Πηγαίνετε στην αρχική σελίδα

Κύτταρα HuH7: Μια πύλη προς την έρευνα για το ηπατοκαρκίνωμα και τον ιό της ηπατίτιδας C

Η κυτταρική σειρά HuH7, που προέρχεται από ανθρώπινο ηπατώμα, αντιπροσωπεύει μια αθανατοποιημένη συλλογή καρκινογόνων κυττάρων τύπου επιθηλίου. Αυτή η σειρά, μαζί με τα παράγωγά της HuH7.5 και HuH7.5.1, χρησιμεύει ως πρακτικό υποκατάστατο των πρωτογενών ηπατοκυττάρων σε πειραματικά πλαίσια. Χρησιμοποιείται κυρίως σε μοντέλα κυτταρικής καλλιέργειας για τη μελέτη της λοίμωξης από τον ιό της ηπατίτιδας C (HCV) και της παθοφυσιολογίας του ηπατώματος.

📋 Κυτταρική σειρά HuH7 — Σύντομα στοιχεία
Μέσο ανάπτυξης
Δείτε τη σελίδα του προϊόντος
Χρόνος διπλασιασμού
Δείτε τη σελίδα του προϊόντος
Τύπος ανάπτυξης
Προσκολλητική
Επίπεδο βιοασφάλειας
BSL-1
Διαθέσιμο από
Cytion — Παραγγελία HuH7

Προέλευση και χαρακτηριστικά των κυττάρων HuH7

Η κατανόηση της προέλευσης, των βασικών χαρακτηριστικών και των βέλτιστων συνθηκών καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς HuH7 είναι απαραίτητη πριν από την εφαρμογή της στην έρευνα.

Η κυτταρική σειρά HuH7 δημιουργήθηκε από τους Sato, J και Nakabayshi, H το 1982, προερχόμενη από μια εξαιρετικά διαφοροποιημένη γενεαλογία καρκινικών ηπατοκυττάρων. Προέρχεται αρχικά από ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα ενός 57χρονου Ιάπωνα άνδρα. Χαρακτηριζόμενα από την ικανότητά τους να παράγουν διάφορες φυσιολογικά σημαντικές ουσίες, όπως αλβουμίνη και άλφα-φετοπρωτεΐνη, τα κύτταρα HuH7 εμφανίζουν υψηλή ευαισθησία στη μόλυνση από τον ιό της ηπατίτιδας C (HCV), γεγονός που τα καθιστά κατάλληλα για χρήση σε συστήματα ρεπλικονίων του HCV. Αυτό το χαρακτηριστικό καθιστά τη κυτταρική σειρά πολύτιμη για τον έλεγχο και την ανάπτυξη θεραπευτικών αγωγών κατά του HCV. Τα κύτταρα HuH7 παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία, με εξαγωνικό σχήμα, και προσκολλώνται σε επιφάνειες σχηματίζοντας μονοστρωματικές επιφάνειες 2D κατά τη διάρκεια της ανάπτυξής τους. Κατά μέσο όρο, τα κύτταρα HuH7 έχουν διάμετρο 21,9 µm, τείνοντας προς μια μεγαλύτερη, πεπλατυσμένη εμφάνιση. Η κυτταρική σειρά HuH7 χαρακτηρίζεται από ετερογενή αριθμό χρωμοσωμάτων, που κυμαίνεται συνήθως μεταξύ 55 και 63, γεγονός που αντανακλά τη γενετική μεταβλητότητα εντός του κυτταρικού πληθυσμού. Αυτή η ετερογένεια είναι συνέπεια των επιλεκτικών πιέσεων που συναντώνται κατά τη διάρκεια της κυτταρικής καλλιέργειας και μπορεί να ποικίλλει ανάλογα με τις διαφορετικές εργαστηριακές συνθήκες.

