Κύτταρα Hep3B: Καρκινώματος: Έρευνα και ανακάλυψη
Το HEP3B είναι μια αθάνατη κυτταρική σειρά καρκινώματος ηπατοκυττάρων ανθρώπινης προέλευσης. Χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για την ηπατοτοξικότητα και τον μεταβολισμό των φαρμάκων. Η αποτελεσματικότητα της διαμόλυνσης HEP3B είναι σημαντική- ως εκ τούτου, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται συνήθως για τη μελέτη της ανάπτυξης, της εξέλιξης και των θεραπευτικών παρεμβάσεων του καρκίνου του ήπατος. Αυτό το άρθρο καλύπτει όλες τις απαραίτητες πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά HEP3B για να σας βοηθήσει να εργαστείτε μαζί της. Κυρίως, θα περιλαμβάνει:
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HEP3B
- Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HEP3B
- Κυτταρική σειρά HEP3B: HEPB: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων HEP3B στην έρευνα
- Δημοσιεύσεις για την κυτταρική σειρά HEP3B
- Πηγές για την κυτταρική σειρά HEP3B: HEBPB: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
1.γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HEP3B
Οι πρωταρχικές πληροφορίες που χρειάζεστε για μια κυτταρική σειρά είναι η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά της. Μπορούν να σας βοηθήσουν να αποφασίσετε τη χρήση της στην έρευνά σας και να σας βοηθήσουν στην αντιμετώπισή της. Αυτή η ενότητα του άρθρου καλύπτει όλες τις βασικές πληροφορίες σχετικά με την προέλευση και τα χαρακτηριστικά του HEP3B. Εδώ θα μάθετε: Τι είναι η κυτταρική σειρά Hep 3B Ποια είναι η προέλευση των κυττάρων Hep3B Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων HEP3B
- Η HEP3B, μια συνεχής ανθρώπινη κυτταρική σειρά ηπατώματος, προέρχεται από τον ηπατικό ιστό ενός 8χρονου αγοριού από την Αφρική με ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC). Δημιουργήθηκε από τον Aden και τους συνεργάτες του το 1979 στο εργαστήριο της Barbara B. Knowles, Ινστιτούτο Wistar, Φιλαδέλφεια, ΗΠΑ [1].
- Τα κύτταρα HEP3B έχουν ενσωμάτωση του γονιδιώματος του ιού της ηπατίτιδας Β (HBV) στο χρωμόσωμά τους.
- Αυτά τα κύτταρα καρκινώματος ηπατοκυττάρων παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία.
- Τα κύτταρα HEP3B έχουν έναν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 60. Σε αντίθεση με το HepG2, δεν διαθέτουν αναδιαταγμένο χρωμόσωμα 1.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ των HepG2 και Hep3B
Τα HepG2 και HEP3B διαφέρουν ως προς τον αριθμό των χρωμοσωμάτων ανά κύτταρο. Το HEP3B περιέχει 60 χρωμοσώματα, ενώ τα κύτταρα HepG2 έχουν κατά μέσο όρο 55 χρωμοσώματα. Επιπλέον, το HepG2 είναι μη ογκογόνο και αρνητικό για την ηπατίτιδα Β, ενώ το HEP3B είναι ογκογόνο και θετικό για τον HBV.
