Κύτταρα NCI-H460 - Πλοήγηση στην έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα με τις γνώσεις του NCI-H460
Τα κύτταραNCI-H460 είναι ανθρώπινα κύτταρα μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα που χρησιμοποιούνται συνήθως στην έρευνα για το καρκίνωμα του πνεύμονα και την τοξικολογία. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ένα πολύτιμο εργαλείο για τη μελέτη διαφόρων πτυχών της βιολογίας του καρκίνου που αφορούν την ανάπτυξη, την ανάπτυξη και την αντίσταση στα φάρμακα. Επιπλέον, τα κύτταρα NCI-H460 αποτελούν κατάλληλο μοντέλο για την ανάπτυξη αντικαρκινικών αντιδραστηρίων.
Κύτταρα NCI-H460: Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά
Η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά μιας κυτταρικής σειράς συμβάλλουν σημαντικά στις ερευνητικές εφαρμογές της. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα σας βοηθήσει να μάθετε την προέλευση και τα βασικά χαρακτηριστικά των κυττάρων NCI-H460 για τον καρκίνο του πνεύμονα. Θα μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα NCI-H460 Ποιος είναι ο τύπος της κυτταρικής σειράς NCI-H460 Ποια είναι η μορφολογία του NCI-H460
- Η κυτταρική σειρά NCI-H460 προέρχεται από την υπεζωκοτική συλλογή ενός Ευρωπαίου άνδρα με καρκίνο του πνεύμονα μεγάλων κυττάρων. Δημιουργήθηκε το 1982 από τον A.F. Gazdar και τους συνεργάτες του.
- Τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 διαθέτουν επιθηλιακή μορφολογία.
- Η NCI-H460 είναι μια καρκινογόνος κυτταρική σειρά με υποτριπλοειδή καρυότυπο. Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων για τα κύτταρα αυτά είναι 57. Τα κύτταρα NCI-H460 διαθέτουν επίσης 58 modal χρωμοσωμικό αριθμό σε συγκρίσιμα ποσοστά.
- Αυτά τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα έχουν πολλές μεταλλάξεις NCI-NCI-H460 όπως οι μη μικροκυτταρικοί όγκοι του πνεύμονα, όπως η μετάλλαξη KRAS NCI-H460, οι οποίες εμπλέκονται στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, την ανάπτυξη, την εισβολή και τη μετάσταση.
Πληροφορίες καλλιέργειας κυττάρων NCI-H460
Θα πρέπει να γνωρίζετε τα ακόλουθα βασικά σημεία για τον κατάλληλο χειρισμό και τη συντήρηση της κυτταρικής σειράς NCI-H460. Θα σας ενημερώσουν σχετικά με τον χρόνο διπλασιασμού του NCI-H460, το μέσο καλλιέργειας του NCI-H460 και τις βασικές διαδικασίες καλλιέργειας κυττάρων για τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460.
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια των κυττάρων NCI-H460
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού του NCI-H460 είναι περίπου 33 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 είναι προσκολλημένα. |
|
Αναλογία υποκαλλιέργειας: |
Η αναλογία διαίρεσης που συνιστάται για την κυτταρική σειρά NCI-H460 είναι 1:2 και 1:4. Μετά την απομάκρυνση του παλαιού μέσου, τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1 x ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών αλάτων. Στη συνέχεια, τα κύτταρα επωάζονται με το διάλυμα διέλευσης Accutase για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Τα διαχωρισμένα κύτταρα επαναιωρούνται σε μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωματώνονται και πάλι και χύνεται στη νέα φιάλη για καλλιέργεια. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Ως μέσο καλλιέργειας NCI-H460 χρησιμοποιείται το RPMI 1640. Συμπληρώνεται με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών, 2,1 mM σταθερής γλουταμίνης και 2,0 g/L NaHCO3. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Οι καλλιέργειες NCI-H460 διατηρούνται σε θερμοκρασία 37°C σε υγροποιημένο επωαστήρα με συνεχή παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 μπορούν να αποθηκευτούν σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150°C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών για μεγάλο χρονικό διάστημα. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Το μέσο CM-1 ή CM-ACF χρησιμοποιείται για την κατάψυξη και την αποθήκευση των κυττάρων NCI-H460. Συνιστάται μια αργή μέθοδος κατάψυξης για την προστασία της μέγιστης βιωσιμότητας των κυττάρων. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα NCI-H460 αποψύχονται σε προθερμασμένο υδατόλουτρο (σε θερμοκρασία 37°C) για 40 έως 60 δευτερόλεπτα έως ότου απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Τα αποψυγμένα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το συλλεγέν κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και πάλι και τα κύτταρα διανέμονται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσα για ανάπτυξη. Τα κύτταρα NCI-H460 μπορεί να χρειαστούν σχεδόν 24 ώρες για να προσκολληθούν στην επιφάνεια της φιάλης. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 χειρίζονται και διατηρούνται σε εργαστήρια επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
Πλεονεκτήματα & Μειονεκτήματα των κυττάρων NCI-H460
Το NCI-H460 είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη κυτταρική σειρά στην έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα. Αυτή η ενότητα θα καλύψει τα γενικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που σχετίζονται με τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460.