Συγκριτική ανάλυση: Κυτταρικές σειρές HuH7 έναντι HuH7.5

Η κυτταρική σειρά HuH7.5, παράγωγο της HuH7, διαφέρει κυρίως λόγω μιας μετάλλαξης missense στο γονίδιο RIG-I (DDX58), το οποίο είναι κρίσιμο για την ενδοκυτταρική αντιιική απόκριση. Αυτή η μετάλλαξη ενισχύει την ευαισθησία των κυττάρων HuH7.5 στην αναπαραγωγή του γονιδιωματικού και υπογονιδιωματικού RNA του HCV, διακρίνοντάς την από τη μητρική κυτταρική σειρά HuH7 όσον αφορά τη χρησιμότητά της στην ιολογική έρευνα.

Huh 7 cells

Κύτταρα HuH7 σε μεγέθυνση 10x και 20x.

Καλλιέργεια κυττάρων HuH7: Βασικά πρωτόκολλα για βέλτιστη ανάπτυξη

Τα κύτταρα HuH7, τα οποία αποτελούν αναπόσπαστο μέρος μιας πληθώρας ερευνητικών μελετών, απαιτούν ακριβείς συνθήκες καλλιέργειας για να αναπτυχθούν. Αυτή η ενότητα εμβαθύνει στις θεμελιώδεις πτυχές της καλλιέργειας κυττάρων HuH7, διασφαλίζοντας τη διατήρηση της φυσιολογικής τους συνάφειας στις επιστημονικές έρευνες.

Δυναμική του χρόνου διπλασιασμού

Ο χρόνος διπλασιασμού για τα κύτταρα HuH7 είναι συνήθως 24 ώρες, αν και οι διακυμάνσεις στα μέσα καλλιέργειας κυττάρων μπορούν να παρατείνουν αυτή την περίοδο σε 36-48 ώρες, υπογραμμίζοντας την επίδραση των περιβαλλοντικών συνθηκών στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό.

Χαρακτηριστικά προσκόλλησης

Τα κύτταρα HuH7 σχηματίζουν κυρίως ένα δισδιάστατο μονοστρωματικό στρώμα, προσκολλώμενα στις επιφάνειες των πλακών και των φιαλών καλλιέργειας, υπογραμμίζοντας την προτίμησή τους για ένα σταθερό φυσικό υπόστρωμα έναντι των καλλιεργειών σε εναιώρημα.

Βέλτιστη πυκνότητα σποράς

Η διατήρηση της συγκέντρωσης των κυττάρων HuH7 εντός του εύρους 30-90% είναι κρίσιμη για την αποφυγή μείωσης των ρυθμών πολλαπλασιασμού πέραν του 90% συγκέντρωσης. Η υποκαλλιέργεια με Accutase διευκολύνει την αποκόλληση, επιτρέποντας τη σπορά σε πυκνότητες προσαρμοσμένες στις πειραματικές ανάγκες, που κυμαίνονται από βέλτιστα (2×10⁴ κύτταρα/cm²) έως επίπεδα κορεσμού (6×10⁴ κύτταρα/cm²).

Διατροφικές απαιτήσεις

Το Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) με υψηλή περιεκτικότητα σε γλυκόζη και συμπληρωμένο με 10% εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS) παρέχει ένα ιδανικό θρεπτικό περιβάλλον για τα κύτταρα HuH7. Η τακτική ανανέωση του μέσου, ιδανικά 2-3 φορές την εβδομάδα, είναι ζωτικής σημασίας για τη διατήρηση της υγείας των κυττάρων.

Περιβαλλοντικές συνθήκες

Ένας υγραντικός επωαστήρας ρυθμισμένος σε 5% CO₂ και 37°C υποστηρίζει βέλτιστα την καλλιέργεια κυττάρων HuH7, προσομοιώνοντας φυσιολογικές συνθήκες που ευνοούν τις κυτταρικές δραστηριότητες.

Μακροχρόνια αποθήκευση

Για παρατεταμένη συντήρηση, τα κύτταρα HuH7 πρέπει να αποθηκεύονται στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου, διασφαλίζοντας τη βιωσιμότητά τους για μελλοντική έρευνα.

