Κύτταρα HK-2 - Διερεύνηση της λειτουργίας και της παθολογίας των νεφρών με κύτταρα HK-2 στη νεφρική έρευνα

Το HK-2 είναι μια αθάνατη σειρά ανθρώπινων επιθηλιακών κυττάρων των νεφρών που χρησιμοποιείται συνήθως στην τοξικολογική έρευνα. Οι ερευνητές αξιολογούν τις επιδράσεις των περιβαλλοντικών τοξινών σε αυτά τα νεφρικά κύτταρα. Επιπλέον, χρησιμοποιούν επίσης κύτταρα HK-2 για τη διερεύνηση νεφρικών ασθενειών και των υποκείμενων μηχανισμών τους.

Αυτό το άρθρο θα εξηγήσει σχεδόν τις βασικές πληροφορίες σχετικά με τα κύτταρα HK-2, συμπεριλαμβανομένων των γενικών χαρακτηριστικών τους, των συνθηκών κυτταροκαλλιέργειας, των ερευνητικών εφαρμογών και πολλά άλλα. Θα μάθετε τα εξής:

Κύτταρα HK-2: HK-2: Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά
Κυτταρική σειρά HK-2: HK-2: Πληροφορίες για την καλλιέργεια
Πλεονεκτήματα και περιορισμοί των κυττάρων HK-2
Εφαρμογές της κυτταρικής σειράς HK-2 στην έρευνα
Κύτταρα HK-2: HK-2: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
Πηγές για την κυτταρική σειρά HK-2: HK-2: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

1.κύτταρα HK-2: HK-2: Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά

Η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά μιας κυτταρικής γραμμής είναι απαραίτητο να είναι γνωστά για τον ορθό χειρισμό, τη συντήρηση και τη χρήση μιας κυτταρικής γραμμής. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει τα ακόλουθα: Τι είναι τα κύτταρα HK-2 του ανθρώπινου νεφρού 2 Ποιος είναι ο ρόλος του HK2 Τι είναι τα κύτταρα HK2 Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς HK-2 Ποιο είναι το μέγεθος και η μορφολογία των κυττάρων HK-2

Τα κύτταρα του ανθρώπινου νεφρού 2 (HK-2) είναι ένας τύπος εγγύς σωληναριακών κυττάρων που προέρχονται από τον φυσιολογικό νεφρικό ιστό ενός Ευρωπαίου ενήλικα. Η κυτταρική σειρά HK-2 δημιουργήθηκε με τη διαμόλυνση νεφρικών κυττάρων με ανασυνδυασμένο ρετροϊό που περιλαμβάνει τα γονίδια E6/E7 του ιού των ανθρώπινων θηλωμάτων 16. Το πείραμα αυτό προκάλεσε την αθανασία και τη δημιουργία μιας συνεχώς αναπτυσσόμενης επιθηλιακής κυτταρικής σειράς HK-2 των νεφρών.
Τα κύτταρα HK-2 παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία.
Το μέγεθος των κυττάρων HK-2 κυμαίνεται μεταξύ 17,4 -18,6 μm σε διάμετρο. Η µέση διάµετρος είναι 18,2 µm [1].

Ανθρώπινα υγιή νεφρικά κύτταρα στο μικροσκόπιο.

2.κυτταρική σειρά HK-2: Πληροφορίες καλλιέργειας

Οι πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια της κυτταρικής γραμμής ανθρώπινου νεφρού 2 μπορούν να σας βοηθήσουν σημαντικά πριν εργαστείτε μαζί της. Σε αυτή την ενότητα του άρθρου αναφέρονται επιτακτικές πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HK-2. Θα μάθετε: Τι είναι η κυτταρική ομάδα της HK-2K; Είναι τα κύτταρα HK-2 προσκολλημένα Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HK-2 Ποιο μέσο χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια κυττάρων HK-2

