Ανθρώπινα ενδοθηλιακά κύτταρα της ομφάλιας φλέβας (HUVEC)
Τα HUVEC είναι πρωτογενή ενδοθηλιακά κύτταρα που αποτελούν ένα κρίσιμο εργαλείο στη βιοϊατρική έρευνα. Βοηθούν τους ερευνητές να μελετήσουν την αγγειογένεση, τη βιολογία των αγγείων και ασθένειες όπως η αθηροσκλήρωση και ο καρκίνος. Τα HUVEC χρησιμοποιούνται για τη διερεύνηση της συμπεριφοράς των ενδοθηλιακών κυττάρων, των μηχανισμών κυτταρικής σηματοδότησης και της δοκιμής φαρμάκων, προσφέροντας πολύτιμες πληροφορίες για πιθανές θεραπείες ή αγωγές για καρδιαγγειακές παθήσεις και καρκίνο. Χρησιμεύουν επίσης ως μοντέλο για μελέτες αγγειακής βιολογίας.
Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων HUVEC
Η γνώση σχετικά με την προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά μιας κυτταρικής σειράς είναι καθοριστική για να αποφασίσετε αν είναι κατάλληλη για τη μελέτη σας. Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε αυτές τις βασικές πληροφορίες σχετικά με τα ενδοθηλιακά κύτταρα HUVEC: Σε τι χρησιμοποιούνται τα κύτταρα HUVEC; Ποια είναι η πλήρης ονομασία των κυττάρων HUVEC; Ποια είναι τα διακριτικά χαρακτηριστικά των HUVEC; Ποια είναι η μορφολογία των HUVEC; Ποια είναι η διάμετρος των HUVEC; Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων HUVEC;
- Τα κύτταρα HUVEC εξάγονται από το ενδοθήλιο της φλέβας του ανθρώπινου ομφάλιου λώρου.
- Η μορφολογία των HUVEC είναι ενδοθηλιακού τύπου. Συνήθως έχουν πολυγωνικό σχήμα και διαθέτουν στρογγυλό πυρήνα στο κέντρο.
- Το μέγεθος των κυττάρων HUVEC είναι 17 μm σε διάμετρο.
- Αυτά τα ενδοθηλιακά κύτταρα είναι διπλοειδή. Έχουν τυπικό αριθμό χρωμοσωμάτων 46.
HUVEC TERT2
Το HUVEC TERT2 είναι μια αθανατοποιημένη κυτταρική σειρά που προέρχεται από πρωτογενή ενδοθηλιακά κύτταρα της ανθρώπινης φλέβας του ομφάλιου λώρου (HUVEC). Αναπτύχθηκε με την εισαγωγή του γονιδίου της ανθρώπινης τελομεράσης αντίστροφης μεταγραφάσης (TERT) στο γονιδίωμα των κυττάρων HUVEC. Αυτή η τροποποίηση συνέβαλε στην παράταση της διάρκειας ζωής τους σε καλλιέργεια, επιτρέποντας μακροπρόθεσμα πειράματα χωρίς τους περιορισμούς που σχετίζονται με τα πρωτογενή HUVEC.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ HUVEC και HMEC-1;
Η δομή και η πολυπλοκότητα των κυτταρικών σειρών ενδοθηλιακών κυττάρων HUVEC και HMEC-1 είναι συγκρίσιμες. Ωστόσο, τα κύτταρα HMEC-1 παρουσιάζουν έναν πιο ομοιογενή πληθυσμό από τα HUVEC όσον αφορά το μέγεθος και την κοκκώδη δομή των κυττάρων. Αυτό μπορεί να μειώσει τις διακυμάνσεις στα πειραματικά δεδομένα.
Πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HUVEC
Αυτό το τμήμα του άρθρου έχει ως στόχο να σας παρέχει βασικές γνώσεις σχετικά με την καλλιέργεια κυττάρων HUVEC. Αυτό θα σας βοηθήσει σημαντικά στην εργασία σας με αυτά. Εδώ θα βρείτε απαντήσεις στις ακόλουθες συχνές ερωτήσεις: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των HUVEC; Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των HUVEC; Πόσες μεταμοσχεύσεις υπάρχουν στα HUVEC; Τι είναι το μέσο καλλιέργειας κυττάρων HUVEC; Πώς καλλιεργούνται τα HUVEC;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων HUVEC
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού των HUVEC είναι περίπου 23,5 ώρες. Ωστόσο, μπορεί να διαφέρει ανάλογα με τις συνθήκες καλλιέργειας των κυττάρων και τον αριθμό των πασών.
Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:
Τα HUVEC είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά. Τα κύτταρα αναπτύσσονται και σχηματίζουν μονοστρωματικές καλλιέργειες.
Αναλογία διαίρεσης:
Η αναλογία υποκαλλιέργειας για τα HUVEC είναι 1:2 έως 1:4. Για την σπορά, τα κύτταρα πλένονται με 1x φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα και προστίθεται διάλυμα αποσύνδεσης (Accutase) για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Στη συνέχεια, προστίθεται καλλιεργητικό μέσο και τα αποκολλημένα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Το υπερκείμενο υγρό απορρίπτεται και το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται προσεκτικά. Τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη καλλιέργειας για ανάπτυξη.
Μέσο ανάπτυξης:
Το μέσο ανάπτυξης ενδοθηλιακών κυττάρων χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια κυττάρων HUVEC. Το μέσο αντικαθίσταται κάθε 2-3 ημέρες. Τα HUVEC μπορούν να χρησιμοποιηθούν για έως και 8-10 πασάζ.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Η ανθρώπινη ενδοθηλιακή κυτταρική σειρά (HUVEC) διατηρείται σε υγραντικό επωαστήρα με 5% CO2 στους 37°C.
Αποθήκευση:
Τα κύτταρα HUVEC συνήθως αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας ή στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου. Αυτό προστατεύει τη βιωσιμότητα των κυττάρων για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Για τη συντήρηση των κυττάρων HUVEC, συνιστάται η χρήση μέσων κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Γενικά, συνιστάται μια διαδικασία αργής κατάψυξης, καθώς επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό, αποτρέποντας το σοκ στα κύτταρα και διατηρώντας τη βιωσιμότητά τους.
Διαδικασία απόψυξης:
Για να αποψύξετε τα κατεψυγμένα κύτταρα, τοποθετήστε τα σε προθερμασμένο υδατόλουτρο στους 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα, έως ότου απομείνει μόνο μια μικρή συσσώρευση πάγου. Στη συνέχεια, προσθέστε φρέσκο μέσο στα κύτταρα και φυγοκεντρήστε. Αυτό το βήμα είναι απαραίτητο για την απομάκρυνση τυχόν υπολειμμάτων του μέσου κατάψυξης από τα κύτταρα. Ανακατέψτε το ίζημα των κυττάρων και μεταφέρετε τα κύτταρα σε νέα φιάλη με το μέσο καλλιέργειας.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Απαιτείται εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1 για τον σωστό χειρισμό των κυτταρικών καλλιεργειών HUVEC.
Δημοσίευση: 2023 | Τελευταία αναθεώρηση: Μάιος 2026
- Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων HUVEC στην έρευνα
- Δημοσιεύσεις που αναφέρονται στα κύτταρα HUVEC
- Πληροφορίες καλλιέργειας σχετικά με τη σειρά κυττάρων HUVEC
- Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων HUVEC
- 6. Πόροι για τη σειρά κυττάρων HUVEC: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις
Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
Όπως και άλλες ανθρώπινες κυτταρικές σειρές, τα κύτταρα HUVEC έχουν τα δικά τους πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Σε αυτή την ενότητα, θα εξετάσουμε μερικά αξιοσημείωτα πλεονεκτήματα και περιορισμούς που επηρεάζουν σημαντικά τη χρήση τους στην έρευνα.