Κρυοσυντήρηση και ανάκτηση

Η χρήση μιας τεχνικής σταδιακής κατάψυξης είναι υψίστης σημασίας για τη διατήρηση της βιωσιμότητας των κυττάρων κατά τη διάρκεια της κρυοσυντήρησης. Τα κύτταρα πρέπει να αιωρούνται σε ένα ειδικά σχεδιασμένο μέσο κατάψυξης, όπως το CM-1, εξασφαλίζοντας μια ομαλή μετάβαση στην κρυογενική αποθήκευση. Κατά την απόψυξη, η ταχεία αλλά ήπια αναζωογόνηση σε υδατόλουτρο 37 °C, ακολουθούμενη από φυγοκέντρηση για την απομάκρυνση του μέσου κατάψυξης και επαναδιασπορά σε φρέσκο μέσο ανάπτυξης, είναι απαραίτητη για την αποκατάσταση των κυτταρικών καλλιεργειών.

Θέματα βιοασφάλειας

Συνιστάται η τήρηση πρωτοκόλλου βιοασφάλειας επιπέδου 1 για τον χειρισμό και τον πολλαπλασιασμό της κυτταρικής σειράς HuH7, σύμφωνα με τα πρότυπα ασφάλειας και δεοντολογίας σε εργαστηριακό περιβάλλον.

Τηρώντας αυτές τις σχολαστικά περιγραφόμενες συνθήκες καλλιέργειας, οι ερευνητές μπορούν να εξασφαλίσουν την ισχυρή ανάπτυξη και τη φυσιολογική συνάφεια των κυττάρων HuH7 στις επιστημονικές τους έρευνες, ανοίγοντας το δρόμο για πρωτοποριακές ανακαλύψεις στην έρευνα για το ηπατώμα και τον ιό της ηπατίτιδας C.

Ανακαλύψτε τα κύτταρα HuH7 για τις επιστημονικές σας ανακαλύψεις

Κύτταρα HuH7: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα

Η κυτταρική σειρά HuH7 παρουσιάζει ταυτόχρονα πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Ας εξετάσουμε τα πιθανά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα αυτής της κυτταρικής σειράς, καθώς αυτό μπορεί να σας βοηθήσει να αποφασίσετε αν είναι κατάλληλη για τα πειράματά σας.

Πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς HuH7

Τα κύτταρα HuH7 διαθέτουν πολλά χαρακτηριστικά που τα καθιστούν ελκυστικά για ερευνητική χρήση.

  • Εύκολη πολλαπλασιασμός: Σε αντίθεση με άλλες κυτταρικές σειρές ανθρώπινου ηπατώματος, η κυτταρική σειρά HuH7 μπορεί να αναπτυχθεί εύκολα χωρίς την προσθήκη ορού. Ωστόσο, η CLS συνιστά τη χρήση RPMI 1640 με 10% FBS και 2 mM L-γλουταμίνη. Τα κύτταρα HuH-7 εκκρίνουν έναν αυξητικό παράγοντα που βοηθά τα κύτταρα να αναπτυχθούν χωρίς ορό.
  • Ευελιξία μεταμόλυνσης: Η κυτταρική σειρά HuH7 χρησιμοποιείται ευρέως για σκοπούς μεταμόλυνσης λόγω της υψηλής δεκτικότητάς της στο γονιδίωμα του HCV. Ως εκ τούτου, αυτά τα κύτταρα είναι ζωτικής σημασίας για τον έλεγχο και την ανάπτυξη φαρμάκων κατά του HCV.
  • Εναλλακτική λύση έναντι των ανθρώπινων ηπατοκυττάρων: Η κυτταρική σειρά HuH7 αποτελεί εξαιρετικό υποκατάστατο των ανθρώπινων ηπατοκυττάρων. Μπορεί να βοηθήσει τους ερευνητές να μελετήσουν τους ηπατικούς μεταφορείς φαρμάκων και να κατανοήσουν την αλληλεπίδραση ορισμένων φαρμάκων με τις MRP (πρωτεΐνες που σχετίζονται με την πολυφαρμακευτική αντοχή).
  • Ανάπτυξη μοντέλου ποντικού με ξενομόσχευμα: Τα κύτταρα HuH7 έχουν χρησιμοποιηθεί για την παραγωγή μοντέλου ποντικού με ξενομόσχευμα που προέρχεται από κυτταρική σειρά. Αυτό το ζωικό μοντέλο μπορεί να προσφέρει πολύτιμες πληροφορίες στους ερευνητές σχετικά με τους αναστολείς πρωτεϊνικής κινάσης και τις αντικαρκινικές θεραπείες.
  • Έρευνα για τον καρκίνο: Η κυτταρική σειρά HuH7 είναι μια κυτταρική σειρά ανθρώπινου καρκίνου του ήπατος, η οποία βοηθά τους ερευνητές να διεξάγουν μελέτες για τον καρκίνο του ήπατος.

