Πηγαίνετε στην αρχική σελίδα

Κύτταρα DU-145 – Ο πλήρης οδηγός για ερευνητές

Το DU-145 είναι μια κυτταρική σειρά καρκινώματος του ανθρώπινου προστάτη που χρησιμοποιείται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα. Αυτά τα κύτταρα χρησιμεύουν ως ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του προστάτη, τη δοκιμή φαρμάκων και την ανάπτυξη. Επιπλέον, οι ερευνητές χρησιμοποιούν επίσης κύτταρα DU-145 για να διερευνήσουν τους μοριακούς μηχανισμούς που υποκρύπτονται στην ανάπτυξη, την ανάπτυξη και την εξέλιξη του καρκίνου του προστάτη.

📋 Κυτταρική σειρά DU-145 — Σύντομα στοιχεία
Μέσο ανάπτυξης
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) με συμπληρώματα μέσου, δηλ. 10% εμβρυϊκό βοοειδές ορό (FBS), 2 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3 και EBSS. Το μέσο ανανεώνεται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Χρόνος διπλασιασμού
Ο χρόνος διπλασιασμού του DU-145 κυμαίνεται μεταξύ 30 και 40 ωρών.
Τύπος ανάπτυξης
Το DU-145 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.
Επίπεδο βιοασφάλειας
BSL-1
Διαθέσιμο από
Cytion — Παραγγελία DU-145

Γενικές πληροφορίες και προέλευση της κυτταρικής σειράς DU-145

Η κατανόηση των βασικών χαρακτηριστικών και της προέλευσης μιας κυτταρικής σειράς είναι απαραίτητη πριν ξεκινήσετε να εργάζεστε με αυτήν. Αυτή η ενότητα θα σας προσφέρει μια ολοκληρωμένη εικόνα των χαρακτηριστικών και της προέλευσης της κυτταρικής σειράς DU-145. Θα μάθετε: Τι είναι τα καρκινικά κύτταρα DU145; Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων DU145; Ποια είναι η διαφορά μεταξύ PC-3 και DU145;

  • Η DU-145, μια κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη, προήλθε από τον εγκέφαλο ενός λευκού άνδρα (69 ετών) με μεταστατικό καρκίνωμα του προστάτη. Αυτά τα κύτταρα κατατέθηκαν για πρώτη φορά από τον K.R. Stone και τους συνεργάτες του το 1978.
  • Όπως και τα καρκινικά κύτταρα του προστάτη PC-3, τα DU-145 εκφράζουν επίσης υποδοχείς ανδρογόνων. Ωστόσο, όταν αυτά τα κύτταρα υποβάλλονται σε θεραπεία με ανδρογόνο, δεν εμφανίζουν καμία δραστηριότητα γονιδίων που ανταποκρίνονται στους υποδοχείς ανδρογόνων και, ως εκ τούτου, θεωρούνται κύτταρα ανεξάρτητα από τα ανδρογόνα.
  • Τα κύτταρα DU-145 έχουν επιθηλιακή μορφολογία.
  • Τα κύτταρα DU-145 είναι υποτριπλοειδή και έχουν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 64. Παρουσιάζουν διάφορα χρωμοσώματα-δείκτες, όπως del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) και del (9) (p11).

PC-3 έναντι DU145

Και οι δύο κυτταρικές σειρές καρκίνου του προστάτη είναι ανεξάρτητες από τους υποδοχείς ανδρογόνων. Διαφέρουν ως προς το ογκογόνο και μεταστατικό δυναμικό τους. Όταν εγχέεται σε ποντίκι με ανοσοκαταστολή, η κυτταρική σειρά PC-3 σχηματίζει αδενοκαρκίνωμα βαθμού IV με υψηλή μεταστατική ικανότητα. Αντίθετα, η κυτταρική σειρά DU-145 αναπτύσσει καρκίνο του προστάτη με μέτριο μεταστατικό δυναμικό [1].

Διαταραχή των μικροϊνών στα ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα του προστάτη PC-3.

Καλλιέργεια κυττάρων DU-145

Η κυτταρική σειρά DU-145 χρησιμοποιείται ευρέως σε ερευνητικά εργαστήρια για τον καρκίνο του προστάτη. Θα πρέπει να μάθετε τα ακόλουθα βασικά σημεία για να διευκολύνετε την εύκολη και αποτελεσματική καλλιέργειά της. Αυτή η ενότητα θα περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με το μέσο DU145, τον χρόνο διπλασιασμού, τις συνθήκες κυτταρικής καλλιέργειας και τα πρωτόκολλα.

