Κύτταρα DU-145 - Ο αναλυτικός οδηγός ενός ερευνητή
Το DU-145 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκινώματος του προστάτη που εφαρμόζεται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα. Τα κύτταρα αυτά χρησιμεύουν ως ανεκτίμητο μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του προστάτη, τη δοκιμή φαρμάκων και την ανάπτυξη. Εκτός αυτού, οι ερευνητές χρησιμοποιούν επίσης τα κύτταρα DU-145 για τη διερεύνηση των μοριακών μηχανισμών που διέπουν την ανάπτυξη, την ανάπτυξη και την εξέλιξη του καρκίνου του προστάτη.
Αυτό το άρθρο θα σας δώσει πολύτιμες πληροφορίες σχετικά με τα κύτταρα DU-145 για τον καρκίνο του προστάτη. Ειδικότερα, θα καλύψει: - τα στοιχεία για το DU45 DU-145:
- Γενικές πληροφορίες και προέλευση της κυτταρικής σειράς DU-145
- Καλλιέργεια των κυττάρων DU-145
- Κυτταρική σειρά DU-145: DU-145 DU-145: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων DU-145
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα DU-145
- Πηγές για την κυτταρική σειρά DU-145: DU45-145: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
1. Γενικές πληροφορίες και προέλευση της κυτταρικής σειράς DU-145
Η κατανόηση των θεμελιωδών χαρακτηριστικών και της προέλευσης μιας κυτταρικής σειράς είναι απαραίτητη πριν από την έναρξη της εργασίας με αυτήν. Αυτή η ενότητα θα παράσχει μια ολοκληρωμένη κατανόηση των χαρακτηριστικών και της προέλευσης της κυτταρικής σειράς DU-145. Θα γνωρίσετε: Τι είναι τα καρκινικά κύτταρα DU145 Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων DU145 Ποια είναι η διαφορά μεταξύ PC-3 και DU145
- Το DU-145, μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη, προήλθε από τον εγκέφαλο ενός καυκάσιου άνδρα (69 ετών) με μεταστατικό καρκίνωμα του προστάτη. Τα κύτταρα αυτά κατατέθηκαν για πρώτη φορά από τον K.R. Stone και τους συνεργάτες του το 1978.
- Όπως και τα κύτταρα καρκίνου του προστάτη PC-3, το DU-145 εκφράζει επίσης υποδοχείς ανδρογόνων. Ωστόσο, όταν τα κύτταρα αυτά υποβάλλονται σε θεραπεία με συνδέτες ανδρογόνων, δεν παρουσιάζουν καμία δραστηριότητα γονιδίων που ανταποκρίνονται στους υποδοχείς ανδρογόνων, οπότε θεωρούνται κύτταρα ανεξάρτητα από ανδρογόνα.
- Τα κύτταρα DU-145 έχουν επιθηλιακή μορφολογία.
- Τα κύτταρα DU-145 είναι υποτριπλοειδή και έχουν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 64. Παρουσιάζουν διάφορα χρωμοσώματα-δείκτες, όπως del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) και del (9) (p11).
PC-3 Vs DU145
Και οι δύο κυτταρικές σειρές καρκίνου του προστάτη είναι ανεξάρτητες από τον υποδοχέα ανδρογόνων. Διαφέρουν ως προς το καρκινικό και μεταστατικό δυναμικό τους. Κατά την έγχυση σε ανοσοκατεσταλμένο ποντίκι, η κυτταρική σειρά PC-3 σχηματίζει αδενοκαρκίνωμα υψηλής μεταστατικότητας βαθμού IV. Αντίθετα, η κυτταρική σειρά DU-145 αναπτύσσει καρκίνο του προστάτη με μέτριο μεταστατικό δυναμικό [1].
2. καλλιέργεια κυττάρων DU-145
Η κυτταρική σειρά DU-145 χρησιμοποιείται ευρέως στα ερευνητικά εργαστήρια για τον καρκίνο του προστάτη. Θα πρέπει να μάθετε τα ακόλουθα βασικά σημεία για να διευκολύνετε την εύκολη και αποτελεσματική καλλιέργειά της. Αυτή η ενότητα θα περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με το μέσο DU145, τον χρόνο διπλασιασμού, τις συνθήκες καλλιέργειας των κυττάρων και τα πρωτόκολλα.
