Κύτταρα BEAS-2B - Κύτταρα BEAS-2B στην έρευνα για τις αναπνευστικές παθήσεις: Μπάσκιες: Περιεκτικός οδηγός
Το BEAS-2B είναι μια αθάνατη και μη καρκινική ανθρώπινη επιθηλιακή σειρά πνευμονικών κυττάρων. Αποτελεί ένα εκτενώς χρησιμοποιούμενο in vitro μοντέλο για τη μελέτη της απόκρισης των πνευμονικών κυττάρων σε διάφορα καρκινογόνα και τοξικά. Επιπλέον, αποτελεί πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο για τη μελέτη διαφόρων αναπνευστικών λοιμώξεων και ασθενειών, όπως το COVID-19 και τα καρκινώματα του πνεύμονα.
Σε αυτό το άρθρο, θα συζητήσουμε σχεδόν όλες τις πτυχές της πνευμονικής κυτταρικής σειράς BEAS-2B, συμπεριλαμβανομένης της προέλευσής της, των πληροφοριών κυτταρικής καλλιέργειας, των πλεονεκτημάτων, των μειονεκτημάτων και των εφαρμογών στην έρευνα. Ειδικότερα, θα εξετάσουμε:
- Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων BEAS-2B
- Κυτταρική σειρά BEAS-2B: Πληροφορίες καλλιέργειας
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων BEAS-2B
- Εφαρμογές της κυτταρικής σειράς BEAS-2B στην έρευνα
- Κύτταρα BEAS-2B: BEBASB: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
- Πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων
1. Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων BEAS-2B
Το πρώτο πράγμα που αναζητάτε σε μια κυτταρική σειρά είναι η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά της. Στο παρόν θα μάθετε τα βασικά χαρακτηριστικά και την προέλευση των ανθρώπινων βρογχικών επιθηλιακών κυττάρων BEAS-2B. Θα μελετήσετε: Τι είναι η κυτταρική σειρά πνευμονικών κυττάρων BEAS-2B Τι είδους κύτταρα είναι η Beas 2B Ποια είναι η προέλευση των κυττάρων BEAS-2B
- Η BEAS-2B, η κυτταρική σειρά βρογχικού επιθηλίου, αναπτύχθηκε από μη καρκινικό ανθρώπινο πνευμονικό ιστό το 1988 από την ομάδα του Curtis C. Harris [1].
- Τα κύτταρα BEAS-2B διαθέτουν μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο.
HBEpC Vs BEAS-2B
Τα HBEpC είναι ανθρώπινα πρωτογενή βρογχικά επιθηλιακά κύτταρα. Παρόμοια με τα BEAS-2B, είναι φυσιολογικά ανθρώπινα βρογχικά επιθηλιακά κύτταρα. Ωστόσο, έχουν περιορισμένη διάρκεια ζωής σε σύγκριση με τα αθάνατα BEAS-2B. Και οι δύο κυτταρικές σειρές μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη μελέτη της πνευμονικής βιολογίας, της τοξικολογίας και της μοντελοποίησης ασθενειών.