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HK-2

Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού:	Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων HK-2 κυμαίνεται μεταξύ 47,3 h και 61,7 h.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:	Η σειρά επιθηλιακών κυττάρων HK-2 των νεφρών είναι προσκολλημένη.
Αναλογία υποκαλλιέργειας:	Τα κύτταρα HK-2 υποκαλλιεργούνται σε αναλογία 1:2 έως 1:4. Τα προσκολλημένα κύτταρα HK-2 πλένονται με 1 x PBS και επωάζονται σε θερμοκρασία περιβάλλοντος για 8 έως 10 λεπτά μετά την προσθήκη διαλύματος Accutase. Το μέσο καλλιέργειας προστίθεται στα διαχωρισμένα κύτταρα και φυγοκεντρείται. Τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωματώνονται προσεκτικά και χύνεται σε νέες φιάλες για καλλιέργεια.
Μέσο ανάπτυξης:	Το μέσο κυτταρικής σειράς κερατινοκυττάρων που περιέχει 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών, 0,05 mg/ml εκχύλισμα βλεννογόνου βοοειδών (BPE) & 5 ng/ml επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGF) είναι το ιδανικό μέσο για τα κύτταρα HK-2. Το μέσο θα πρέπει να αντικαθίσταται κάθε 2 έως 3 ημέρες την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:	Οι καλλιέργειες της κυτταρικής σειράς ανθρώπινου νεφρού 2 διατηρούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα με παροχή 5% CO2 στους 37°C.
Αποθήκευση:	Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποθηκεύονται σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:	Τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF είναι ιδανικά για την κατάψυξη κυττάρων HK-2. Εν συντομία, επιλέγεται μια μέθοδος αργής κατάψυξης που επιτρέπει μόνο 1 βαθμό Κελσίου ανά λεπτό πτώση της θερμοκρασίας και προστατεύει τα κύτταρα από οποιοδήποτε σοκ.
Διαδικασία απόψυξης:	Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο ρυθμισμένο σε θερμοκρασία 37 βαθμών Κελσίου. Τα κύτταρα αυτά προστίθενται με φρέσκο θρεπτικό υλικό και ανασυσσωματώνονται. Στη συνέχεια, τα κύτταρα διανέμονται σε νέα φιάλη που περιέχει μέσο ανάπτυξης. Μετά από 24 ώρες το μέσο αντικαθίσταται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης.
Επίπεδο βιοασφάλειας:	Οι καλλιέργειες κυττάρων HK-2 διατηρούνται σε εργαστήρια επιπέδου βιοασφάλειας 1.

Κύτταρα HK-2 που αναπτύσσονται σε νησίδια σε μεγέθυνση 10x και 20x.

3.πλεονεκτήματα και περιορισμοί των κυττάρων HK-2

Το HK-2 είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη ανθρώπινη επιθηλιακή σειρά κυττάρων του εγγύς σωληναρίου. Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, συνδέεται επίσης με ορισμένα πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Σε αυτή την ενότητα θα συζητηθούν ορισμένα βασικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής γραμμής ανθρώπινου νεφρού 2.

Πλεονεκτήματα

Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής γραμμής HK-2 περιλαμβάνουν:

Καλά χαρακτηρισμένη	Η κυτταρική σειρά HK-2 χαρακτηρίζεται εκτενώς όσον αφορά τη μορφολογία, το μέγεθος και το γονιδίωμά της. Έχουν διεξαχθεί πολυάριθμες ερευνητικές μελέτες σε αυτά τα φυσιολογικά νεφρικά κύτταρα.
Αθάνατη	Η HK-2 είναι μια συνεχής κυτταρική σειρά με εκτεταμένη διάρκεια ζωής, που της επιτρέπει να πολλαπλασιάζεται μέσω πολλών περασμάτων. Αυτό το χαρακτηριστικό εξασφαλίζει συνεχή προμήθεια κυττάρων για εργαστηριακά πειράματα.
Επιθηλιακά χαρακτηριστικά του εγγύς σωληναρίου	Τα κύτταρα HK-2 παρουσιάζουν έναν καλά διαφοροποιημένο φαινότυπο, χαρακτηριστικό των κυττάρων του εγγύς σωληναρίου (PTC) που βρίσκονται στον ανθρώπινο νεφρό. Αυτό το μοναδικό χαρακτηριστικό καθιστά τα κύτταρα HK-2 ένα πολύτιμο in vitro μοντέλο για τη μελέτη της νεφρικής φυσιολογίας, των κυτταρικών διεργασιών και των αποκρίσεων σε διάφορα ερεθίσματα.

