Γραμμή κυττάρων HT-29

Η HT-29 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου με ευρύ φάσμα εφαρμογών στην έρευνα για τον καρκίνο και την τοξικολογία. Όπως, τα κύτταρα αυτά είναι ευαίσθητα στις συνήθεις χημειοθεραπευτικές θεραπείες κατά του καρκίνου του παχέος εντέρου. Επιπλέον, η κυτταρική σειρά HT-29 είναι ένα καλά χαρακτηρισμένο in vitro μοντέλο για τη διερεύνηση της απόκρισης του εντερικού επιθηλίου σε βακτηριακή λοίμωξη. Τα κύτταρα HT-29 μιμούνται τα χαρακτηριστικά των ώριμων εντερικών κυττάρων, δηλαδή των εντεροκυττάρων, και συνεπώς είναι κατάλληλα για μελέτες προσκόλλησης και μηχανιστικές μελέτες.

Αυτό το άρθρο θα καλύψει όλες τις πτυχές της κυτταρικής σειράς HT-29 που πρέπει να γνωρίζετε πριν εργαστείτε μαζί της. Κυρίως θα περιλαμβάνει:

  1. Κύτταρα HT-29: 29-29: προέλευση και γενικές πληροφορίες
  2. Πληροφορίες για την κυτταρική καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT-29
  3. Κύτταρα HT-29: -29-29: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
  4. Κύτταρα HT-29:
  5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις για τα κύτταρα HT-29
  6. Κύτταρα HT-29 Πηγές: HT-29-29: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

1. Κύτταρα HT-29: -29: Προέλευση και γενικές πληροφορίες

Πριν από τη χρήση οποιασδήποτε κυτταρικής σειράς, θα πρέπει να γνωρίζετε τα γενικά χαρακτηριστικά και την προέλευση της κυτταρικής σειράς. Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα HT-29 Είναι η HT-29 μια κυτταρική σειρά για τον καρκίνο του παχέος εντέρου Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων HT-29

Ποια είναι η κυτταρική σειρά HT-29 Η HT-29 είναι μια κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του παχέος εντέρου που δημιουργήθηκε το 1964 από τους Trempe και Fogh. Τα κύτταρα προήλθαν αρχικά από τον πρωτοπαθή όγκο μιας καυκάσιας γυναίκας (44 ετών) με αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου [1]. Από την ίδρυσή της, η εν λόγω κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται για τη μελέτη της βιολογίας των καρκίνων.

Μορφολογία των κυττάρων HT-29: Η κυτταρική σειρά HT-29 έχει γενικά μορφολογία που μοιάζει με επιθήλιο. Τα διαφοροποιημένα κύτταρα αναπτύσσονται σε μονοστρώσεις, σχηματίζουν στενές συνδέσεις κυττάρων-κυττάρων και διαθέτουν ένα ακραίο βουρτσισμένο όριο. Εάν τα κύτταρα αυτά αναπτυχθούν σε μέσο με ανεπάρκεια γλυκόζης ή εάν τους χορηγηθούν επαγωγείς όπως βουτυρικό οξύ ή οξύ, παρουσιάζουν χαρακτηριστικά που μοιάζουν με εντεροκύτταρα.

Μέγεθος κυττάρων: Η διάμετρος της κυτταρικής σειράς του καρκίνου του παχέος εντέρου HT-29 είναι 11 μm.

Γονιδίωμα και πλουδισμός: Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων για την κυτταρική σειρά HT-29 είναι 71. Μπορεί να κυμαίνεται από 68-72. Επιπλέον, ο εξορθολογισμένος αριθμός χρωμοσωμάτων για τα κύτταρα HT-29 είναι υπερτριπλοειδής, με τη συνιστώσα 2S να εμφανίζεται σε ποσοστό 2,4 %.

Τι είναι η HT29 MTX Η HT29 MTX είναι μια ανθεκτική στη μεθοτρεξάτη κυτταρική σειρά που απομονώθηκε από την αρχική ανθρώπινη κυτταρική σειρά HT-29 για τον καρκίνο του παχέος εντέρου με προσαρμογή σε 10 μΜ μεθοτρεξάτη. Τα κύτταρα αυτά παρουσιάζουν χαρακτηριστικά βλεννοεκκριτικών ώριμων κυττάρων βλεννογόνων.