2.κυτταρική σειρά BEAS-2B: Πληροφορίες για την καλλιέργεια
Οι πληροφορίες καλλιέργειας από μια κυτταρική γραμμή μπορούν να διευκολύνουν την εργασία σας με αυτήν. Σε αυτή την ενότητα του άρθρου, θα μάθετε όλα τα βασικά στοιχεία για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς πνευμονικών κυττάρων BEAS-2B. Ειδικότερα, θα γνωρίζουμε: Τι είναι η κυτταρική κυτταρική σειρά της κυτταρικής σειράς της κυτταρικής σειράς; Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της BEAS-2B Τι είναι το μέσο BEAS-2B Είναι η κυτταρική σειρά BEAS-2B προσκολλημένη Πώς καλλιεργείτε τα κύτταρα BEAS-2B
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων BEAS-2B
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού BEAS-2B είναι περίπου 26 ώρες. |
|
Προσκολλημένη ή σε εναιώρημα: |
Η BEAS-2B είναι μια επιθηλιοειδής προσκολλημένη κυτταρική σειρά. |
|
Κυτταρική πυκνότητα: |
Η κυτταρική πυκνότητα που συνιστάται για την κυτταρική σειρά BEAS-2B είναι 1 έως 2 ×104 κύτταρα/cm2. Τα προσκολλημένα κύτταρα BEAS-2B ξεπλένονται με ρυθμιστικό φυσιολογικό ορό φωσφορικών αλάτων και επωάζονται με Accutase σε θερμοκρασία περιβάλλοντος για λίγα λεπτά. Μετά τη διάσπαση των κυττάρων, προστίθεται νέο μέσο και τα κύτταρα συλλέγονται με φυγοκέντρηση. Τα κύτταρα που συλλέγονται ανασυσσωματώνονται προσεκτικά και χύνεται στη νέα φιάλη για ανάπτυξη. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
Για την καλλιέργεια της πνευμονικής κυτταρικής σειράς BEAS-2B χρησιμοποιείται μέσο BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) που περιέχει 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται κάθε 2 έως 3 ημέρες. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Η καλλιέργεια BEAS-2B διατηρείται στους 37°C σε υγροποιημένο επωαστήρα με συνεχή παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κατεψυγμένα φιαλίδια κυττάρων BEAS-2B μπορούν να αποθηκευτούν στην αέρια φάση υγρού αζώτου ή σε ηλεκτρικό καταψύκτη σε θερμοκρασία κάτω των -150°C. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
Για την κατάψυξη της πνευμονικής κυτταρικής σειράς BEAS-2B χρησιμοποιούνται τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Τα κύτταρα καταψύχονται επιτρέποντας μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1°C ανά λεπτό για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων. Αυτός ο τύπος μεθόδου ονομάζεται αργή κατάψυξη. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Οι κατεψυγμένες ή κρυοσυντηρημένες καλλιέργειες BEAS-2B αποψύχονται σε υδατόλουτρο 37°C που περιέχει αντιμικροβιακό παράγοντα για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται με μέσο και μπορούν να καλλιεργηθούν απευθείας σε νέες φιάλες ή μπορούν να φυγοκεντρηθούν για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Στη συνέχεια, τα συλλεχθέντα κύτταρα επαναιωρούνται και καλλιεργούνται. Στην πρώτη περίπτωση, το μέσο κατάψυξης απομακρύνεται μετά από 24 ώρες. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Για το χειρισμό των καλλιεργειών BEAS-2B απαιτούνται εργαστήρια επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
3.πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα των κυττάρων BEAS-2B
Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, τα κύτταρα BEAS-2B συνδέονται επίσης με ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Ορισμένα από αυτά αναλύονται παρακάτω.
