Κυτταρική σειρά HT-29
Η HT-29 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου με ευρύ φάσμα εφαρμογών στην έρευνα για τον καρκίνο και την τοξικολογία. Για παράδειγμα, αυτά τα κύτταρα είναι ευαίσθητα στις τυπικές χημειοθεραπευτικές αγωγές κατά του καρκίνου του παχέος εντέρου. Επιπλέον, η κυτταρική σειρά HT-29 αποτελεί ένα καλά χαρακτηρισμένο in vitro μοντέλο για τη μελέτη της απόκρισης του εντερικού επιθηλίου σε βακτηριακή λοίμωξη. Τα κύτταρα HT-29 μιμούνται τα χαρακτηριστικά των ώριμων εντερικών κυττάρων, δηλαδή των εντεροκυττάρων, και ως εκ τούτου είναι κατάλληλα για μελέτες προσκόλλησης και μηχανισμούς.
- Μέσο ανάπτυξης
- Δείτε τη σελίδα του προϊόντος
- Χρόνος διπλασιασμού
- Δείτε τη σελίδα του προϊόντος
- Τύπος ανάπτυξης
- Προσκολλητικός
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διαθέσιμο από
- Cytion — Παραγγελία HT-29
- Κύτταρα HT-29: Προέλευση και γενικές πληροφορίες
- Πληροφορίες για την κυτταρική καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT-29
- Κύτταρα HT-29: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Κύτταρα HT-29: Εφαρμογές
- 5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα HT-29
- Πόροι για τα κύτταρα HT-29: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Αναφορές
- Συχνές ερωτήσεις
Κύτταρα HT-29: Προέλευση και γενικές πληροφορίες
Πριν χρησιμοποιήσετε οποιαδήποτε κυτταρική σειρά, θα πρέπει να γνωρίζετε τα γενικά χαρακτηριστικά και την προέλευσή της. Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα HT-29; Είναι η HT-29 μια κυτταρική σειρά καρκίνου του παχέος εντέρου; Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων HT-29;
Τι είναι η κυτταρική σειρά HT-29; Η HT-29 είναι μια κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του παχέος εντέρου που δημιουργήθηκε το 1964 από τους Trempe και Fogh. Τα κύτταρα προήλθαν αρχικά από τον πρωτογενή όγκο μιας γυναίκας καυκάσιας καταγωγής (44 ετών) με αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου [1]. Από τη δημιουργία της, αυτή η κυτταρική σειρά έχει χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη της βιολογίας των καρκίνων.
Μορφολογία των κυττάρων HT-29: Η κυτταρική σειρά HT-29 έχει γενικά επιθηλιακή μορφολογία. Τα διαφοροποιημένα κύτταρα αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες, σχηματίζουν στενές κυτταρικές συνδέσεις και διαθέτουν κορυφαία βουρτσώδη άκρη. Εάν αυτά τα κύτταρα καλλιεργηθούν σε μέσο με έλλειψη γλυκόζης ή τους χορηγηθούν επαγωγείς όπως βουτυρικό οξύ ή οξύ, εμφανίζουν χαρακτηριστικά παρόμοια με αυτά των εντεροκυττάρων.
Μέγεθος κυττάρου: Η διάμετρος της κυτταρικής σειράς HT-29 του καρκίνου του παχέος εντέρου είναι 11 μm.
Γονιδίωμα και πλοειδία: Ο τυπικός αριθμός χρωμοσωμάτων για τη κυτταρική σειρά HT-29 είναι 71. Μπορεί να κυμαίνεται από 68 έως 72. Επιπλέον, ο απλοποιημένος αριθμός χρωμοσωμάτων για τα κύτταρα HT-29 είναι υπερτριπλοειδής, με το συστατικό 2S να εμφανίζεται σε ποσοστό 2,4 %.
