Κύτταρα RBL-2H3 - Σημασία του RBL-2H3 στην αλλεργική απόκριση και στις ανοσολογικές μελέτες
Η κυτταρική σειρά RBL-2H3 είναι μια κυτταρική σειρά βασεόφιλης λευχαιμίας αρουραίου που χρησιμοποιείται στην ανοσολογική έρευνα. Χρησιμεύει ως πρότυπο σύστημα για τη μελέτη της φυσιολογίας, της συμπεριφοράς και των λειτουργιών των μαστοκυττάρων. Τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται επίσης για τη μελέτη αλλεργικών αντιδράσεων, ανοσολογικών διεργασιών και δοκιμών και ανάπτυξης φαρμάκων.
Το άρθρο θα παρέχει πληροφορίες σχετικά με την προέλευση του RBL-2H3, τα γενικά χαρακτηριστικά, τις απαιτήσεις καλλιέργειας και τις ερευνητικές εφαρμογές.
Κύτταρα RBL-2H3: ΡΗΒ2: Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά
Πριν χρησιμοποιήσετε μια σειρά βασεόφιλων κυττάρων στην έρευνά σας, θα πρέπει να γνωρίζετε την προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά της. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα σας ενημερώσει για τα βασικά στοιχεία των κυττάρων RBL-2H3. Όπως: Τι είναι τα μαστοκύτταρα RBL-2H3 Γιατί να χρησιμοποιήσετε κύτταρα RBL-2H3 Τι είναι τα κύτταρα RBL-2H3 στη βασεόφιλη λευχαιμία των αρουραίων Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων RBL-2H3 Είναι τα κύτταρα RBL-2H3 αθάνατα
- Τα RBL-2H3 είναι κύτταρα βασεόφιλης λευχαιμίας που προέρχονται από βασεόφιλα κύτταρα αρουραίων Wistar το 1978 στο Εργαστήριο Ανοσολογίας του Εθνικού Ινστιτούτου Οδοντιατρικών Ερευνών.
- Τα κύτταρα RBL-2H3 διαθέτουν υποδοχέα τυροσινικής κινάσης c-kit και υποδοχείς πρωτεάσης ΙΙ των μαστοκυττάρων (RMCP-II), γεγονός που τα καθιστά ένα πιθανό μοντέλο μαστοκυττάρων. Ως εκ τούτου, αποκαλούνται συνήθως μαστοκύτταρα παρά την προέλευσή τους από βασεόφιλα αρουραίων [1].
- Απελευθερώνουν ισταμίνη και άλλους μεσολαβητές κατά την ενεργοποίηση και εκφράζουν υποδοχείς IgE υψηλής συγγένειας.
- Τα κύτταρα RBL-2H3 παρουσιάζουν μορφολογία που μοιάζει με ινοβλάστες.
Κύτταρα RBL-2H3: RBLR-2: Πληροφορίες καλλιέργειας
Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε ορισμένες βασικές πτυχές για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς RBL-2H3. Θα μάθετε: Τι είναι αυτό που πρέπει να γνωρίζετε; Τι είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων RBL-2H3 Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των κυττάρων RBL-2H3 Ποιο είναι το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων RBL-2H3 Ποιο είναι το μέσο κατάψυξης της κυτταρικής σειράς RBL-2H3
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων RBL-2H3
|
Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού των μαστοκυττάρων RBL-2H3 είναι περίπου 50-60 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Το RBL-2H3 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά. |
|
Αναλογία υποκαλλιέργειας: |
