Γραμμή κυττάρων HT22
Η HT22 είναι μια νευρωνική κυτταρική σειρά ποντικού που χρησιμοποιείται συνήθως στη νευροεπιστημονική έρευνα. Είναι πολύτιμη για τη μελέτη νευρογενετικών διαταραχών και τη δοκιμή πιθανών νευροπροστατευτικών θεραπειών ή αγωγών. Εκτός αυτού, τα κύτταρα HT22 είναι ευαίσθητα στο γλουταμικό, επομένως, χρησιμοποιούνται για τη διερεύνηση της επαγόμενης από γλουταμικό τοξικότητας ή της νευρωνικής βλάβης.
Αυτό το άρθρο υπογραμμίζει τις επιτακτικές πτυχές των κυττάρων HT22 που μπορούν να σας βοηθήσουν στην ερευνητική σας εργασία. Θα συζητήσει κυρίως τα εξής:
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HT22
- Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT22
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς HT22
- Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς HT22
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα HT22
- Πόροι για τα κύτταρα HT22: 2222: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
1. Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων HT22
Αυτή η ενότητα του άρθρου θα ρίξει φως στην προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων HT22. Η γνώση αυτών των πληροφοριών για μια κυτταρική σειρά είναι απαραίτητη πριν από την έναρξη των εργασιών σε αυτήν. Στο πλαίσιο αυτό, θα μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα HT22 Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων HT22 του ιππόκαμπου Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων HT22
Η HT22 είναι μια συνεχής κυτταρική σειρά που προέρχεται από την περιοχή του ιππόκαμπου του εγκεφάλου ποντικού. Πρόκειται για υποκλώνο της γονικής κυτταρικής σειράς HT-4 που αναπτύχθηκε με αθανατοποίηση νευρωνικών ιστών ποντικού μέσω ενός ευαίσθητου στη θερμοκρασία πολυομοιοϊού του ιού simian virus 40 (SV40) T αντιγόνου.
Τα κύτταρα αυτά διαφέρουν από τα ώριμα κύτταρα του ιππόκαμπου καθώς στερούνται υποδοχέων γλουταμινικού και χολινεργικού όπως οι ώριμοι νευρώνες ιπποκάμπειου προέλευσης. Συνεπώς, δεν είναι κατάλληλα για ερευνητικές μελέτες που σχετίζονται με τη μνήμη [1].
Τα κύτταρα HT22 έχουν εμφάνιση που μοιάζει με επιθηλιακά κύτταρα.
2. Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT22
Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται σε ερευνητικά εργαστήρια νευροεπιστημών. Πριν από την καλλιέργεια αυτών των κυττάρων, οι ερευνητές αναζητούν βασικές πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων που καθιστούν την εργασία τους εύκολη και αποτελεσματική. Αυτή η ενότητα καλύπτει όλα τα βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HT22. Θα γνωρίζετε: Τι θα πρέπει να γνωρίζετε για τα 2222 HT22; Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HT22 Πώς καλλιεργείτε κύτταρα HT22 Ποιο είναι το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων HT22 Ποιο είναι το μέσο καλλιέργειας κυττάρων HT22
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HT22
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HT22 είναι περίπου 15 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Τα κύτταρα HT22 είναι προσκολλημένα. |
|
Αναλογία υποκαλλιέργειας: |
Η αναλογία υποκαλλιέργειας για τα ιπποκάμπεια κύτταρα HT22 είναι 1:3 έως 1:6. Εν συντομία, αφαιρείται το μέσο και τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1 x PBS. Στη φιάλη προστίθεται διάλυμα διάσπασης Accutase και τα κύτταρα επωάζονται για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Στη συνέχεια, προστίθεται φρέσκο μέσο καλλιέργειας και τα κύτταρα συλλέγονται σε φιαλίδιο για φυγοκέντρηση. Το λαμβανόμενο κυτταρικό σφαιρίδιο ανασυσσωματώνεται προσεκτικά και τα κύτταρα διανέμονται σε φιάλη καλλιέργειας για ανάπτυξη. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Για την καλλιέργεια των κυττάρων HT22 χρησιμοποιείται μέσο DMEM. Συμπληρώνεται με 10% FBS, 4,5 g/L γλυκόζη, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3 και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο για τη βέλτιστη ανάπτυξη των κυττάρων. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Οι καλλιέργειες κυττάρων HT22 διατηρούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα (θερμοκρασία 37 °C) μεπαροχή 5%CO2 . |
