Κύτταρα DLD-1: Εφαρμογές και πληροφορίες σχετικά με τα κύτταρα DLD-1 στην έρευνα για τον καρκίνο του παχέος εντέρου
Το DLD-1 είναι μια σειρά κυττάρων ανθρώπινου καρκίνου του παχέος εντέρου που χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα για τον καρκίνο. Αποτελεί ένα πολύτιμο εργαλείο για τη διερεύνηση διαφόρων πτυχών του καρκίνου του παχέος εντέρου, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης του όγκου, της εξέλιξής του, των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών και της ανταπόκρισης σε θεραπευτικά μέσα. Ως εκ τούτου, το DLD-1 διακρίνεται στην κατανόηση της νόσου και στην ανάπτυξη πιθανών στρατηγικών θεραπείας.
- Μέσο ανάπτυξης
- Για την καλλιέργεια των κυττάρων DLD-1 χρησιμοποιείται RPMI 1640 με συμπληρώματα μέσου, συμπεριλαμβανομένου 10% εμβρυϊκού βοείου ορού (FBS), 2,1 mM σταθερής γλουταμίνης και 2,0 g/L NaHCO3. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2-3 φορές την εβδομάδα.
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού του DLD-1 είναι περίπου 15 ώρες.
- Τύπος ανάπτυξης
- Το DLD-1 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου του ανθρώπου. Τα κύτταρα αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διαθέσιμο από
- Cytion — Παραγγελία DLD-1
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων DLD-1
- Πληροφορίες καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς DLD-1
- Κυτταρική σειρά DLD-1: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς DLD-1
- 5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα DLD-1
- Πόροι για τη σειρά κυττάρων DLD-1: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων DLD-1
Πριν ξεκινήσει την εργασία του με μια κυτταρική σειρά, το πρώτο πράγμα που εξετάζει ένας ερευνητής είναι η προέλευσή της και τα γενικά χαρακτηριστικά της. Αυτή η ενότητα του άρθρου αποτελεί μια λεπτομερή εισαγωγή στην κυτταρική σειρά DLD-1. Θα καλύψει τις ακόλουθες συχνές ερωτήσεις: Τι είναι τα κύτταρα DLD-1; Τι είναι η καρκινική κυτταρική σειρά DLD-1; Ποιες είναι οι μεταλλάξεις της κυτταρικής σειράς DLD-1; Ποιο είναι το μέγεθος ενός κυττάρου DLD-1; Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων DLD-1;
- Η DLD-1, μια κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου, προήλθε από το παχύ έντερο ενός 67χρονου άνδρα ασθενούς με αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου. Απομονώθηκε από τον D.L. Dexter και τους συνεργάτες του κατά τη διάρκεια της περιόδου 1977-1979. Αυτή η κυτταρική σειρά έχει την ίδια προέλευση με τις κυτταρικές σειρές HCT-8, HCT-15 και HRT-18.
- Όπως και οι καρκίνοι του παχέος εντέρου, τα κύτταρα DLD-1 παρουσιάζουν φαινότυπο μικροδορυφορικής αστάθειας [1].
- Οι μεταλλάξεις του DLD-1 περιλαμβάνουν τα γονίδια KRAS, P53, BRAF, BRCA1 και BRCA2. Λόγω της κατάστασης του P53 στο DLD-1, καθώς και των μεταλλάξεων BRCA, BRCA2 και KRAS στο DLD-1, αυτά τα κύτταρα θεωρούνται ιδανικά για μελέτες σχετικά με τον καρκίνο.
- Αυτά τα κύτταρα έχουν επιθηλιακή μορφολογία.
- Το μέγεθος της κυτταρικής σειράς DLD-1 είναι περίπου 15 µm.
- Η ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1 διαθέτει ψευδοδιπλοειδή καρυότυπο. Περίπου το 86% των κυττάρων διαθέτει έναν τυπικό αριθμό χρωμοσωμάτων 46. Ωστόσο, πολυπλοειδία μπορεί επίσης να υπάρχει στο 17,1% του κυτταρικού πληθυσμού.
Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς DLD-1
Πριν από την καλλιέργεια οποιασδήποτε κυτταρικής σειράς, πρέπει να γνωρίζετε τις βασικές απαιτήσεις της κυτταρικής καλλιέργειας. Σε αυτή την ενότητα θα επισημανθούν τα σημαντικά σημεία που πρέπει να μάθετε πριν ξεκινήσετε την εργασία σας με την κυτταρική σειρά DLD-1. Αυτά περιλαμβάνουν: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού του DLD-1; Ποιο είναι το μέσο καλλιέργειας DLD-1; Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των κυττάρων DLD-1; Πώς καλλιεργούνται τα κύτταρα DLD-1;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων DLD-1
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού του DLD-1 είναι περίπου 15 ώρες.
Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:
Το DLD-1 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά ανθρώπινου καρκίνου του παχέος εντέρου. Τα κύτταρα αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες.