Τι είναι το HT29 MTX; Το HT29 MTX είναι μια κυτταρική σειρά ανθεκτική στη μεθοτρεξάτη που απομονώθηκε από την αρχική κυτταρική σειρά ανθρώπινου καρκίνου του παχέος εντέρου HT-29 μέσω προσαρμογής σε 10 µM μεθοτρεξάτη. Αυτά τα κύτταρα παρουσιάζουν χαρακτηριστικά ώριμων κυπελλοειδών κυττάρων που εκκρίνουν βλέννα.
Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς HT-29
Η γνώση των βασικών απαιτήσεων καλλιέργειας μιας κυτταρικής σειράς μπορεί να διευκολύνει την εργασία σας με αυτήν. Πρέπει να γνωρίζετε: ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της κυτταρικής σειράς HT-29; Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των κυττάρων HT-29; Ποια είναι τα μέσα καλλιέργειας για τα κύτταρα HT-29;
Χρόνος διπλασιασμού
Ο μέσος χρόνος διπλασιασμού για τη κυτταρική σειρά HT-29 είναι 24 ώρες.
Προσκολλητικά/εν αιωρήματα
Η HT-29 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.
Πυκνότητα σποράς
Η συνιστώμενη πυκνότητα σποράς για τα κύτταρα HT-29 είναι 3 x 104 κύτταρα/cm2. Τα αναπτυγμένα κύτταρα πλένονται με 1 X PBS και αποκολλώνται μετά από επώαση με Accutase για 8-10 λεπτά. Προστίθεται φρέσκο μέσο και τα κύτταρα φυγοκεντρώνονται. Το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέες φιάλες στην συνιστώμενη κυτταρική πυκνότητα.
Μέσο ανάπτυξης
Για τη βέλτιστη καλλιέργεια των κυττάρων HT-29 χρησιμοποιείται το Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) συμπληρωμένο με 2,5 mM L-γλουταμίνη και 10 % FBS. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης
Τα κύτταρα HT-29 απαιτούν υγραντικό επωαστήρα με θερμοκρασία 37 °C και παροχή 5 % CO2 για την ανάπτυξή τους.
Αποθήκευση
Αυτά τα κύτταρα αποθηκεύονται στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου σε θερμοκρασία κάτω των -195 °C.
Το μέσο κατάψυξης που χρησιμοποιείται για τη σειρά κυττάρων HT-29 είναι το CM-1 ή το CM-ACF. Τα κύτταρα καταψύχονται με μια διαδικασία αργής κατάψυξης που προκαλεί πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C και προστατεύει αποτελεσματικά τη βιωσιμότητα των κυττάρων.
Διαδικασία απόψυξης
Τα κατεψυγμένα κύτταρα HT-29 αποψύχονται σε υδατόλουτρο ρυθμισμένο στους 37 °C. Αυτά τα κύτταρα μπορούν να επαναδιαλυθούν και να μεταφερθούν απευθείας σε φιάλη με φρέσκο μέσο ανάπτυξης. Αντίθετα, τα αποψυγμένα κύτταρα μπορούν να φυγοκεντρηθούν για την απομάκρυνση των στοιχείων του μέσου κατάψυξης, να επαναδιαλυθούν σε φρέσκο μέσο και να καλλιεργηθούν σε φιάλες.
Επίπεδο βιοασφάλειας
Για τον χειρισμό και τη διατήρηση της κυτταρικής σειράς HT-29 χρησιμοποιείται επίπεδο βιοασφάλειας 1.
Κύτταρα HT-29: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
Κάθε κυτταρική σειρά έχει τα δικά της πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που τη διακρίνουν από άλλες κυτταρικές σειρές. Σε αυτή την ενότητα θα εξετάσουμε τα κύρια πλεονεκτήματα και τους περιορισμούς που σχετίζονται με τα κύτταρα HT-29.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα των κυττάρων HT-29 είναι:
-
Εύκολη καλλιέργεια
Η κυτταρική σειρά HT-29 είναι εύκολη στη διαχείριση και τη συντήρηση, χωρίς πολύπλοκες απαιτήσεις για την καλλιέργεια. Καλλιεργείται ευρέως σε ερευνητικά εργαστήρια.