Περιορισμοί

Ακολουθούν ορισμένοι περιορισμοί της κυτταρικής σειράς HK-2:

Μοντέλο in vitro

Η HK-2 χρησιμεύει ως in vitro μοντέλο φυσιολογικών νεφρικών κυττάρων, παρουσιάζοντας ιδιαίτερα χαρακτηριστικά των επιθηλιακών κυττάρων του εγγύς σωληναρίου. Ωστόσο, ενδέχεται να μην αναπαράγει πλήρως την πολυπλοκότητα του ανθρώπινου νεφρικού ιστού και του μικροπεριβάλλοντος που απαντάται in vivo.

4.εφαρμογές της κυτταρικής σειράς HK-2 στην έρευνα

Η κυτταρική σειρά HK-2 έχει πολυάριθμες εφαρμογές στην τοξικολογική έρευνα. Εδώ συζητήσαμε ορισμένες συγκεκριμένες και σημαντικές ερευνητικές χρήσεις αυτής της ανθρώπινης κυτταρικής σειράς εγγύς σωληναρίου.

Νεφρική φυσιολογία: Τα κύτταρα HK-2 χρησιμοποιούνται συνήθως για τη μελέτη της φυσιολογικής νεφρικής φυσιολογίας και λειτουργίας. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα επιθηλιακά κύτταρα του εγγύς σωληναρίου για να διερευνήσουν τους διαύλους ιόντων, τις διαδικασίες μεταφοράς και άλλους κυτταρικούς μηχανισμούς που ρυθμίζουν την ομοιόσταση των νεφρών. Όπως, οι ερευνητές μελέτησαν τον ρόλο των διαύλων του διαύλου δυναμικού μεταβατικού υποδοχέα 6 (TRPC6) στην (+)-Κονοκαρπάνη (CNCP), μια νεολιγνάνη, που προκαλεί κυτταρικό θάνατο σε επιθηλιακά κύτταρα του νεφρού, HK-2 [2].
Ασθένειες των νεφρών: Η ανθρώπινη κυτταρική σειρά νεφρού 2 χρησιμοποιείται για τη διερεύνηση διαφόρων νεφρικών ασθενειών, δηλαδή οξείας νεφρικής βλάβης και διαβητικής νεφροπάθειας, και των υποκείμενων κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών τους. Όπως η έρευνα διαπίστωσε ότι τα επίπεδα μεθυλίωσης της πρωτεΐνης klotho συνδέονται με τη νεφρική βλάβη. Η μείωση της μεθυλίωσης του υποκινητή του γονιδίου Klotho μπορεί να ενισχύσει την έκφρασή του και να ανακουφίσει τη νεφρική βλάβη που προκαλείται σε μοντέλα διαβητικών ποντικών db/db και σε κύτταρα HK-2 που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με υψηλή γλυκόζη [3].
Μελέτες τοξικολογίας: Τα κύτταρα HK-2 αποτελούν ένα εξαιρετικό ερευνητικό εργαλείο για την αξιολόγηση των πιθανών επιδράσεων διαφόρων φαρμάκων, χημικών ουσιών και περιβαλλοντικών ρύπων. Οι μελέτες μπορούν να βοηθήσουν τους ερευνητές να αξιολογήσουν την ασφάλεια και τις παρενέργειες των φαρμάκων στα νεφρικά κύτταρα. Όπως μια μελέτη που δημοσιεύθηκε το 2022 αξιολόγησε τις πιθανές επιδράσεις ενός φυσικού βοτάνου Polygonatumkingianum (PK) πολυσακχαριτών και υδατικού εκχυλίσματος στην επαγόμενη από ουράνιο νεφροτοξικότητα σε κύτταρα HK-2. Διαπίστωσαν ότι το PK ασκεί προστατευτικές επιδράσεις και αποτρέπει τη δηλητηρίαση από ουράνιο στα νεφρικά κύτταρα [4].

650,00 €*

Περιεχόμενο: 1.5 milliliter

Τιμές χωρίς φόρους συν έξοδα αποστολής

cryovial

Αριθμός προϊόντος: 305021

5.κύτταρα HK-2: HK-2: Ερευνητικές δημοσιεύσεις

Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα επιθηλιακά κύτταρα HK-2 των νεφρών.