2.πληροφορίες καλλιέργειας για την κυτταρική σειρά HEP3B
Η γνώση σχετικά με τις πληροφορίες καλλιέργειας μιας κυτταρικής σειράς μπορεί να σας διευκολύνει. Αυτή η ενότητα καλύπτει όλα τα βασικά σημεία για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HEP3B HBV, συμπεριλαμβανομένων των εξής: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων Hep3B Ποιες είναι οι συνθήκες καλλιέργειας της HEP3B Πώς καλλιεργείτε τα κύτταρα ΗΕΠ3Β ΗΒC
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HEP3B
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HEP3B είναι περίπου 36 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Αυτή η κυτταρική σειρά ηπατώματος είναι προσκολλημένη. |
|
Αναλογία διαχωρισμού: |
Τα κύτταρα HEP3B υποκαλλιεργούνται σε αναλογία 1:2 έως 1:4. Τα προσκολλημένα κύτταρα HEP3B ξεπλένονται με 1 x PBS και στη συνέχεια επωάζονται με το διάλυμα διαχωρισμού Accutase. Μετά από 8 έως 10 λεπτά, προστίθεται φρέσκο μέσο και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Στη συνέχεια, τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωματώνονται προσεκτικά και χύνεται σε φιάλες που περιέχουν μέσα καλλιέργειας σε συνιστώμενη αναλογία διαχωρισμού. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Για την καλλιέργεια των κυττάρων HEP3B χρησιμοποιείται μέσο EMEM που περιέχει 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-γλουταμίνη και Earle's Balanced Salt Solution (EBSS). |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Τα κύτταρα HEP3B καλλιεργούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα 37°C με συνεχή παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Η αποθήκευση των κατεψυγμένων κυττάρων HEP3B γίνεται σε θερμοκρασία κάτω των -150°C σε ηλεκτρικό καταψύκτη ή στην αέρια φάση υγρού αζώτου. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Το μέσο κατάψυξης που συνιστάται για τα κύτταρα HEP3B είναι το CM-1 ή το CM-ACF. Η κατάψυξη των κυττάρων γίνεται με αργή διαδικασία κατάψυξης που επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1°C ανά λεπτό για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο προρυθμισμένο στους 37°C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Αργότερα τα κύτταρα αυτά προστίθενται στο φρέσκο μέσο ανάπτυξης και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των στοιχείων του μέσου κατάψυξης. Τα συλλεγέντα κύτταρα ανασυσσωματώνονται και διανέμονται σε νέες φιάλες για ανάπτυξη. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Για την καλλιέργεια κυττάρων HEP3B απαιτείται εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
3.κυτταρική σειρά HEP3B: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
Το HEP3B είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη κυτταρική σειρά ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Αυτή η ενότητα θα επικεντρωθεί σε ορισμένα βασικά πλεονεκτήματα και περιορισμούς αυτών των κυττάρων ηπατώματος.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα των κυττάρων HEP3B είναι τα εξής:
|
Εύκολη καλλιέργεια |
Τα κύτταρα HEP3B δεν έχουν περίπλοκες απαιτήσεις κυτταροκαλλιέργειας, γεγονός που καθιστά εύκολο τον χειρισμό και τη συντήρησή τους σε ένα ερευνητικό εργαστήριο. Αυτό απλοποιεί τις πειραματικές διαδικασίες. |
|
Υψηλή αποτελεσματικότητα της διαμόλυνσης |
Τα κύτταρα HEP3B παρουσιάζουν αξιοσημείωτη αποτελεσματικότητα διαμόλυνσης, γεγονός που τα καθιστά ευρέως χρησιμοποιούμενα σε μελέτες γενετικού χειρισμού και μελέτες που σχετίζονται με τη γονιδιακή έκφραση. |
|
Ογκογονικότητα |