Περιορισμοί της κυτταρικής σειράς HuH-7

Υπάρχουν ορισμένοι περιορισμοί που σχετίζονται με την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HuH7.

Μικροβιακή μόλυνση: Η βακτηριακή μόλυνση είναι το πιο συνηθισμένο πρόβλημα στην κυτταρική καλλιέργεια. Όταν συμβαίνει μια μόλυνση, αυτή μπορεί να διακριθεί μέσω της αλλαγής του pH και της θολότητας του καλλιεργητικού μέσου. Μεταξύ των βακτηριακών μολύνσεων, η μόλυνση από μυκόπλασμα συνήθως δεν είναι εμφανής. Ωστόσο, επηρεάζει σταδιακά τη μορφολογία, τη γονιδιακή έκφραση και άλλα χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς.

Περίοδος καλλιέργειας: Αν και η κυτταρική σειρά HuH7 είναι αθάνατη, η υπέρβαση της περιόδου καλλιέργειας μπορεί να επηρεάσει σταδιακά την υγεία των κυττάρων. Μπορεί να επηρεάσει τον ρυθμό πολλαπλασιασμού και τη γονιδιακή έκφραση, γεγονός που μπορεί να μειώσει την αναπαραγωγιμότητα των αποτελεσμάτων. Για την κυτταρική σειρά HuH7, ο αριθμός πασάζων πρέπει να διατηρείται κάτω από 20–25.

Εφαρμογές των κυττάρων HuH-7

Αυτή η κυτταρική σειρά που προέρχεται από ανθρώπινο ηπατόμα προσφέρει πολλές ερευνητικές εφαρμογές. Εδώ περιγράφουμε μερικούς ερευνητικούς τομείς που χρησιμοποιούν την κυτταρική σειρά HuH7.

  1. Αντοχή στα φάρμακα: Η HuH7 είναι μια κυτταρική σειρά ηπατοκυτταρικού καρκινώματος (HCC) που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη της αντοχής στα φάρμακα έναντι πιθανών θεραπειών για τον καρκίνο του ήπατος. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2021 χρησιμοποίησε κύτταρα HuH7, τα οποία είχαν καταστεί πειραματικά ανθεκτικά στο σοραφενίμπ, για την ανάπτυξη νέων και αποτελεσματικών θεραπειών, δηλαδή πεπτιδίων αυτοσυναρμολόγησης που συσσωρεύονται στα μιτοχόνδρια.

