Κύτταρα ARPE-19 - Εξειδικευμένη ματιά στην έρευνα των επιθηλιακών κυττάρων του αμφιβληστροειδούς με ARPE-19

Τα κύτταραARPE-19 είναι ανθρώπινα κύτταρα του αμφιβληστροειδούς χρωστικού επιθηλίου που προκύπτουν αυθόρμητα. Χρησιμοποιούνται για τη μελέτη διαφόρων πτυχών της βιολογίας του αμφιβληστροειδούς, παθολογικών καταστάσεων και θεραπευτικών παρεμβάσεων (φαρμακολογία). Αυτό το άρθρο αποσκοπεί στην παροχή ολοκληρωμένων γνώσεων σχετικά με τα αθάνατα κύτταρα ARPE-19. Κυρίως, θα συζητηθούν τα γενικά χαρακτηριστικά, οι συνθήκες καλλιέργειας και οι ποικίλες ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς. Ως εκ τούτου, διαβάζοντας το παρόν, θα αποκτήσετε μια εμπεριστατωμένη κατανόηση των εξής:

Κύτταρα ARPE-19: ARPE ARPE: Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά
Κυτταρική σειρά ARPE-19: ARPEPE: Πληροφορίες καλλιέργειας
Πλεονεκτήματα και περιορισμοί των κυττάρων ARPE-19
Εφαρμογές της κυτταρικής σειράς ARPE-19 στην έρευνα
Κύτταρα ARPE-19: ARPE ARPE: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
Πηγές για την κυτταρική σειρά ARPE-19: ARPE ARPE: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

1. κύτταρα ARPE-19: ARPE ARPE: Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά

Η γνώση της προέλευσης και των γενικών χαρακτηριστικών μιας κυτταρικής σειράς είναι επιτακτική ανάγκη για την αποτελεσματική χρήση της στην έρευνα. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει όλες τις πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά ARPE. Όπως: Τι είναι η κυτταρική σειρά ARPE-19 Γιατί να χρησιμοποιηθούν κύτταρα ARPE-19 Τι είναι η κυτταρική σειρά ARPE-19/HPV-16 Είναι τα κύτταρα ARPE-19 αθάνατα Ποια είναι η μορφολογία και το μέγεθος των κυττάρων ARPE-19

Η αθάνατη σειρά κυττάρων μελαγχρωματικού επιθηλίου του αμφιβληστροειδούς, ARPE-19, προήλθε από τα μάτια ενός 19χρονου άνδρα που πέθανε από τραύμα στο κεφάλι σε ατύχημα. Δημιουργήθηκε από την Amy Aotaki-Keen το 1986.
Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν δείκτες κυττάρων του μελαγχρωματικού επιθηλίου του αμφιβληστροειδούς, δηλαδή CRALBP και RPE-65, γεγονός που υποδηλώνει ότι μπορούν να δημιουργήσουν σταθερά μονοστρώματα που χαρακτηρίζονται από μορφολογική και λειτουργική πολικότητα.
Τα κύτταρα ARPE-19 διαθέτουν μορφολογία που μοιάζει με επιθηλιακά κύτταρα.
Τα κύτταρα ARPE-19 έχουν ως επί το πλείστον φυσιολογικό καρυότυπο, εκτός από μία διαγραφή και μία προσθήκη στο μακρύ σκέλος του χρωμοσώματος 9 και 19, αντίστοιχα. Επιπλέον, παρατηρούνται και ορισμένες ανευπλοειδίες [1].

Ηλεκτρονική μικρογραφία σάρωσης (SEM) ραβδίων και κωνίων του αμφιβληστροειδούς.

2.κυτταρική σειρά ARPE-19: Πληροφορίες καλλιέργειας

Οι βασικές πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων είναι ζωτικής σημασίας για τον ορθό χειρισμό και τη διατήρηση μιας κυτταρικής σειράς. Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε τα βασικά σημεία για την καλλιέργεια της κυτταρικής γραμμής ARPE-19. Θα γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της arpe-19 Ποια είναι η πυκνότητα σποράς ARPE-19 Ποια είναι η πυκνότητα των κυττάρων ARPE-19 Τι είναι το μέσο κατάψυξης ARPE-19 Πώς καλλιεργείτε την κυτταρική σειρά ARPE-19

