Κύτταρα SiHa - ρίχνοντας φως στην έρευνα για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας
Τα κύτταραSiHa είναι κύτταρα καρκίνου του τραχήλου της μήτρας που χρησιμοποιούνται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα. Είναι εξαιρετικοί ξενιστές διαμόλυνσης και, ως εκ τούτου, είναι κατάλληλα για μελέτες γονιδιακής έκφρασης. Λόγω της ανθρώπινης προέλευσής τους και της συνάφειας με τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται κυρίως σε μελέτες βιολογίας του καρκίνου, ιολογίας και ανάπτυξης φαρμάκων.
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων SiHa
Η κατανόηση της προέλευσης και των γενικών χαρακτηριστικών μιας κυτταρικής σειράς είναι ζωτικής σημασίας, καθώς επηρεάζει τη χρήση της στο πλαίσιο της έρευνάς σας. Σε αυτή την ενότητα του άρθρου, θα μάθετε για την προέλευση της κυτταρικής σειράς SiHa, τα διακριτικά χαρακτηριστικά και πολλά άλλα: Τι είναι η καρκινική κυτταρική σειρά SiHa Τι είναι τα κύτταρα SiHa HPV Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς SiHa Ποια είναι η μορφολογία της SiHa
- Η SiHa, η κυτταρική σειρά καρκινώματος του τραχήλου της μήτρας, προήλθε από θραύσματα μιας πρωτογενούς βιοψίας μήτρας μιας γυναίκας από την Ασία (55 ετών) με καρκίνο πλακώδους κυττάρου [1].
- Η κυτταρική σειρά SiHa εμφανίζει υπερτριπλοειδή καρυότυπο. Τα περισσότερα κύτταρα έχουν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων μεταξύ 69 και 72. Ωστόσο, περίπου το 24% των κυττάρων διαθέτει έναν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 71.
- Τα κύτταρα SiHa είναι θετικά στον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων 16. Παρουσιάζουν ενσωμάτωση περίπου 1 έως 2 αντιγράφων του γονιδιώματος του HPV ανά κύτταρο [2].
- Αυτά τα καρκινικά κύτταρα του τραχήλου της μήτρας παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία.
Κυτταρική σειρά SiHa: Πληροφορίες καλλιέργειας
Η διατήρηση της καλλιέργειας μιας κυτταρικής γραμμής δεν είναι εύκολη αν δεν γνωρίζετε όλα τα βασικά σημεία για την καλλιέργειά της. Θα πρέπει να γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της SiHa Τι είναι το μέσο κυτταρικής σειράς SiHa Πώς καλλιεργείτε την κυτταρική σειρά SiHa
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια των κυττάρων SiHa
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων SiHa είναι περίπου 17 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Η SiHa είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά. |
|
Αναλογία υποκαλλιέργειας: |
Η αναλογία υποκαλλιέργειας για τα κύτταρα SiHa είναι 1:2 έως 1:4. Για τη διέλευση, και τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1x PBS. Προστίθεται διάλυμα Accutase και τα κύτταρα επωάζονται για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Στη συνέχεια, προστίθεται μέσο καλλιέργειας και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και τα κύτταρα χύνεται στη νέα φιάλη για καλλιέργεια. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Για την ιδανική ανάπτυξη των κυττάρων SiHa χρησιμοποιείται το ελάχιστο απαραίτητο μέσο του Eagle (EMEM) που περιέχει 10% FBS, 2 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3 και Earle's Balanced Salt Solution (EBSS). Το μέσο αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Τα κύτταρα SiHa διατηρούνται σε επωαστικό κλίβανο με υγρασία 37°C και παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κατεψυγμένα φιαλίδια της κυτταρικής σειράς SiHa του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150°C σε ηλεκτρικό καταψύκτη ή στη φάση ατμών υγρού αζώτου για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Για την κατάψυξη των κυττάρων SiHa χρησιμοποιείται το μέσο κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Η κατάψυξη των κυττάρων γίνεται με τη μέθοδο της αργής κατάψυξης που επιτρέπει μείωση μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα διατηρούνται για 40 έως 60 δευτερόλεπτα σε υδατόλουτρο 37 °C έως ότου απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Στη συνέχεια, προστίθεται φρέσκο μέσο ανάπτυξης και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το κυτταρικό σφαιρίδιο ανασυσσωματώνεται και τα κύτταρα διανέμονται σε φιάλη καλλιέργειας για ανάπτυξη. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Απαιτείται εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1 για το χειρισμό και τη συντήρηση των κυτταρικών καλλιεργειών SiHa. |
Πλεονεκτήματα & Μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς SiHa
Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές ανθρώπινου καρκινώματος, η SiHa διαθέτει επίσης ορισμένα διακριτά χαρακτηριστικά που συνδέονται με ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Στο παρόν, συζητήσαμε μερικά σημαντικά από αυτά.