Για τα κύτταρα RBL-2H3, η αναλογία διαίρεσης διατηρείται μεταξύ 1:2 έως 1:4. Τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με διάλυμα 1 x PBS χωρίς μαγνήσιο και ασβέστιο. Προστίθεται διάλυμα παθητικοποίησης Accutase και τα κύτταρα διατηρούνται σε θερμοκρασία περιβάλλοντος για 10 λεπτά για να αποκολληθούν από τον πυθμένα του δοχείου καλλιέργειας. Προστίθεται φρέσκο μέσο και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωρεύονται προσεκτικά σε φρέσκο μέσο και χύνεται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Για την καλλιέργεια των κυττάρων RBL-2H3 χρησιμοποιείται μέσο EMEM που περιέχει 10% FBS, 2 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3 και αλάτι EBSS. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Τα κύτταρα RBL-2H3 καλλιεργούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα ρυθμισμένο σε θερμοκρασία 37 °C και συνδεδεμένο με πηγήCO2 5%. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κύτταρα αποθηκεύονται σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων για μεγάλο χρονικό διάστημα. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Το μέσο κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF χρησιμοποιείται για την κατάψυξη των κυττάρων RBL-2H3 χρησιμοποιώντας μια αργή διαδικασία κατάψυξης. Εν συντομία, η μέθοδος αυτή επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας κατά 1 °C ανά λεπτό και προστατεύει τα κύτταρα από το σοκ. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κύτταρα RBL-2H3 αποψύχονται σε προκαθορισμένο υδατόλουτρο (37 °C) για περίπου 60 δευτερόλεπτα. Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται σε φρέσκο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Το βήμα αυτό είναι απαραίτητο για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Στη συνέχεια, το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται σε μέσο ανάπτυξης και τα κύτταρα διανέμονται σε φιάλη για καλλιέργεια. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Τα κύτταρα RBL-2H3 πρέπει να διατηρούνται σε εργαστήρια βιοασφάλειας 1. |
Πλεονεκτήματα και περιορισμοί της γραμμής βασεόφιλων κυττάρων RBL-2H3
Τα κύτταρα RBL-2H3 χρησιμοποιούνται συνήθως στην ανοσολογική έρευνα. Στην παρούσα ενότητα περιγράφονται τα κύρια πλεονεκτήματα και οι περιορισμοί τους.
Πλεονεκτήματα
- Εύκολη καλλιέργεια: Τα κύτταρα RBL-2H3 μπορούν εύκολα να καλλιεργηθούν και να διατηρηθούν στο εργαστηριακό περιβάλλον. Αυτό διευκολύνει τα οικονομικά αποδοτικά και αναπαραγώγιμα πειράματα, καθιστώντας τα μια δημοφιλή επιλογή για αρχικές μελέτες στην ανοσολογία.
Περιορισμοί
- Μη ανθρώπινη προέλευση: Τα κύτταρα RBL-2H3, που προέρχονται από βασεόφιλα αρουραίου, ενδέχεται να μην μιμούνται με ακρίβεια τις ανθρώπινες βιολογικές διεργασίες, γεγονός που μπορεί να περιορίσει τη δυνατότητά τους να χρησιμοποιηθούν σε ειδικές για τον άνθρωπο ερευνητικές μελέτες. Αυτό απαιτεί προσεκτική ερμηνεία των δεδομένων κατά την παρέκταση των αποτελεσμάτων σε ανθρώπινα συστήματα.
- Απλοποιημένο μοντέλο μαστοκυττάρων: Ενώ αυτά τα κύτταρα παρέχουν ένα βασικό μοντέλο για τη μελέτη των λειτουργιών των μαστοκυττάρων, δεν αντιπροσωπεύουν πλήρως την πολύπλοκη φύση των αλληλεπιδράσεων των μαστοκυττάρων στο ανθρώπινο ανοσοποιητικό σύστημα. Κατά συνέπεια, ενδέχεται να μην μοντελοποιούν επαρκώς τους πολύπλευρους ρόλους των μαστοκυττάρων στις ανοσολογικές αποκρίσεις ή στις καταστάσεις ασθενειών in vivo.