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων DU-145

Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού:

Ο χρόνος διπλασιασμού των DU-145 κυμαίνεται μεταξύ 30 και 40 ωρών.

Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:

Η DU-145 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.

Πυκνότητα σποράς:

Τα κύτταρα DU-145 σπέρνονται σε συνιστώμενη κυτταρική πυκνότητα 2 x 104 κύτταρα/cm2. Σε αυτή την πυκνότητα, τα κύτταρα σχηματίζουν ένα συνεχές μονοστρωματικό στρώμα σε περίπου 4 ημέρες. Για τη σπορά, τα κύτταρα πλένονται με 1 x φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα και επωάζονται με διάλυμα μεταφοράς, Accutase. Μετά από 8 έως 10 λεπτά επώασης σε θερμοκρασία δωματίου, στα κύτταρα προστίθεται φρέσκο καλλιεργητικό μέσο και φυγοκεντρίζονται. Το συλλεγόμενο ίζημα κυττάρων επαναδιαλύεται προσεκτικά και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέες φιάλες καλλιέργειας για ανάπτυξη.

Μέσο ανάπτυξης:

EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) με συμπληρώματα μέσου, δηλ. 10% εμβρυϊκό βοοειδές ορό (FBS), 2 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3 και EBSS. Το μέσο ανανεώνεται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Οι καλλιέργειες DU-145 διατηρούνται σε υγραντικό επωαστήρα στους 37 °C με πηγή 5% CO2.

Αποθήκευση:

Τα κύτταρα DU-145 αποθηκεύονται στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη, προκειμένου να διατηρηθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Για τα κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145 συνιστώνται τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Για την κατάψυξη των κυττάρων επιλέγεται μια μέθοδος αργής κατάψυξης που επιτρέπει τη σταδιακή πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C. Αυτό αποτρέπει την πρόκληση σοκ στα κύτταρα και βοηθά στη διατήρηση της βιωσιμότητάς τους.

Διαδικασία απόψυξης:

Τα φιαλίδια με κατεψυγμένα κύτταρα DU-145 αποψύχονται γρήγορα σε υδατόλουτρο στους 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Στη συνέχεια, στα κύτταρα προστίθενται μέσα καλλιέργειας και φυγοκεντρώνονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Τα συλλεγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται σε μέσο ανάπτυξης και μεταφέρονται σε φιάλη για ανάπτυξη. Η ανάκτηση μετά την κατάψυξη διαρκεί σχεδόν 24 ώρες.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Απαιτούνται ρυθμίσεις βιοασφάλειας επιπέδου 1 για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς DU145 που είναι ανεξάρτητη από τον υποδοχέα ανδρογόνων.

Du145 cells

Κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145 σε μεγέθυνση 10x και 20x.

Κυτταρική σειρά DU-145: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί

Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, η κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη DU-145 έχει κάποια πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Αυτά τα χαρακτηριστικά μπορούν να σας βοηθήσουν να αποφασίσετε αν θα τη χρησιμοποιήσετε στην έρευνά σας. Τα κύρια πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων DU-145 αναφέρονται παρακάτω.

Πλεονεκτήματα

Τα πλεονεκτήματα των κυττάρων DU-145 είναι:

Ογκογένεση

Η DU-145 είναι μια επιθετική ογκογόνος κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη με μέτριο μεταστατικό δυναμικό. Χρησιμοποιείται για την ανάπτυξη του μοντέλου ξενομοσχεύματος DU145 σε ποντίκια με ανοσοκαταστολή για τη μελέτη της βιολογίας, της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου του προστάτη in vitro και in vivo.

Ανεξαρτησία από τους υποδοχείς ανδρογόνων

Τα κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145 είναι ανεξάρτητα από τους υποδοχείς ανδρογόνων. Δεν εξαρτώνται από τα ανδρογόνα για την ανάπτυξή τους και δεν εμφανίζουν καμία αντίδραση σε κυτταρικό και μοριακό επίπεδο όταν υποβάλλονται σε θεραπεία με ανδρογόνα. Ιδανικά για την έρευνα των μηχανισμών του καρκίνου του προστάτη που είναι ανεξάρτητοι από τις ορμόνες.