Το CircHIPK3 μετριάζει την τοξικότητα της υψηλής γλυκόζης στα ανθρώπινα νεφρικά σωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα HK-2 μέσω της ρύθμισης των miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

Αυτή η μελέτη στο Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) πρότεινε ότι το κυκλικό RNA HIPK3 μπορεί να μειώσει την αναστολή του πολλαπλασιασμού των κυττάρων HK-2 που προκαλείται από την υψηλή τοξικότητα της γλυκόζης. Επιπλέον, μπορεί να αναστείλει τον κυτταρικό θάνατο ρυθμίζοντας τον καταρράκτη miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.

Διαφορετικός μηχανισμός τοξικότητας των νανοσωματιδίων χρυσού στα νεφρικά εγγύς σωληναριακά κύτταρα HK-2 και στα καρκινικά κύτταρα 786-0

Αυτή η ερευνητική δημοσίευση στο Nanomedicine (2020) αξιολόγησε διαφορετικούς μηχανισμούς τοξικότητας των νανοσωματιδίων χρυσού (AuNPs) σε καρκινικά κύτταρα 786-0 και επιθηλιακά κύτταρα HK-2 του εγγύς σωληναρίου.

Η τοξικότητα που προκαλείται από υψηλή γλυκόζη στα κύτταρα HK-2 μπορεί να ανακουφιστεί με την αναστολή του miRNA-320c

Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Renal Failure (2022). Τα ευρήματα αναφέρουν ότι το microRNA-320c μπορεί να μειώσει την επαγόμενη από υψηλή γλυκόζη τοξικότητα σε νεφρικά κύτταρα (HK-2) στοχεύοντας το PTEN και αναστέλλοντας τη σηματοδότηση PI3K/AKT.

Εξωσώματα προερχόμενα από μεσεγχυματικά βλαστικά κύτταρα μετριάζουν την επιθηλιακή-μεσεγχυματική μετάβαση των κυττάρων HK-2

Αυτή η μελέτη στο Tissue Engineering Part A (2022) πρότεινε ότι τα εξωσώματα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστικά κύτταρα αποτρέπουν την επιθηλιακή-μεσεγχυματική μετάβαση των νεφρικών κυττάρων HK-2.

Το LncRNA TapSAKI προάγει τη φλεγμονώδη βλάβη στα κύτταρα HK-2 και τη νεφρική βλάβη που προκαλείται από σηψαιμία προερχόμενη από τα ούρα

Το άρθρο του Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) αναφέρει ότι το lncRNA TapSAKI ενισχύει την απόκριση στη φλεγμονή και τον κυτταρικό θάνατο των HK-2 ρυθμίζοντας το σηματοδοτικό μονοπάτι microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.

6.πόροι για την κυτταρική σειρά HK-2: HK-2: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Η HK-2 είναι μια διάσημη κυτταρική γραμμή. Ακολουθούν ορισμένοι πόροι που περιγράφουν το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων HK-2.

Καλλιέργεια κυττάρων HK-2: Αυτός ο δικτυακός τόπος είναι εμπλουτισμένος με πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων HK-2. Όπως παρέχει τη συνταγή του μέσου κυττάρων HK-2, το πρωτόκολλο διέλευσης και το πρωτόκολλο για το χειρισμό και τη διατήρηση πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.
Πέρασμα κυττάρων: Αυτό το βίντεο θα σας βοηθήσει να μάθετε ένα γενικό πρωτόκολλο διαχωρισμού ή παθητικοποίησης για προσκολλημένες κυτταρικές σειρές.

Αναφορές

Handl, J., et al., The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds. Physiological Research, 2020. 69(4): p. 731.
Yang, G., et al., Η ενεργοποίηση των διαύλων TRPC6 συμβάλλει στον επαγόμενο από την (+)-κονοκαρπίνη αποπτωτικό κυτταρικό θάνατο σε κύτταρα HK-2. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
Yang, X.H., et al., Το EGCG μετριάζει τη νεφρική βλάβη μέσω της αντιστροφής της υπερμεθυλίωσης klotho σε διαβητικά db/db ποντίκια και κύτταρα HK-2. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
Li, W., et al., Protective effects of Polygonatum kingianum polysaccharides and aqueous extract on uranium-induced toxicity in human kidney (HK-2) cells. International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.