Κυτταρική γραμμή RBL-2H3: Ακρογωνιαίος λίθος στην ανοσολογική έρευνα
Έρευνα για τα βασεόφιλα και τα μαστοκύτταρα με τη χρήση της κυτταρικής γραμμής RBL-2H3
Η κυτταρική σειρά RBL-2H3, που προέρχεται από το Rattus norvegicus, χρησιμεύει ως βασικό μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας των βασεόφιλων και των μαστοκυττάρων. Αυτά τα μαστοκύτταρα αρουραίου παρέχουν ουσιαστικές γνώσεις σχετικά με την απελευθέρωση μεσολαβητών των μαστοκυττάρων, οι οποίες είναι κρίσιμες για την κατανόηση αλλεργικών καταστάσεων όπως η αλλεργική ρινίτιδα. Μέσω αυτών των κυττάρων, οι ερευνητές διερευνούν τη δυναμική των κυτταρικών υποδοχέων και τη δημιουργία ανοσολογικών συνάψεων, οι οποίες είναι κεντρικής σημασίας για την απόκριση του ανοσοποιητικού συστήματος στα αλλεργιογόνα. μια ενδιαφέρουσα μελέτη που δημοσιεύθηκε το 2019 χρησιμοποίησε την κυτταρική σειρά RBL-2H3 και διερεύνησε τους μηχανισμούς πίσω από τις ψευδοαλλεργικές αντιδράσεις που προκαλούνται από την ένεση Qingkailing. Η μελέτη διαπίστωσε ότι ο σηματοδοτικός καταρράκτης PI3K-RAC1 προκαλεί εν μέρει αυτή την αλλεργική απόκριση στα κύτταρα [2]
Η δυναμική των ανοσολογικών συνάψεων στην έρευνα για την αλλεργία
Τα κύτταρα RBL-2H3, που χρησιμοποιούνται εκτενώς στην ανοσολογική έρευνα, είναι ιδιαίτερα αποτελεσματικά για τη διερεύνηση της δυναμικής των ανοσολογικών συνάψεων. Αυτό βοηθά στη διαλεύκανση των διαδικασιών επικοινωνίας του ανοσοποιητικού συστήματος, με εφαρμογές στη μελέτη τόσο των μαστοκυττάρων του περιφερικού αίματος όσο και των μαστοκυττάρων του περιτοναίου. Μια τέτοια έρευνα είναι ζωτικής σημασίας για την ολοκληρωμένη κατανόηση της ανοσολογικής απόκρισης τόσο σε συστηματικά όσο και σε τοπικά πλαίσια
Έλεγχος φαρμάκων και δοκιμή τοξικότητας
Στον έλεγχο και τη δοκιμή φαρμάκων αξιοποιείται η ανταπόκριση των κυττάρων RBL σε διάφορα ερεθίσματα, συμπεριλαμβανομένης της μελέτης του τρόπου με τον οποίο το H2O2 αναστέλλει τις αντιδράσεις που μεσολαβούνται από την IgE. Τα κύτταρα αυτά διαδραματίζουν ουσιαστικό ρόλο στην ανάπτυξη θεραπειών για ασθένειες όπως οι στρεπτοκοκκικές λοιμώξεις, όπου οι στρεπτόκοκκοι της ομάδας mitis αναστέλλουν την ενεργοποίηση των μαστοκυττάρων. Εκτός αυτού, οι ερευνητές αξιολογούν τις τοξικές επιδράσεις διαφόρων ουσιών, συμπεριλαμβανομένων χημικών ουσιών, φαρμάκων και νανοσωματιδίων, χρησιμοποιώντας αυτό το μοντέλο RBL 2H3 mc. Όπως μια πρόσφατη μελέτη (2022) αξιολόγησε την κυτταροτοξικότητα των μικροπλαστικών από πολυστυρένιο στα κύτταρα RBL-2H3. Διαπίστωσαν ότι τα μικροπλαστικά προκαλούν βλάβες στα οργανίδια των κυττάρων RBL-2H3 και προάγουν τον κυτταρικό θάνατο [3]. Μια άλλη μελέτη του 2021 αξιολόγησε το αντιαλλεργικό και αντιφλεγμονώδες δυναμικό ενός φυσικού προϊόντος, της νεφερίνης, χρησιμοποιώντας το μοντέλο mc RBL 2H3. Η μελέτη αποκάλυψε τις καλές αντιαλλεργικές και αντιφλεγμονώδεις ιδιότητες της ένωσης [4]
Προηγμένες μεθοδολογίες στην ανοσολογική μέτρηση
Η συνεπής και μετρήσιμη απελευθέρωση μεσολαβητών από τα κύτταρα RBL-2H3 τα καθιστά ιδανικά για βολική φθορισμομετρία, διευκολύνοντας ακριβείς και ακριβείς μετρήσεις ζωτικής σημασίας για τη μελέτη ασθενειών και την αξιολόγηση θεραπευτικών παραγόντων.