-
In vitro μοντέλο εντερικών κυττάρων
Τα κύτταρα HT-29 μπορούν να διαφοροποιηθούν σε ώριμα εντερικά κύτταρα (εντεροκύτταρα και κύτταρα που παράγουν βλέννα) υπό συγκεκριμένες συνθήκες καλλιέργειας. Χρησιμοποιούνται ως κυτταρικό μοντέλο για τη μελέτη της πέψης των τροφών και της βιοδιαθεσιμότητας.
-
Υψηλή απόδοση μεταφοράς
Τα κύτταρα καρκίνου του παχέος εντέρου HT-29 προσφέρουν υψηλή απόδοση μεταμόλυνσης, καθιστώντας τα κατάλληλα για μελέτες γονιδιακής έκφρασης και ρύθμισης. Μπορούν να πραγματοποιηθούν πειράματα τόσο παροδικής όσο και σταθερής μεταμόλυνσης χρησιμοποιώντας διάφορες μεθόδους.
-
Ευαισθησία στα φάρμακα
Τα κύτταρα HT-29 είναι ευαίσθητα σε χημειοθεραπευτικά φάρμακα όπως η φθοριοουρακίλη και η οξαλιπλατίνη, που χρησιμοποιούνται συνήθως στη θεραπεία του καρκίνου του παχέος εντέρου. Χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της αντοχής στα φάρμακα και τον έλεγχο πιθανών θεραπευτικών φαρμάκων για το καρκίνωμα του παχέος εντέρου.
Περιορισμοί
-
Ετερογένεια
Τα κύτταρα HT-29, όπως και άλλες καρκινικές κυτταρικές σειρές, παρουσιάζουν ετερογένεια και ενδέχεται να μην σχηματίζουν έναν ομοιόμορφο κυτταρικό πληθυσμό. Αυτό μπορεί να επηρεάσει την αναπαραγωγιμότητα των αποτελεσμάτων σε ορισμένες δοκιμασίες και να οδηγήσει σε μικρές διακυμάνσεις στα πειραματικά αποτελέσματα.
-
Περιορισμένη διαφοροποίηση
Τα κύτταρα HT-29 έχουν περιορισμένο δυναμικό διαφοροποίησης. Δεν διαφοροποιούνται πλήρως σε εντερικά ή κολοϊκά κύτταρα, αλλά παρουσιάζουν μόνο μερικά χαρακτηριστικά γνωρίσματα. Αυτός ο περιορισμός μπορεί να περιορίσει τη χρήση τους στη μελέτη πιο σύνθετων βιολογικών διεργασιών.
Κύτταρα HT-29: Εφαρμογές
Η κυτταρική σειρά HT-29 καλλιεργείται εκτενώς σε ερευνητικά εργαστήρια λόγω του ευρέος φάσματος εφαρμογών της. Αυτή η ενότητα θα καλύψει μόνο μερικές σημαντικές εφαρμογές των κυττάρων HT-29.
Έρευνα για τον καρκίνο: Η HT-29 είναι μια κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος του παχέος εντέρου, επομένως χρησιμοποιείται για τη μελέτη της εξέλιξης, της ανάπτυξης και των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών του καρκίνου. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 χρησιμοποίησε την κυτταρική σειρά HT-29 για να διερευνήσει τα κυτταρικά μόρια που ευθύνονται για τη μετάσταση. Η μελέτη αυτή παρατήρησε ότι τα γονίδια βιμεντίνης και CXCR4 ρυθμίζουν τη μεταστατική δραστηριότητα των κυττάρων. Ενώ η μεταφορά του μιμητικού microRNA-193a-5p μπορεί να μειώσει τα επίπεδα mRNA αυτών των γονιδίων και να μειώσει επιτυχώς τη μεταστατική δραστηριότητα των καρκινικών κυττάρων [2].