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια των κυττάρων ARPE-19

Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού:	Ο χρόνος διπλασιασμού των ARPE-19 είναι περίπου 55-65 ώρες. Μπορούν να υποστούν έως και 48 διπλασιασμούς πληθυσμού.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:	Το ARPE-19 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά.
Αναλογία υποκαλλιέργειας:	Η αναλογία υποκαλλιέργειας της ARPE-19 είναι 1:3 έως 1:5. Τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1x PBS και επωάζονται με διάλυμα διαχωρισμού, accutase, για 8 έως 10 λεπτά. Τα αποκολλημένα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται. Το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και πάλι και χύνεται σε φιάλη καλλιέργειας που περιέχει φρέσκο μέσο.
Μέσο ανάπτυξης:	Για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς ARPE-19 χρησιμοποιείται μέσο DMEM ή Ham's F12. Το μέσο ARPE-19 συμπληρώνεται με 5% FBS, 3,1 g/L γλυκόζη, 15 mM HEPES, 1,6 mM L-γλουταμίνη, 1,0 mM πυρουβικό νάτριο και 1,2 g/L NaHCO3. Το μέσο αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:	Τα κύτταρα ARPE-19 διατηρούνται σε υγροποιημένο επωαστήρα σε θερμοκρασία 37°C με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:	Η κυτταρική σειρά μπορεί να αποθηκευτεί σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150°C για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων για μεγάλο χρονικό διάστημα.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:	Ως μέσα κατάψυξης ARPE-19 χρησιμοποιούνται τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Εν συντομία, τα κύτταρα καταψύχονται μέσω μιας μεθόδου αργής κατάψυξης που επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό και προστατεύει τα κύτταρα από το σοκ.
Διαδικασία απόψυξης:	Τα κύτταρα αποψύχονται σε υδατόλουτρο προρυθμισμένο στους 37 °C. Αφού απομείνει μια μικρή μάζα πάγου, τα κύτταρα προστίθενται σε φρέσκο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Με τον τρόπο αυτό απομακρύνονται τα στοιχεία του μέσου κατάψυξης. Στη συνέχεια, το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και τα κύτταρα διανέμονται σε φιάλη για καλλιέργεια.
Επίπεδο βιοασφάλειας:	Τα κύτταρα ARPE-19 χειρίζονται σε εργαστήρια βιοασφάλειας 1.

Κύτταρα ARPE-19 σε μεγέθυνση 10x μετά την υποκαλλιέργεια και ημι-συμπυκνωμένα.

3.πλεονεκτήματα και περιορισμοί των κυττάρων ARPE-19

Τα κύτταρα ARPE-19 χρησιμοποιούνται ευρέως σε μελέτες κυτταρικής βιολογίας του αμφιβληστροειδούς. Όπως και άλλα κύτταρα, συνδέονται επίσης με ορισμένα πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Μερικά από αυτά παρατίθενται στην παρούσα ενότητα:

Πλεονεκτήματα

Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς ARPE-19 περιλαμβάνουν:

Μοντέλο κυττάρων αμφιβληστροειδούς	Τα κύτταρα ARPE-19 μοιάζουν πολύ με τα ανθρώπινα κύτταρα του μελαγχρωματικού επιθηλίου του αμφιβληστροειδούς, γεγονός που τα καθιστά ιδανικά για τη μελέτη ασθενειών του αμφιβληστροειδούς και τη δοκιμή φαρμάκων.
Σταθερός ρυθμός ανάπτυξης	Τα κύτταρα αυτά παρουσιάζουν σταθερή ανάπτυξη και μπορούν να διατηρηθούν για μεγάλα χρονικά διαστήματα, διευκολύνοντας τα μακροχρόνια πειράματα.
Δυνατότητα διαμόλυνσης	Η κυτταρική σειρά ARPE-19 είναι ένας εξαιρετικός ξενιστής διαμόλυνσης, που χρησιμοποιείται ευρέως τόσο σε μελέτες παροδικής όσο και σταθερής έκφρασης.

Περιορισμοί

Ακολουθούν ορισμένοι περιορισμοί που σχετίζονται με την κυτταρική σειρά ARPE-19:

Περιορισμένη διαφοροποίηση

Η διαφοροποίηση της ARPE-19 είναι περιορισμένη σε σύγκριση με τα πρωτογενή κύτταρα του αμφιβληστροειδούς. Αυτό μπορεί ενδεχομένως να επηρεάσει ορισμένες μελέτες που σχετίζονται με τη διαφοροποίηση.