Η κυτταρική σειρά RBL-2H3, με καταγωγή από το Rattus norvegicus, αποτελεί ανεκτίμητο πλεονέκτημα τόσο στη βασική όσο και στην εφαρμοσμένη έρευνα στον τομέα της ανοσολογίας. Προσφέρει βαθιές ευκαιρίες για την πρόοδο της γνώσης και της θεραπείας των ανοσολογικών ασθενειών
Κυτταρική γραμμή RBL-2H3 για προηγμένη ανοσολογική έρευνα
Κύτταρα RBL-2H3: RBLR2-2: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
Ακολουθούν ορισμένες συναρπαστικές ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα μαστοκύτταρα RBL-2H3:
Η ανασταλτική δράση της ναριρουτίνης στην αποκοκκίωση των κυττάρων RBL-2H3
Αυτή η ερευνητική εργασία δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Η μελέτη πρότεινε ότι η ναριρουτίνη, μια φυσική ένωση, ασκεί ανασταλτικές επιδράσεις στην αποκοκκίωση των RBL 2H3 μέσω της ρύθμισης των μονοπατιών σηματοδότησης NF-κΒ, MAPK και κινάσης τυροσίνης.
Αυτή η έρευνα στο International Journal of Molecular Sciences (2020) πρότεινε ότι η ένωση απιγενίνη καταστέλλει σημαντικά τις αλλεργικές και φλεγμονώδεις αντιδράσεις των κυττάρων RBL-2H3 και RAW264.7. Ως εκ τούτου, μπορεί να χρησιμεύσει ως δυνητικός παράγοντας για την καταπολέμηση ασθενειών που σχετίζονται με το ανοσοποιητικό σύστημα.
Αυτή η ερευνητική εργασία στο International Journal of Molecular Sciences (2021) αξιολόγησε τις αντιαλλεργικές και αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις ενός φυσικού προϊόντος, της σαπωναρίνης, χρησιμοποιώντας διάφορες κυτταρικές σειρές, συμπεριλαμβανομένης της RBL-2H3.
Αυτή η μελέτη Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) διαπίστωσε ότι τα εκχυλίσματα Benchalokawichian και ορισμένα δραστικά συστατικά ασκούν δυνητική ανασταλτική δράση στην απελευθέρωση β- εξωσαμινιδάσης από κύτταρα RBL 2H3.
Αυτή η εργασία δημοσιεύθηκε το 2018 στο International Journal of Biological Macromolecules. Η μελέτη ανέφερε ότι η spirulina maxima, ένα φυσικό προϊόν, αναστέλλει την αποκοκκίωση των RBL 2H3 εμποδίζοντας τη φωσφορυλίωση των MAPKs και AKT.
Πόροι για την κυτταρική σειρά RBL-2H3: RBL2R2H2: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Το RBL-2H3 είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη γραμμή μαστοκυττάρων. Οι διαθέσιμοι πόροι που καλύπτουν τα πρωτόκολλα καλλιέργειας και διαμόλυνσης της RBL-2H3 αναφέρονται εδώ:
- Μοντέλο RBL 2H3 MC: Αυτό το ερευνητικό άρθρο περιλαμβάνει πρωτόκολλα για τη διατήρηση καλλιεργειών RBL-2H3 και για τη μεταμόσχευση RBL-2H3.
Ακολουθούν ορισμένοι πόροι που εξηγούν το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων RBL-2H3:
- Κύτταρα RBL-2H3: RBL-2H3: Αυτός ο δικτυακός τόπος είναι χρήσιμος για να μάθετε πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων για την κυτταρική σειρά RBL-2H3. Εκτός αυτού, περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με τα μέσα και τις συνθήκες καλλιέργειας των κυττάρων RBL 2H3.
Κυτταρική γραμμή RBL-2H3: Για τους ερευνητές
Αναφορές
- Passante, E. and N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Ψευδοαλλεργική αντίδραση που προκαλείται από την ένεση Qingkailing εν μέρει μέσω της οδού σηματοδότησης PI3K-Rac1 στα κύτταρα RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Τα μικρο(νανο)πλαστικά πολυστυρενίου βλάπτουν τα οργανίδια των κυττάρων RBL-2H3 και προάγουν το MOAP-1 για να προκαλέσουν απόπτωση. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Αντιαλλεργικές και αντιφλεγμονώδεις επιδράσεις της νεφερίνης στα κύτταρα RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.