  2. Γενετικές πληροφορίες και μοριακός χαρακτηρισμός μέσω των κυττάρων HuH7: Οι διακριτές κυτταρικές σειρές HuH7, συμπεριλαμβανομένων διαφόρων παραγώγων και παραλλαγών, έχουν επιτρέψει μια βαθύτερη κατανόηση της γονιδιακής έκφρασης και του ρόλου συγκεκριμένων γονιδιακών δεικτών στην ασθένεια. Τεχνικές όπως η φασματοσκοπία Raman, που υποστηρίχθηκε από ερευνητές όπως ο Evgeny Gladilin, έχουν εφαρμοστεί στα κύτταρα HuH7 για μοριακό και κυτταρικό προφίλ, αποκαλύπτοντας πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική απόκριση στην ιογενή λοίμωξη. Το δυναμικό της φασματοσκοπίας Raman, σε συνδυασμό με μεθόδους όπως η ποσοτική πρωτεομική, έχει διευκολύνει τη διερεύνηση των αποκρίσεων των κυττάρων-ξενιστών, συμπεριλαμβανομένης της απόκρισης στην ιντερφερόνη και των αλλαγών στα λιπιδικά σταγονίδια, οι οποίες είναι κρίσιμες για την κατανόηση της αναπαραγωγής του HCV και της επίδρασης του SARS. Η έκφραση διαφορετικών ογκογονικών δεικτών μπορεί να διερευνηθεί για την κατανόηση της συμπεριφοράς τους σε απόκριση σε οποιαδήποτε θεραπεία, όπως σε μια μελέτη που χρησιμοποίησε κύτταρα HuH7 για να διερευνήσει την επίδραση της ένωσης Kaempferol στο μοτίβο έκφρασης των γονιδίων της οδού MMP9 και AKT. Αυτές οι οδοί ρυθμίζουν τη μετάσταση και την διηθητικότητα του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Μια άλλη πρόσφατη μελέτη διερεύνησε επίσης τον ρόλο του γονιδίου της κασκάδας σηματοδότησης Wnt/β-κατενίνης στην επιβίωση και την ανάπτυξη των κυττάρων HCC.

  3. Ανάπτυξη φαρμάκων: Τα κύτταρα HuH7 χρησιμοποιούνται ευρέως σε μελέτες διαλογής και ανάπτυξης φαρμάκων κατά του καρκίνου του ήπατος. Έχουν διεξαχθεί πολλαπλές μελέτες για τη διερεύνηση του ανασταλτικού δυναμικού πολλών φυτικών εκχυλισμάτων, φυτικών ενώσεων, νανοσωματιδίων και άλλων θεραπευτικών παραγόντων κατά του HCC. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2022 εξέτασε τις προ-αποπτωτικές και αντικαρκινικές ιδιότητες ενός ραδιονουκλιδίου κατά του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος χρησιμοποιώντας μια κυτταρική σειρά HuH7.

  4. Κύτταρα HuH7: Ένα σημείο εστίασης στην έρευνα για τους ιούς και την κυτταρική ανάλυση Τα κύτταρα HuH7 έχουν καταστεί ακρογωνιαίος λίθος στη μελέτη των ιογενών λοιμώξεων και των μολυσματικών ασθενειών, ιδίως του ιού της ηπατίτιδας C (HCV) και των αλληλεπιδράσεών τους με κοροναϊούς όπως ο SARS-CoV-2, ο οποίος ευθύνεται για τη νόσο του κοροναϊού 2019 (COVID-19). Η ανάπτυξη πειραματικών συστημάτων κυτταρικής καλλιέργειας HCV (HCVcc) με τη χρήση κυττάρων HuH7 έχει προωθήσει σημαντικά την ικανότητά μας να μελετάμε την περίπλοκη διαδικασία αναπαραγωγής του HCV και τους παράγοντες του ξενιστή που είναι απαραίτητοι για τη μόλυνση από τον HCV. Αυτό περιλαμβάνει την εξέταση της αποτελεσματικότητας της αναπαραγωγής του RNA του HCV και της παραγωγής μολυσματικών ιικών σωματιδίων. Οι διακριτές σειρές κυττάρων HuH7, συμπεριλαμβανομένων των γηρασμένων και μολυσμένων παραλλαγών, παρέχουν ένα ποικίλο πάνελ για τη διερεύνηση της πολλαπλότητας της μόλυνσης, της ιικής διάδοσης και των μηχανισμών αναστολής κατά ιών όπως ο SARS.

