Κυτταρική γραμμή MX-1

ΗMX-1 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του μαστού που προέρχεται από ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος καρκίνου του μαστού σε αθυμικά ποντίκια. Τα ανθρώπινα κύτταρα αδενοκαρκινώματος του μαστού δημιουργήθηκαν από τον όγκο του μαστού μιας 29χρονης καυκάσιας γυναίκας. Τα κύτταρα MX1 είναι τριπλά αρνητικός καρκίνος του μαστού (TNBC) που χρησιμοποιείται εκτενώς για την έρευνα σχετικά με την ανθεκτικότητα στα φάρμακα, την κυτταρική σηματοδότηση, τον μηχανισμό απόκρισης στα φάρμακα κ.λπ.

Προέλευση και γενικές πληροφορίες για τα κύτταρα MX-1

Πριν εργαστείτε με αυτή την κυτταρική σειρά, θα πρέπει να μάθετε τα βασικά της στοιχεία. Θα επανεξετάσουμε σχεδόν όλες τις γενικές πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά MX-1.

Η αθάνατη κυτταρική σειρά MX-1 είναι μια καρκινική κυτταρική σειρά που δημιουργήθηκε από ένα ξενομόσχευμα όγκου. Τα κύτταρα MX-1 θεωρούνται ένας τύπος τριπλά αρνητικού καρκίνου του μαστού (TNBC) [1]. Επιπλέον, τα κύτταρα αυτά είναι αρνητικά ως προς τον υποδοχέα οιστρογόνων και το p53, καθώς δεν εκφράζουν αυτά τα γονίδια.

Κύτταρα MX-1 - Ένα πρότυπο σύστημα για τον τριπλά αρνητικό καρκίνο του μαστού

Οι συνθήκες καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς MX-1 δεν είναι ιδιότροπες. Τα κύτταρα αυτά μπορούν εύκολα να πολλαπλασιαστούν και να χρησιμοποιηθούν σε διάφορα ερευνητικά εργαστήρια για μελέτες διαμόλυνσης. Η μέθοδος της παροδικής διαμόλυνσης μελετά συνήθως τους υποκείμενους κυτταρικούς μηχανισμούς και τα πρότυπα έκφρασης γονιδίων σε αυτή την κυτταρική σειρά [2, 3].

Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ένα υγιές σύστημα μοντέλου για τα καρκινώματα του μαστού. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την κατανόηση των μοριακών μηχανισμών πίσω από την εξέλιξη της νόσου και για τον έλεγχο και την ανάπτυξη φαρμάκων για την καταπολέμηση της νόσου. Πιο συγκεκριμένα, η ανθρώπινη κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του μαστού MX-1 μπορεί να αποτελέσει εναλλακτική λύση για τα κύτταρα TNBC, καθώς είναι αρνητική ως προς τους υποδοχείς οιστρογόνων [4].

