογένεια: Η U-87 MG είναι μια ομοιογενής κυτταρική σειρά. Τα περισσότερα κύτταρα σε έναν πληθυσμό διαθέτουν την ίδια γενετική σύνθεση και, συνεπώς, μοιράζονται παρόμοια χαρακτηριστικά. Τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται για τη μελέτη κυτταρικών διεργασιών, τον έλεγχο φαρμάκων και τις δοκιμές
- Καλά χαρακτηρισμένες: Αυτή η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος είναι καλά χαρακτηρισμένη ως προς τα χαρακτηριστικά ανάπτυξης, τη μορφολογία και τη γονιδιακή έκφραση, γεγονός που την καθιστά πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο
Μειονεκτήματα
- Περιορισμένη δυνατότητα εφαρμογής: Η U 87 MG είναι μια κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος, επομένως οι εφαρμογές της περιορίζονται κυρίως στη μελέτη των γλοιοβλαστωμάτων και των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών. Μπορεί να μην είναι κατάλληλη για τη διερεύνηση άλλων τύπων καρκίνου.
Ερευνητικές εφαρμογές με κύτταρα U-87 MG
Η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος U87 MG χρησιμοποιείται εκτενώς σε μελέτες καρκίνου, ιδίως στην έρευνα του γλοιοβλαστώματος. Ορισμένες από τις ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων U 87 MG είναι:
- Έρευνα βιολογίας του καρκίνου: Η κυτταρική σειρά U87 χρησιμοποιείται για τη μελέτη της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου, των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών, των μονοπατιών σηματοδότησης και του μικροπεριβάλλοντος του όγκου. Μια μελέτη που δημοσιεύθηκε το 2020 χρησιμοποίησε ένα in vitro μοντέλο γλοιοβλαστώματος, την κυτταρική σειρά U-87 MG, για τη διερεύνηση του γονιδίου BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) ως θεραπευτικού στόχου. Τα ευρήματα έδειξαν ότι το γονίδιο BMAL1 αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων γλοιοβλαστώματος καταστέλλοντας την έκφραση των γονιδίων κυκλίνης B1, μεταλλοπρωτεϊνάσης-9 και phospho-AKT [1]. Μια άλλη έρευνα που πραγματοποιήθηκε το 2019 χρησιμοποίησε τη σειρά κυττάρων U87 και διερεύνησε ότι η μειωμένη έκφραση του μεταγραφικού παράγοντα Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha (LITAF) μπορεί να ενισχύσει την ακτινοευαισθησία των κυττάρων γλοιώματος μέσω της ρύθμισης του μονοπατιού FOXO-1. Ο LITAF είναι επίσης γνωστός ως γονίδιο 7 που προκαλείται από το p53 (PIG7) [2].
- Ανακάλυψη και ανάπτυξη φαρμάκων: Τα κύτταρα U-87 MG μπορούν να χρησιμοποιηθούν για σκοπούς διαλογής και δοκιμής φαρμάκων, επιτρέποντας στους ερευνητές να εντοπίσουν νέα δυνητικά αντικαρκινικά φάρμακα και να αξιολογήσουν την αποτελεσματικότητα και την τοξικότητά τους. Ως έρευνα χρησιμοποιήθηκε η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος U 87 MG για την αξιολόγηση του αντικαρκινικού και αντιοξειδωτικού δυναμικού των αντιοξειδωτικών και αντικαρκινικών δράσεων του εκχυλίσματος Inula helenium (L.) [3]. Ομοίως, σε άλλη δημοσίευση αναφέρεται η χρήση της κυτταρικής σειράς U87 για τη δοκιμή της κυτταροτοξικής και αποπτωτικής δράσης των φυτικών εκχυλισμάτων [4]. Επιπλέον, σε έρευνα που δημοσιεύθηκε το 2018, μελετήθηκε η κυτταροτοξική δράση των σεσκιτερπενικών αλκαλοειδών που εξάγονται από τα φυτά Nuphar σε ευαίσθητες και ανθεκτικές στα φάρμακα κυτταρικές σειρές U 87 MG [5].
