Κύτταρα DLD-1: DLD-1 στην έρευνα για τον καρκίνο του παχέος εντέρου
ΤοDLD-1 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκινώματος του παχέος εντέρου που χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα για τον καρκίνο. Αποτελεί πολύτιμο εργαλείο για τη διερεύνηση διαφόρων πτυχών του καρκίνου του παχέος εντέρου, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης του όγκου, της εξέλιξης, των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών και της ανταπόκρισης σε θεραπευτικούς παράγοντες. Έτσι, η DLD-1 είναι εξαιρετική για την κατανόηση της νόσου και την ανάπτυξη πιθανών στρατηγικών θεραπείας.
Αυτό το άρθρο θα παράσχει σημαντικές πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά DLD-1 που πρέπει να γνωρίζετε πριν εργαστείτε μαζί της. Θα καλύψει:
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων DLD-1
- Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς DLD-1
- Κυτταρική σειρά DLD-1: DLD DLD: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς DLD-1
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις για τα κύτταρα DLD-1
- Πηγές για την κυτταρική σειρά DLD-1: DLD-1D: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
1. Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων DLD-1
Πριν από την επεξεργασία μιας κυτταρικής σειράς, η πρώτη σκέψη ενός ερευνητή είναι η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά της. Αυτή η ενότητα του άρθρου αποτελεί μια λεπτομερή εισαγωγή στην κυτταρική σειρά DLD-1. Θα καλύψει τις ακόλουθες συχνές ερωτήσεις: Τι είναι τα κύτταρα DLD-1 Τι είναι η καρκινική κυτταρική σειρά DLD-1 Ποιες είναι οι μεταλλάξεις της κυτταρικής σειράς DLD-1 Ποιο είναι το μέγεθος ενός κυττάρου DLD-1 Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων DLD-1
- Η DLD-1, μια κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου, προέρχεται από το παχύ έντερο ενός 67χρονου άνδρα ασθενούς με αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου. Απομονώθηκε από τον D.L. Dexter και τους συνεργάτες του κατά τη διάρκεια του 1977-1979. Αυτή η κυτταρική σειρά έχει την ίδια προέλευση με τις κυτταρικές σειρές HCT-8, HCT-15 και HRT-18.
- Όπως και οι καρκίνοι του παχέος εντέρου, τα κύτταρα DLD-1 διαθέτουν φαινότυπο μικροδορυφορικής αστάθειας [1].
- Οι μεταλλάξεις της DLD-1 περιλαμβάνουν τις μεταλλάξεις KRAS, P53, BRAF, BRCA1 και BRCA2. Λόγω της κατάστασης DLD-1 P53, της μετάλλαξης DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 και DLD-1 KRAS, τα κύτταρα αυτά θεωρούνται ιδανικά για μελέτες καρκίνου.
- Τα κύτταρα αυτά διαθέτουν μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο.
- Το μέγεθος της κυτταρικής σειράς DLD-1 είναι περίπου 15 μm.
- Η ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1 διαθέτει ψευδοδιπλοειδή καρυότυπο. Περίπου το 86% των κυττάρων διαθέτει έναν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 46. Ωστόσο, πολυπλοειδία μπορεί επίσης να υπάρχει στο 17,1% του κυτταρικού πληθυσμού.
