Κυτταρική σειρά HT22
Η HT22 είναι μια σειρά νευρωνικών κυττάρων ποντικού που χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα των νευροεπιστημών. Είναι πολύτιμη για τη μελέτη νευροεκφυλιστικών διαταραχών και τη δοκιμή πιθανών νευροπροστατευτικών θεραπειών ή αγωγών. Επιπλέον, τα κύτταρα HT22 είναι ευαίσθητα στο γλουταμινικό οξύ και, ως εκ τούτου, χρησιμοποιούνται για τη διερεύνηση της τοξικότητας που προκαλείται από το γλουταμινικό οξύ ή της νευρωνικής βλάβης.
- Μέσο ανάπτυξης
- Για την καλλιέργεια των κυττάρων HT22 χρησιμοποιείται μέσο DMEM. Συμπληρώνεται με 10% FBS, 4,5 g/L γλυκόζη, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3 και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο για βέλτιστη κυτταρική ανάπτυξη.
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HT22 είναι περίπου 15 ώρες.
- Τύπος ανάπτυξης
- Τα κύτταρα HT22 είναι προσκολλητικά.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διαθέσιμο από
- Cytion — Παραγγελία HT22
Αυτό το άρθρο επισημαίνει τις βασικές πτυχές των κυττάρων HT22 που μπορούν να σας βοηθήσουν στην ερευνητική σας εργασία. Θα εξετάσει κυρίως:
- Τα γενικά χαρακτηριστικά και την προέλευση των κυττάρων HT22
- Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT22
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς HT22
- Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς HT22
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα HT22
- Πόροι για τα κύτταρα HT22: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HT22
- Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT22
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς HT22
- 5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με θέμα τα κύτταρα HT22
- Πόροι για τα κύτταρα HT22: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Αναφορές
- Συχνές ερωτήσεις
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HT22
Αυτό το τμήμα του άρθρου θα ρίξει φως στην προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων HT22. Η γνώση αυτών των πληροφοριών σχετικά με μια κυτταρική σειρά είναι απαραίτητη πριν ξεκινήσετε την εργασία σας με αυτήν. Εδώ θα μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα HT22; Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων του ιππόκαμπου HT22; Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων HT22;
Τα HT22 είναι μια συνεχής κυτταρική σειρά που προέρχεται από την περιοχή του ιππόκαμπου του εγκεφάλου του ποντικιού. Πρόκειται για έναν υποκλώνο της γονικής κυτταρικής σειράς HT-4 που αναπτύχθηκε μέσω της αθανατοποίησης νευρωνικών ιστών ποντικιών μέσω ενός θερμοευαίσθητου πολυοϊού, του ιού των πιθήκων 40 (SV40) Τ αντιγόνου.
Αυτά τα κύτταρα διαφέρουν από τα ώριμα κύτταρα του ιππόκαμπου, καθώς στερούνται υποδοχέων γλουταμινικού και χολινεργικών υποδοχέων, όπως τα ώριμα νευρώνες ιπποκάμπου. Επομένως, δεν είναι κατάλληλα για ερευνητικές μελέτες που σχετίζονται με τη μνήμη [1].
Τα κύτταρα HT22 έχουν εμφάνιση παρόμοια με αυτή των επιθηλιακών κυττάρων.
Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT22
Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται σε ερευνητικά εργαστήρια νευροεπιστημών. Πριν από την καλλιέργεια αυτών των κυττάρων, οι ερευνητές αναζητούν βασικές πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων που θα κάνουν τη δουλειά τους εύκολη και αποδοτική. Αυτή η ενότητα καλύπτει όλα τα βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HT22. Θα μάθετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HT22; Πώς καλλιεργούνται τα κύτταρα HT22; Ποιο είναι το πρωτόκολλο καλλιέργειας των κυττάρων HT22; Ποιο είναι το μέσο καλλιέργειας των κυττάρων HT22;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HT22
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HT22 είναι περίπου 15 ώρες.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:
Τα κύτταρα HT22 είναι προσκολλητικά.
Αναλογία υποκαλλιέργειας:
Ο λόγος υποκαλλιέργειας για τα κύτταρα του ιππόκαμπου HT22 είναι 1:3 έως 1:6. Εν συντομία, το μέσο απομακρύνεται και τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1 x PBS. Προστίθεται διάλυμα αποσύνδεσης Accutase στη φιάλη και τα κύτταρα επωάζονται για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Στη συνέχεια, προστίθεται φρέσκο μέσο καλλιέργειας και τα κύτταρα συλλέγονται σε φιαλίδιο για φυγοκέντρηση. Το ίζημα κυττάρων που λαμβάνεται επαναδιαλύεται προσεκτικά και τα κύτταρα μεταφέρονται σε φιάλη καλλιέργειας για ανάπτυξη.