|
Αποθήκευση: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα HT22 μπορούν να αποθηκευτούν σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C είτε σε φάση ατμών υγρού αζώτου είτε σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας για μεγάλο χρονικό διάστημα. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Τα κύτταρα HT22 μπορούν να καταψυχθούν σε μέσα CM-1 ή CM-ACF με τη μέθοδο της αργής κατάψυξης. Η διαδικασία αυτή επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας του δείγματος μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό, προστατεύει τα κύτταρα από το σοκ και συμβάλλει στη διατήρηση της βιωσιμότητάς τους. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα έως ότου απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Στη συνέχεια, προστίθεται μέσο καλλιέργειας στα κύτταρα και αυτά φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και τα κύτταρα χύνεται στη νέα φιάλη που περιέχει μέσο καλλιέργειας. Στη συνέχεια, τα κύτταρα επωάζονται στους 37 °C σε επωαστήρα για τουλάχιστον 24 ώρες. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Για την καλλιέργεια κυττάρων HT22 είναι υποχρεωτική η εργαστηριακή ρύθμιση επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
3. Πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς HT22
Τα ιπποκάμπεια κύτταρα HT22 συνδέονται με ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που τα διαφοροποιούν από άλλες νευρωνικές κυτταρικές σειρές. Ορισμένα αξιοσημείωτα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής γραμμής αναφέρονται εδώ.
Πλεονεκτήματα
Τα πλεονεκτήματα της νευρωνικής κυτταρικής γραμμής HT22 του ποντικού είναι τα εξής:
-
Ταχύς ρυθμός ανάπτυξης
Τα κύτταρα HT22 έχουν χρόνο διπλασιασμού 15 ωρών, επιτρέποντας τον γρήγορο και αποτελεσματικό πειραματισμό και βοηθώντας σε έγκαιρα ερευνητικά αποτελέσματα.
-
Αθανασία
Η HT22 είναι μια αθάνατη κυτταρική γραμμή, εξασφαλίζοντας συνεχή ανάπτυξη για παρατεταμένες περιόδους. Αυτό παρέχει σταθερή διαθεσιμότητα κυττάρων, μειώνει το χρόνο και το κόστος και διευκολύνει μακροχρόνια πειράματα με συνεπή αποτελέσματα.
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα των κυττάρων HT22 είναι τα εξής:
-
Προέλευση από ποντίκι
Η κυτταρική σειρά HT22 προέρχεται από ιστό του ιππόκαμπου του εγκεφάλου ποντικού, ο οποίος ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως την πολυπλοκότητα της φυσιολογίας και της συμπεριφοράς των ανθρώπινων νευρικών κυττάρων, περιορίζοντας τη μεταφραστική τους σημασία.
4. Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς HT22
Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται εκτενώς στην έρευνα της νευροβιολογίας. Σε αυτό το τμήμα του άρθρου συζητούνται μερικές υποσχόμενες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς:
- Νευροεπιστημονική έρευνα: Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα νευροεκφυλιστικών ασθενειών, δηλαδή της νόσου Αλτσχάιμερ και της νόσου του Πάρκινσον. Θεωρούνται πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο για τη μελέτη της νευροτοξικότητας και των μηχανισμών οξειδωτικού στρες που σχετίζονται με αυτές τις ασθένειες. Έρευνα που διεξήχθη το 2020 διαπίστωσε ότι το μονοπάτι PI3K/AKT/CREB εμπλέκεται στην επαγόμενη από υπεργλυκαιμία νευρική τοξικότητα στα κύτταρα HT22 [2]. Ομοίως, μια πρόσφατη μελέτη πρότεινε ότι το μονοπάτι Nrf2/HO-1 και ο άξονας σηματοδότησης NF- κB διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στην τοξικότητα του αμυλοειδούς βήτα HT22 [3].
- Έλεγχος φαρμάκων: Τα κύτταρα HT22 χρησιμοποιούνται ευρέως για σκοπούς δοκιμών και διαλογής φαρμάκων. Βοηθούν τους ερευνητές να εντοπίσουν πιθανούς θεραπευτικούς παράγοντες που παρουσιάζουν νευροπροστατευτικά αποτελέσματα για την καταπολέμηση νευροεκφυλιστικών ασθενειών. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2019 διερεύνησε το νευροπροστατευτικό δυναμικό της ένωσης τετραϋδροκουρκουμίνης σε κύτταρα HT22 ιππόκαμπου που έχουν υποστεί επεξεργασία με γλουταμικό. Εδώ, το γλουταμικό προκαλεί οξειδωτικό στρες στα κύτταρα HT22 και προκαλεί κυτταρικό θάνατο μέσω της ενεργοποίησης των ενεργοποιημένων με μιτογόνο πρωτεϊνικών κινασών [4].