Διαίρεση και κίνηση των καρκινικών κυττάρων του παχέος εντέρου στο μικροσκόπιο.

2. Πληροφορίες κυτταρικής καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς HT-29

Η γνώση των βασικών απαιτήσεων καλλιέργειας μιας κυτταρικής σειράς μπορεί να διευκολύνει την εργασία σας με αυτήν. Θα πρέπει να γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της κυτταρικής σειράς HT-29 Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των κυττάρων HT-29 Ποιο είναι το μέσο για τα κύτταρα HT-29

Χρόνος διπλασιασμού

Ο μέσος χρόνος διπλασιασμού για την κυτταρική σειρά HT-29 είναι 24 ώρες.

Προσκολλημένο/εναιώρημα

Η HT-29 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά.

Πυκνότητα σποράς

Η συνιστώμενη πυκνότητα σποράς για τα κύτταρα HT-29 είναι 3 x104 κύτταρα/cm2. Τα κύτταρα που αναπτύσσονται πλένονται με 1 X PBS και αποκολλώνται μετά από επώαση με Accutase για 8-10 λεπτά. Προστίθεται φρέσκο μέσο και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται και τα κύτταρα διανέμονται σε νέες φιάλες με τη συνιστώμενη πυκνότητα κυττάρων.

Μέσο ανάπτυξης

Για τη βέλτιστη καλλιέργεια των κυττάρων HT-29 χρησιμοποιείται το ελάχιστο απαραίτητο μέσο Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) συμπληρωμένο με 2,5 mM L-γλουταμίνη και 10 % FBS. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης

Τα κύτταρα HT-29 απαιτούν υγρό επωαστήρα με θερμοκρασία 37 °C και παροχή 5 %CO2 για την ανάπτυξή τους.

Αποθήκευση

Τα κύτταρα αυτά αποθηκεύονται σε φάση ατμών υγρού αζώτου σε θερμοκρασία κάτω των -195°C.

Μέσο κατάψυξης και διαδικασία

Το μέσο κατάψυξης που χρησιμοποιείται για την κυτταρική σειρά HT-29 είναι το CM-1 ή το CM-ACF. Τα κύτταρα καταψύχονται με μια αργή διαδικασία κατάψυξης που προκαλεί πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C και προστατεύει αποτελεσματικά τη βιωσιμότητα των κυττάρων.

Διαδικασία απόψυξης

Τα κατεψυγμένα κύτταρα HT-29 αποψύχονται σε υδατόλουτρο ρυθμισμένο σε θερμοκρασία 37 °C. Τα κύτταρα αυτά μπορούν να ανασταλούν και να διανεμηθούν απευθείας στη φιάλη φρέσκου μέσου ανάπτυξης. Αντίθετα, τα κύτταρα που έχουν αποψυχθεί μπορούν να φυγοκεντρηθούν για να απομακρυνθούν τα στοιχεία του μέσου κατάψυξης, να ανασταλούν εκ νέου σε φρέσκο μέσο και να καλλιεργηθούν σε φιάλες.

Επίπεδο βιοασφάλειας

Το επίπεδο βιοασφάλειας 1 χρησιμοποιείται για τον χειρισμό και τη συντήρηση της κυτταρικής σειράς HT-29.

Κύτταρα HT-29 σε μεγέθυνση 10x και 20x.

3. Κύτταρα HT-29: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί

Κάθε κυτταρική σειρά έχει μοναδικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που τη διακρίνουν από άλλες κυτταρικές σειρές. Αυτή η ενότητα θα καλύψει τα κύρια πλεονεκτήματα και τους περιορισμούς που σχετίζονται με τα κύτταρα HT-29.

Πλεονεκτήματα

Τα κύρια πλεονεκτήματα των κυττάρων HT-29 είναι τα εξής:

  • Εύκολη καλλιέργεια

    Η κυτταρική σειρά HT-29 είναι εύκολη στο χειρισμό και τη συντήρηση, χωρίς πολύπλοκες απαιτήσεις για την καλλιέργεια. Καλλιεργείται ευρέως σε ερευνητικά εργαστήρια.