Μέσο ανάπτυξης:
Για την καλλιέργεια των κυττάρων HT22 χρησιμοποιείται μέσο DMEM. Συμπληρώνεται με 10% FBS, 4,5 g/L γλυκόζη, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3 και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο για βέλτιστη κυτταρική ανάπτυξη.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Οι καλλιέργειες κυττάρων HT22 διατηρούνται σε υγραντικό επωαστήρα (θερμοκρασία 37 °C) με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα HT22 μπορούν να αποθηκευτούν σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C είτε σε ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου είτε σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας για μακροχρόνια αποθήκευση.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Τα κύτταρα HT22 μπορούν να καταψυχθούν σε μέσο CM-1 ή CM-ACF χρησιμοποιώντας μια μέθοδο αργής κατάψυξης. Αυτή η διαδικασία επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας του δείγματος μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό, προστατεύει τα κύτταρα από το σοκ και βοηθά στη διατήρηση της βιωσιμότητάς τους.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο στους 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα, έως ότου απομείνει ένας μικρός σβώλος πάγου. Στη συνέχεια, προστίθεται μέσο καλλιέργειας στα κύτταρα και αυτά φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη που περιέχει μέσο καλλιέργειας. Στη συνέχεια, τα κύτταρα επωάζονται στους 37 °C σε επωαστήρα για τουλάχιστον 24 ώρες.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για την καλλιέργεια κυττάρων HT22 απαιτείται εργαστηριακό περιβάλλον βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς HT22
Τα κύτταρα του ιππόκαμπου HT22 παρουσιάζουν ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που τα διαφοροποιούν από άλλες νευρωνικές κυτταρικές σειρές. Εδώ αναφέρονται μερικά αξιοσημείωτα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς.
Πλεονεκτήματα
Τα πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς νευρικών κυττάρων ποντικού HT22 είναι:
-
Γρήγορος ρυθμός ανάπτυξης
Τα κύτταρα HT22 έχουν χρόνο διπλασιασμού 15 ωρών, επιτρέποντας γρήγορα και αποτελεσματικά πειράματα και συμβάλλοντας στην έγκαιρη απόκτηση ερευνητικών αποτελεσμάτων.
-
Αθανατοποίηση
Η HT22 είναι μια αθανατοποιημένη κυτταρική σειρά, που εξασφαλίζει συνεχή ανάπτυξη για παρατεταμένες περιόδους. Αυτό παρέχει συνεχή διαθεσιμότητα κυττάρων, μειώνει το χρόνο και το κόστος και διευκολύνει μακροχρόνια πειράματα με συνεπή αποτελέσματα.
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα των κυττάρων HT22 είναι:
-
Προέλευση από ποντίκια
Η κυτταρική σειρά HT22 προήλθε από ιστό του ιππόκαμπου εγκεφάλου ποντικού, ο οποίος ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως την πολυπλοκότητα της φυσιολογίας και της συμπεριφοράς των ανθρώπινων νευρικών κυττάρων, περιορίζοντας τη μεταφραστική τους συνάφεια.
4. Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς HT22
Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα της νευροβιολογίας. Σε αυτό το τμήμα του άρθρου αναλύονται μερικές πολλά υποσχόμενες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς:
- Έρευνα στη νευροεπιστήμη: Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα για τις νευροεκφυλιστικές ασθένειες, όπως η νόσος του Αλτσχάιμερ και η νόσος του Πάρκινσον. Θεωρούνται ένα πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο για τη μελέτη της νευροτοξικότητας και των μηχανισμών οξειδωτικού στρες που σχετίζονται με αυτές τις ασθένειες. Έρευνα που διεξήχθη το 2020 διαπίστωσε ότι η οδός PI3K/AKT/CREB εμπλέκεται στην νευρική τοξικότητα που προκαλείται από την υπεργλυκαιμία στα κύτταρα HT22 [2]. Ομοίως, μια πρόσφατη μελέτη πρότεινε ότι η οδός Nrf2/HO-1 και ο άξονας σηματοδότησης NF-κB διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στην τοξικότητα της αμυλοειδούς βήτα στα κύτταρα HT22 [3].