Συνοψίζοντας, η μελέτη των κυττάρων HuH7 καλύπτει ένα ευρύ φάσμα επιστημονικών ερευνών, από τους μοριακούς μηχανισμούς που υποκρύπτουν τις ιογενείς μολύνσεις έως τις λεπτομερείς κυτταρικές αντιδράσεις που προκαλούνται από αυτούς τους παθογόνους παράγοντες. Μέσα από το πρίσμα της έρευνας για τα HuH7, η επιστημονική κοινότητα συνεχίζει να αποκαλύπτει τη σύνθετη δυναμική των αλληλεπιδράσεων ξενιστή-ιού, συμβάλλοντας στην πρόοδο των αντιιικών στρατηγικών και στην κατανόηση των κυτταρικών καθοριστικών παραγόντων στις ιογενείς ασθένειες.

Δημοσιεύσεις για τα HuH-7

Υπάρχει πληθώρα δημοσιεύσεων που χρησιμοποιούν την κυτταρική σειρά HuH7 για διαφορετικούς σκοπούς. Εδώ, αναφέρουμε μερικές πρόσφατες και σημαντικές δημοσιεύσεις.

Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο Nature Scientific Reports το 2021. Η μελέτη χρησιμοποίησε πειραματικά επαγόμενα κύτταρα ηπατοκυτταρικού καρκινώματος ανθεκτικά στο σοραφενίμπ (κυτταρική σειρά HuH7) για να διερευνήσει τις προ-αποπτωτικές και αντικαρκινικές επιδράσεις του πρόσφατα αναπτυγμένου Mito-FF (πεπτίδια αυτοσυναρμολόγησης που συσσωρεύονται στα μιτοχόνδρια).

Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Environmental Toxicology από τον Po-Chung Ju και τους συνεργάτες του το 2021. Σε αυτή τη μελέτη, οι ερευνητές διερεύνησαν το αντιμεταστατικό δυναμικό μιας φυτικής ένωσης, της καμπεφερόλης, έναντι κυττάρων ηπατοκυτταρικού καρκινώματος (HuH7). Επιπλέον, μελέτησαν επίσης τις οδούς σηματοδότησης που ρυθμίζουν τη μετάσταση και την εισβολή των καρκινικών κυττάρων του ήπατος.

Αυτή η εργασία δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Drug Development Research το 2022. Η μελέτη αυτή εξηγεί τον αντικαρκινικό ρόλο της ένωσης δαφνετίνης κατά του HCC. Αυτή η φυτική ένωση αναστέλλει τη σηματοδότηση Wnt/β-κατενίνης για να περιορίσει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων.

Αυτό το ερευνητικό άρθρο, που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Drug Design, Development, and Therapy, περιγράφει τον ρόλο της σηματοδότησης EGFR στην ανάπτυξη και τη μετάσταση του ηπατοκυτταρικού καρκίνου. Η μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα HuH7 για να διερευνήσει την ανασταλτική δράση του RGFP966, ενός αναστολέα της ιστόνης δεακετυλάσης 3 (HDAC3), κατά του HCC μέσω της καταστολής των γονιδίων της οδού EGFR.

Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό Cells υποδεικνύει τη χρήση κυττάρων HuH7 στη διερεύνηση του αντι-HCC δυναμικού ενός ραδιονουκλιδίου, δηλαδή του υπερρενικού ρενίου.

Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο περιοδικό International Journal of Nanomedicine. Η μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα HuH7 για να διερευνήσει την αντιιική δράση των νανοσωματιδίων χιτοζάνης που περιέχουν κουρκουμίνη κατά του γονότυπου 4a του ιού της ηπατίτιδας C (HCV).

Πόροι HuH-7: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Υπάρχουν πολλοί πόροι διαθέσιμοι για την καλλιέργεια και τη συντήρηση της κυτταρικής σειράς HuH7. Εδώ, θα μάθετε για τους διαθέσιμους πόρους που εξηγούν τα πρωτόκολλα κυτταρικής καλλιέργειας και μεταμόλυνσης για το HuH7, καθώς και για εκπαιδευτικά βίντεο.