Πλεονεκτήματα της κυτταρικής γραμμής SiHa για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας
- Μοντέλο καρκίνου του τραχήλου της μήτρας
- Προέρχεται από πλακώδες καρκίνωμα του τραχήλου της μήτρας.
- Χρησιμοποιείται για τη μελέτη των μηχανισμών, της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας.
- Εκφράζει τα γονίδια p53+ και pRB+ τα οποία σχετίζονται με την επιδιόρθωση του DNA, τη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου και την καταστολή του όγκου.
- Ογκογόνο δυναμικό
- Τα κύτταρα SiHa είναι καρκινικά και μπορούν να προκαλέσουν κακώς διαφοροποιημένους επιδερμοειδείς όγκους βαθμού ΙΙΙ σε γυμνά ποντίκια.
- Χρησιμοποιούνται για την in vivo έρευνα του καρκίνου και τη δοκιμή αντικαρκινικών θεραπειών.
Μειονεκτήματα των κυττάρων SiHa
- Ρυθμός πολλαπλασιασμού
- Τα κύτταρα SiHa πολλαπλασιάζονται γρήγορα, οδηγώντας σε υπερανάπτυξη.
- Απαιτεί συχνή διαιώνιση, αυξάνοντας τον κίνδυνο γενετικής αστάθειας, η οποία μπορεί να επηρεάσει τη συμπεριφορά των κυττάρων με την πάροδο του χρόνου.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων SiHa
Η κυτταρική σειρά SiHa χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας. Μερικές συγκεκριμένες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς συζητούνται εδώ.
- Μελέτες σχετικές με τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων (HPV): Συνεπώς, αποτελούν πολύτιμες οντότητες για τη μελέτη της λοίμωξης από τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων, των μοριακών μηχανισμών του και του ρόλου του στην ανάπτυξη και την εξέλιξη του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν επίσης αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν τον ιικό πολλαπλασιασμό, την ενσωμάτωση και τον αντίκτυπό του στις διεργασίες των κυττάρων ξενιστών. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 χρησιμοποίησε την κυτταρική σειρά SiHa για να εξετάσει τον ρόλο των ογκοπρωτεϊνών HPV E6/E7 στην ανάπτυξη του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας, στοχεύοντάς την με την τεχνολογία CRISPR. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι η απενεργοποίηση των γονιδίων E6/E7 προκάλεσε αναστολή της ανάπτυξης των κυττάρων SiHa και απόπτωση. Ως εκ τούτου, αυτά τα ιικά γονίδια μπορούν να χρησιμεύσουν ως κρίσιμοι φαρμακευτικοί στόχοι για την ανάπτυξη θεραπειών κατά του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας που σχετίζεται με τον HPV [3].
- Βιολογία του καρκίνου: Τα κύτταρα SiHa χρησιμεύουν ως ανεκτίμητο μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης, της εξέλιξης, της μετάστασης και της εισβολής του καρκίνου. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν τις γενετικές μεταλλάξεις και τα υποκείμενα μοριακά μονοπάτια που συμβάλλουν στην ανάπτυξη και την αύξηση του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας, όπως, για παράδειγμα, μια μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα SiHa και διαπίστωσε ότι η ρυθμισμένη SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) ενθαρρύνει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας μέσω της ενεργοποίησης του καταρράκτη MAPK [4].