  • In vitro μοντέλο εντερικών κυττάρων

    Τα κύτταρα HT-29 μπορούν να διαφοροποιηθούν σε ώριμα εντερικά κύτταρα (εντεροκύτταρα και κύτταρα που παράγουν βλέννα) υπό συγκεκριμένες συνθήκες καλλιέργειας. Χρησιμοποιούνται ως κυτταρικό μοντέλο για τη μελέτη της πέψης και της βιοδιαθεσιμότητας των τροφίμων.

  • Υψηλή αποτελεσματικότητα διαμόλυνσης

    Τα καρκινικά κύτταρα του παχέος εντέρου HT-29 προσφέρουν υψηλή αποτελεσματικότητα διαμόλυνσης, καθιστώντας τα κατάλληλα για μελέτες γονιδιακής έκφρασης και ρύθμισης. Μπορούν να πραγματοποιηθούν τόσο πειράματα παροδικής όσο και σταθερής διαμόλυνσης με τη χρήση διαφόρων μεθόδων.

  • Ευαισθησία στα φάρμακα

    Τα κύτταρα HT-29 είναι ευαίσθητα σε χημειοθεραπευτικά φάρμακα όπως η φθοριοουρακίλη και η οξαλιπλατίνη, που χρησιμοποιούνται συνήθως στη θεραπεία του καρκίνου του παχέος εντέρου. Χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της ανθεκτικότητας στα φάρμακα και τη διαλογή πιθανών θεραπευτικών φαρμάκων για το καρκίνωμα του παχέος εντέρου.

Περιορισμοί

  • Ετερογένεια

    Τα κύτταρα HT-29, όπως και άλλες καρκινικές κυτταρικές σειρές, παρουσιάζουν ετερογένεια και ενδέχεται να μην αποτελούν ενιαίο κυτταρικό πληθυσμό. Αυτό μπορεί να επηρεάσει την αναπαραγωγιμότητα των αποτελεσμάτων σε ορισμένες δοκιμασίες και να οδηγήσει σε μικρές διαφοροποιήσεις στα πειραματικά αποτελέσματα.

  • Περιορισμένη διαφοροποίηση

    Τα κύτταρα HT-29 έχουν περιορισμένη δυνατότητα διαφοροποίησης. Δεν διαφοροποιούνται πλήρως σε κύτταρα του εντέρου ή του παχέος εντέρου, αλλά παρουσιάζουν μόνο μερικά χαρακτηριστικά χαρακτηριστικά. Αυτός ο περιορισμός μπορεί να περιορίσει τη χρήση τους στη μελέτη πιο σύνθετων βιολογικών διεργασιών.

4. κύτταρα HT-29: 29-29: Εφαρμογές

Η κυτταρική σειρά HT-29 καλλιεργείται εκτενώς σε ερευνητικά εργαστήρια λόγω του ευρέος φάσματος εφαρμογών της. Η παρούσα ενότητα θα καλύψει μόνο μερικές σημαντικές εφαρμογές των κυττάρων HT-29.

Έρευνα για τον καρκίνο: Το HT-29 είναι μια κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του παχέος εντέρου, οπότε χρησιμοποιείται για τη μελέτη της εξέλιξης του καρκίνου, της ανάπτυξης και των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 χρησιμοποίησε την κυτταρική σειρά HT-29 για τη διερεύνηση των κυτταρικών μορίων που είναι υπεύθυνα για τη μετάσταση. Η μελέτη αυτή παρατήρησε ότι τα γονίδια vimentin και CXCR4 ρυθμίζουν την κυτταρική μετάσταση. Ενώ η διαμόλυνση microRNA-193a-5p mimic μπορεί να μειώσει τα επίπεδα mRNA αυτών των γονιδίων και να μειώσει επιτυχώς τη μετάσταση των καρκινικών κυττάρων [2].