Παραγγείλτε τη γραμμή κυττάρων γλοιώματος U87 MG σήμερα
Κυτταρική σειρά U-87 MG: -88: Ερευνητικές Δημοσιεύσεις
Ακολουθούν ορισμένες εξέχουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις που χαρακτηρίζουν την κυτταρική γραμμή U 87 MG.
Αυτό το άρθρο που δημοσιεύθηκε στο Neuroreport 2018 πρότεινε ότι η υποξία θα μπορούσε να αυξήσει τη μετανάστευση και την εισβολή των ανθρώπινων κυττάρων γλοιοβλαστώματος μέσω της ρύθμισης του σηματοδοτικού μονοπατιού PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Η μελέτη αυτή δημοσιεύεται στο Frontiers in Pharmacology το 2020. Τα ευρήματα της έρευνας αναφέρουν ότι ένα φλαβονοειδές, η εριοδικτυόλη, ασκεί αντικαρκινική δράση στην κυτταρική σειρά U87 και καταστέλλει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και τη μετάσταση. Η ένωση μεσολαβεί στις αντικαρκινικές της ιδιότητες μέσω της διαμόρφωσης του μονοπατιού PI3K/Akt/NF-κΒ.
Αυτή η έρευνα στο Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) υποδηλώνει ότι μια κινεζική φυτική φόρμουλα που ονομάζεται χάπι Xihuang μπορεί να επάγει την απόπτωση σε κύτταρα U87 μέσω της στόχευσης του ROS-ενεργοποιημένου καταρράκτη Akt/mTOR/FOXO1.
Το LITAF ενισχύει την ακτινοευαισθησία των ανθρώπινων κυττάρων γλοιώματος μέσω του μονοπατιού FoxO1
Αυτή η ερευνητική εργασία δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Cellular and Molecular Neurobiology το 2019. Η μελέτη πρότεινε ότι ένας μεταγραφικός παράγοντας, ο LITAF, ρυθμίζει προς τα κάτω και ενισχύει την ακτινοευαισθησία των κυττάρων γλοιώματος μέσω της ρύθμισης του σηματοδοτικού μονοπατιού FOXO-1.
Το άρθρο αυτό δημοσιεύθηκε στο Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Οι ερευνητές χρησιμοποίησαν κύτταρα U 87 MG για να διερευνήσουν την κυτταροτοξική δράση νανοσωματιδίων PLGA φορτωμένων με κουρκουμίνη.
Πηγές για τα κύτταρα U-87 MG: Μ-87: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος U87MG χρησιμοποιείται σε πολλά ερευνητικά εργαστήρια για τον καρκίνο. Μερικοί πόροι που χαρακτηρίζουν αυτή την κυτταρική σειρά είναι οι ακόλουθοι:
- Διαμόλυνση της κυτταρικής σειράς U87: Αυτό το έγγραφο θα σας περιγράψει ένα πρωτόκολλο διαμόλυνσης για τα κύτταρα U 87 MG.
- Μεταμόλυνση της κυτταρικής σειράς U 87 MG: Αυτό το βίντεο είναι ένα σεμινάριο που εξηγεί βήμα προς βήμα το πρωτόκολλο διαμόλυνσης των κυττάρων U87.
Η πηγή για το πρωτόκολλο κυτταροκαλλιέργειας των κυττάρων U87 παρατίθεται παρακάτω:
- Κύτταρα U87 MG: Αυτός ο σύνδεσμος περιέχει βασικές πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά U 87 MG. Περιλαμβάνει σύντομα πρωτόκολλα διαχωρισμού κυττάρων, κατάψυξης και απόψυξης κυττάρων.
Εισαγωγές στην έρευνα για το γλοίωμα U87 MG: Glilima: Συχνές ερωτήσεις
Αναφορές
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 Suppresses Proliferation, Migration, and Invasion of U87MG Cells by Downregulating Cyclin B1, Phospho-AKT, and Metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., αντιοξειδωτικές και αντικαρκινικές δράσεις του εκχυλίσματος του Inula helenium (L.) στην ανθρώπινη κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicity of sesquiterpene alkaloids from Nuphar plants towards sensitive and drug-resistant cell lines. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.