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων DU-145
|
Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού του DU-145 κυμαίνεται μεταξύ 30 και 40 ωρών. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Το DU-145 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά. |
|
Πυκνότητα σποράς: |
DU-145: Τα κύτταρα DU-145 σπείρονται με συνιστώμενη πυκνότητα κυττάρων 2 x104 κύτταρα/cm2. Σε αυτή την πυκνότητα, τα κύτταρα δημιουργούν μια συνεχή μονοστιβάδα σε σχεδόν 4 ημέρες. Για τη σπορά, τα κύτταρα πλένονται με 1 x ρυθμιστικό φυσιολογικό ορό φωσφορικών αλάτων και επωάζονται με το διάλυμα διέλευσης, Accutase. Μετά από 8 έως 10 λεπτά επώασης σε θερμοκρασία δωματίου, τα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Το συλλεγμένο κυτταρικό σφαιρίδιο ανασυγκροτείται προσεκτικά και τα κύτταρα χύνεται σε νέες φιάλες καλλιέργειας για ανάπτυξη. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) με συμπληρώματα του μέσου, δηλαδή 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS), 2 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3 και EBSS. Το μέσο ανανεώνεται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Οι καλλιέργειες DU-145 διατηρούνται σε επωαστήρα με υγρασία 37°C και πηγή CO2 5%. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κύτταρα DU-145 αποθηκεύονται σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150°C σε ηλεκτρικό καταψύκτη για τη διατήρηση της βιωσιμότητας των κυττάρων για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Συνιστώνται τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF για τα κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145. Για την κατάψυξη των κυττάρων επιλέγεται μια μέθοδος αργής κατάψυξης που επιτρέπει τη σταδιακή πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C. Αυτό αποτρέπει τα κύτταρα από οποιοδήποτε σοκ και συμβάλλει στη διατήρηση της βιωσιμότητάς τους. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα φιαλίδια κυττάρων DU-145 αποψύχονται γρήγορα σε υδατόλουτρο 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται με μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται για να απομακρυνθούν τα συστατικά του μέσου κατάψυξης. Τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωρεύονται σε μέσο ανάπτυξης και χύνεται στη φιάλη για ανάπτυξη. Η αποκατάσταση της κατάψυξης διαρκεί σχεδόν 24 ώρες. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Απαιτούνται ρυθμίσεις επιπέδου βιοασφάλειας 1 για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς DU145 που είναι ανεξάρτητη από τον υποδοχέα ανδρογόνων. |
3. κυτταρική σειρά DU-145: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, η κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη DU-145 συνδέεται με ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Αυτά τα χαρακτηριστικά μπορούν να σας βοηθήσουν να αποφασίσετε τη χρήση της στην έρευνά σας. Τα κύρια πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων DU-145 αναφέρονται παρακάτω.
Πλεονεκτήματα
Τα πλεονεκτήματα των κυττάρων DU-145 είναι τα εξής:
|
Ογκογονικότητα |
Το DU-145 είναι μια επιθετική καρκινική κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη με μέτριο μεταστατικό δυναμικό. Χρησιμοποιείται για την ανάπτυξη του μοντέλου ξενομοσχεύματος DU145 σε ανοσοκατεσταλμένα ποντίκια για τη μελέτη της βιολογίας, της ανάπτυξης και της ανάπτυξης του καρκίνου του προστάτη in vitro και in vivo. |
|
Ανεξαρτησία από τον υποδοχέα ανδρογόνων |
Τα κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145 είναι ανεξάρτητα από τον υποδοχέα ανδρογόνων. Δεν εξαρτώνται από τα ανδρογόνα για την ανάπτυξή τους και δεν παρουσιάζουν καμία απόκριση σε κυτταρικό και μοριακό επίπεδο όταν υποβάλλονται σε θεραπεία με ανδρογόνα. Ιδανικά για την έρευνα ορμονοανεξάρτητων μηχανισμών καρκίνου του προστάτη. |
Περιορισμοί
Οι περιορισμοί της κυτταρικής σειράς DU-145 είναι οι εξής:
|
Μοντέλο in vitro |
Η DU-145 είναι ένα in vitro κυτταρικό μοντέλο μεταστατικού καρκινώματος του προστάτη, οπότε ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως την πολυπλοκότητα των πρωτοπαθών όγκων του προστάτη. Επιπλέον, ενδέχεται να μην υποδηλώνει όλους τους τύπους και τους υπότυπους καρκίνου του προστάτη λόγω ειδικών χαρακτηριστικών όπως η ανεξαρτησία από τον υποδοχέα ανδρογόνων. |
4. ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων DU-145
Η κυτταρική σειρά DU-145 για τον καρκίνο του προστάτη έχει ευρύ φάσμα ερευνητικών εφαρμογών. Μερικές υποσχόμενες εφαρμογές παρατίθενται εδώ.
- Βιολογία του καρκίνου του προστάτη: Το DU-145 είναι ένα σχετικό μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του προστάτη. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν τους μοριακούς μηχανισμούς που οδηγούν στην ανάπτυξη, την εξέλιξη και τη μετάσταση του καρκίνου. Επιπλέον, διερευνώνται επίσης γενετικές μεταβολές που συνήθως σχετίζονται με τον καρκίνο του προστάτη. Η έρευνα που διεξήχθη το 2021 εξέτασε τα κύτταρα DU-145 για τον εντοπισμό πιθανών βιοδεικτών για αποτελεσματικές διαγνωστικές και θεραπευτικές επιπτώσεις. Η μελέτη πρότεινε την ακτίνη γάμμα 1 (ACTG1) ως δυνητικό βιοδείκτη για τον καρκίνο του προστάτη, καθώς προάγει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων και ρυθμίζει τη μετάσταση μέσω της ενεργοποίησης του μονοπατιού MAPK/ERK [2].