Πλεονεκτήματα
Τα βασικά πλεονεκτήματα των κυττάρων HUVEC είναι:
-
Μοντέλο ενδοθηλιακών κυττάρων
Μοντέλα υψηλής συνάφειας για τη μελέτη της αγγειογένεσης, της αγγειακής βιολογίας και των ασθενειών που σχετίζονται με την ενδοθηλιακή λειτουργία.
-
Εύκολη καλλιέργεια
Σχετικά εύκολη απομόνωση από ανθρώπινα ομφάλια λώρια. Δεν έχουν απαιτητικές απαιτήσεις καλλιέργειας και διατηρούνται εύκολα σε ερευνητικά εργαστήρια.
Περιορισμοί
Οι περιορισμοί που σχετίζονται με τη σειρά ενδοθηλιακών κυττάρων HUVEC είναι:
-
Περιορισμένη διάρκεια ζωής
Τα HUVEC έχουν περιορισμένη διάρκεια ζωής, συνήθως 8 έως 10 πασάζ, γεγονός που αποτελεί περιορισμό για μακροχρόνια πειράματα. Μπορεί να υποστούν γήρανση καθώς αυξάνεται ο αριθμός των πασάζ.
Εφαρμογές των κυττάρων HUVEC στην έρευνα
Τα κύτταρα HUVEC έχουν σημαντικό δυναμικό για διάφορες εφαρμογές στον τομέα της βιοϊατρικής. Εδώ, θα επισημάνουμε μερικές σημαντικές ερευνητικές χρήσεις των κυττάρων HUVEC.
- Μελέτες καρδιαγγειακών παθήσεων: Η κυτταρική σειρά HUVEC αποτελεί ένα πολύτιμο μοντέλο ενδοθηλιακών κυττάρων, παρέχοντας έτσι πληροφορίες για τους μηχανισμούς που υποκρύπτονται σε καρδιαγγειακές παθήσεις όπως η αθηροσκλήρωση, η θρόμβωση και η υπέρταση. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν τους μηχανισμούς που υποκρύπτονται στην ενδοθηλιακή δυσλειτουργία, το οξειδωτικό στρες και τη φλεγμονή. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 χρησιμοποίησε HUVEC και διερεύνησε ότι το μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA TTTY15 παίζει καθοριστικό ρόλο στη βελτίωση της βλάβης των αγγειακών ενδοθηλιακών κυττάρων που προκαλείται από την υποξία, στοχεύοντας τον άξονα miRNA-186-5p [1].
- Έρευνα για τον καρκίνο: Τα HUVEC είναι ιδανικά για τη μελέτη της αγγειακής βιολογίας. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιούνται για τη διερεύνηση της αγγειογένεσης των όγκων και των αλληλεπιδράσεων των ενδοθηλιακών κυττάρων. Αυτό βοηθά τους ερευνητές να κατανοήσουν πώς οι όγκοι εξασφαλίζουν υπερβολική παροχή αίματος και πολλαπλασιάζονται. Για παράδειγμα, ο Hui Wang και οι συνεργάτες του ανακάλυψαν ότι τα εξωσώματα που απελευθερώνονται από κύτταρα καρκινώματος πλακωδών κυττάρων του στόματος (OSCC) αυξάνουν τα επίπεδα του miRNA-210-3p και μειώνουν την έκφραση της εφρίνης A3 στα κύτταρα HUVEC και προάγουν τον σχηματισμό σωληναρίων μέσω της ρύθμισης της κασκάδας PI3K/AKT, όπως επιβεβαιώθηκε μέσω της δοκιμασίας σχηματισμού σωληναρίων HUVEC [2].
- Δοκιμές φαρμάκων: Τα ενδοθηλιακά κύτταρα HUVEC χρησιμοποιούνται ευρέως για τη δοκιμή φαρμάκων. Οι ερευνητές μπορούν να αξιολογήσουν την αποτελεσματικότητα, την τοξικότητα και τις πιθανές παρενέργειες φυσικών ενώσεων, νανοσωματιδίων και άλλων θεραπευτικών παραγόντων in vitro χρησιμοποιώντας HUVEC. Για παράδειγμα, μια μελέτη αξιολόγησε την τοξικότητα νανοσωματιδίων αργύρου που συντέθηκαν από εκχύλισμα Rheum ribes χρησιμοποιώντας κύτταρα HUVEC [3].
