Κυτταρική γραμμή A375 - Ένας οδηγός για την έρευνα του μελανώματος

Το A375 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική γραμμή μελανώματος που χρησιμοποιείται ευρέως στην τοξικολογική και ανοσο-ογκολογική έρευνα. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτή την κυτταρική σειρά για να μελετήσουν τη βιολογία του καρκίνου και τα μονοπάτια σηματοδότησης, να δοκιμάσουν ή να ελέγξουν πιθανούς αντικαρκινικούς παράγοντες και να αναπτύξουν νέα και αποτελεσματικά θεραπευτικά μέσα.

Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων A375

Η γνώση της προέλευσης και των γενικών χαρακτηριστικών μιας κυτταρικής σειράς μπορεί να σας βοηθήσει να σχεδιάσετε τη χρήση της στην έρευνα. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει την προέλευση και τα χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς A375. Για παράδειγμα, τι είναι η κυτταρική σειρά A375 Ποια είναι τα χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς A375 Από πού προέρχονται τα κύτταρα A375 Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων μελανώματος A375 Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων A375

Η κυτταρική σειρά A375 για τον καρκίνο του δέρματος προήλθε από την καλλιέργεια εκβλάστησης ενός συμπαγούς όγκου μιας 54χρονης γυναίκας με κακοήθες μελάνωμα [1].
Τα κύτταρα A375 έχουν μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο.
Το μέγεθος των κυττάρων A375 είναι σχετικά μικρότερο σε σύγκριση με άλλες κυτταρικές σειρές. Διαθέτουν περίπου διάμετρο 12 μm.
Τα κύτταρα μελανώματος A375 είναι υποτριπλοειδή. Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων για αυτή την κυτταρική σειρά είναι 62. Συνήθως, κάθε κύτταρο διαθέτει εννέα χρωμοσώματα-δείκτες και ένα αντίγραφο των φυσιολογικών χρωμοσωμάτων Ν2, Ν6 και Ν22.

Ένας γιατρός εξετάζει τις αναπτύξεις στο δέρμα ενός ενήλικα για καρκίνο του δέρματος.

Κύτταρα A375: Α375: Πληροφορίες κυτταρικής καλλιέργειας

Οι καλλιέργειες κυττάρων A375 διατηρούνται εύκολα. Δεν έχουν ιδιαίτερες απαιτήσεις καλλιέργειας κυττάρων. Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε τις απαραίτητες πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων. Όπως για παράδειγμα ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων A375. Ποιο είναι το μέσο της κυτταρικής σειράς A375 Ποια είναι η πυκνότητα σποράς της A375 Είναι τα κύτταρα μελανώματος A375 προσκολλημένα

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων A375

Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού:	Ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού A375 είναι 20 ώρες.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:	Το A375 είναι μια προσκολλημένη ανθρώπινη κυτταρική σειρά μελανώματος.
Πυκνότητα σποράς:	1 x¹⁰⁴^{κύτταρα/cm2}είναι η ιδανική πυκνότητα για καλλιέργειες κυττάρων A375. Τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1 x ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών αλάτων (PBS) και επωάζονται με διάλυμα διέλευσης (Accutase). Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται με μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Τα κύτταρα που συλλέχθηκαν ανασυγκροτήθηκαν σε μέσο καλλιέργειας και διανεμήθηκαν σε νέες φιάλες για ανάπτυξη.
Μέσο ανάπτυξης:	Το DMEM συνιστάται ως ιδανικό μέσο καλλιέργειας A375 όταν συμπληρώνεται με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS), 4,5 g/L γλυκόζη, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-γλουταμίνη και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο. Το μέσο A375 πρέπει να ανανεώνεται 2-3 ημέρες την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:	Τα κύτταρα μελανώματος A375 αναπτύσσονται σε υγροποιημένο επωαστήρα (37°C) με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:	Τα κατεψυγμένα κύτταρα A375 πρέπει να διατηρούνται κάτω από τους -150°C σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε ηλεκτρικό καταψύκτη.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:	Για την κατάψυξη της κυτταρικής σειράς A375 χρησιμοποιούνται τα μέσα CM-1 ή CM-ACF. Για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων έχει επιλεγεί μια αργή διαδικασία κατάψυξης που επιτρέπει σταδιακή μείωση της θερμοκρασίας κατά 1°C.
Διαδικασία απόψυξης:	Το κατεψυγμένο φιαλίδιο κυττάρων μελανώματος A375 αναδεύεται ταχέως στο υδατόλουτρο για 40 έως 60 δευτερόλεπτα έως ότου απομείνει μόνο μια μικρή μάζα πάγου. Τα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των στοιχείων του μέσου κατάψυξης. Το λαμβανόμενο κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και πάλι και χύνεται σε νέες φιάλες.
Επίπεδο βιοασφάλειας:	Οι καλλιέργειες A375 χειρίζονται και διατηρούνται σε εργαστηριακές συνθήκες επιπέδου βιοασφάλειας 1.

