Κύτταρα AGS – Διερεύνηση των κυττάρων AGS του γαστρικού αδενοκαρκινώματος στις μελέτες για τον καρκίνο
Τα κύτταρα AGS αποτελούν μια κυτταρική σειρά ανθρώπινου γαστρικού αδενοκαρκινώματος που χρησιμοποιείται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα. Συγκεκριμένα, χρησιμοποιείται για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του στομάχου, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης, της εξέλιξης και της πρόοδος του όγκου, καθώς και των θεραπευτικών παρεμβάσεων. Επιπλέον, χρησιμοποιείται για τη διερεύνηση των αλληλεπιδράσεων μεταξύ ξενιστή και παθογόνου.
- Μέσο ανάπτυξης
- Για την καλλιέργεια των κυττάρων AGS χρησιμοποιείται μέσο DMEM που περιέχει 10% FBS, 4 mM L-γλουταμίνη, 4,5 g/L γλυκόζη, 1,5 g/L NaHCO3 και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων AGS κυμαίνεται μεταξύ 24 και 48 ωρών.
- Τύπος ανάπτυξης
- Τα κύτταρα AGS είναι προσκολλητικά. Αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-2
- Διαθέσιμο από
- Cytion — Παραγγελία AGS
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων AGS
- Πληροφορίες καλλιέργειας σχετικά με τη σειρά κυττάρων AGS
- Κυτταρική σειρά AGS: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων AGS
- 5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τη σειρά κυττάρων AGS
- Πόροι για τη σειρά κυττάρων AGS: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων AGS
Πριν ξεκινήσετε να εργάζεστε με μια κυτταρική σειρά, είναι απαραίτητο να γνωρίζετε την προέλευσή της και τα γενικά χαρακτηριστικά της. Σε αυτή την ενότητα θα καλύψουμε τα εξής: Τι είναι τα κύτταρα AGS; Ποια είναι η προέλευση των κυττάρων AGS; Ποια είναι η μορφολογία της καρκινικής κυτταρικής σειράς AGS;
- Η κυτταρική σειρά AGS προήλθε από ιστό του στομάχου μιας 54χρονης γυναίκας καυκάσιας καταγωγής με αδενοκαρκίνωμα του στομάχου. Απομονώθηκε το 1979 [1].
- Τα κύτταρα AGS έχουν επιθηλιακή μορφολογία.
- Τα γαστρικά επιθηλιακά κύτταρα AGS είναι υπερδιπλοειδή. Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων για τα κύτταρα AGS είναι 49, ο οποίος εμφανίζεται σε σχεδόν το 60% των κυττάρων. Πολυπλοειδία εμφανίζεται επίσης σε περίπου 3,6% των κυττάρων.
Πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς AGS
Για τον σωστό χειρισμό και τη διαχείριση μιας κυτταρικής σειράς, πρέπει να γνωρίζετε τις βασικές έννοιες της καλλιέργειας. Συγκεκριμένα, θα πρέπει να μάθετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων AGS; Ποιο είναι το μέσο καλλιέργειας των κυττάρων AGS; Πώς πραγματοποιείται η υποκαλλιέργεια των κυττάρων AGS; Ποια μέσα κατάψυξης χρησιμοποιούνται για τα γαστρικά επιθηλιακά κύτταρα AGS;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων AGS
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων AGS κυμαίνεται μεταξύ 24 και 48 ωρών.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:
Τα κύτταρα AGS είναι προσκολλητικά. Αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες.
Πυκνότητα σποράς:
Τα κύτταρα AGS σπέρνονται σε πυκνότητα 1 x 104 κύτταρα/cm2. Σε αυτή την πυκνότητα, τα κύτταρα σχηματίζουν ένα συνεχές μονοστρωματικό στρώμα σε 3 έως 5 ημέρες. Μετά την απομάκρυνση του παλαιού μέσου καλλιέργειας, τα κύτταρα ξεπλένονται με 1 x PBS και επωάζονται με διάλυμα αποσύνδεσης Accutase. Τα αποκολλημένα κύτταρα επαναδιαλύθηκαν σε μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρήθηκαν. Το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύθηκε και, μετά την καταμέτρηση των κυττάρων AGS, αυτά μεταφέρθηκαν σε νέα φιάλη για ανάπτυξη.