Πρωτόκολλα κυτταρικής καλλιέργειας

Οι παρακάτω πόροι μπορούν να σας βοηθήσουν να ξεκινήσετε την καλλιέργεια και τη συντήρηση των HuH7.

Πρωτόκολλα μεταμόλυνσης των HuH7

Τα κύτταρα HuH7 μετασχηματίζονται με πολλούς τρόπους. Οι παρακάτω πηγές παρέχουν πληθώρα πληροφοριών σχετικά με τα πρωτόκολλα μετασχηματισμού, τα απαιτούμενα αντιδραστήρια και χημικά, χρήσιμες συμβουλές και προφυλάξεις.

  • Μεταφορά HUH-7: Αυτός ο ιστότοπος παρέχει λεπτομέρειες σχετικά με τα αντιδραστήρια μεταφοράς για τη σειρά κυττάρων HuH7. Επιπλέον, παρέχει επίσης τους ακόλουθους συνδέσμους για το απλό πρωτόκολλο μεταφοράς Huh7 και το πρωτόκολλο μεταφοράς Huh7 CRISPR/Cas9.

Βίντεο σχετικά με τη σειρά κυττάρων HuH7

Υπάρχουν πολλά εκπαιδευτικά βίντεο σχετικά με βασικά πρωτόκολλα υποκαλλιέργειας, επιχρίσματος και μεταμόλυνσης, καθώς και άλλα θέματα.

Ελπίζουμε ότι οι πληροφορίες που παρέχονται σε αυτό το άρθρο θα σας βοηθήσουν να αποκτήσετε βασικές και προχωρημένες γνώσεις σχετικά με τη κυτταρική σειρά HuH7 πριν ξεκινήσετε την εργασία σας. Εάν θέλετε να χρησιμοποιήσετε αυτά τα κύτταρα στην ερευνητική σας εργασία, μπορείτε να τα παραγγείλετε από εμάς.

Συχνές ερωτήσεις σχετικά με τη κυτταρική σειρά HuH7 και την έρευνα στον τομέα των ιών