Πλεονεκτήματα
Τα πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 είναι τα εξής:
-
Προέλευση του όγκου
Η κυτταρική σειρά NCI-H460 προέρχεται από ασθενή με καρκίνωμα του πνεύμονα μεγάλων κυττάρων, αντιπροσωπεύοντας τον συγκεκριμένο τύπο καρκίνου του πνεύμονα. Χρησιμοποιούνται ως μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα και την ανάπτυξη νέων και αποτελεσματικών θεραπειών. Τα κύτταρα NCI-H460 έχουν καρκινικό δυναμικό και μπορούν να εγχυθούν σε ανοσοανεπαρκή ποντίκια για τη δημιουργία in vivo μοντέλων όγκων για τη μελέτη της ανάπτυξης όγκων, της ανάπτυξης και της αποτελεσματικότητας πιθανών φαρμάκων.
-
Υψηλά ποσοστά πολλαπλασιασμού
Η NCI-H460 παρουσιάζει υψηλότερους ρυθμούς ανάπτυξης από άλλες κυτταρικές σειρές μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα, όπως η A549. Το πλεονέκτημα αυτό αυξάνει τη διαθεσιμότητά τους και βοηθά τους ερευνητές να διεξάγουν αναπαραγώγιμα και χρονικά ευαίσθητα πειράματα.
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 είναι τα εξής:
-
Ομοιογένεια
Τα κύτταρα NCI-H460 είναι ομοιογενή, καθώς προέρχονται από τον όγκο ενός και μόνο ασθενούς. Ως εκ τούτου, στερούνται γενικά της πολυπλοκότητας και της ετερογένειας που παρατηρείται στους όγκους των ασθενών.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NCI-H460
Τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 χρησιμοποιούνται εκτενώς σε μελέτες που σχετίζονται με το καρκίνωμα του πνεύμονα. Ακολουθούν ορισμένες από τις σημαντικές ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NCI-H460:
- Έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα: Τα κύτταρα NCI-H460 αποτελούν ανεκτίμητο μοντέλο για τη διερεύνηση των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που εμπλέκονται στην ανάπτυξη, την ανάπτυξη και τη μετάσταση του όγκου. Επιπλέον, χρησιμοποιούνται για τη μελέτη επιτακτικών μονοπατιών σηματοδότησης, μοριακών στόχων και διαφόρων γενετικών μεταλλάξεων που σχετίζονται με την εξέλιξη του καρκίνου του πνεύμονα. Έχουν διεξαχθεί αρκετές μελέτες σε κύτταρα NCI-H460 για την αποτελεσματική μελέτη αυτών των παραγόντων. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2019 πρότεινε ότι η υπερεκφρασμένη πυρηνική πανταχού παρούσα καζεΐνη και το υπόστρωμα των κυκλινοεξαρτώμενων κινασών (NUCKS) εμπλέκονται στην ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων μέσω της ρύθμισης του σηματοδοτικού μονοπατιού PI3K/AKT [1]. Ομοίως, σε μια μελέτη in vitro και in vivo χρησιμοποιήθηκαν κύτταρα NCI-H460 για τη μελέτη του ρόλου του γονιδίου eIF4E. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι το γονίδιο eIF4E εμπλέκεται στην ανάπτυξη του καρκινώματος του πνεύμονα και στην αγγειογένεση και μπορεί να αποτελέσει στόχο για την ανάπτυξη υποσχόμενων φαρμάκων κατά του καρκίνου του πνεύμονα [2].
- Ανακάλυψη και ανάπτυξη φαρμάκων: Το NCI-H460, μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του πνεύμονα, χρησιμοποιείται ευρέως σε μελέτες ανακάλυψης και ανάπτυξης φαρμάκων. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν την τοξικότητα και την αποτελεσματικότητα νέων υποψήφιων φαρμάκων, στοχευμένων θεραπειών και θεραπειών που στοχεύουν κυρίως στις μεταλλάξεις KRAS του NCI-H460. Μια μελέτη που διεξήχθη από τον Haoyue Hu και τους συνεργάτες του το 2023 χρησιμοποίησε κύτταρα NCI-H460 για να μελετήσει τις αντικαρκινικές επιδράσεις του φαρμάκου anlotinib. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η ανλοτινίμπη επηρέασε εν μέρει την ανάπτυξη των κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα με μετάλλαξη KRAS αναστέλλοντας τον σηματοδοτικό καταρράκτη MEK/ERK [3]. Ομοίως, μια φαινολική ένωση, το καρνοσικό οξύ, ελέγχθηκε για αντιπολλαπλασιαστικές και προαποπτωτικές δραστηριότητες χρησιμοποιώντας κύτταρα NCI-H460 [4].