Το HEP3B είναι μια καρκινογόνος κυτταρική σειρά ηπατοκυτταρικού καρκινώματος ικανή να σχηματίζει όγκους όταν εγχέεται σε ανοσοκατεσταλμένο ποντίκι. Αυτό βοηθά στη μελέτη της εξέλιξης και της ανάπτυξης του καρκίνου με τη χρήση μοντέλων ξενομοσχεύματος HEP3B. |
|
Κατάσταση P53 HEP3B |
Τα κύτταρα HEP3B διαθέτουν μετάλλαξη του γονιδίου P53 παρόμοια με το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC) και άλλους καρκίνους, γεγονός που τα καθιστά σημαντικά για τη μελέτη των επιπτώσεων της μετάλλαξης P53 στην αύξηση, την ανάπτυξη και την εξέλιξη του καρκίνου. |
Περιορισμοί
Ο περιορισμός που σχετίζεται με την κυτταρική σειρά HEP3B είναι:
|
In vitro κυτταρικό μοντέλο |
Η κυτταρική σειρά HEP3B χρησιμεύει ως in vitro μοντέλο κυττάρων ηπατοκυτταρικού καρκινώματος (HCC). Ωστόσο, ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως την πολυπλοκότητα του HCC, όπως συναντάται σε ζωντανούς οργανισμούς. Κατά συνέπεια, τα πειραματικά αποτελέσματα in vitro ενδέχεται να διαφέρουν από εκείνα που παρατηρούνται in vivo. |
4.εφαρμογές των κυττάρων HEP3B στην έρευνα
Η κυτταρική σειρά HEP3B προσφέρει διάφορες ερευνητικές εφαρμογές στη βιοϊατρική έρευνα. Ορισμένες από τις βασικές ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων HEP3B περιλαμβάνουν:
- Βιολογία του καρκίνου: Το HEP3B είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Είναι ένα ανεκτίμητο κυτταρικό μοντέλο για τη διερεύνηση των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που διέπουν την ανάπτυξη και την εξέλιξη του HCC. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να μελετήσουν γενετικές μεταλλάξεις, κυτταρικές διεργασίες και μονοπάτια κυτταρικής σηματοδότησης που σχετίζονται με τον καρκίνο του ήπατος. Όπως μια μελέτη που χρησιμοποίησε κύτταρα HEP3B και διαπίστωσε ότι το microRNA-223-3p ρυθμίζει τα συστατικά του φλεγμονώματος NLRP3, αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό και ενισχύει την απόπτωση των ηπατοκαρκινωματικών κυττάρων HEP3B [2].
- Διαλογή και ανάπτυξη φαρμάκων: Η κυτταρική σειρά HEP3B χρησιμοποιείται επίσης για τη δοκιμή, τον έλεγχο και την ανάπτυξη νέων θεραπευτικών ουσιών κατά του καρκινώματος του ήπατος. Επιπλέον, χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της τοξικότητας και της αποτελεσματικότητας διαφόρων αντικαρκινικών φαρμάκων και θεραπειών. Οι ερευνητές χρησιμοποίησαν επίσης αυτά τα κύτταρα ηπατώματος για τη μελέτη του μεταβολισμού των φαρμάκων. Οι ερευνητές χρησιμοποίησαν κύτταρα HEP3B και αξιολόγησαν το κυτταροτοξικό δυναμικό του φυτικού εκχυλίσματος Cotinus coggygria στα κύτταρα καρκινώματος ηπατοκυττάρων HEP3B [3].
- Ιογενείς λοιμώξεις: Το HEP3B είναι μια θετική στον ιό της ηπατίτιδας Β κυτταρική σειρά- ως εκ τούτου, χρησιμοποιείται για τη μελέτη ιογενών λοιμώξεων που μπορεί να οδηγήσουν στην ανάπτυξη καρκίνου του ήπατος, δηλαδή του HBV και του HCV. Αυτό μπορεί να βοηθήσει στην καλύτερη κατανόηση των ιογενών λοιμώξεων και στην ανάπτυξη πιθανών αντι-ιικών θεραπειών. Για παράδειγμα, μια μελέτη χρησιμοποίησε καρκινικά ηπατοκυτταρικά κύτταρα HEP3B και διερεύνησε τη σημασία της ουβικουιτινίωσης για τον πολλαπλασιασμό του ιού της ηπατίτιδας c. Τα ευρήματα υπέδειξαν ότι η ειδική για την ουβικουιτίνη πρωτεάση 15 (USP15) εμπλέκεται στον πολλαπλασιασμό του HCV μέσω της ρύθμισης ειδικών για τα ηπατοκύτταρα λειτουργιών, συμπεριλαμβανομένου του σχηματισμού λιπιδικών σταγονιδίων και της μετάφρασης του RNA του HCV [4].
5.δημοσιεύσεις για την κυτταρική σειρά HEP3B
Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα HEP3B.