Έρευνα τοξικολογίας: Η κυτταρική σειρά HT-29 χρησιμοποιείται εκτενώς στην τοξικολογική έρευνα. Αυτά τα κύτταρα καρκινώματος του παχέος εντέρου χρησιμοποιούνται για την αξιολόγηση της τοξικότητας διαφόρων υποψήφιων φαρμάκων χρησιμοποιώντας διάφορες δοκιμασίες. Όπως, μια μελέτη διερεύνησε το δυναμικό τοξικότητας ενός αιθανολικού εκχυλίσματος του φυτού Syzygium cumini στην κυτταρική σειρά HT-29. Τα αποτελέσματα έδειξαν σημαντική καταστολή της ανάπτυξης των κυττάρων HT-29, υποδεικνύοντας τις υποσχόμενες αντικαρκινικές ιδιότητες του εκχυλίσματος [3].

Μικροβιολογία: Η HT-29 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως κυτταρικό σύστημα ξενιστή για τη διερεύνηση της παθογένειας πιθανών μικροβίων, δηλαδή βακτηρίων και ιών. Οι ερευνητές μπορούν να μολύνουν τα κύτταρα HT-29 με μικρόβια για να διερευνήσουν την ιογένειά τους και την αντίδραση του ξενιστή. Μια τέτοια μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα HT-29 για να διερευνήσει τις προβιοτικές ιδιότητες των βακτηρίων γαλακτικού οξέος [4]. Μια άλλη μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα HT-29 για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας και της ασφάλειας των θεραπειών με βακτηριοφάγους [5].

5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις για τα κύτταρα HT-29

Αυτή η ενότητα θα διαφωτίσει ορισμένες αξιοσημείωτες δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα HT-29 που θα σας βοηθήσουν να σχεδιάσετε την ερευνητική σας μελέτη.

Αξιολόγηση της αντικαρκινικής επίδρασης του αιθανολικού εκχυλίσματος Syzygium cumini στην κολοορθική κυτταρική γραμμή HT-29

Αυτή η μελέτη πρότεινε το αιθανολικό εκχύλισμα Syzygium cumini ως δυνητικό αντικαρκινικό παράγοντα κατά της κυτταρικής σειράς HT-29 του καρκίνου του παχέος εντέρου. Το εκχύλισμα κατέστειλε σημαντικά την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων.

Η τετρανδρίνη αναστέλλει την ανάπτυξη των κυττάρων του καρκινώματος του παχέος εντέρου HT-29 μέσω της οδού Bcl-2/Caspase 3/PARP και της φάσης G1/S

Αυτή η δημοσίευση στο Bioscience Reports εξέτασε την αντικαρκινική δράση μιας ένωσης, της τετραδρίνης, σε κύτταρα HT-29. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι η τετραδρίνη αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό και την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων μέσω της ρύθμισης των κυτταρικών σηματοδοτικών μονοπατιών.

το microRNA-193a-5p αναστέλλει τη μετανάστευση των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων του παχέος εντέρου HT-29 μέσω της καταστολής του μονοπατιού της μετάστασης

Αυτή η μελέτη πρότεινε ότι το miRNA-193a-5p μπορεί ενδεχομένως να ρυθμίζει τη μετάσταση των κυττάρων HT-29 ρυθμίζοντας γονίδια που σχετίζονται με τη μετάσταση.

Οι βακτηριοφάγοι είναι πιο μολυσματικοί για τα βακτήρια με ανθρώπινα κύτταρα απ' ό,τι είναι σε βακτηριακή καλλιέργεια- πληροφορίες από τα κύτταρα HT-29

Η εργασία αυτή δημοσιεύεται στο Nature Scientific Reports το 2018. Αυτή η μελέτη χρησιμοποίησε την καρκινική κυτταρική σειρά HT-29 ως εντερικό κυτταρικό μοντέλο για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της προτεινόμενης θεραπείας με βακτηριοφάγους.