Περιορισμοί

Οι περιορισμοί της κυτταρικής σειράς DU-145 είναι:

Μοντέλο in vitro

Το DU-145 είναι ένα in vitro κυτταρικό μοντέλο μεταστατικού καρκίνου του προστάτη, επομένως ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει πλήρως την πολυπλοκότητα των πρωτοπαθών όγκων του προστάτη. Επιπλέον, ενδέχεται να μην καλύπτει όλους τους τύπους και υποτύπους καρκίνου του προστάτη λόγω συγκεκριμένων χαρακτηριστικών, όπως η ανεξαρτησία από τους υποδοχείς ανδρογόνων.

 

Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων DU-145

Η κυτταρική σειρά καρκίνου του προστάτη DU-145 έχει ένα ευρύ φάσμα ερευνητικών εφαρμογών. Μερικές πολλά υποσχόμενες εφαρμογές παρατίθενται εδώ.

  • Βιολογία του καρκίνου του προστάτη: Η DU-145 αποτελεί ένα σχετικό μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του προστάτη. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν τους μοριακούς μηχανισμούς που οδηγούν στην ανάπτυξη, την εξέλιξη και τη μετάσταση του καρκίνου. Επιπλέον, διερευνώνται και οι γενετικές μεταλλάξεις που συνήθως συνδέονται με τον καρκίνο του προστάτη. Έρευνα που διεξήχθη το 2021 εξέτασε τα κύτταρα DU-145 για τον εντοπισμό πιθανών βιοδεικτών για αποτελεσματικές διαγνωστικές και θεραπευτικές εφαρμογές. Η μελέτη πρότεινε την ακτίνη γάμμα 1 (ACTG1) ως πιθανό βιοδείκτη καρκίνου του προστάτη, καθώς προάγει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων και ρυθμίζει τη μετάσταση μέσω της ενεργοποίησης της οδού MAPK/ERK [2].
  • Διαλογή και ανάπτυξη φαρμάκων: Τα κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145 χρησιμοποιούνται ευρέως για τη δοκιμή της κυτταροτοξικότητας και της αποτελεσματικότητας πιθανών αντικαρκινικών φαρμάκων. Αυτό βοηθά τους ερευνητές να εντοπίσουν νέα φάρμακα, να κατανοήσουν την αντοχή στα φάρμακα και τους υποκείμενους μοριακούς μηχανισμούς. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2022 διερεύνησε την κυτταροτοξική δράση ενός ρητινώδους μίγματος, της πρόπολης ή της κόλλας μελισσών, στις κυτταρικές σειρές καρκίνου του προστάτη PC-3 και DU-145. Η μελέτη έδειξε ανασταλτικές επιδράσεις αυτής της φυσικής ουσίας στην ανάπτυξη και στις δύο κυτταρικές σειρές και πρότεινε το αντικαρκινικό της δυναμικό [3]. Μια άλλη μελέτη διεξήχθη το 2019, η οποία διερεύνησε τις αντιπολλαπλασιαστικές επιδράσεις μιας φυσικής ένωσης, της βεταΐνης, σε κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145. Η έρευνα έδειξε ότι η βεταΐνη ασκεί αντιπολλαπλασιαστικές δράσεις αυξάνοντας τον κυτταρικό θάνατο που προκαλείται από το οξειδωτικό στρες και τη φλεγμονή στα κύτταρα DU-145 [4].

5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με θέμα τα κύτταρα DU-145

Ακολουθούν ορισμένες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τη σειρά κυττάρων DU-145.

Εξαρτώμενες από τη συγκέντρωση επιδράσεις του θειικού ψευδαργύρου στη σειρά κυττάρων ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη DU-145: οξειδωτικές, αποπτωτικές, φλεγμονώδεις και μορφολογικές αναλύσεις

Αυτή η μελέτη στο περιοδικό Biological Trace Element Research, 2020, πρότεινε ότι το θειικό ψευδάργυρο (ZnSo4) ασκεί αντιπολλαπλασιαστικές επιδράσεις στα κύτταρα DU-145 μέσω της πρόκλησης απόπτωσης, μορφολογικών αλλαγών, οξειδωτικής βλάβης και φλεγμονής.

Επιλεκτική κυτταροτοξική και αντιμεταστατική δράση σε κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145 που προκαλείται από εκχύλισμα φλοιού Annona muricata L. και το φυτοχημικό συστατικό αννονακίνη

Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο BMC Complementary Medicine and Therapies το 2020. Η μελέτη αυτή διερεύνησε το κυτταροτοξικό και αντιμεταστατικό δυναμικό ενός φυτού, του εκχυλίσματος φλοιού Annona muricata L., και της βιοδραστικής ουσίας του, της αννονακίνης, στην κυτταρική σειρά DU-145.