5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα HT22
Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις που περιλαμβάνουν την κυτταρική σειρά HT22:
Σε κύτταρα HT22 και σε ποντίκια με νόσο του Alzheimer
Αυτή η μελέτη στο International Journal of Molecular Medicine (2019) πρότεινε το νευροπροστατευτικό δυναμικό της κροκίνης, μιας ένωσης που απομονώνεται από το Crocus sativus L. στακύτταρα HT22που έχουν υποστεί βλάβη απόL-γλουταμικό.
Αυτή η δημοσίευση στο Neuropharmacology (2018) ανέφερε ότι τα παράγωγα οξινδόλης προστατεύουν από τον κυτταρικό θάνατο των κυττάρων HT22 που προκαλείται από οξειδωτικό στρες.
Αυτή η ερευνητική εργασία δημοσιεύθηκε στο Journal of Ginseng Research το 2019. Αυτή η μελέτη διερεύνησε τις νευροπροστατευτικές επιδράσεις ενός φυσικού προϊόντος, του ginsenoside Rb2, χρησιμοποιώντας την κυτταρική σειρά HT22. Η μελέτη διαπίστωσε ότι η ginsenoside rb2 μείωσε αποτελεσματικά το επαγόμενο από γλουταμικό οξειδωτικό στρες και τον κυτταρικό θάνατο σε κύτταρα HT22 ιππόκαμπου ποντικού.
Αυτή η μελέτη στο Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) αξιολόγησε το κυτταροτοξικό δυναμικό των νανοσωματιδίων αργύρου στην κυτταρική σειρά HT22.
Η φερροστατίνη-1 προστατεύει τα κύτταρα HT-22 από την οξειδωτική τοξικότητα
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2020 στο Neural regeneration research. Πρότεινε ότι η φερροστατίνη-1, ένας αναστολέας της φερρόπτωσης, αποτρέπει την οξειδωτική τοξικότητα σε κύτταρα HT22 του ιππόκαμπου.
6. Πόροι για τα κύτταρα HT22: 2222: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι σχετικά με τα κύτταρα HT22 εξηγούν τη διαμόλυνση, τη διαφοροποίηση και τα πρωτόκολλα κυτταροκαλλιέργειας:
- Μεταμόσχευση HT22: Αυτό το έγγραφο περιέχει ένα βελτιστοποιημένο πρωτόκολλο για τη διαμόλυνση HT22 σε πλάκες κυτταροκαλλιέργειας 24 και 96 κοιλοτήτων.
- Διαφοροποίηση κυττάρων HT22: Αυτό το άρθρο θα σας καθοδηγήσει διεξοδικά σχετικά με το πρωτόκολλο διαφοροποίησης των κυττάρων HT22.
Ο ακόλουθος σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων HT22:
- Υποκαλλιέργεια κυττάρων HT22: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο υποκαλλιέργειας για την κυτταρική σειρά HT22. Επιπλέον, θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο για την πρόκληση νευροτοξικότητας στα κύτταρα.
- Κύτταρα ιππόκαμπου HT22: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει πολλές χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τον χρόνο διπλασιασμού των κυττάρων HT22, τα μέσα και τα πρωτόκολλα κυτταροκαλλιέργειας.
Αναφορές
- He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Η φιστικίνη αποτρέπει τα κύτταρα HT22 από τη νευροτοξικότητα που προκαλείται από υψηλή γλυκόζη μέσω του σηματοδοτικού μονοπατιού PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Προστατευτικές επιδράσεις της βερβερίνης έναντι της νευροτοξικότητας που προκαλείται από β-αμυλοειδές σε κύτταρα HT22 μέσω του μονοπατιού Nrf2/HO-1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Νευροπροστατευτικές επιδράσεις της τετραϋδροκουρκουμίνης έναντι του επαγόμενου από γλουταμικό οξειδωτικού στρες σε κύτταρα HT22 του ιππόκαμπου. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.