4.εφαρμογές της κυτταρικής σειράς ARPE-19 στην έρευνα

Η κυτταρική σειρά ARPE-19 έχει πολυάριθμες εφαρμογές στην έρευνα του αμφιβληστροειδούς. Εδώ, έχουμε μιλήσει για ορισμένες συγκεκριμένες και σημαντικές ερευνητικές χρήσεις αυτής της κυτταρικής γραμμής του μελαγχρωματικού επιθηλίου του αμφιβληστροειδούς.

Έρευνα ασθενειών του αμφιβληστροειδούς: Τα κύτταρα ARPE-19 προσφέρουν πολύτιμες γνώσεις για την παθογένεια του αμφιβληστροειδούς. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα για να διερευνήσουν τους μηχανισμούς των ασθενειών και τις πιθανές θεραπείες. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 διαπίστωσε ότι το κυκλικό RNA hsa_circ_0041795 αλληλεπιδρά με το miRNA-646 και το VEGFC για να διευκολύνει τη βλάβη που προκαλείται από υψηλή γλυκόζη σε ανθρώπινα κύτταρα ARPE-19 του μελαγχρωματικού επιθηλίου του αμφιβληστροειδούς. Ως εκ τούτου, η μελέτη προτείνει αυτό το κυκλικό RNA ως αποτελεσματικό θεραπευτικό και διαγνωστικό στόχο για την καταπολέμηση της διαβητικής αμφιβληστροειδοπάθειας [2]. Ομοίως, ο Jing Yang και οι συνεργάτες του χρησιμοποίησαν κύτταρα ARPE-19 και παρείχαν πληροφορίες σχετικά με την παθογένεια της διαβητικής αμφιβληστροειδοπάθειας. Μελέτησαν ότι η αναστολή του lncRNA SNHG1 (Small Nucleolar RNA Host Gene 1) μπορεί να καταστείλει τη φλεγμονώδη απόκριση και την επιθηλιακή σε μεσεγχυματική μετάβαση των κυττάρων ARPE-19 που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με υψηλή γλυκόζη [3].
Δοκιμές φαρμάκων: Τα κύτταρα ARPE-19 χρησιμοποιούνται για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας και της ασφάλειας φαρμάκων και ενώσεων, βοηθώντας στην ανάπτυξη θεραπειών ή θεραπειών για τις ασθένειες του αμφιβληστροειδούς. Για παράδειγμα, μια μελέτη που πραγματοποιήθηκε το 2019 διαπίστωσε τις προστατευτικές επιδράσεις των βιοενεργών ουσιών του Syzygium malaccense έναντι του στρες που προκαλείται από υπεροξείδιο του υδρογόνου σε ανθρώπινα κύτταρα του επιθηλίου της χρωστικής του αμφιβληστροειδούς, ARPE-19 [4]. Ακολούθως, μια μελέτη διαπίστωσε τον θεραπευτικό ρόλο του εκχυλίσματος Prunella vulgaris var. L κατά της βλάβης που προκαλείται από μπλε φως σε κύτταρα ARPE-19 και σε μοντέλο ποντικού [5].

650,00 €*

Περιεχόμενο: 1.5 milliliter

Τιμές χωρίς φόρους συν έξοδα αποστολής

cryovial

Αριθμός προϊόντος: 305025

5.κύτταρα ARPE-19: ARPE-19: Ερευνητικές δημοσιεύσεις

Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα ARPE-19 του αμφιβληστροειδικού επιθηλίου.

Αξιολόγηση των αποκρίσεων των microRNA στα κύτταρα ARPE-19 έναντι του οξειδωτικού στρες

Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2018 στο Cutaneous and Ocular Toxicology. Αυτή η μελέτη αξιολόγησε την έκφραση των miRNA σε απόκριση στο οξειδωτικό στρες που προκαλείται σε ανθρώπινα κύτταρα ARPE-19 του αμφιβληστροειδούς χρωστικού επιθηλίου μέσω επεξεργασίας υπεροξειδίου του υδρογόνου.

Το κλιματιζόμενο μέσο ARPE-19 προάγει τη νευρική διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών βλαστικών κυττάρων που προέρχονται από το λίπος

Αυτή η δημοσίευση στο World Journal of Stem Cells (2021) πρότεινε ότι το κλιματιζόμενο μέσο των κυττάρων ARPE-19 περιέχει αυξητικούς παράγοντες που ενθαρρύνουν τη νευρική διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών βλαστικών κυττάρων που προέρχονται από λιπώδεις ιστούς.