Η οδός που σχετίζεται με το LncRNA LOXL1‐AS1/miR‐let‐7a‐5p/EGFR ρυθμίζει την αντοχή στη δοξορουβικίνη των κυττάρων καρκίνου του προστάτη DU‐145

Αυτή η δημοσίευση στο IUBMB Life (2019) πρότεινε ότι η αλληλεπίδραση του μακρού μη κωδικοποιητικού RNA LOXL1-AS1 με το miR-let-7a-5p και την οδό EGFR ρυθμίζει την αντοχή στη δοξορουβικίνη στα κύτταρα καρκίνου του προστάτη DU-145.

Η υπορύθμιση του DDR1 προκαλεί απόπτωση και αναστέλλει την EMT μέσω της φωσφορυλίωσης του Pyk2/MKK7 στις κυτταρικές σειρές καρκίνου του προστάτη DU-145 και Lncap-FGC

Αυτό το άρθρο στο Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) ανέφερε ότι η υπορύθμιση του γονιδίου Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) προκαλεί θάνατο των κυττάρων DU-145 και αναστέλλει την επιθηλιακή προς μεσεγχυματική μετάβαση (EMT) μέσω της ενεργοποίησης της οδού Pyk2/MKK7.

Η καστικίνη αναστέλλει τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων του καρκίνου του προστάτη DU 145 μέσω των οδών σηματοδότησης Ras/Akt/NF-κB

Αυτή η μελέτη στο Journal of Food Biochemistry (2019) πρότεινε ότι η καστικίνη, μια πολυμεθοξυφλαβόνη, αναστέλλει τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων DU-145 ρυθμίζοντας τη σηματοδότηση Ras/Akt/NF-κB.

Πόροι για τη σειρά κυττάρων DU-145: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Υπάρχουν πολλές διαδικτυακές πηγές σχετικά με τη κυτταρική σειρά DU-145 του καρκίνου του προστάτη. Σε αυτή την ενότητα θα αναφερθούν μερικές πηγές που εξηγούν τον χειρισμό, τη συντήρηση και το πρωτόκολλο μεταμόλυνσης για αυτά τα κύτταρα:

  • Μεταφορά DU-145: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο είναι ένας βήμα-βήμα οδηγός για την εκμάθηση του πρωτοκόλλου μεταφοράς κυττάρων DU-145.

Το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων DU-145 αναφέρεται εδώ.

  • Υποκαλλιέργεια DU-145: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια ή την υπο-καλλιέργεια κυττάρων DU-145.
  • Κύτταρα DU-145: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει πολλές χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τη κυτταρική σειρά DU-145, συμπεριλαμβανομένου του μέσου DU145, του πρωτοκόλλου υποκαλλιέργειας και του χειρισμού πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.

Αναφορές

  1. Lima, A.R., et al., Διαχωρισμός μεταξύ του εξωμεταβολώματος φυσιολογικών και καρκινικών κυττάρων του ανθρώπινου προστάτη με GC-MS. Επιστημονικές εκθέσεις, 2018. 8(1): σ. 5539.
  2. Xiao, L., et al., Η σίγηση της έκφρασης του ACTG1 προκαλεί επιθηλιακή μεσεγχυματική μετάβαση στον καρκίνο του προστάτη μέσω της οδού σηματοδότησης MAPK/ERK. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): σ. 1445-1455.
  3. Gogacz, M., et al., Αντικαρκινικές επιδράσεις εκχυλισμάτων πρόπολης που λαμβάνονται με τη μέθοδο ψυχρού διαχωρισμού σε κυτταρικές σειρές καρκίνου του προστάτη PC-3 και DU-145. Molecules, 2022. 27(23): σ. 8245.
  4. Kar, F., et al., Η βεταΐνη καταστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων αυξάνοντας την απόπτωση και τη φλεγμονή που προκαλούνται από το οξειδωτικό στρες στη σειρά κυττάρων καρκίνου του προστάτη DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: σ. 871-881.

 

Εντοπίσαμε ότι βρίσκεστε σε διαφορετική χώρα ή χρησιμοποιείτε διαφορετική γλώσσα του προγράμματος περιήγησης από την τρέχουσα επιλεγμένη. Θα θέλατε να αποδεχτείτε τις προτεινόμενες ρυθμίσεις

Κλείστε το