Πλεονεκτήματα
Τα πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς BEAS-2B περιλαμβάνουν:
|
Αθάνατη κυτταρική γραμμή |
Η ανθρώπινη βρογχική επιθηλιακή κυτταρική σειρά BEAS-2B έχει αθανατιστεί. Ως εκ τούτου, συνεχίζει να αναπτύσσεται χωρίς να εισέρχεται σε γήρανση. Αυτό το χαρακτηριστικό των κυττάρων BEAS-2B εξαλείφει την ανάγκη επαναλαμβανόμενης εξαγωγής πρωτογενών ανθρώπινων επιθηλιακών κυττάρων του πνεύμονα με μικρότερη διάρκεια ζωής. |
|
Εύκολη καλλιέργεια |
Οι καλλιέργειες BEAS-2B είναι εύκολα συντηρήσιμες. Τα κύτταρα αναπτύσσονται και πολλαπλασιάζονται αβίαστα σε τυπικές συνθήκες καλλιέργειας. Δεν υπάρχουν δύσκολες ή περίπλοκες απαιτήσεις καλλιέργειας κυττάρων. |
|
Ανθρώπινη προέλευση |
Η κυτταρική σειρά BEAS-2B έχει ανθρώπινη προέλευση και συνάφεια. Συνεπώς, αποτελεί ιδανικό in vitro μοντέλο για τη μελέτη των αποκρίσεων, της συμπεριφοράς και των διεργασιών των ανθρώπινων επιθηλιακών κυττάρων των αεραγωγών. |
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με την πνευμονική κυτταρική σειρά BEAS-2B είναι τα εξής:
|
Μετασχηματισμένα ανθρώπινα επιθηλιακά κύτταρα του πνεύμονα |
Τα κύτταρα BEAS-2B μετασχηματίζονται με τον ιό Ad12-SV40 2B, γεγονός που ενδέχεται να αλλάξει τη συμπεριφορά και τις αποκρίσεις τους σε σύγκριση με τα αρχικά ανθρώπινα βρογχικά επιθηλιακά κύτταρα που προέρχονται από πνευμονικό ιστό. |
4.εφαρμογές της κυτταρικής σειράς BEAS-2B στην έρευνα
Η κυτταρική σειρά BEAS-2B προσφέρει διάφορες εφαρμογές στη βιοϊατρική έρευνα. Ορισμένες κοινές εφαρμογές των κυττάρων BEAS-2B είναι:
- Τοξικολογία: BEAS-2B χρησιμοποιούνται συχνά για τη διερεύνηση της γονοτοξικότητας και της κυτταροτοξικότητας διαφόρων τοξινών, περιβαλλοντικών ρύπων και χημικών ουσιών. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτή τη σειρά βρογχικών επιθηλιακών κυττάρων για να αξιολογήσουν τις βλαβερές επιδράσεις αυτών των ουσιών στην υγεία των πνευμόνων. Εκτός αυτού, μελετούν επίσης τους υποκείμενους μοριακούς μηχανισμούς. Όπως, μια μελέτη που πραγματοποιήθηκε το 2021 αξιολόγησε την τοξικότητα του μετάλλου καδμίου στην κυτταρική σειρά BEAS-2B. Τα ευρήματα της έρευνας αποκάλυψαν ότι το κάδμιο προκάλεσε κυτταρικό θάνατο και μιτοχονδριακή βλάβη στην πνευμονική κυτταρική σειρά BEAS-2B μέσω της διαμόρφωσης του σηματοδοτικού μονοπατιού MAPK [2]. Μια άλλη μελέτη χρησιμοποίησε την κυτταρική σειρά BEAS-2B για να αξιολογήσει την τοξικότητα των νανοσωματιδίων οξειδίου του ψευδαργύρου υπό οξειδωτικό στρες [3].
- Μοντελοποίηση αναπνευστικών ασθενειών: Η κυτταρική σειρά BEAS-2B είναι ένα εξαιρετικό ερευνητικό εργαλείο και in vitro μοντέλο για τη μελέτη αναπνευστικών ασθενειών όπως η χρόνια αποφρακτική πνευμονοπάθεια (ΧΑΠ), το άσθμα, ο καρκίνος του πνεύμονα και οι ιογενείς λοιμώξεις όπως ο SARS-CoV-2. Οι ερευνητές τείνουν να προκαλούν καταστάσεις που σχετίζονται με τη νόσο στην κυτταρική σειρά BEAS-2B και να μελετούν τους υποκείμενους κυτταρικούς και μοριακούς μηχανισμούς. Αυτό βοηθά στον εντοπισμό πιθανών στόχων φαρμάκων και στην ανάπτυξη εξατομικευμένων θεραπειών. Η έρευνα που διεξήχθη το 2022 χρησιμοποίησε την κυτταρική σειρά BEAS-2B και μελέτησε τον ρόλο των οιστρογόνων και των υποδοχέων τους στη μόλυνση SARS-CoV-2. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι η υψηλότερη έκφραση του υποδοχέα οιστρογόνων GPER1 μειώνει το ιικό φορτίο SARS-CoV-2 της BEAS-2B. Ως εκ τούτου, μπορεί να εμπλέκεται στην ιογενή λοίμωξη ή τον πολλαπλασιασμό του SARS-CoV-2 [4].