Η κερκετίνη αναστέλλει την παραγωγή φλεγμονωδών κυτταροκινών και χημειοκινών που προκαλούνται από την IL-1β σε κύτταρα ARPE-19 μέσω των σηματοδοτικών μονοπατιών MAPK και NF-κΒ

Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο International Journal of Molecular Sciences (2019). Αναφέρει ότι η κερκετίνη προστατεύει την διεγερμένη από την IL-1β απελευθέρωση χημειοκινών σε κύτταρα ARPE-19 αποτρέποντας την ενεργοποίηση των καταρρακτών MAPK και NF-κB για τη βελτίωση της φλεγμονώδους απόκρισης.

Η ρεσβερατρόλη ρυθμίζει τις λειτουργίες των SIRT1 και DNMT και αποκαθιστά τα επίπεδα μεθυλίωσης της LINE-1 σε κύτταρα ARPE-19 υπό οξειδωτικό στρες και φλεγμονή

Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο International Journal of Molecular Sciences (2018). Αυτή η μελέτη αξιολόγησε τις πιθανές επιδράσεις του οξειδωτικού στρες και της φλεγμονής στις λειτουργίες του SIRT1 (Sirtuin 1) και των DNMTs (DNA methyltransferases) καθώς και στη μεθυλίωση του LINE-1 (long interspersed nuclear element-1) σε κύτταρα ARPE-19.

Προστατευτική επίδραση των εκχυλισμάτων λουλουδιών Chrysanthemum boreale έναντι της επαγόμενης από A2E βλάβης του αμφιβληστροειδούς σε κύτταρα ARPE-19

Αυτό το άρθρο στο περιοδικό Antioxidants (2022) διαπίστωσε ότι τα εκχυλίσματα λουλουδιών Chrysanthemum boreale ασκούν προστατευτική δράση έναντι της επαγόμενης από Ν-ρετινυλιδένιο-Ν-ρετινυλαιθανολαμίνη (A2E) βλάβης του αμφιβληστροειδούς σε κύτταρα ARPE-19.

6.πηγές για την κυτταρική σειρά ARPE-19: ARPE ARPE: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Η ARPE-19 είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη κυτταρική σειρά επιθηλιακών κυττάρων του αμφιβληστροειδούς. Οι διαθέσιμοι πόροι που καλύπτουν τα πρωτόκολλα καλλιέργειας και διαμόλυνσης των κυττάρων ARPE-19 παρατίθενται εδώ:

Μεταμόσχευση της ARPE-19: Αυτό το βίντεο είναι ένας βήμα προς βήμα οδηγός για την εκμάθηση του πρωτοκόλλου διαμόλυνσης για την κυτταρική σειρά ARPE-19.

Ακολουθούν ορισμένοι πόροι που περιγράφουν το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων ARPE-19:

ARPE-19: πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων: Αυτός ο σύνδεσμος περιέχει πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια και τη συντήρηση των κυττάρων ARPE-19. Περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με το μέσο ARPE-19, τις συνθήκες καλλιέργειας, τα πρωτόκολλα υποκαλλιέργειας και τον χειρισμό πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.

Αναφορές

Schnichels, S., et al., Retina in a dish: Cell cultures, retinal explants and animal models for common diseases of the retina. Πρόοδος στην έρευνα του αμφιβληστροειδούς και των οφθαλμών, 2021. 81: p. 100880.
Sun, H. και X. Kang, Η hsa_circ_0041795 συμβάλλει στον τραυματισμό των ανθρώπινων μελαγχρωματικών επιθηλιακών κυττάρων του αμφιβληστροειδούς (ARPE 19) που προκαλείται από υψηλή γλυκόζη μέσω της σφουγγάρωσης του miR-646 και της ενεργοποίησης του VEGFC. Gene, 2020. 747: p. 144654.
Yang, J., et al., Silenced SNHG1 Inhibited Epithelial-Mesenchymal Transition and Inflammatory Response of ARPE-19 Cells Induced by High Glucose. J Inflamm Res, 2021. 14: p. 1563-1573.
Arumugam, B., et al., Προστατευτική επίδραση των παραγώγων μυρικετίνης από το Syzygium malaccense κατά του στρες που προκαλείται από υπεροξείδιο του υδρογόνου σε κύτταρα ARPE-19. Molecular vision, 2019. 25: p. 47.
Kim, J., K. Cho και S.-Y. Choung, Protective effect of Prunella vulgaris var. L extract against blue light induced damages in ARPE-19 cells and mouse retina. Free Radical Biology and Medicine, 2020. 152: p. 622-631.