- Διαλογή φαρμάκων: Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται ευρέως για σκοπούς δοκιμών και διαλογής φαρμάκων. Βοηθούν τους ερευνητές να εντοπίσουν πιθανά θεραπευτικά μέσα που παρουσιάζουν νευροπροστατευτικά αποτελέσματα για την καταπολέμηση των νευροεκφυλιστικών ασθενειών. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2019 διερεύνησε το νευροπροστατευτικό δυναμικό της ένωσης τετραϋδροκουρκουμίνης σε κύτταρα του ιππόκαμπου HT22 που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με γλουταμινικό. Στην περίπτωση αυτή, το γλουταμινικό προκαλεί οξειδωτικό στρες στα κύτταρα HT22 και προκαλεί κυτταρικό θάνατο ενεργοποιώντας τις πρωτεϊνικές κινά
5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα HT22
Ακολουθούν μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές εργασίες που αφορούν τη σειρά κυττάρων HT22:
Αυτή η μελέτη στο International Journal of Molecular Medicine (2019) πρότεινε το νευροπροστατευτικό δυναμικό της κροκίνης, μιας ένωσης που απομονώθηκε από το Crocus sativus L., στα κύτταρα HT22 που υπέστησαν βλάβη από L-γλουταμινικό.
Αυτή η δημοσίευση στο Neuropharmacology (2018) ανέφερε ότι τα παράγωγα οξινδόλης προστατεύουν από τον κυτταρικό θάνατο των HT22 που προκαλείται από το οξειδωτικό στρες.
Αυτή η ερευνητική εργασία δημοσιεύθηκε στο Journal of Ginseng Research το 2019. Η μελέτη αυτή διερεύνησε τις νευροπροστατευτικές επιδράσεις ενός φυσικού προϊόντος, της γινσενοσίδης Rb2, χρησιμοποιώντας την κυτταρική σειρά HT22. Η μελέτη διαπίστωσε ότι η γινσενοσίδη Rb2 μείωσε αποτελεσματικά το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από το γλουταμινικό και τον κυτταρικό θάνατο στα κύτταρα HT22 του ιππόκαμπου ποντικών.
Αυτή η μελέτη στο Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) αξιολόγησε το κυτταροτοξικό δυναμικό των νανοσωματιδίων αργύρου στη κυτταρική σειρά HT22.
Η φεροστατίνη-1 προστατεύει τα κύτταρα HT-22 από την οξειδωτική τοξικότητα
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2020 στο περιοδικό Neural regeneration research. Προτείνει ότι η φεροστατίνη-1, ένας αναστολέας της σιδηροπτωσίας, προλαμβάνει την οξειδωτική τοξικότητα στα κύτταρα του ιππόκαμπου HT22.
Πόροι για τα κύτταρα HT22: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι σχετικά με τα κύτταρα HT22 εξηγούν τα πρωτόκολλα μεταφοράς, διαφοροποίησης και κυτταροκαλλιέργειας:
- Μεταφορά HT22: Αυτό το έγγραφο περιέχει ένα βελτιστοποιημένο πρωτόκολλο για τη μεταφορά HT22 σε πλάκες κυτταρικής καλλιέργειας 24 και 96 φρεατίων.
- Διαφοροποίηση κυττάρων HT22: Αυτό το άρθρο θα σας καθοδηγήσει αναλυτικά σχετικά με το πρωτόκολλο διαφοροποίησης των HT22.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο κυτταροκαλλιέργειας HT22:
- Υποκαλλιέργεια κυττάρων HT22: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο υποκαλλιέργειας για τη σειρά κυττάρων HT22. Επιπλέον, θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο για την πρόκληση νευροτοξικότητας στα κύτταρα.
- Κύτταρα ιππόκαμπου HT22: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει πολλές χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τον χρόνο διπλασιασμού των κυττάρων HT22, τα μέσα καλλιέργειας και τα πρωτόκολλα κυτταρικής καλλιέργειας.
Αναφορές
- He, M., et al., Η διαφοροποίηση καθιστά τα νευρώνες HT22 ευαίσθητα στην διεγερτοτοξικότητα. Neural Regen Res, 2013. 8(14): σ. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Η φισετίνη προλαμβάνει τη νευροτοξικότητα που προκαλείται από υψηλά επίπεδα γλυκόζης στα κύτταρα HT22 μέσω της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: σ. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Προστατευτικές επιδράσεις της βερβερίνης κατά της νευροτοξικότητας που προκαλείται από β-αμυλοειδές σε κύτταρα HT22 μέσω της οδού Nrf2/HO‐1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: σ. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Νευροπροστατευτικές επιδράσεις της τετραϋδροκουρκουμίνης κατά του οξειδωτικού στρες που προκαλείται από το γλουταμινικό στα κύτταρα HT22 του ιππόκαμπου. Molecules, 2019. 25(1): σ. 144.