Κύτταρα Hep3B: Έρευνα και ανακαλύψεις σχετικά με το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα
Το HEP3B είναι μια αθανατοποιημένη κυτταρική σειρά καρκινώματος ηπατοκυττάρων ανθρώπινης προέλευσης. Χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για την ηπατοτοξικότητα και το μεταβολισμό των φαρμάκων. Η αποτελεσματικότητα της μεταμόλυνσης των HEP3B είναι σημαντική· ως εκ τούτου, αυτά τα κύτταρα χρησιμοποιούνται συνήθως για τη μελέτη της ανάπτυξης, της εξέλιξης και των θεραπευτικών παρεμβάσεων του καρκίνου του ήπατος. Αυτό το άρθρο καλύπτει όλες τις απαραίτητες πληροφορίες σχετικά με τη κυτταρική σειρά HEP3B για να σας βοηθήσει στην εργασία σας με αυτήν. Κυρίως, θα περιλαμβάνει:
- Μέσο ανάπτυξης
- Για την καλλιέργεια των κυττάρων HEP3B χρησιμοποιείται μέσο EMEM που περιέχει 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-γλουταμίνη και ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα Earle (EBSS).
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HEP3B είναι περίπου 36 ώρες.
- Τύπος ανάπτυξης
- Αυτή η κυτταρική σειρά ηπατώματος είναι προσκολλητική.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διαθέσιμο από
- Cytion — Παραγγελία HEP3B
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HEP3B
- Πληροφορίες καλλιέργειας σχετικά με τη σειρά κυττάρων HEP3B
- Κυτταρική σειρά HEP3B: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων HEP3B στην έρευνα
- Δημοσιεύσεις σχετικά με τη σειρά κυττάρων HEP3B
- Πόροι για τη σειρά κυττάρων HEP3B: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HEP3B
- Πληροφορίες καλλιέργειας σχετικά με τη σειρά κυττάρων HEP3B
- Κυτταρική σειρά HEP3B: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων HEP3B στην έρευνα
- 5. Δημοσιεύσεις σχετικά με τη σειρά κυττάρων HEP3B
- Πόροι για τη σειρά κυττάρων HEP3B: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HEP3B
Οι βασικές πληροφορίες που χρειάζεστε για μια κυτταρική σειρά είναι η προέλευσή της και τα γενικά χαρακτηριστικά της. Αυτές οι πληροφορίες μπορούν να σας βοηθήσουν να αποφασίσετε τη χρήση της στην έρευνά σας και να τη χειριστείτε. Αυτή η ενότητα του άρθρου καλύπτει όλες τις βασικές πληροφορίες σχετικά με την προέλευση και τα χαρακτηριστικά της HEP3B. Εδώ θα μάθετε: Τι είναι οι κυτταρικές σειρές Hep 3B; Ποια είναι η προέλευση των κυττάρων Hep3B; Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων HEP3B;
- Η HEP3B, μια συνεχής κυτταρική σειρά ανθρώπινου ηπατώματος, προήλθε από τον ηπατικό ιστό ενός 8χρονου αφρικανικού αγοριού με ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC). Δημιουργήθηκε από τον Aden και τους συνεργάτες του το 1979 στο εργαστήριο της Barbara B. Knowles, στο Wistar Institute της Φιλαδέλφειας, στις ΗΠΑ [1].
- Τα κύτταρα HEP3B έχουν ενσωμάτωση του γονιδιώματος του ιού της ηπατίτιδας Β (HBV) στο χρωμόσωμά τους.
- Αυτά τα καρκινικά ηπατοκυτταρικά κύτταρα παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία.
- Τα κύτταρα HEP3B έχουν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 60. Σε αντίθεση με τα HepG2, δεν διαθέτουν αναδιατάξιμο χρωμόσωμα 1.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ των HepG2 και των Hep3B;
Τα HepG2 και HEP3B διαφέρουν ως προς τον αριθμό των χρωμοσωμάτων ανά κύτταρο. Τα HEP3B περιέχουν 60 χρωμοσώματα, ενώ τα κύτταρα HepG2 έχουν κατά μέσο όρο 55 χρωμοσώματα. Επιπλέον, τα HepG2 είναι μη ογκογόνα και αρνητικά στην ηπατίτιδα Β, ενώ τα HEP3B είναι ογκογόνα και θετικά στον HBV.
Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HEP3B
Η γνώση των πληροφοριών καλλιέργειας μιας κυτταρικής σειράς μπορεί να σας διευκολύνει. Αυτή η ενότητα καλύπτει όλα τα βασικά σημεία για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HEP3B HBV, συμπεριλαμβανομένων των εξής: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων Hep3B; Ποιες είναι οι συνθήκες καλλιέργειας των HEP3B; Πώς καλλιεργείτε τα κύτταρα HEP3B HCC;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HEP3B
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HEP3B είναι περίπου 36 ώρες.
Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:
Αυτή η κυτταρική σειρά ηπατώματος είναι προσκολλητική.
Αναλογία διαίρεσης:
Τα κύτταρα HEP3B υποκαλλιεργούνται σε αναλογία 1:2 έως 1:4. Τα προσκολλημένα κύτταρα HEP3B ξεπλένονται με 1 x PBS και στη συνέχεια επωάζονται με το διάλυμα αποσύνδεσης Accutase. Μετά από 8 έως 10 λεπτά, προστίθεται φρέσκο μέσο και τα κύτταρα φυγοκεντρώνονται. Τα συλλεγμένα κύτταρα στη συνέχεια επαναδιαλύονται προσεκτικά και χύνονται σε φιάλες που περιέχουν μέσο καλλιέργειας σε συνιστώμενη αναλογία διαίρεσης.
Μέσο ανάπτυξης:
Για την καλλιέργεια των κυττάρων HEP3B χρησιμοποιείται μέσο EMEM που περιέχει 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-γλουταμίνη και ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα Earle (EBSS).
Συνθήκες ανάπτυξης:
Τα κύτταρα HEP3B καλλιεργούνται σε υγραντικό επωαστήρα στους 37 °C με συνεχή παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα HEP3B αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη ή στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Το μέσο κατάψυξης που συνιστάται για τα κύτταρα HEP3B είναι το CM-1 ή το CM-ACF. Τα κύτταρα καταψύχονται χρησιμοποιώντας μια διαδικασία αργής κατάψυξης που επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1°C ανά λεπτό, προκειμένου να προστατευθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο προρυθμισμένο στους 37°C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Στη συνέχεια, τα κύτταρα αυτά προστίθενται στο φρέσκο μέσο ανάπτυξης και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των στοιχείων του μέσου κατάψυξης. Τα συλλεγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται και μεταφέρονται σε νέες φιάλες για ανάπτυξη.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για την καλλιέργεια κυττάρων HEP3B απαιτείται εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Κυτταρική σειρά HEP3B: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
Η HEP3B είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη κυτταρική σειρά ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Αυτή η ενότητα θα επικεντρωθεί σε ορισμένα βασικά πλεονεκτήματα και περιορισμούς αυτών των ηπατοκαρκινικών κυττάρων.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα των κυττάρων HEP3B είναι:
Εύκολη καλλιέργεια
Τα κύτταρα HEP3B δεν έχουν ιδιαίτερες απαιτήσεις καλλιέργειας, γεγονός που τα καθιστά εύκολα στη διαχείριση και τη συντήρηση σε ένα ερευνητικό εργαστήριο. Αυτό απλοποιεί τις πειραματικές διαδικασίες.
Υψηλή απόδοση μεταμόλυνσης
Τα κύτταρα HEP3B παρουσιάζουν αξιοσημείωτη αποτελεσματικότητα μεταμόλυνσης, γεγονός που τα καθιστά ευρέως χρησιμοποιούμενα σε μελέτες γενετικής χειραγώγησης και έκφρασης γονιδίων.
Ογκογένεση
Το HEP3B είναι μια ογκογόνος κυτταρική σειρά ηπατοκυτταρικού καρκινώματος ικανή να σχηματίζει όγκους όταν εγχυθεί σε ποντίκι με ανοσοκαταστολή. Αυτό βοηθά στη μελέτη της εξέλιξης και της ανάπτυξης του καρκίνου χρησιμοποιώντας μοντέλα ξενομοσχεύματος HEP3B.