- Αντοχή στα φάρμακα: Η κυτταρική σειρά NCI-H460 είναι ιδανική για τη μελέτη του μηχανισμού αντίστασης του καρκινώματος του πνεύμονα στα φάρμακα. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για την ανάπτυξη μοντέλων ανθεκτικότητας στα φάρμακα για τον εντοπισμό των υποκείμενων γονιδίων, των μοριακών παραγόντων και των μονοπατιών σηματοδότησης. Όπως, για παράδειγμα, σε μια μελέτη αναπτύχθηκαν κύτταρα NCI-H460 ανθεκτικά στην πεμετρεξίδη, έναν πολυ-στοχευμένο αντιφυματικό παράγοντα, για να μελετηθούν οι υποκείμενοι μοριακοί μηχανισμοί της αντοχής στην πεμετρεξίδη σε κύτταρα μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα [5].
Αγοράστε τη γραμμή κυττάρων NCI-H460: Η πύλη σας στην έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα
Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα NCI-H460
Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με την κυτταρική σειρά καρκινώματος του πνεύμονα NCI-H460.
Αυτή η μελέτη στο Molecules (2023) πρότεινε ότι μια φυσική α-1,6-γλυκάνη, BBWPW, από μαύρο φασόλι αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων NCI-H460 μέσω της ρύθμισης του μονοπατιού PI3K/AKT/MAPK.
Αυτό το άρθρο στο Phytomedicine (2019) μελέτησε ότι η διοσκίνη-6′-O-acetate, μια νέα φυσική ένωση, ασκεί αντιπολλαπλασιαστική δράση στα καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα NCI-H460.
Η έρευνα BMC Pulmonary Medicine (2020) αναφέρει ότι το microRNA-425-5p ενισχύει την καρκινογένεση του καρκίνου του πνεύμονα μέσω του μονοπατιού PTEN/PI3K/AKT.
Αυτό το άρθρο στο Molecular Medicine Reports (2017) πρότεινε το αντικαρκινικό δυναμικό και τους υποκείμενους μηχανισμούς της ένωσης quinalizarin σε κύτταρα NCI-H460 και άλλα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα.
Αυτή η έρευνα στο Food and Function (2019) αναδεικνύει τη δυνητική αντικαρκινική δράση του εκχυλίσματος Eucalyptus globulus labill. χρησιμοποιώντας κύτταρα NCI-H460. Τα ευρήματα έδειξαν ότι το φυτικό εκχύλισμα εμφάνισε αυτές τις επιδράσεις αυξάνοντας την έκφραση του p53 των NCI-H460 και τροποποιώντας το προφίλ του κυτταρικού κύκλου.
Πόροι για την κυτταρική σειρά NCI-H460: H604-H460: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που χαρακτηρίζουν τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460.
- Διαμόλυνση κυττάρων NCI-H460: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο είναι ένας οδηγός βήμα προς βήμα για τη μόλυνση των κυττάρων NCI-H460 με πλασμιδιακό DNA.
Οι ακόλουθοι σύνδεσμοι περιέχουν επιτακτικές πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων για τα κύτταρα H460.
- Κύτταρα NCI-H460: Αυτός ο δικτυακός τόπος θα παρέχει σημαντικές πληροφορίες σχετικά με τα μέσα για τα κύτταρα NCI-H460, τις διαδικασίες υποκαλλιέργειας, κατάψυξης και απόψυξης.
- Πέρασμα κυττάρων NCI-H460: Αυτό το έγγραφο θα σας καθοδηγήσει σχετικά με τη διέλευση και την υποκαλλιέργεια της κυτταρικής σειράς NCI-H460. Εκτός αυτού, θα σας βοηθήσει επίσης να μάθετε το πρωτόκολλο διαμόλυνσης για τα κύτταρα NCI-H460.
Εξερεύνηση της κυτταρικής γραμμής NCI-H460: N605: Συχνές ερωτήσεις και γνώσεις: Συχνές ερωτήσεις και γνώσεις: Συχνές ερωτήσεις και γνώσεις
Αναφορές
- Hu, C., et al., Το NUCKS προάγει τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την εισβολή των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα μέσω του μονοπατιού σηματοδότησης Pi3k/Akt. Κλινική και ερευνητική ιατρική, 2021. 44(2): σ. E55-61.
- Qi, X., et al., Το EGPI-1, ένας νέος αναστολέας αλληλεπίδρασης eIF4E/eIF4G, αναστέλλει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα και την αγγειογένεση μέσω του σηματοδοτικού μονοπατιού Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Το Anlotinib ασκεί αντικαρκινικές επιδράσεις σε κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα με μετάλλαξη KRAS μέσω της καταστολής του μονοπατιού MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Δημιουργία και χαρακτηρισμός ανθεκτικών στην πεμετρεξίδη κυττάρων NCI-H460/PMT. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (πρώην Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.