- Διαλογή και ανάπτυξη φαρμάκων: Τα κύτταρα του καρκίνου του προστάτη DU-145 χρησιμοποιούνται ευρέως για τη δοκιμή της κυτταροτοξικότητας και της αποτελεσματικότητας πιθανών αντικαρκινικών φαρμάκων. Αυτό βοηθά τους ερευνητές να εντοπίσουν νέα φάρμακα, να κατανοήσουν την αντίσταση στα φάρμακα και τους υποκείμενους μοριακούς μηχανισμούς. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2022 διερεύνησε την κυτταροτοξική επίδραση ενός ρητινώδους μείγματος, πρόπολης ή κόλλας μέλισσας, σε καρκινικές κυτταρικές σειρές του προστάτη PC-3 και DU-145. Η μελέτη έδειξε ανασταλτικές επιδράσεις στην ανάπτυξη αυτής της φυσικής ουσίας και στις δύο κυτταρικές σειρές και πρότεινε το αντικαρκινικό δυναμικό της [3]. Μια άλλη μελέτη διεξήχθη το 2019, η οποία διερεύνησε τις αντιπολλαπλασιαστικές επιδράσεις μιας φυσικής ένωσης, της βεταΐνης, σε κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145. Η έρευνα έδειξε ότι η βεταΐνη ασκεί αντιπολλαπλασιαστικές δράσεις αυξάνοντας τον κυτταρικό θάνατο και τη φλεγμονή που προκαλούνται από το οξειδωτικό στρες στα κύτταρα DU-145 [4].
5.ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα DU-145
Ακολουθούν ορισμένες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με την κυτταρική σειρά DU-145.
Αυτή η μελέτη στο Biological Trace Element Research, 2020, πρότεινε ότι ο θειικός ψευδάργυρος (ZnSo4) ασκεί αντιπολλαπλασιαστικά αποτελέσματα στα κύτταρα DU-145 μέσω της πρόκλησης απόπτωσης, μορφολογικών αλλαγών, οξειδωτικής βλάβης και φλεγμονής.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο BMC Complementary Medicine and Therapies το 2020. Αυτή η μελέτη διερεύνησε το κυτταροτοξικό και αντιμεταστατικό δυναμικό ενός φυτού, του εκχυλίσματος φλοιού Annona muricata L., και της βιοδραστικής του ουσίας, της αννονακίνης, στην κυτταρική σειρά DU-145.
Αυτή η δημοσίευση στο IUBMB Life (2019) πρότεινε ότι η αλληλεπίδραση του μακρού μη κωδικού RNA LOXL1-AS1 με το miR-let-7a-5p και το μονοπάτι EGFR ρυθμίζουν την αντίσταση στη δοξορουβικίνη στα κύτταρα του καρκίνου του προστάτη DU-145.
Αυτό το άρθρο στην επιθεώρηση Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) αναφέρει ότι η υπορρύθμιση του γονιδίου του υποδοχέα της περιοχής της δισκοειδούς (Discoidin Domain Receptor1, DDR1) προκαλεί το θάνατο των κυττάρων DU-145 και αναστέλλει την επιθηλιακή σε μεσεγχυματική μετάβαση (EMT) μέσω της ενεργοποίησης του μονοπατιού Pyk2/MKK7.
Αυτή η μελέτη στο Journal of Food Biochemistry (2019) πρότεινε ότι η Καστικίνη, μια πολυμεθοξυφλαβόνη, αναστέλλει τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων DU-145 ρυθμίζοντας τη σηματοδότηση Ras/Akt/NF-κB.
6. πόροι για την κυτταρική γραμμή DU-145: DU-14545: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Πολλοί διαδικτυακοί πόροι είναι διαθέσιμοι για την κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη DU-145. Εδώ σε αυτή την ενότητα θα αναφερθούν μερικοί πόροι που εξηγούν τον χειρισμό, τη συντήρηση και το πρωτόκολλο διαμόλυνσης για αυτά τα κύτταρα:
- DU-145: DU-145: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο είναι ένας οδηγός βήμα προς βήμα για την εκμάθηση του πρωτοκόλλου για τη μόλυνση των κυττάρων DU-145.
Το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων DU-145 αναφέρεται εδώ.
- Υποκαλλιέργεια DU-145: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια ή υποκαλλιέργεια κυττάρων DU-145.
- Κύτταρα DU-145: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει πολλές χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά DU-145, συμπεριλαμβανομένου του μέσου DU145, του πρωτοκόλλου υποκαλλιέργειας και του χειρισμού των πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Επιστημονικές αναφορές, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Αντικαρκινικές επιδράσεις των εκχυλισμάτων πρόπολης που λαμβάνονται με τη μέθοδο ψυχρού διαχωρισμού στις κυτταρικές σειρές καρκίνου του προστάτη PC-3 και DU-145. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., et al., Η βηταΐνη καταστέλλει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό αυξάνοντας την απόπτωση και τη φλεγμονή με τη μεσολάβηση οξειδωτικού στρες στην ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.