Κατάσταση P53 των HEP3B
Τα κύτταρα HEP3B διαθέτουν μια μετάλλαξη του γονιδίου P53 παρόμοια με αυτή του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος (HCC) και άλλων καρκίνων, γεγονός που τα καθιστά κατάλληλα για τη μελέτη των επιδράσεων της μετάλλαξης του P53 στην ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόοδο του καρκίνου.
Περιορισμοί
Ο περιορισμός που σχετίζεται με τη κυτταρική σειρά HEP3B είναι:
In vitro κυτταρικό μοντέλο
Η κυτταρική σειρά HEP3B χρησιμεύει ως in vitro μοντέλο κυττάρων ηπατοκυτταρικού καρκίνου (HCC). Ωστόσο, ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως την πολυπλοκότητα του HCC όπως αυτή παρατηρείται σε ζωντανούς οργανισμούς. Κατά συνέπεια, τα πειραματικά αποτελέσματα in vitro ενδέχεται να διαφέρουν από αυτά που παρατηρούνται in vivo.
Εφαρμογές των κυττάρων HEP3B στην έρευνα
Η κυτταρική σειρά HEP3B προσφέρει διάφορες εφαρμογές στην βιοϊατρική έρευνα. Μερικές από τις βασικές εφαρμογές των κυττάρων HEP3B περιλαμβάνουν:
- Βιολογία του καρκίνου: Η HEP3B είναι μια κυτταρική σειρά ανθρώπινου ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Αποτελεί ένα ανεκτίμητο κυτταρικό μοντέλο για τη διερεύνηση των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που υποκρύπτονται στην ανάπτυξη και την εξέλιξη του HCC. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να μελετήσουν γενετικές μεταλλάξεις, κυτταρικές διεργασίες και οδούς κυτταρικής σηματοδότησης που σχετίζονται με τον καρκίνο του ήπατος. Για παράδειγμα, μια μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα HEP3B και διαπίστωσε ότι το microRNA-223-3p ρυθμίζει τα συστατικά του inflammasome NLRP3, αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό και ενισχύει την απόπτωση των κυττάρων ηπατοκαρκινώματος HEP3B [2].
- Διαλογή και ανάπτυξη φαρμάκων: Η κυτταρική σειρά HEP3B χρησιμοποιείται επίσης για τη δοκιμή, τη διαλογή και την ανάπτυξη νέων θεραπειών κατά του καρκίνου του ήπατος. Επιπλέον, χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της τοξικότητας και της αποτελεσματικότητας διαφόρων αντικαρκινικών φαρμάκων και θεραπειών. Οι ερευνητές χρησιμοποίησαν επίσης αυτά τα κύτταρα ηπατώματος για να μελετήσουν το μεταβολισμό των φαρμάκων. Χρησιμοποίησαν κύτταρα HEP3B και αξιολόγησαν το κυτταροτοξικό δυναμικό του φυτικού εκχυλίσματος Cotinus coggygria σε κύτταρα καρκινώματος ηπατοκυττάρων HEP3B [3].
- Ιογενείς λοιμώξεις: Η HEP3B είναι μια κυτταρική σειρά θετική στον ιό της ηπατίτιδας Β. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιείται για τη μελέτη ιογενών λοιμώξεων που μπορεί να οδηγήσουν στην ανάπτυξη καρκίνου του ήπατος, δηλαδή του HBV και του HCV. Αυτό μπορεί να βοηθήσει στην καλύτερη κατανόηση των ιογενών λοιμώξεων και στην ανάπτυξη πιθανών αντιιικών θεραπειών. Για παράδειγμα, σε μια μελέτη χρησιμοποιήθηκαν καρκινικά ηπατοκυτταρικά κύτταρα HEP3B και διερευνήθηκε η σημασία της ουβικιτινίωσης για τη διάδοση του ιού της ηπατίτιδας C. Τα ευρήματα υποδείκνυαν ότι η πρωτεάση 15 ειδική για την ουβικιτίνη (USP15) εμπλέκεται στη διάδοση του HCV μέσω της ρύθμισης λειτουργιών ειδικών για τα ηπατοκύτταρα, συμπεριλαμβανομένου του σχηματισμού σταγονιδίων λιπιδίων και της μετάφρασης του RNA του HCV [4].