Κυτταρική σειρά MX-1: Πληροφορίες καλλιέργειας

• Χρόνος διπλασιασμού: Ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού των κυττάρων MX-1 είναι περίπου 44 ώρες.
• Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: Τα κύτταρα INS-1 αναπτύσσονται τόσο σε εναιώρημα όσο και σε προσκολλημένη μορφή.
• Αναλογία υποκαλλιέργειας: Τα κύτταρα INS-1 υποκαλλιεργούνται σε αναλογία διάσπασης 1:3. Εν συντομία, συλλέγονται τα αιωρούμενα κύτταρα. Τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με PBS και επωάζονται με το διάλυμα Accutase. Μετά την αποκόλληση τα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο. Στη συνέχεια, τόσο τα αιωρούμενα όσο και τα προσκολλημένα κύτταρα φυγοκεντρίζονται και συλλέγονται. Τα κύτταρα ανασυσσωματώνονται προσεκτικά και διανέμονται στις νέες φιάλες για ανάπτυξη.
• Μέσο ανάπτυξης: Το RPMI 1640 χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς ινσουλινώματος αρουραίου INS-1. Το μέσο συμπληρώνεται με 10% θερμικά αδρανοποιημένο εμβρυϊκό ορό βοοειδών, 2,1 mM σταθερή γλουταμίνη, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 και 1 mM πυρουβικό νάτριο.
• Συνθήκες ανάπτυξης: Τα κύτταρα INS-1 διατηρούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα σε θερμοκρασία 37°C και με συνεχή παροχή 5% CO2.
• Αποθήκευση: Τα κύτταρα INS-1 beta μπορούν να αποθηκευτούν σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150°C σε ηλεκτρικό καταψύκτη για μεγάλο χρονικό διάστημα.
• Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: Τα μέσα CM-1 ή CM-ACF χρησιμοποιούνται για την κατάψυξη των κυττάρων INS-1 μέσω μιας αργής διαδικασίας κατάψυξης. Επιτρέπει μόνο μια πτώση της θερμοκρασίας κατά 1°C ανά λεπτό για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων.
• Διαδικασία απόψυξης: Τα κατεψυγμένα κύτταρα INS-1 αποψύχονται σε υδατόλουτρο προρυθμισμένο σε θερμοκρασία 37 βαθμών Κελσίου για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Μετά την απόψυξη, τα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο θρεπτικό υλικό και χύνεται απευθείας σε νέα φιάλη για ανάπτυξη. Μετά από 24 ώρες το μέσο αντικαθίσταται για την εξάλειψη των συστατικών του μέσου κατάψυξης.
• Επίπεδο βιοασφάλειας: Για την καλλιέργεια των κυττάρων ινσουλινώματος αρουραίου INS-1 απαιτείται εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1.

Κύτταρα MX-1: MX-1: Εφαρμογές στην έρευνα

Αυτή η ανθρώπινη κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του μαστού MX-1 χρησιμοποιείται συνήθως σε μελέτες για τον καρκίνο του μαστού αντί για κύτταρα όπως τα MDA-MB-231 ή MCF-7. Ακολουθούν μερικές ειδικές εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς στην έρευνα για τον καρκίνο.

Μηχανισμοί αντίστασης στα φάρμακα

Τα κύτταρα MX-1 χρησιμοποιούνται για τη μελέτη των μοριακών παραγόντων που μεσολαβούν στην ανάπτυξη ανθεκτικότητας έναντι των φαρμάκων για τον καρκίνο του μαστού. Οι μελέτες έχουν χρησιμοποιήσει ευρέως τα κύτταρα MX-1 για τη δημιουργία μοντέλων ανθεκτικών στα φάρμακα. Μια μελέτη που δημοσιεύθηκε το 2021 ανέφερε τη χρήση κυττάρων MX-1 για τη δημιουργία μιας ανθεκτικής στη δοξορουβικίνη κυτταρικής σειράς καρκίνου του μαστού. Το κυτταρικό μοντέλο που αναπτύχθηκε επικύρωσε τη συμμετοχή του μεταφορέα ABC ABCB1 και της επιθηλιο-μεσεγχυματικής μετάβασης (EMT) στην απόκτηση χημειοανθεκτικότητας [5].

Γονιδιακή έκφραση/κυτταρική οδός σηματοδότησης

Η κυτταρική σειρά MX-1 μπορεί να διαμολυνθεί παροδικά για τη διαλεύκανση προτύπων γονιδιακής έκφρασης και μονοπατιών κυτταρικής σηματοδότησης. Μελέτες έχουν χρησιμοποιήσει κύτταρα MX-1 για τη διαμόλυνση shRNA (short hairpin RNA) και μη κωδικοποιητικού RNA για τη διερεύνηση της επίδρασής τους στον πολλαπλασιασμό και την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων του μαστού. Επιπλέον, διευκρινίζονται τα σχετικά μονοπάτια σηματοδότησης γονιδίων [2, 6].