Αυτή η δημοσίευση στην επιθεώρηση Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) πρότεινε ότι η επαγόμενη από ένωση λουτεολίνης καταπόνηση του ενδοπλασματικού δικτύου μπορεί να ασκεί αντικαρκινικές επιδράσεις σε κύτταρα HEP3B με P53-null με τρόπο ανεξάρτητο από το P53.
Αυτή η μελέτη στο Archiv der Pharmazie (2021) πρότεινε ένα πεντακυκλικό τριτερπενοειδές, τη λουπεόλη, ως δυνητικό αντικαρκινικό παράγοντα κατά των κυττάρων HEP3B.
Το άρθρο αυτό δημοσιεύεται στο Molecular Medicine Reports (2017). Τα ευρήματα της μελέτης αναφέρουν ότι το αιθανολικό εκχύλισμα Cnidium monnieri (L.) Cusson επάγει τον κυτταρικό θάνατο (απόπτωση) και τη διακοπή του κυτταρικού κύκλου σε κύτταρα ηπατοκαρκινώματος HepG2 και HEP3B μέσω της ρύθμισης του σηματοδοτικού μονοπατιού p53 και Akt/GSK-3β.
Αυτή η έρευνα που δημοσιεύθηκε στην επιθεώρηση Biomolecules and Therapeutics (2020) πρότεινε ότι η auranofin παρουσιάζει συνεργιστική δράση και προάγει την διαμεσολαβούμενη από τη σουλφοραφάνη απόπτωση των κυττάρων HEP3B μέσω της ενεργοποίησης του μονοπατιού PI3K/AKT.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο στο BioFactors (2023) πρότεινε ότι το κυκλικό RNA-0072309 ασκεί αντικαρκινικές επιδράσεις σε κύτταρα ηπατοκυτταρικού καρκινώματος HEP3B μέσω στόχευσης του miRNA-665.
6.πόροι για την κυτταρική σειρά HEP3B: H3PEB3: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικοί διαθέσιμοι πόροι για τα κύτταρα HEP3B:
- Διαμόλυνση HEP3B: Αυτό το βίντεο θα εξηγήσει το πρωτόκολλο διαμόλυνσης για τα κύτταρα HEP3B.
- Αποδοτικότητα της διαμόλυνσης HEP3B: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε τη σύνθεση του μέσου HEP3B DMEM, τη διέλευση των κυττάρων και το πρωτόκολλο διαμόλυνσης για κύτταρα HEP3B. Επιπλέον, παρέχει πληροφορίες για τη βελτιστοποίηση του αντιδραστηρίου HEP3B lipofectamine 3000 στο πρωτόκολλο διαμόλυνσης.
Ο ακόλουθος σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων HEP3B:
- Συνθήκες καλλιέργειας HEP3B: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο για το χειρισμό και τη διατήρηση των καλλιεργειών Huh7 και HEP3B.
- Κύτταρα HEP3B: Αυτός ο δικτυακός τόπος έχει πολλές πληροφορίες σχετικά με τα κύτταρα HEP3B, συμπεριλαμβανομένων των μέσων HEP3B, του πρωτοκόλλου για τη διάσπαση των κυττάρων, την απόψυξη και τον χειρισμό των πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
- Wan, L., et al., Το miRNA-223-3p ρυθμίζει το NLRP3 για την προώθηση της απόπτωσης και την αναστολή του πολλαπλασιασμού των κυττάρων hep3B. Πειραματική και θεραπευτική ιατρική, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. and S. Selen-Isbilir, Κυτταροτοξική επίδραση του εκχυλίσματος Cotinus coggygria στην καρκινική κυτταρική σειρά Hep3B. Natural Product Research, 2022: σ. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., Ο USP15 συμμετέχει στον πολλαπλασιασμό του ιού της ηπατίτιδας C μέσω της ρύθμισης της μετάφρασης του ιικού RNA και του σχηματισμού λιπιδικών σταγονιδίων. Journal of Virology, 2019. 93(6): σ. 10.1128/jvi. 01708-18.