2.πληροφορίες καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς DLD-1
Πριν από την καλλιέργεια οποιασδήποτε κυτταρικής σειράς, πρέπει να γνωρίζετε τις βασικές απαιτήσεις της κυτταρικής καλλιέργειας. Σε αυτή την ενότητα θα επισημανθούν τα σημαντικά σημεία που πρέπει να μάθετε πριν ξεκινήσετε την εργασία στην κυτταρική σειρά DLD-1. Αυτό περιλαμβάνει: Τι είναι ο χρόνος διπλασιασμού της DLD-1 Ποιο είναι το μέσο καλλιέργειας DLD-1 Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των κυττάρων DLD-1 Πώς καλλιεργείτε τα κύτταρα DLD-1
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων DLD-1
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού των DLD-1 είναι περίπου 15 ώρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Το DLD-1 είναι μια προσκολλημένη ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου. Τα κύτταρα αναπτύσσονται σε μονοστρώματα. |
|
Πυκνότητα σποράς: |
Τα κύτταρα DLD-1 σπείρονται σε πυκνότητα 1 έως 2 x104 κύτταρα/cm2. Τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με 1x phosphate buffer saline (PBS) και επωάζονται με διάλυμα παθητικοποίησης (Accutase) σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Μετά από επώαση 8 έως 10 λεπτών, τα αποκολλημένα κύτταρα προστίθενται στο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Στη συνέχεια, το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται προσεκτικά και τα κύτταρα χύνεται σε νέα δοχεία καλλιέργειας που περιέχουν μέσο ανάπτυξης. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Για την καλλιέργεια των κυττάρων DLD-1 χρησιμοποιείται RPMI 1640 με συμπληρώματα του μέσου, συμπεριλαμβανομένου 10% εμβρυϊκού ορού βοοειδών FBS, 2,1 mM σταθερής γλουταμίνης και 2,0 g/L NaHCO3. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2-3 φορές την εβδομάδα. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Οι καλλιέργειες DLD-1 διατηρούνται σε επωαστήρα με υγρασία 37°C και παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κύτταρα DLD-1 αποθηκεύονται σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών (σε θερμοκρασία κάτω των -150°C). |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Για την κατάψυξη των κυττάρων DLD-1 μπορούν να χρησιμοποιηθούν τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Συνιστάται πάντα μια αργή διαδικασία κατάψυξης, που επιτρέπει τη σταδιακή μείωση της θερμοκρασίας κατά 1°C, αποτρέποντας έτσι το σοκ των κυττάρων και προστατεύοντας τη βιωσιμότητά τους. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο προρυθμισμένο σε θερμοκρασία 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα έως ότου απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται σε φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται. Το βήμα αυτό είναι απαραίτητο για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης από τα κύτταρα. Τα συλλεγέντα κύτταρα επαναιωρούνται σε μέσο ανάπτυξης και διανέμονται στη φιάλη για ανάπτυξη. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Η κυτταρική σειρά DLD-1 διατηρείται στα εργαστήρια επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
3.κυτταρική σειρά DLD-1: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
Σε αυτή την ενότητα του άρθρου, θα εξετάσουμε τα πλεονεκτήματα και τους περιορισμούς της κυτταρικής σειράς DLD-1 για τον καρκίνο του παχέος εντέρου.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς DLD-1 είναι τα εξής:
|
Μοντέλο καρκίνου του παχέος εντέρου |
Τα κύτταρα DLD-1 διαθέτουν μεταλλάξεις που απαντώνται συνήθως σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου, όπως η μετάλλαξη KRAS του DLD-1, το BRCA του DLD-1 και το BRCA2 του DLD-1. Αυτή η συνάφεια τα καθιστά ένα κλινικά κατάλληλο κυτταρικό μοντέλο για τη μελέτη αυτής της νόσου. |
|
Ογκογόνος κυτταρική γραμμή |
Τα κύτταρα DLD-1 είναι καρκινικά. Μπορούν να προκαλέσουν όγκους όταν εγχέονται σε γυμνά ποντίκια. Ως εκ τούτου, οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για την ανάπτυξη μοντέλων όγκων ξενομοσχεύματος που βοηθούν στη διερεύνηση του σχηματισμού, της ανάπτυξης και της εξέλιξης των όγκων in vivo. |
Περιορισμοί
Οι περιορισμοί που σχετίζονται με τα κύτταρα DLD-1 είναι οι εξής:
|
Ετερογένεια |
Οι πληθυσμοί κυττάρων του καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1 παρουσιάζουν γενετική και φαινοτυπική ετερογένεια. Αυτό μπορεί να επηρεάσει τη δυνατότητα γενίκευσης των ερευνητικών αποτελεσμάτων. |
4.ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς DLD-1
Η κυτταρική σειρά DLD-1 προσφέρει μια σειρά εφαρμογών στην έρευνα για τον καρκίνο. Ορισμένες εξέχουσες εφαρμογές συζητούνται στην παρούσα ενότητα.
- Μελέτη του καρκίνου: Τα κύτταρα DLD-1 χρησιμεύουν ως πολύτιμο in vitro μοντέλο για την κατανόηση των μοριακών μηχανισμών που διέπουν την ανάπτυξη, την εξέλιξη και την εξέλιξη του καρκίνου του παχέος εντέρου. Επιπλέον, χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της γονιδιακής έκφρασης, των σηματοδοτικών μονοπατιών και της επίδρασης συγκεκριμένων γενετικών μεταλλάξεων στη συμπεριφορά των καρκινικών κυττάρων. Έρευνα που διεξήχθη το 2022 παρατήρησε ότι ο σηματοδοτικός καταρράκτης PI3K/Akt/YAP ρυθμίζει τη μετανάστευση και την εισβολή της κυτταρικής σειράς του καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1 [2].