Διαλογή δυνητικών αναστολέων

Τα κύτταρα MX-1 μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον έλεγχο πιθανών φαρμάκων κατά του καρκίνου του μαστού, καθώς μιμούνται το μικροπεριβάλλον των καρκινικών κυττάρων. Μια ερευνητική μελέτη έδειξε τη θεραπευτική δράση της Vinorelbine, μιας τοξίνης μικροσωληνίσκων, η οποία προκάλεσε κυτταρικό θάνατο και πολυπλοειδία σε κύτταρα MX-1 [4].

Παραγγείλτε τη γραμμή κυττάρων MX-1 σήμερα

Κυτταρική σειρά MX-1 Πόροι: Βίντεο & περισσότερα: Πρωτόκολλα, βίντεο & άλλα

Υπάρχουν περιορισμένοι διαθέσιμοι πόροι σχετικά με τις μεθόδους καλλιέργειας και διαμόλυνσης, αλλά συγκεντρώσαμε όσο το δυνατόν περισσότερες πληροφορίες για εσάς.

Πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων

Τα κύτταρα MX-1 χρησιμοποιούνται σε πολλές μελέτες ανάλυσης παροδικής διαμόλυνσης. Εδώ, έχουμε παραθέσει μερικούς πόρους για να σας βοηθήσουμε με τα πρωτόκολλα διαμόλυνσης.

• Διαμόλυνση κυττάρων MX-1: Αυτή η δημοσίευση περιγράφει το πρωτόκολλο για τη διαμόλυνση με siRNA σε κύτταρα MX-1 για την ανάπτυξη ενός μοντέλου knock-out γονιδίων.
• Διαμόλυνση κυττάρων θηλαστικών: Αυτό το άρθρο έχει όλες τις βασικές πληροφορίες σχετικά με τις μεθόδους διαμόλυνσης που χρησιμοποιούνται σε κυτταρικές σειρές θηλαστικών.

Ελπίζουμε ότι αυτό το άρθρο σας παρείχε πολύτιμες γνώσεις σχετικά με την κυτταρική σειρά MX-1 και ότι αποκτήσατε καλύτερη κατανόηση του τρόπου καλλιέργειας, συντήρησης και χρήσης αυτών των κυττάρων στην έρευνά σας. Εάν ενδιαφέρεστε να εργαστείτε με την κυτταρική σειρά MX-1, μη διστάσετε να παραγγείλετε από εμάς για να ξεκινήσετε το ερευνητικό σας ταξίδι!

Συχνές ερωτήσεις σχετικά με την κυτταρική γραμμή καρκινώματος του μαστού MX-1

Αναφορές

1. Stefanski, C.D. και J.R. Prosperi, Καταπολέμηση της αντίστασης CHK1 στον τριπλά αρνητικό καρκίνο του μαστού: EGFR ως δυνητική συνδυαστική θεραπεία. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., Το ανάλογο του cGAMP, c-di-AMP, ενεργοποιεί το μεσολαβούμενο από το STING μονοπάτι κυτταρικού θανάτου σε αρνητικά σε οιστρογονικούς υποδοχείς κύτταρα καρκίνου του μαστού. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Πρωτεομική ανάλυση του αναστολέα της πρωτεΐνης πουμοιάζει με τηνπρωτεΐνη-2 της απόπτωσηςστον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων του μαστού. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa, and J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Human Triple-Negative Breast Cancer Cell Line. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Ο μη γενοτοξικός ενεργοποιητής ABCB1 τετραφαινυλοφωσφονίου μπορεί να συμβάλει στην αντίσταση στη δοξορουβικίνη στην κυτταρική σειρά καρκίνου του μαστού MX-1. Επιστημονικές αναφορές, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomics analysis of breast cancer: Το μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA linc01561 δρα ως ceRNA που εμπλέκεται στην εξέλιξη του καρκίνου του μαστού. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.