Πυκνότητα σποράς:
Τα κύτταρα DLD-1 σπέρνονται σε πυκνότητα 1 έως 2 x 104 κύτταρα/cm2. Τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με 1x φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα (PBS) και επωάζονται με διάλυμα μεταφοράς (Accutase) σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Μετά από επώαση 8 έως 10 λεπτών, τα αποκολλημένα κύτταρα προστίθενται στο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρώνονται. Στη συνέχεια, το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται προσεκτικά και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα δοχεία καλλιέργειας που περιέχουν μέσο ανάπτυξης.
Μέσο ανάπτυξης:
Για την καλλιέργεια των κυττάρων DLD-1 χρησιμοποιείται RPMI 1640 με συμπληρώματα μέσου, συμπεριλαμβανομένου 10% εμβρυϊκού βοείου ορού (FBS), 2,1 mM σταθερής γλουταμίνης και 2,0 g/L NaHCO3. Τα μέσα πρέπει να αντικαθίστανται 2-3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Οι καλλιέργειες DLD-1 διατηρούνται σε υγραντικό επωαστήρα στους 37 °C με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Τα κύτταρα DLD-1 αποθηκεύονται στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου ή σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας (σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C).
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Για την κατάψυξη των κυττάρων DLD-1 μπορούν να χρησιμοποιηθούν τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Συνιστάται πάντα η εφαρμογή μιας διαδικασίας αργής κατάψυξης, η οποία επιτρέπει τη σταδιακή μείωση της θερμοκρασίας κατά 1 °C, αποτρέποντας έτσι το σοκ στα κύτταρα και προστατεύοντας τη βιωσιμότητά τους.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο προρυθμισμένο στους 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα, έως ότου απομείνει ένας μικρός σβώλος πάγου. Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται σε φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται. Αυτό το βήμα είναι απαραίτητο για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης από τα κύτταρα. Τα συλλεγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται σε μέσο ανάπτυξης και μεταφέρονται σε φιάλη για ανάπτυξη.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Η κυτταρική σειρά DLD-1 διατηρείται σε εργαστήρια βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Κυτταρική σειρά DLD-1: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
Σε αυτό το τμήμα του άρθρου, θα εξετάσουμε τα πλεονεκτήματα και τους περιορισμούς της κυτταρικής σειράς DLD-1 του καρκίνου του παχέος εντέρου.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς DLD-1 είναι:
Μοντέλο καρκίνου του παχέος εντέρου
Τα κύτταρα DLD-1 φέρουν μεταλλάξεις που συναντώνται συχνά σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου, όπως η μετάλλαξη DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA και DLD-1 BRCA2. Αυτή η συνάφεια τα καθιστά ένα κλινικά κατάλληλο κυτταρικό μοντέλο για τη μελέτη αυτής της νόσου.
Ογκογόνος κυτταρική σειρά
Τα κύτταρα DLD-1 είναι ογκογόνα. Μπορούν να προκαλέσουν όγκους όταν εγχυθούν σε γυμνά ποντίκια. Ως εκ τούτου, οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για την ανάπτυξη μοντέλων όγκων ξενομοσχεύματος που βοηθούν στη διερεύνηση του σχηματισμού, της ανάπτυξης και της εξέλιξης των όγκων in vivo.
Περιορισμοί
Οι περιορισμοί που σχετίζονται με τα κύτταρα DLD-1 είναι:
Ετερογένεια
Οι πληθυσμοί κυττάρων καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1 παρουσιάζουν γενετική και φαινοτυπική ετερογένεια. Αυτό μπορεί να επηρεάσει τη γενικευσιμότητα των ερευνητικών αποτελεσμάτων.
Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς DLD-1
Η κυτταρική σειρά DLD-1 προσφέρει μια σειρά εφαρμογών στην έρευνα για τον καρκίνο. Ορισμένες σημαντικές εφαρμογές αναλύονται σε αυτή την ενότητα.
- Μελέτη του καρκίνου: Τα κύτταρα DLD-1 χρησιμεύουν ως ένα πολύτιμο in vitro μοντέλο για την κατανόηση των μοριακών μηχανισμών που διέπουν την ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόοδο του καρκίνου του παχέος εντέρου. Επιπλέον, χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της γονιδιακής έκφρασης, των οδών σηματοδότησης και της επίδρασης συγκεκριμένων γενετικών μεταλλάξεων στη συμπεριφορά των καρκινικών κυττάρων. Έρευνα που διεξήχθη το 2022 παρατήρησε ότι η κασκάδα σηματοδότησης PI3K/Akt/YAP ρυθμίζει τη μετανάστευση και την εισβολή της κυτταρικής σειράς DLD-1 του καρκίνου του παχέος εντέρου [2].