Δημοσιεύσεις με θέμα τα κύτταρα HUVEC
Σε αυτή την ενότητα του άρθρου θα αναφερθούν μερικές συχνά αναφερόμενες και ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα HUVEC.
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Σύμφωνα με τη μελέτη, το γ-αμινοβουτυρικό οξύ (GABA), ένας νευροδιαβιβαστής, αναστέλλει το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από το H2O2 στα κύτταρα HUVEC. Ως εκ τούτου, θα μπορούσε να αποτελέσει έναν αποτελεσματικό φαρμακολογικό παράγοντα κατά των καρδιαγγειακών παθήσεων που σχετίζονται με οξειδωτική βλάβη.
Αυτή η μελέτη στο Biochemical and Biophysical Research Communications (2020) διερεύνησε τον τρόπο με τον οποίο το οιστρογόνο ρυθμίζει έναν μεταφορέα σήματος, τη γλυκοπρωτεΐνη 130 (gp130) στα κύτταρα HUVEC.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο στο Journal of Cellular Physiology (2017) διερεύνησε τις επιδράσεις της μεταβολής της ακαμψίας του υποστρώματος στη μετανάστευση και την αγγειογένεση των ενδοθηλιακών κυττάρων (A549 και HUVEC). Διεξήγαγαν δοκιμές μετανάστευσης HUVEC και αγγειογένεσης HUVEC για να αξιολογήσουν αυτές τις επιδράσεις.
Η λυσοσωμική εναπόθεση νανοσωματιδίων οξειδίου του χαλκού προκαλεί τον θάνατο των κυττάρων HUVEC
Αυτή η έρευνα στο Biomaterials (2018) διερευνά τους πιθανούς μηχανισμούς που ευθύνονται για την τοξικότητα των νανοσωματιδίων οξειδίου του χαλκού στα αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα.
Αυτή η μελέτη στο περιοδικό Medicine (2020) πρότεινε ότι μια φυσική ένωση, η κερσετίνη, καταστέλλει την απόπτωση και τη φλεγμονή των HUVEC που προκαλείται από το TNF-α, ρυθμίζοντας τις οδούς σηματοδότησης AP-1 και NF-kB.
6. Πηγές για τη σειρά κυττάρων HUVEC: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικοί διαδικτυακοί πόροι σχετικά με τα κύτταρα HUVEC.
- Μεταφορά HUVEC: Αυτός ο σύνδεσμος ιστότοπου παρέχει ολοκληρωμένες πληροφορίες σχετικά με τη μεταφορά HUVEC. Για παράδειγμα, περιλαμβάνει πληροφορίες για τα αντιδραστήρια μεταφοράς και ένα πρωτόκολλο για τη μεταφορά HUVEC in vitro.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων HUVEC.
- Καλλιέργεια κυττάρων HUVEC: Αυτό το έγγραφο θα σας βοηθήσει να μάθετε τα πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων HUVEC για υποκαλλιέργεια και χειρισμό κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Zheng, J., et al., Το LncRNA TTTY15 ρυθμίζει τη βλάβη των αγγειακών ενδοθηλιακών κυττάρων που προκαλείται από υποξία μέσω της στόχευσης του miR-186-5p στις καρδιαγγειακές παθήσεις. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., Τα εξωσώματα OSCC ρυθμίζουν το miR-210-3p στοχεύοντας το EFNA3 για την προώθηση της αγγειογένεσης του καρκίνου του στόματος μέσω της οδού PI3K/AKT. BioMed research international, 2020. 2020.
- Unal, İ. και S. Egri, Βιοσύνθεση νανοσωματιδίων αργύρου με χρήση υδατικού εκχυλίσματος Rheum ribes, χαρακτηρισμός και αξιολόγηση της τοξικότητάς του σε HUVECs και Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: σ. 1-14.