Τα κύτταρα HuH-7 είναι μια σειρά ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων του ήπατος, που προέρχονται από ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα. Χρησιμοποιούνται εκτενώς στη βιοϊατρική έρευνα, ιδίως σε μελέτες που σχετίζονται με τον καρκίνο του ήπατος, τη μόλυνση από τον ιό της ηπατίτιδας C (HCV) και τον μεταβολισμό των φαρμάκων.
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HuH-7 είναι περίπου 24 ώρες, αν και αυτός μπορεί να διαφέρει ανάλογα με τις ειδικές συνθήκες καλλιέργειας και τον αριθμό διέλευσης των κυττάρων που χρησιμοποιούνται.
Το προφίλ γονιδιακής έκφρασης περιλαμβάνει τη μέτρηση της δραστηριότητας και των επιπέδων έκφρασης χιλιάδων γονιδίων ταυτόχρονα για την κατανόηση των κυτταρικών λειτουργιών και αποκρίσεων. Στα κύτταρα HuH7, η τεχνική αυτή είναι ζωτικής σημασίας για τη μελέτη του τρόπου με τον οποίο αυτά τα κύτταρα αντιδρούν σε διάφορες ιογενείς λοιμώξεις, συμπεριλαμβανομένων των HCV και SARS, αναλύοντας τις αλλαγές στα πρότυπα γονιδιακής έκφρασης.
Ο γονότυπος συναίνεσης του HCV αναφέρεται στην πιο κοινή γενετική σύνθεση που συναντάται στα στελέχη του HCV. Η κατανόηση αυτού του γονότυπου είναι απαραίτητη στην έρευνα των κυττάρων HuH7, διότι βοηθά στο σχεδιασμό πειραμάτων για τη μελέτη των αλληλεπιδράσεων του HCV με τα κύτταρα του ξενιστή, της διαδικασίας αντιγραφής του και της αποτελεσματικότητας των πιθανών αντιικών φαρμάκων.
Η είσοδος του HCV στα κύτταρα HuH7 διαμεσολαβείται από συγκεκριμένους κυτταρικούς παράγοντες του ξενιστή, τους οποίους ο ιός εκμεταλλεύεται για να μολύνει το κύτταρο. Στις μελέτες HCVcc (Hepatitis C Virus Cell Culture), η κατανόηση αυτών των μηχανισμών εισόδου και των παραγόντων ξενιστή είναι ζωτικής σημασίας για την ανάπτυξη μοντέλων για τη μελέτη της ιογενούς λοίμωξης, του πολλαπλασιασμού και της παθογένειας σε ελεγχόμενο περιβάλλον.
Τα κύτταρα HuH7 ονομάζονται επιτρεπτά, επειδή επιτρέπουν εύκολα την είσοδο και τον πολλαπλασιασμό ορισμένων ιών, συμπεριλαμβανομένων του HCV και του SARS. Αυτό τα καθιστά ανεκτίμητο εργαλείο για την κατανόηση του κύκλου ζωής του ιού, των αλληλεπιδράσεων μεταξύ ξενιστή και ιού και για τον έλεγχο αντι-ιικών ενώσεων.
Η απόκριση της ιντερφερόνης είναι μια κρίσιμη πτυχή της έμφυτης ανοσολογικής απόκρισης στις ιογενείς λοιμώξεις. Στα κύτταρα HuH7, η μελέτη της απόκρισης της ιντερφερόνης μπορεί να προσφέρει πληροφορίες για τους κυτταρικούς μηχανισμούς που συμβάλλουν στην αναστολή του SARS και άλλων ιών, προσφέροντας πιθανές οδούς για θεραπευτική παρέμβαση.
Η πρωτεομική, η μεγάλης κλίμακας μελέτη των πρωτεϊνών, συμπληρώνει τις γενετικές μελέτες παρέχοντας πληροφορίες για τις πρωτεΐνες που εμπλέκονται στον πολλαπλασιασμό του HCV και την παθογένεια του SARS εντός των κυττάρων HuH7. Αυτό μπορεί να αποκαλύψει τις λειτουργικές συνέπειες των αλλαγών της γονιδιακής έκφρασης και να εντοπίσει πιθανούς στόχους για αντιιική θεραπεία.
Η μικροφασματοσκοπία Raman είναι μια μη επεμβατική τεχνική που παρέχει λεπτομερείς πληροφορίες σχετικά με τη μοριακή σύνθεση των κυττάρων. Στο πλαίσιο των μολυσμένων κυττάρων HuH7, μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση λεπτών αλλαγών στην κυτταρική βιοχημεία που προκαλούνται από την ιογενή λοίμωξη, βοηθώντας στην κατανόηση των επιδράσεων του ιού στα κύτταρα του ξενιστή.
Η μελέτη των σηματοδοτικών μονοπατιών στα κύτταρα HuH7 βοηθά στην κατανόηση του τρόπου με τον οποίο αυτά τα κύτταρα ανταποκρίνονται στις ιογενείς λοιμώξεις σε μοριακό επίπεδο. Αυτό περιλαμβάνει τον τρόπο με τον οποίο τα κύτταρα σηματοδοτούν ως απάντηση στην είσοδο του ιού, τον πολλαπλασιασμό και την ενεργοποίηση των ανοσολογικών αποκρίσεων, παρέχοντας κρίσιμες γνώσεις σχετικά με τους μηχανισμούς της παθογένειας του ιού και τα πιθανά σημεία παρέμβασης.

Εντοπίσαμε ότι βρίσκεστε σε διαφορετική χώρα ή χρησιμοποιείτε διαφορετική γλώσσα του προγράμματος περιήγησης από την τρέχουσα επιλεγμένη. Θα θέλατε να αποδεχτείτε τις προτεινόμενες ρυθμίσεις

Κλείστε το