Τοξικολογική έρευνα: Η κυτταρική σειρά HT-29 χρησιμοποιείται εκτενώς στην τοξικολογική έρευνα. Αυτά τα κύτταρα καρκινώματος του παχέος εντέρου χρησιμοποιούνται για την αξιολόγηση της τοξικότητας διαφορετικών υποψήφιων φαρμάκων χρησιμοποιώντας διαφορετικές δοκιμασίες. Για παράδειγμα, μια μελέτη διερεύνησε το τοξικό δυναμικό ενός αιθανολικού εκχυλίσματος του φυτού Syzygium cumini στην κυτταρική σειρά HT-29. Τα αποτελέσματα έδειξαν σημαντική καταστολή της ανάπτυξης των κυττάρων HT-29, υποδηλώνοντας τις πολλά υποσχόμενες αντικαρκινικές ιδιότητες του εκχυλίσματος [3].
Μικροβιολογία: Η HT-29 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως σύστημα κυττάρων ξενιστών για τη διερεύνηση της παθογένειας πιθανών μικροβίων, δηλαδή βακτηρίων και ιών. Οι ερευνητές μπορούν να μολύνουν τα κύτταρα HT-29 με μικροοργανισμούς για να διερευνήσουν τη μολυσματικότητά τους και την απόκριση του ξενιστή. Μια τέτοια μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα HT-29 για να διερευνήσει τις προβιοτικές ιδιότητες των βακτηρίων γαλακτικού οξέος [4]. Μια άλλη μελέτη χρησιμοποίησε κύτταρα HT-29 για να αξιολογήσει την αποτελεσματικότητα και την ασφάλεια των θεραπειών με βακτηριοφάγους [5].
5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα HT-29
Αυτή η ενότητα θα παρουσιάσει μερικές αξιοσημείωτες δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα HT-29 που θα σας βοηθήσουν να σχεδιάσετε την ερευνητική σας μελέτη.
Η μελέτη αυτή πρότεινε το αιθανολικό εκχύλισμα Syzygium cumini ως πιθανό αντικαρκινικό παράγοντα κατά της κυτταρικής σειράς HT-29 του καρκίνου του παχέος εντέρου. Το εκχύλισμα ανέστειλε σημαντικά την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων.
Αυτή η δημοσίευση στο Bioscience Reports εξέτασε την αντικαρκινική δράση μιας ένωσης, της τετραδρίνης, στα κύτταρα HT-29. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι η τετραδρίνη αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό και την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων μέσω της ρύθμισης των οδών κυτταρικής σηματοδότησης.
Αυτή η μελέτη πρότεινε ότι το miRNA-193a-5p μπορεί ενδεχομένως να ρυθμίζει τη μετάσταση των κυττάρων HT-29 μέσω της ρύθμισης γονιδίων που σχετίζονται με τη μετάσταση.
Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο Nature Scientific Reports το 2018. Η μελέτη αυτή χρησιμοποίησε την ογκογόνο κυτταρική σειρά HT-29 ως εντερικό κυτταρικό μοντέλο για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της προτεινόμενης θεραπείας με βακτηριοφάγους.
Σε αυτή τη μελέτη, οι ερευνητές χρησιμοποίησαν κύτταρα HT-29 για να διερευνήσουν τις προβιοτικές δραστηριότητες των γαλακτοβακτηρίων. Είναι ενδιαφέρον ότι η μελέτη έδειξε ότι τα γαλακτοβακτήρια εμποδίζουν την προσκόλληση παθογόνων βακτηρίων στα κύτταρα του παχέος εντέρου.
Κύτταρα HT-29 Πόροι: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Αυτή η ενότητα θα καλύψει ορισμένους διαδικτυακούς πόρους που είναι διαθέσιμοι για τα κύτταρα HT-29 και θα σας βοηθήσουν να μάθετε τα πρωτόκολλα συντήρησης, καλλιέργειας και μεταμόλυνσης.