Συρρέον στρώμα προσκολλημένων κυττάρων A375 σε μεγέθυνση 20x.

Πλεονεκτήματα και περιορισμοί της κυτταρικής σειράς A375

Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, η κυτταρική σειρά μελανώματος A375 συνδέεται με έναν μοναδικό συνδυασμό πλεονεκτημάτων και περιορισμών, καθιστώντας την πολύτιμο εργαλείο για την έρευνα του καρκίνου του μελανώματος. Στην παρούσα ενότητα παρατίθενται μόνο μερικά σημαντικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής γραμμής A375.

Πλεονεκτήματα

Τα σημαντικά πλεονεκτήματα των κυττάρων A375 αναφέρονται παρακάτω:

Μοντέλο όγκου μελανώματος: Η κυτταρική σειρά A375 προέρχεται από κακοήθη όγκο μελανώματος, αποτελώντας έτσι ένα ανεκτίμητο μοντέλο όγκου για τη διερεύνηση της βιολογίας του μελανώματος και των θεραπευτικών παρεμβάσεων. Τα κύτταρα αυτά παρουσιάζουν ιδιότητες που μοιάζουν με το μελάνωμα, όπως υψηλό ρυθμό πολλαπλασιασμού και διεισδυτικότητα.
Ογκογονικότητα: Τα κύτταρα A375 είναι εξαιρετικά καρκινικά, δηλαδή μπορούν να σχηματίσουν όγκους. Αναφέρεται ότι τα κύτταρα A375 παράγουν επιθετικά αμελανωτικά μελανώματα σε NIH Swiss ποντίκια που υποβάλλονται σε θεραπεία με αντιθυμοκυτταρικό ορό (ανοσοκατασταλτικός παράγοντας).
Καλά χαρακτηρισμένα: Το A375 είναι μια γενετικά καλά χαρακτηρισμένη κυτταρική σειρά. Διαθέτει συγκεκριμένες γενετικές μεταλλάξεις όπως το μελάνωμα. Οι μεταλλάξεις του A375 περιλαμβάνουν την αλλοίωση του γονιδίου BRAF του A375, καθιστώντας το ευαίσθητο στους ειδικούς για τον BRAF αναστολείς. Αυτό το γενετικό προφίλ καθιστά έτσι τα κύτταρα A375 ένα εξαιρετικό εργαλείο έρευνας του καρκίνου για τη μελέτη των υποκείμενων μοριακών μονοπατιών και των στοχευμένων θεραπειών.