Μέσο ανάπτυξης:
Για την καλλιέργεια των κυττάρων AGS χρησιμοποιείται μέσο DMEM που περιέχει 10% FBS, 4 mM L-γλουταμίνη, 4,5 g/L γλυκόζη, 1,5 g/L NaHCO3 και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Τα κύτταρα AGS διατηρούνται σε υγραντικό επωαστήρα (σε θερμοκρασία 37 °C) με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα AGS διατηρούνται σε ηλεκτρικούς καταψύκτες σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C ή στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Για την κατάψυξη των κυττάρων AGS χρησιμοποιείται μέσο CM-1 ή CM-ACF. Η κατάψυξη των κυττάρων πραγματοποιείται μέσω μιας διαδικασίας αργής κατάψυξης που επιτρέπει πτώση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1°C ανά λεπτό και προστατεύει τη βιωσιμότητα των κυττάρων.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κατεψυγμένα γαστρικά επιθηλιακά κύτταρα αναδεύονται γρήγορα σε υδατόλουτρο στους 37°C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Τα αποψυγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται σε φρέσκο μέσο καλλιέργειας και μεταφέρονται σε νέες φιάλες για ανάπτυξη. Μετά από επώαση 24 ωρών, το μέσο ανανεώνεται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Αντίθετα, τα αποψυγμένα κύτταρα φυγοκεντρίζονται και τα στοιχεία του μέσου κατάψυξης απομακρύνονται. Στη συνέχεια, τα συλλεγμένα κύτταρα ανασυστάνονται εκ νέου και μεταφέρονται στη φιάλη που περιέχει το μέσο καλλιέργειας.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για την καλλιέργεια κυττάρων AGS είναι απαραίτητες εργαστηριακές συνθήκες βιοασφάλειας επιπέδου 2.
Κυτταρική σειρά AGS: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
Αυτή η ενότητα του άρθρου θα αναδείξει μερικά από τα βασικά πλεονεκτήματα και τους περιορισμούς που σχετίζονται με τα κύτταρα AGS.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα των γαστρικών επιθηλιακών κυττάρων AGS είναι:
Εύκολη καλλιέργεια
Η κυτταρική σειρά AGS του γαστρικού καρκινώματος διατηρείται εύκολα σε εργαστήρια κυτταρικής καλλιέργειας. Δεν έχει περίπλοκες και απαιτητικές απαιτήσεις κυτταρικής καλλιέργειας. Επιπλέον, παρουσιάζει καλά χαρακτηριστικά ανάπτυξης, καθιστώντας την ιδανική επιλογή για τη μελέτη της βιολογίας του γαστρικού καρκίνου.
Σχέση με τον καρκίνο του στομάχου
Τα κύτταρα AGS προέρχονται από ανθρώπινο γαστρικό αδενοκαρκίνωμα, γεγονός που τα καθιστά ευρέως χρησιμοποιούμενα για τη μελέτη της βιολογίας του γαστρικού καρκίνου και των θεραπευτικών παρεμβάσεων.
Περιορισμοί
Ο περιορισμός που σχετίζεται με τη κυτταρική σειρά AGS είναι:
In vitro κυτταρικό μοντέλο
Τα κύτταρα AGS καλλιεργούνται σε εργαστήρια βιοϊατρικής έρευνας υπό τεχνητές συνθήκες. Ως εκ τούτου, ενδέχεται να μην αναπαράγουν πλήρως το μικροπεριβάλλον του καρκίνου του στομάχου in vivo και άλλες κυτταρικές και μοριακές αλληλεπιδράσεις.
Εφαρμογές των κυττάρων AGS
Τα κύτταρα AGS χρησιμοποιούνται ειδικά για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του στομάχου. Έχουν πολλές άλλες πολλά υποσχόμενες εφαρμογές στον τομέα της βιοϊατρικής. Μερικές από τις ενδιαφέρουσες ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων AGS είναι:
- Μελέτη του καρκίνου του στομάχου: Τα κύτταρα AGS αποτελούν ένα εξαιρετικό ερευνητικό εργαλείο για τη διερεύνηση των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που υποκρύπτονται στην ανάπτυξη, τη μετάσταση και την εισβολή του καρκίνου του στομάχου. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν επίσης γαστρικά επιθηλιακά κύτταρα AGS για τη μελέτη διαφορετικών κυτταρικών διεργασιών, γενετικών μεταλλάξεων και οδών σηματοδότησης στην ανάπτυξη του καρκίνου του στομάχου. Μια μελέτη του Oncology Reports (2019) διαπίστωσε ότι το microRNA-183-5p.1 ενθαρρύνει τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την εισβολή των καρκινικών κυττάρων αναστέλλοντας την κασκάδα σηματοδότησης Bcl 2/P53. Επιπλέον, ρυθμίζει προς τα κάτω το γονίδιο TPM1 για να ασκήσει αυτές τις επιδράσεις. Έτσι, τόσο το microRNA όσο και το TPM1 προτείνονται ως αποτελεσματικοί μοριακοί στόχοι για την ανάπτυξη στοχευμένων θεραπειών κατά του καρκίνου του στομάχου [2].
- Διαλογή φαρμάκων: Τα κύτταρα AGS έχουν χρησιμοποιηθεί ευρέως για τη διαλογή νέων και αποτελεσματικών φαρμάκων κατά του καρκίνου του στομάχου. Οι ερευνητές αξιολογούν την κυτταροτοξικότητα και την αποτελεσματικότητα πιθανών φαρμάκων χρησιμοποιώντας τη κυτταρική σειρά AGS. Έχουν επίσης διεξαχθεί μελέτες για τον εντοπισμό νέων μοριακών στόχων και την ανάπτυξη καινοτόμων στοχευμένων θεραπειών για την καταπολέμηση των καρκινωμάτων του στομάχου. Έρευνα που διεξήχθη το 2021 χρησιμοποίησε κύτταρα γαστρικού καρκίνου AGS και μελέτησε τη θεραπευτική δράση του φαρμάκου πακλιταξέλη. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι η πακλιταξέλη προκαλεί μιτωτική καταστροφή, έναν αναπόσπαστο μηχανισμό απόπτωσης ή κυτταρικού θανάτου στα κύτταρα AGS. Επιπλέον, προώθησε επίσης την αυτοφαγία στα κύτταρα του γαστρικού καρκίνου [3].