Προβιοτικές ιδιότητες των γαλακτοβακίλλων και η ικανότητά τους να αναστέλλουν την προσκόλληση εντεροπαθογόνων βακτηρίων στα κύτταρα Caco-2 και HT-29

Σε αυτή τη μελέτη, οι ερευνητές χρησιμοποίησαν κύτταρα HT-29 για να διερευνήσουν τις προβιοτικές δραστηριότητες των γαλακτικών βακτηρίων. Είναι ενδιαφέρον ότι η μελέτη έδειξε ότι τα βακτήρια γαλακτοβακίλλων εμποδίζουν την προσκόλληση των παθογόνων βακτηρίων στα κύτταρα του παχέος εντέρου.

6. Κύτταρα HT-29 Πηγές: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Αυτή η ενότητα θα καλύψει ορισμένους διαθέσιμους διαδικτυακούς πόρους σχετικά με τα κύτταρα HT-29 που θα σας βοηθήσουν να μάθετε τα πρωτόκολλα συντήρησης, καλλιέργειας και διαμόλυνσης τους.

Πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων

Οι ακόλουθοι πόροι θα σας καθοδηγήσουν σχετικά με την υποκαλλιέργεια των κυττάρων HT-29.

  • Καλλιέργεια κυττάρων HT-29: Αυτός ο σύνδεσμος θα παράσχει βασικές γνώσεις σχετικά με το μέσο ανάπτυξης, την απόψυξη και την υποκαλλιέργεια των κυττάρων HT-29.
  • Διατήρηση καλλιεργειών HT-29: Αυτό το άρθρο περιέχει όλες τις χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια και τη συντήρηση των κυττάρων HT-29.

Πρωτόκολλα διαμόλυνσης

Η κυτταρική σειρά HT-29 έχει μεγάλη αποτελεσματικότητα διαμόλυνσης και χρησιμοποιείται συχνά σε μελέτες γονιδιακής έκφρασης. Οι ακόλουθοι πόροι περιγράφουν τα πιθανά πρωτόκολλα διαμόλυνσης για αυτά τα κύτταρα.

Βίντεο σχετικά με την κυτταρική σειρά HT-29

Ακολουθούν ορισμένα βίντεο σχετικά με την καλλιέργεια και τη συντήρηση αυτής της καρκινικής κυτταρικής γραμμής.

  • Πέρασμα κυττάρων: Αυτό το βίντεο παρουσιάζει το πρωτόκολλο διέλευσης κυττάρων για προσκολλημένες κυτταρικές σειρές.
  • Διαμόλυνση κυττάρων HT-29: Αυτό το βίντεο θα σας καθοδηγήσει σχετικά με τη μέθοδο διαμόλυνσης που χρησιμοποιείται για τα κύτταρα HT-29.

Αναμένουμε ότι οι πληροφορίες σε αυτό το άρθρο είναι πολύτιμες και επαρκείς για να χειριστείτε το χειρισμό και τη συντήρηση της κυτταρικής σειράς HT-29. Εάν σκοπεύετε να χρησιμοποιήσετε κύτταρα HT-29 στη μελέτη σας, παραγγείλετε από εμάς.

Αναφορές

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles και I. Recio, κυτταρική σειρά HT29. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: σ. 113-124.
  2. Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p αναστέλλει τη μετανάστευση των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων του παχέος εντέρου HT-29 μέσω της καταστολής της οδού μετάστασης. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh, Αξιολόγηση της αντικαρκινικής επίδρασης του αιθανολικού εκχυλίσματος Syzygium cumini στην κυτταρική σειρά HT-29 του παχέος εντέρου. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
  4. Fonseca, H.C., et al., Probiotic properties of lactobacilli and their ability to inhibit the adhesion of enteropathogenic bacteria to Caco-2 and HT-29 cells. Προβιοτικά και αντιμικροβιακές πρωτεΐνες, 2021. 13: p. 102-112.
  5. Shan, J., et al., Bacteriophages are more virulent to bacteria with human cells than they are in bacterial culture- insights from HT-29 cells. Επιστημονικές αναφορές, 2018. 8(1): p. 5091.

Εντοπίσαμε ότι βρίσκεστε σε διαφορετική χώρα ή χρησιμοποιείτε διαφορετική γλώσσα του προγράμματος περιήγησης από την τρέχουσα επιλεγμένη. Θα θέλατε να αποδεχτείτε τις προτεινόμενες ρυθμίσεις

Κλείστε το