Περιορισμοί

Οι περιορισμοί που σχετίζονται με τα κύτταρα A375 είναι:

Περιορισμοί in vitro: Το A375 είναι ένα in vitro μοντέλο όγκου. Αν και μιμείται τα χαρακτηριστικά του μελανώματος, δεν μπορεί να αντιπροσωπεύσει πλήρως την πολυπλοκότητα των όγκων μελανώματος. Ως εκ τούτου, απαιτείται προσοχή όταν τα ευρήματα in vitro γενικεύονται σε κλινικές μελέτες.

Αγοράστε τα κύτταρα A375 τώρα

430,00 €*

Περιεχόμενο: 1.5 milliliter

Τιμές χωρίς φόρους συν έξοδα αποστολής

cryovial

Αριθμός προϊόντος: 300110

Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς A375

Η κυτταρική σειρά A375 έχει εκτεταμένες ερευνητικές εφαρμογές στην έρευνα για τον καρκίνο. Ακολουθούν ορισμένοι από τους συνήθεις τομείς στους οποίους χρησιμοποιούνται τα κύτταρα A375.

Έρευνα για τον καρκίνο: Τα κύτταρα A375 έχουν εκτεταμένες εφαρμογές στην έρευνα για το μελάνωμα. Οι ερευνητές χρησιμοποίησαν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν τη βιολογία του καρκίνου του δέρματος, τις διαδικασίες και τους υποκείμενους μηχανισμούς κυτταρικής σηματοδότησης, συμπεριλαμβανομένου του κυτταρικού πολλαπλασιασμού, της μετανάστευσης και της εισβολής. Αυτό μπορεί επίσης να βοηθήσει τους ερευνητές να εντοπίσουν νέους μοριακούς θεραπευτικούς στόχους. Μια μελέτη που διεξήχθη από τον Lin Zhu και τους συνεργάτες του το 2019 χρησιμοποίησε εξαιρετικά επιθετικά κύτταρα μελανώματος A375 και διαπίστωσε το ρόλο του microRNA-3662 στην ανάπτυξη και εισβολή των κυττάρων μελανώματος A375. Τα ευρήματα της μελέτης αναφέρουν ότι το microRNA-3662 στοχεύει το γονίδιο ZEB1 και ρυθμίζει την ανάπτυξη των κυττάρων μελανώματος in vitro και in vivo στο μοντέλο όγκου A375 [2]. Ομοίως, έρευνα που διεξήχθη το 2018 διαπίστωσε ότι τα μονοπάτια PI3K/AKT και MAPK/ERK εμπλέκονται στον πολλαπλασιασμό και τη μετάσταση της κυτταρικής σειράς A375 [3].
Ανακάλυψη και δοκιμή φαρμάκων: Η κυτταρική σειρά A375 είναι ένα χρήσιμο in vitro μοντέλο όγκου για τη δοκιμή και τον έλεγχο δυνητικών αντικαρκινικών παραγόντων. Οι ερευνητές αξιολογούν την τοξικότητα και την αποτελεσματικότητα νέων χημειοθεραπευτικών φαρμάκων, ενώσεων και άλλων θεραπειών χρησιμοποιώντας αυτά τα κύτταρα μελανώματος A375. Για παράδειγμα, μια μελέτη διερεύνησε τις αντικαρκινικές ιδιότητες μικρο- και νανοσωματιδίων που προέρχονται από γκρέιπφρουτ σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα μελανώματος A375. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι τα μικρο- και νανοσωματίδια επάγουν τη διακοπή του κυτταρικού κύκλου και την απόπτωση και παρεμποδίζουν την έκφραση γονιδίων στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την εισβολή [4].

Κύτταρα A375: Α375: Δημοσιεύσεις

Εδώ αναφέρονται ορισμένες σημαντικές ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα A375.

Η βιταμίνη D και τα χαμηλής θερμιδικής αξίας ανάλογα της τροποποιούν τις αντικαρκινικές ιδιότητες της σισπλατίνης και της δακαρβαζίνης στην ανθρώπινη κυτταρική σειρά μελανώματος A375

Αυτή η μελέτη δημοσιεύθηκε στο Journal of Oncology το 2019. Η μελέτη πρότεινε ότι η συγχορήγηση βιταμίνης D και αναλόγων βελτιώνει την αντικαρκινική δράση της σισπλατίνης και της δακαρβαζίνης σε κύτταρα μελανώματος A375.