Πρωτόκολλα κυτταρικής καλλιέργειας
Οι παρακάτω πηγές θα σας καθοδηγήσουν σχετικά με την υποκαλλιέργεια των κυττάρων HT-29.
- Καλλιέργεια κυττάρων HT-29: Αυτός ο σύνδεσμος παρέχει βασικές γνώσεις σχετικά με το μέσο ανάπτυξης, την απόψυξη και την υποκαλλιέργεια των κυττάρων HT-29.
- Συντήρηση καλλιεργειών HT-29: Αυτό το άρθρο περιέχει όλες τις χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια και τη συντήρηση των κυττάρων HT-29.
Πρωτόκολλα μεταμόλυνσης
Η κυτταρική σειρά HT-29 έχει μεγάλη αποτελεσματικότητα μεταμόλυνσης και χρησιμοποιείται συχνά σε μελέτες γονιδιακής έκφρασης. Οι παρακάτω πηγές περιγράφουν τα πιθανά πρωτόκολλα μεταμόλυνσης για αυτά τα κύτταρα.
- Μεταφορά γονιδίου σε HT-29: Αυτός ο σύνδεσμος περιέχει το λεπτομερές πρωτόκολλο για τη μεταφορά γονιδίου σε κύτταρα HT-29.
- Μεταφορά της κυτταρικής σειράς HT-29: Αυτό το έγγραφο περιγράφει το πρωτόκολλο μεταφοράς της κυτταρικής σειράς HT-29 με πλασμιδιακό DNA.
Βίντεο σχετικά με τη κυτταρική σειρά HT-29
Ακολουθούν μερικά βίντεο σχετικά με την καλλιέργεια και τη συντήρηση αυτής της ογκογόνου κυτταρικής σειράς.
- Μεταμόσχευση κυττάρων: Αυτό το βίντεο παρουσιάζει το πρωτόκολλο μεταμόσχευσης κυττάρων για προσκολλητικές κυτταρικές σειρές.
- Μεταφορά γονιδίων σε κύτταρα HT-29: Αυτό το βίντεο θα σας καθοδηγήσει σχετικά με τη μέθοδο μεταφοράς γονιδίων που χρησιμοποιείται για τα κύτταρα HT-29.
Ελπίζουμε ότι οι πληροφορίες σε αυτό το άρθρο είναι χρήσιμες και επαρκείς για να χειριστείτε τη διαχείριση και τη συντήρηση της κυτταρικής σειράς HT-29. Εάν σκοπεύετε να χρησιμοποιήσετε κύτταρα HT-29 στη μελέτη σας, παραγγείλετε από εμάς.
Αναφορές
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, και I. Recio, κυτταρική σειρά HT29. Η επίδραση των βιοδραστικών ουσιών των τροφίμων στην υγεία: μοντέλα in vitro και ex vivo, 2015: σ. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., το microRNA‐193a‐5p αναστέλλει τη μετανάστευση των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων του παχέος εντέρου HT‐29 μέσω της καταστολής της οδού μετάστασης. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): σ. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, και R. Safaralizadeh, Αξιολόγηση της αντικαρκινικής δράσης του αιθανολικού εκχυλίσματος Syzygium cumini στην κυτταρική σειρά HT-29 του παχέος εντέρου. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: σ. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., Προβιοτικές ιδιότητες των γαλακτοβακίλλων και η ικανότητά τους να αναστέλλουν την προσκόλληση εντεροπαθογόνων βακτηρίων στα κύτταρα Caco-2 και HT-29. Προβιοτικά και αντιμικροβιακές πρωτεΐνες, 2021. 13: σ. 102-112.
- Shan, J., et al., Οι βακτηριοφάγοι είναι πιο λοιμογόνοι για τα βακτήρια με ανθρώπινα κύτταρα απ' ό,τι σε βακτηριακή καλλιέργεια· συμπεράσματα από κύτταρα HT-29. Επιστημονικές εκθέσεις, 2018. 8(1): σ. 5091.