- Αλληλεπιδράσεις ξενιστή-παθογόνου: Η καρκινική κυτταρική σειρά AGS μελετά επίσης τις αλληλεπιδράσεις ξενιστή-παθογόνου. Αυτό βοηθά τους ερευνητές να κατανοήσουν τους κυτταρικούς μηχανισμούς και τις αντιδράσεις που εμπλέκονται σε μια λοίμωξη. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 παρατήρησε ότι μικρά μη κωδικοποιημένα RNA που υπάρχουν στα κυστίδια της εξωτερικής μεμβράνης του Helicobacter pylori μειώνουν την έκκριση ιντερλευκίνης 8 στα ανθρώπινα κύτταρα AGS [4].
5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τη σειρά κυττάρων AGS
Αυτό το τμήμα του άρθρου θα καλύψει μερικές ενδιαφέρουσες και πιο συχνά αναφερόμενες ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα AGS.
Αυτή η μελέτη στο Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) πρότεινε ότι η σαλιδροσίδη, μια φυσική ένωση, προκαλεί προστατευτική αυτοφαγία και κυτταρικό θάνατο στα επιθηλιακά κύτταρα AGS του γαστρικού καρκίνου μέσω της ρύθμισης της οδού σηματοδότησης PI3K/AKT/mTOR.
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Διερεύνησε τις συνεργιστικές αντικαρκινικές επιδράσεις του πολυσακχαρίτη του Astragalus και του φαρμάκου Apatinib στα κύτταρα AGS. Τα ευρήματα της μελέτης αποκάλυψαν ότι το Astragalus ενισχύει τις αντικαρκινικές επιδράσεις του Apatinib μέσω της καταστολής της σηματοδότησης AKT.
Αυτή η έρευνα στο Journal of Ethnopharmacology (2018) πρότεινε ότι η κουρκουζεδοαλίδη, μια φυσική ένωση από το φυτό Curcuma zedoaria Roscoe, συμβάλλει στο κυτταροτοξικό της δυναμικό έναντι των κυττάρων AGS.
Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό Gene (2018) πρότεινε ότι η ρύθμιση προς τα πάνω του FOXA1 καταστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του γαστρικού αδενοκαρκινώματος AGS, καθώς και την επιθηλιακή προς μεσεγχυματική μετάβαση (EMT) και την εισβολή.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο International Journal of Medical Microbiology το 2020. Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιήθηκαν κύτταρα AGS για τη μελέτη των αλληλεπιδράσεων ξενιστή-παθογόνου. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι το Helicobacter pylori περιέχει κάποιο μη κωδικοποιητικό RNA στα κυστίδια της εξωτερικής μεμβράνης του, το οποίο επηρεάζει τα επίπεδα της IL-8 στα κύτταρα AGS.
Πόροι για τη σειρά κυττάρων AGS: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικοί πόροι που αφορούν τα κύτταρα AGS.
- Πρωτόκολλο μεταφοράς γονιδίων σε κύτταρα AGS: Αυτό το βίντεο είναι ένας αναλυτικός οδηγός για την εκμάθηση του πρωτοκόλλου μεταφοράς γονιδίων σε γαστρικά επιθηλιακά κύτταρα AGS.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων AGS.
- Πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων AGS: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τα μέσα καλλιέργειας κυττάρων AGS και τα πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων. Εν συντομία, παρέχει ένα πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια γαστρικών επιθηλιακών κυττάρων AGS και τον χειρισμό πολλαπλασιαζόμενων και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών AGS.
- Υποκαλλιέργεια κυττάρων AGS: Αυτός ο ιστότοπος εξηγεί λεπτομερώς τη διαδικασία υποκαλλιέργειας για τα κύτταρα AGS.
Αναφορές
- Phuc, B.H., et al., Συγκριτική γονιδιωματική δύο βιετναμέζικων στελεχών Helicobacter pylori, του CHC155 από ασθενή με καρκίνο του στομάχου εκτός της καρδίας και του VN1291 από ασθενή με έλκος του δωδεκαδακτύλου. Scientific Reports, 2023. 13(1): σ. 8869.
- Lin, J., et al., Το miRNA‑183‑5p. 1 προάγει τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων AGS του καρκίνου του στομάχου στοχεύοντας το TPM1. Διόρθωση στο /10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): σ. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., Η επίδραση της πακλιταξέλης στην απόπτωση, την αυτοφαγία και τη μιτωτική καταστροφή σε κύτταρα AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): σ. 23490.
- Zhang, H., et al., Τα sncRNA που συσκευάζονται από κυστίδια εξωτερικής μεμβράνης του Helicobacter pylori εξασθενίζουν την έκκριση IL-8 σε ανθρώπινα κύτταρα. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): σ. 151356.