- Ανάπτυξη φαρμάκων: Οι ερευνητές χρησιμοποιούν τη σειρά κυττάρων DLD-1 για να δοκιμάσουν την αποτελεσματικότητα των αντικαρκινικών φαρμάκων και να αξιολογήσουν το δυναμικό τους για τη θεραπεία του καρκίνου του παχέος εντέρου. Αυτό βοηθά στην ανάπτυξη φαρμάκων και στην αποτελεσματική καταπολέμηση της νόσου. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2022 χρησιμοποίησε τη σειρά καρκινικών κυττάρων DLD-1 και διερεύνησε την αντικαρκινική δράση των φθαλοκυανινών πυριτίου, χημικά συνθεμένων ενώσεων. Τα αποτελέσματα της μελέτης υποδήλωσαν ότι αυτές οι ενώσεις αποτελούν ισχυρούς αντικαρκινικούς παράγοντες [3]. Είναι ενδιαφέρον ότι μια άλλη έρευνα ανακάλυψε το αντικαρκινικό δυναμικό μιας πρωτεΐνης P8 που προέρχεται από προβιοτικά, χρησιμοποιώντας κύτταρα DLD-1 [4].
5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα DLD-1
Σε αυτή την ενότητα θα παρουσιάσουμε μερικές ενδιαφέρουσες και συχνά αναφερόμενες δημοσιεύσεις που αφορούν τη σειρά κυττάρων καρκινώματος του παχέος εντέρου DLD-1.
Αυτή η δημοσίευση βρίσκεται στο περιοδικό Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Η μελέτη διαπίστωσε ότι η διοσμίνη, ένα φλαβονοειδές, προκάλεσε κυτταρικό θάνατο στα κύτταρα DLD-1 και επίσης προκάλεσε διακοπή του κυτταρικού κύκλου· επομένως, μπορεί να αποτελεί πιθανό αντικαρκινικό παράγοντα.
Αυτή η μελέτη στο περιοδικό Animal Cells and Systems (2018) πρότεινε ότι η βρομελαΐνη, ένα ένζυμο, καταστέλλει τη μετάλλαξη DLD-1 KRAS και ασκεί ισχυρές κυτταροτοξικές επιδράσεις.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2019 στο περιοδικό «Environmental Toxicology». Η μελέτη διερεύνησε τις αντικαρκινικές επιδράσεις μιας φυσικής ένωσης, της βεργαπτένης, χρησιμοποιώντας μια κυτταρική σειρά του παχέος εντέρου DLD-1.
Αυτή η μελέτη στο περιοδικό Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) διαπίστωσε ότι τα νανοσύνθετα κουρκουμίνης/οξειδίου του σιδήρου είναι εξαιρετικά αποτελεσματικά κατά των καρκινικών κυττάρων του παχέος εντέρου DLD-1.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2020 στο Turkish Journal of Biology. Η μελέτη πρότεινε ότι ένα φυσικό προϊόν, η ενεργοποίηση της AKT που προκαλείται από την επιμπρασινολίδη σε κύτταρα DLD-1, διεγείρει την αυτοφαγία που σχετίζεται με τις πολυαμίνες.
Πηγές για τη σειρά κυττάρων DLD-1: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικοί πόροι σχετικά με τα κύτταρα DLD-1:
- Μεταφορά DLD-1: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο είναι ένας ολοκληρωμένος οδηγός σχετικά με το πρωτόκολλο μεταφοράς DLD-1 in vitro.
- Κύτταρα DLD-1: Αυτή η ερευνητική εργασία περιγράφει εν συντομία τις απαιτήσεις καλλιέργειας των κυττάρων DLD-1, συμπεριλαμβανομένων των μέσων και των συνθηκών καλλιέργειας. Επιπλέον, μπορεί να σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο μεταμόλυνσης που χρησιμοποιείται για τα κύτταρα DLD-1.
Οι παρακάτω σύνδεσμοι περιέχουν το πρωτόκολλο καλλιέργειας των DLD-1, κυττάρων καρκίνου του παχέος εντέρου ανθρώπινης προέλευσης.
- Κυτταρική σειρά DLD-1: Αυτός ο ιστότοπος παρέχει βασικές πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά DLD-1. Θα σας βοηθήσει να μάθετε διάφορα πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων DLD-1, συμπεριλαμβανομένης της υποκαλλιέργειας και του χειρισμού κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαζόμενων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Gavrilas, L.I., et al., Τα προ-αποπτωτικά γονίδια ως νέοι στόχοι για μεμονωμένες και συνδυαστικές θεραπείες με ρεσβερατρόλη και κουρκουμίνη στον καρκίνο του παχέος εντέρου. Food & function, 2019. 10(6): σ. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., Η σηματοδότηση PI3K/Akt/YAP προάγει τη μετανάστευση και την εισβολή των καρκινικών κυττάρων του παχέος εντέρου DLD‑1. Oncology Letters, 2022. 23(4): σ. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Αντικαρκινική δράση νέων φθαλοκυανινών πυριτίου κατά της κυτταρικής σειράς αδενοκαρκινώματος του παχέος εντέρου (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): σ. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Αντικαρκινικοί ρόλοι της πρωτεΐνης P8 που προέρχεται από προβιοτικά στη σειρά κυττάρων καρκίνου του παχέος εντέρου DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): σ. 9857.