- Έλεγχος και δοκιμή φαρμάκων: Η SiHa είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη γραμμή καρκίνου του τραχήλου της μήτρας για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας πιθανών αντικαρκινικών φαρμάκων ειδικά για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας που σχετίζεται με τον HPV. Οι ερευνητές διερευνούν το αντιπολλαπλασιαστικό, αποπτωτικό και αντιμεταστατικό δυναμικό των φαρμάκων χρησιμοποιώντας αυτά τα κύτταρα. Όπως μια μελέτη που διεξήχθη το 2019, η οποία διερεύνησε το κυτταροτοξικό δυναμικό των εκχυλισμάτων φρούτων Vatica diospyroides Symington τύπου SS σε κυτταρική σειρά καρκίνου του τραχήλου της μήτρας SiHa [5].
Κύτταρα SiHa για την έρευνά σας!
Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα SiHa
Ορισμένες σημαντικές και συχνά αναφερόμενες ερευνητικές δημοσιεύσεις περιλαμβάνουν την κυτταρική σειρά πλακώδους καρκινώματος του τραχήλου της μήτρας SiHa.
Αυτή η δημοσίευση στο OncoTargets and Therapy (2019) πρότεινε ότι μια φυσική ένωση aloe-emodin ασκεί αποπτωτικές επιδράσεις που σχετίζονται με τον HPV E6/E7 και τον μεταβολισμό της γλυκόζης σε κύτταρα καρκίνου του τραχήλου της μήτρας SiHa.
Το άρθρο αυτό δημοσιεύθηκε στο Future Journal of Pharmaceutical Sciences το 2022. Η παρούσα μελέτη διερεύνησε τις αντικαρκινικές δράσεις του εκχυλίσματος φύλλων του φυτού Excoecaria agallocha (L.) στην κυτταρική σειρά καρκίνου του τραχήλου της μήτρας SiHa.
Αυτή η μελέτη που δημοσιεύθηκε στο Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) πρότεινε ότι το μόριο της 1, 10-φαινανθρολίνης κατά τη σύζευξη με νανοσωματίδια θειικού ψευδαργύρου, ασκεί σημαντική αντιπολλαπλασιαστική δράση σε κύτταρα SiHa.
Αυτή η έρευνα δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Oncology Reports το 2019. Η μελέτη αποκάλυψε ότι η αστραγαλοσίδη IV, ένα φυσικό προϊόν, καταστέλλει τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων SiHa μέσω της διαμόρφωσης των μεσολαβούμενων από τον TGF-β1 σηματοδοτικών μονοπατιών PI3K και MAPK.
Αυτή η μελέτη στο Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) αποκάλυψε ότι η IFI16 (επαγώγιμη πρωτεΐνη 16 της ιντερφερόνης-γάμμα) ρυθμίζει το γονίδιο PD-L1 μέσω της ενεργοποίησης του μονοπατιού STING-TBK1-NF-kB για να ενθαρρύνει την ανάπτυξη των κυττάρων του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας SiHa.
Πόροι για την κυτταρική σειρά SiHa: Sia: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που χαρακτηρίζουν τα κύτταρα SiHa.
- Διαμόλυνση κυττάρων SiHa: Αυτό το ερευνητικό άρθρο περιέχει ένα πρωτόκολλο για τη διατήρηση των καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας SiHa και για τη διαμόλυνση των κυττάρων SiHa.
Ο ακόλουθος σύνδεσμος περιέχει πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων για τα κύτταρα SiHa.
- Κυτταρική σειρά SiHa: Αυτός ο δικτυακός τόπος περιέχει πολλά πολύτιμα δεδομένα σχετικά με την κυτταρική σειρά SiHa. Περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με τα μέσα ανάπτυξης, τις συνθήκες καλλιέργειας, τα πρωτόκολλα για την υποκαλλιέργεια των κυττάρων SiHa και τον χειρισμό των πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών της.
Συχνές ερωτήσεις για τα κύτταρα καρκινώματος τραχήλου της μήτρας SiHa
Αναφορές
- Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al., Διερεύνηση της επίδρασης του ιού των ανθρώπινων θηλωμάτων υψηλού κινδύνου στη βιοχημική σύνθεση των καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας με τη χρήση δονητικής φασματοσκοπίας. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., In vitro και in vivo αναστολή της ανάπτυξης των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας μέσω της διάσπασης των mRNAs του ιού των ανθρώπινων θηλωμάτων E6/E7 από το σύστημα CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al., Η SEC61G προάγει τον πολλαπλασιασμό του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας μέσω της ενεργοποίησης του σηματοδοτικού μονοπατιού MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines. The Scientific World Journal, 2019. 2019.