In vitro αξιολόγηση των αντιμελανωματικών επιδράσεων (κυτταρική σειρά A375) του πηκτώματος και των εκχυλισμάτων ολόκληρων φύλλων από επιλεγμένα είδη αλόης

Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε στο Journal of Herbal Medicine το 2022. Αυτή η μελέτη διερεύνησε τις αντιμελανωματικές επιδράσεις του τζελ αλόης βέρα σε κύτταρα μελανώματος A375.

Το μέλος 2 της οικογένειας φερμιτίνης προάγει την εξέλιξη του μελανώματος ενισχύοντας τη σύνδεση του p-α-Pix με το Rac1 για την ενεργοποίηση του μονοπατιού MAPK

Αυτή η μελέτη στο Oncogene (2021) πρότεινε ότι το μέλος 2 της οικογένειας φερμιτίνης (FERMT2 ή kindlin-2) ενθαρρύνει την εξέλιξη του μελανώματος μέσω της ενεργοποίησης της MAPK μέσω της σύνδεσης με το p-α-Pix και το Rac1.

Η FARP1 διευκολύνει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό μέσω της διαμόρφωσης της σηματοδοτικής οδού MAPK στο δερματικό μελάνωμα

Αυτή η μελέτη στο The American Journal of Dermatopathology (2019) πρότεινε ότι η FARP1 μπορεί να διευκολύνει την ανάπτυξη και την εξέλιξη του δερματικού μελανώματος. Συνεπώς, μπορεί να αποτελέσει χρήσιμο θεραπευτικό στόχο.

Κυτταροτοξικό και αποπτωτικό δυναμικό των εκχυλισμάτων Phyllodium elegans σε ανθρώπινες καρκινικές κυτταρικές σειρές

Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο Bioengineered (2019). Αυτή η μελέτη διερεύνησε την κυτταροτοξική και αποπτωτική δράση ενός φυτικού εκχυλίσματος Phyllodium elegans σε ανθρώπινες καρκινικές κυτταρικές σειρές, συμπεριλαμβανομένου του A375.

Πηγές για την κυτταρική σειρά A375: Α375: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που χαρακτηρίζουν τα κύτταρα A375.

Διαμόλυνση κυττάρων A375: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο θα σας βοηθήσει να μάθετε τη διαμόλυνση κυττάρων A375 βήμα προς βήμα.
Καλλιέργεια κυττάρων: Αυτό το βίντεο έχει πολύ χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια κυτταρικών σειρών.

Τα πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων για τα κύτταρα A375 παρατίθενται εδώ.

Κυτταρική σειρά A375: Αυτός ο σύνδεσμος περιέχει χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια και τη συντήρηση της κυτταρικής σειράς A375, συμπεριλαμβανομένων των μέσων A375 και του χειρισμού κατεψυγμένων και πολλαπλασιαζόμενων καλλιεργειών A375.

Συχνές ερωτήσεις (FAQ) για τα κύτταρα A375

Αναφορές

Avram, S., et al., Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 στοχεύει το ZEB1 και μετριάζει την εισβολή της εξαιρετικά επιθετικής κυτταρικής σειράς μελανώματος A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό και τη μετάσταση των κυττάρων μελανώματος A375 μέσω της καταστολής των μονοπατιών PI3K/Akt και MAPK/ERK. Επιστήμες της ζωής, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Μικρο- και νανοσωματίδια προερχόμενα από γκρέιπφρουτ παρουσιάζουν διακριτά προφίλ μεταβολισμού και αντικαρκινικές δράσεις στην ανθρώπινη κυτταρική σειρά μελανώματος A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.