5.κύτταρα BEAS-2B: Μπάμπες: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες και πιο αναφερόμενες ερευνητικές μελέτες που περιλαμβάνουν κύτταρα BEAS-2B.
Τοξικότητα του γραφενίου σε φυσιολογικά ανθρώπινα πνευμονικά κύτταρα (BEAS-2B)
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε το 2011 στο Journal of Biomedical Nanotechnology. Η έρευνα πρότεινε ότι το οξείδιο του γραφίτη προκαλεί απόπτωση και κυτταροτοξικότητα στη σειρά φυσιολογικών βρογχικών επιθηλιακών κυττάρων (BEAS-2B).
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Αυτή η μελέτη διερεύνησε τις θεραπευτικές δυνατότητες της ναρινγενίνης, ενός φλαβονοειδούς, στην κυτταρική σειρά BEAS-2B. Τα ευρήματα υπέδειξαν ότι η ναρινγενίνη προστατεύει τα πνευμονικά κύτταρα BEAS-2B από την επαγόμενη από paraquat τοξικότητα ή την οξειδωτική βλάβη.
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο Inhalation Toxicology (2011). Σε αυτήν, οι ερευνητές αξιολόγησαν την επίδραση της τοξικότητας των μαγνητικών νανοσωματιδίων με επικαλύψεις άμορφου πυριτίου στην κυτταρική σειρά BEAS-2B in vitro.
Αυτό το άρθρο στο Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) πρότεινε ότι το ουρσοδεοξυχολικό οξύ μπορεί να παρεμποδίσει τη μη φυσιολογική μετανάστευση των επιθηλιακών κυττάρων των αεραγωγών και να αποτρέψει τη βλάβη που προκαλείται από την αλληλεπίδραση της πρωτεΐνης αιχμής SARS-CoV-2 και του ACE-2. Έτσι, μπορεί να βοηθήσει στην αποκατάσταση της βασικής επιθηλιακής στιβάδας.
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε το 2019 στο Journal of Toxicology and Environmental Health. Τα ευρήματα της έρευνας αναφέρουν ότι η χρόνια έκθεση σε ραδόνιο μπορεί να προάγει την καρκινογένεση σε ανθρώπινα βρογχικά επιθηλιακά κύτταρα (BEAS-2B) μέσω της ενεργοποίησης του microRNA-34a.
6.πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων
Το πρωτόκολλο κυτταροκαλλιέργειας για τα κύτταρα BEAS-2B αναφέρεται εδώ.
- Υποκαλλιέργεια BEAS-2B: Αυτό το έγγραφο θα σας βοηθήσει να μάθετε για τα μέσα και τις διαδικασίες υποκαλλιέργειας BEAS-2B.
- Κυτταρική σειρά BEAS-2B: Αυτός ο δικτυακός τόπος περιέχει όλες τις βασικές πληροφορίες που χρειάζεστε για να αρχίσετε να εργάζεστε με την κυτταρική σειρά BEAS-2B, συμπεριλαμβανομένων των μέσων της και των πρωτοκόλλων για το χειρισμό των καλλιεργειών πολλαπλασιασμού και κρυοσυντήρησης.
Αναφορές
- Han, X., et al., Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Το κάδμιο επάγει την απόπτωση των κυττάρων BEAS-2B και τη βλάβη των μιτοχονδρίων μέσω του σηματοδοτικού μονοπατιού MAPK. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Η τοξικότητα των νανοσωματιδίων οξειδίου του ψευδαργύρου (ZnO) στα ανθρώπινα βρογχικά επιθηλιακά κύτταρα (BEAS-2B) επιτείνεται από το οξειδωτικό στρες. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Η υπερέκφραση του υποδοχέα οιστρογόνων GPER1 και η θεραπεία με G1 μειώνει τη μόλυνση SARS-CoV-2 σε βρογχικά κύτταρα BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.