- Ανάπτυξη φαρμάκων: Οι ερευνητές χρησιμοποιούν την κυτταρική σειρά DLD-1 για να δοκιμάσουν την αποτελεσματικότητα αντικαρκινικών φαρμάκων και να αξιολογήσουν τις δυνατότητές τους για τη θεραπεία του καρκίνου του παχέος εντέρου. Αυτό βοηθά στην ανάπτυξη φαρμάκων και στην αποτελεσματική καταπολέμηση της νόσου. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2022 χρησιμοποίησε την καρκινική κυτταρική σειρά DLD-1 και διερεύνησε την αντικαρκινική δράση φθαλοκυανινών πυριτίου, χημικά συντιθέμενων ενώσεων. Τα αποτελέσματα της μελέτης υπέδειξαν αυτές τις ενώσεις ως ισχυρούς αντικαρκινικούς παράγοντες [3]. Είναι ενδιαφέρον ότι μια άλλη έρευνα διαπίστωσε το αντικαρκινικό δυναμικό μιας πρωτεΐνης P8 που προέρχεται από προβιοτικά, χρησιμοποιώντας κύτταρα DLD-1 [4].
5.ερευνητικές δημοσιεύσεις για τα κύτταρα DLD-1
Σε αυτή την ενότητα θα επισημανθούν μερικές ενδιαφέρουσες και συχνά αναφερόμενες δημοσιεύσεις που αφορούν την κυτταρική σειρά καρκινώματος του παχέος εντέρου DLD-1.
Αυτή η δημοσίευση είναι στο Journal of Biologically Active Products από το Nature (2022). Η μελέτη διαπίστωσε ότι η διοσμίνη, ένα φλαβονοειδές, επάγει τον κυτταρικό θάνατο στα κύτταρα DLD-1 και προκαλεί επίσης τη διακοπή του κυτταρικού κύκλου- έτσι, μπορεί να αποτελέσει πιθανό αντικαρκινικό παράγοντα.
Αυτή η μελέτη στο Animal Cells and Systems (2018) πρότεινε ότι η βρωμελαΐνη, ένα ένζυμο, καταστέλλει τη μετάλλαξη KRAS του DLD-1 και ασκεί ισχυρά κυτταροτοξικά αποτελέσματα.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2019 στο περιοδικό "Environmental Toxicology". Η μελέτη διερεύνησε τις αντικαρκινικές επιδράσεις μιας φυσικής ένωσης, του Bergapten, χρησιμοποιώντας μια σειρά κυττάρων του πυρήνα DLD-1.
Αυτή η μελέτη στην επιθεώρηση Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) διαπίστωσε ότι τα νανοσύνθετα κουρκουμίνης/οξειδίου του σιδήρου είναι ιδιαίτερα αποτελεσματικά έναντι των κυττάρων του καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2020 στην Turkish Journal of Biology. Η μελέτη πρότεινε ότι ένα φυσικό προϊόν, η μεσολάβηση της επιμπρασσινολίδης στην ενεργοποίηση της AKT σε κύτταρα DLD-1, διεγείρει την αυτοφαγία που σχετίζεται με τις πολυαμίνες.
6.πόροι για την κυτταρική σειρά DLD-1: DLDD: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν ορισμένοι πόροι σχετικά με τα κύτταρα DLD-1:
- DLD-1 transfection: DLD-1 in vitro πρωτόκολλο διαμόλυνσης: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο είναι ένας ολοκληρωμένος οδηγός σχετικά με το πρωτόκολλο διαμόλυνσης DLD-1 in vitro.
- Κύτταρα DLD-1: Αυτή η ερευνητική εργασία περιγράφει εν συντομία τις απαιτήσεις καλλιέργειας κυττάρων DLD-1, συμπεριλαμβανομένων των μέσων και των συνθηκών καλλιέργειας. Εκτός αυτού, μπορεί να σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο διαμόλυνσης που χρησιμοποιείται για τα κύτταρα DLD-1.
Οι ακόλουθοι σύνδεσμοι περιέχουν το πρωτόκολλο για την καλλιέργεια DLD-1, καρκινικών κυττάρων παχέος εντέρου ανθρώπινης προέλευσης.
- Κυτταρική σειρά DLD-1: Αυτός ο δικτυακός τόπος θα παρέχει βασικές πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά DLD-1. Θα σας βοηθήσει να μάθετε διάφορα πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων DLD-1, συμπεριλαμβανομένης της υποκαλλιέργειας και του χειρισμού κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαζόμενων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotic genes as new targets for single and combinatorial treatments with resveratrol and curcumin in colorectal cancer. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., Η σηματοδότηση PI3K/Akt/YAP προάγει τη μετανάστευση και την εισβολή τωνκυττάρων του καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1 ). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.