5. Δημοσιεύσεις σχετικά με τη κυτταρική σειρά HEP3B
Αυτό το τμήμα του άρθρου θα καλύψει μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα HEP3B.
Αυτή η δημοσίευση στο Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) πρότεινε ότι το στρες του ενδοπλασματικού δικτύου που προκαλείται από τη λουτεολίνη μπορεί να ασκήσει αντικαρκινική δράση στα κύτταρα HEP3B χωρίς P53 με τρόπο ανεξάρτητο από το P53.
Αυτή η μελέτη στο Archiv der Pharmazie (2021) πρότεινε ένα πεντακυκλικό τριτερπενοειδές, τη λουπεόλη, ως πιθανό αντικαρκινικό παράγοντα κατά των κυττάρων HEP3B.
Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο Molecular Medicine Reports (2017). Τα ευρήματα της μελέτης αναφέρουν ότι το εκχύλισμα αιθανόλης από το Cnidium monnieri (L.) Cusson προκαλεί κυτταρικό θάνατο (απόπτωση) και διακοπή του κυτταρικού κύκλου στα κύτταρα ηπατοκαρκινώματος HepG2 και HEP3B μέσω της ρύθμισης της οδού σηματοδότησης p53 και Akt/GSK-3β.
Αυτή η έρευνα που δημοσιεύθηκε στο Biomolecules and Therapeutics (2020) πρότεινε ότι η αουρανοφίνη εμφανίζει συνεργιστική δράση και προάγει την αποπτωτική διαδικασία που προκαλείται από τη σουλφοραφάνη στα κύτταρα HEP3B μέσω της ενεργοποίησης της οδού PI3K/AKT.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο στο BioFactors (2023) πρότεινε ότι το κυκλικό RNA-0072309 ασκεί αντικαρκινικές επιδράσεις στα κύτταρα ηπατοκυτταρικού καρκινώματος HEP3B στοχεύοντας το miRNA-665.
Πόροι για τη σειρά κυττάρων HEP3B: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικοί πόροι που είναι διαθέσιμοι για τα κύτταρα HEP3B:
- Μεταφορά HEP3B: Αυτό το βίντεο εξηγεί το πρωτόκολλο μεταφοράς για τα κύτταρα HEP3B.
- Αποτελεσματικότητα μεταφοράς HEP3B: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε τη σύνθεση του μέσου DMEM HEP3B, τη μεταμόσχευση κυττάρων και το πρωτόκολλο μεταφοράς για τα κύτταρα HEP3B. Επιπλέον, παρέχει πληροφορίες για τη βελτιστοποίηση του αντιδραστηρίου HEP3B lipofectamine 3000 στο πρωτόκολλο μεταφοράς σας.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων HEP3B:
- Συνθήκες καλλιέργειας HEP3B: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο χειρισμού και συντήρησης καλλιεργειών Huh7 και HEP3B.
- Κύτταρα HEP3B: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει πολλές πληροφορίες για τα κύτταρα HEP3B, συμπεριλαμβανομένων των μέσων HEP3B, του πρωτοκόλλου για τον διαχωρισμό των κυττάρων, την απόψυξη και τον χειρισμό των πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Προέλευση και ιδιότητες κυτταρικών σειρών ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): σ. 1040.
- Wan, L., et al., Το miRNA-223-3p ρυθμίζει το NLRP3 για να προάγει την απόπτωση και να αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων hep3B. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): σ. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. και S. Selen-Isbilir, Κυτταροτοξική δράση του εκχυλίσματος Cotinus coggygria στη γραμμή καρκινικών κυττάρων Hep3B. Natural Product Research, 2022: σ. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., Το USP15 συμμετέχει στη διάδοση του ιού της ηπατίτιδας C μέσω της ρύθμισης της μετάφρασης του ιικού RNA και του σχηματισμού λιπιδικών σταγονιδίων. Journal of Virology, 2019. 93(6): σ. 10.1128/jvi. 01708-18.