Κύτταρα BV2 - Η έρευνα του Κεντρικού Νευρικού Συστήματος εξηγείται με κύτταρα μικρογλοίας BV2

Το BV2 είναι μια σειρά μικρογλοιακών κυττάρων ποντικού που χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα των νευροεπιστημών. Αυτή η αθάνατη κυτταρική σειρά μπορεί να χρησιμεύσει ως in vitro μοντέλο για τη μελέτη νευροεκφυλιστικών ασθενειών και συναφών κυτταρικών συνθηκών και διαδικασιών, δηλαδή της νευροφλεγμονής. Εκτός αυτού, τα κύτταρα BV2 θεωρούνται εναλλακτικό σύστημα μοντέλου για την πρωτογενή μικρογλοία.

Στο παρόν άρθρο θα συζητηθούν η προέλευση, οι πληροφορίες για την κυτταροκαλλιέργεια και οι ερευνητικές εφαρμογές μιας κυτταρικής σειράς μικρογλοιακών κυττάρων ποντικού, της BV2. Ειδικότερα, θα εξετάσουμε τα εξής:

Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων BV2
Κυτταρική σειρά BV2: Πληροφορίες καλλιέργειας
Πλεονεκτήματα και περιορισμοί των κυττάρων BV2
Εφαρμογές της κυτταρικής σειράς BV2 στην έρευνα
Κύτταρα BV2: BV2: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
Πόροι για την κυτταρική σειρά BV2: Βίντεο και άλλα

1. Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά των κυττάρων BV2

Αυτή η ενότητα του άρθρου εξηγεί την προέλευση της κυτταρικής σειράς BV2 και τα γενικά χαρακτηριστικά που τη διακρίνουν από άλλες σειρές μικρογλοιακών κυττάρων. Στο πλαίσιο αυτό, θα μελετήσετε: Τι είναι τα κύτταρα BV2 Από πού προέρχονται τα κύτταρα BV2 Ποιο είναι το μέγεθος ενός κυττάρου BV2

Η μικρογλοιακή κυτταρική σειρά BV2 ελήφθη από τα μικρογλοία νεογνών (νεογέννητων) C57/BL6 Η κυτταρική σειρά αθανατίστηκε με μόλυνση των κυττάρων με ρετροϊό J2 που φέρει το ογκογονίδιο v-raf/v-myc [1].
Τα μη διεγερμένα κύτταρα BV2 διαθέτουν μορφολογία που μοιάζει με αμοιβάδα, υπερτροφική. Αυτή η μορφολογία παρουσιάζει μια ιδιαίτερα ενεργοποιημένη και φλεγμονώδη κατάσταση των κυττάρων BV2 σε σύγκριση με την πρωτογενή μικρογλοία [2].
Η διάμετρος που αναφέρεται για την κυτταρική σειρά BV-2 κυμαίνεται μεταξύ 10 και 15 μm.

Κυτταρική σειρά BV2 Vs ECO 2

Και οι δύο είναι κυτταρικές σειρές μικρογλοιακών κυττάρων ποντικιών, αλλά διαφέρουν μεταξύ τους. Η κύρια διαφορά είναι ότι η BV2 αθανατίστηκε με γενετικό χειρισμό, ενώ η ECO 2 αθανατίστηκε αυθόρμητα. Επιπλέον, η ECO 2 διαθέτει τα ίδια γενικά χαρακτηριστικά με την BV2, αλλά για την καλλιέργειά της απαιτείται η προσθήκη του παράγοντα διέγερσης αποικιών-1 (CSF-1).

Κινούμενα σχέδια μέσα από ένα πολύχρωμο δίκτυο νευρικών κυττάρων με ώσεις.

2.κυτταρική σειρά BV2: Πληροφορίες καλλιέργειας

Πριν από το χειρισμό και τη διατήρηση μιας καλλιέργειας κυτταρικής γραμμής, οι πληροφορίες για την καλλιέργεια των κυττάρων είναι ζωτικής σημασίας. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα σας βοηθήσει να γνωρίζετε όλα τα βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυτταρικών σειρών BV2. Ειδικότερα, θα μιλήσουμε για τα ακόλουθα: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της BV2 Ποιο μέσο χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια κυττάρων BV2 Είναι η κυτταρική σειρά BV2 προσκολλημένη ή εναιώρημα Πώς γίνεται η απόψυξη των κυττάρων BV2

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων BV2

Χρόνος διπλασιασμού:	Τα μικρογλοιακά κύτταρα BV2 αναπτύσσονται πολύ γρήγορα, με μέσο χρόνο διπλασιασμού BV2 34,5 ώρες.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:	Το BV2 είναι μια προσκολλημένη κυτταρική σειρά.
Αναλογία διαχωρισμού:	Αυτή η προσκολλημένη σειρά μικρογλοιακών κυττάρων υποκαλλιεργείται σε αναλογία διαχωρισμού 1:2 έως 1:4. Τα κύτταρα πλένονται με PBS και επωάζονται με Accutase (διάλυμα διαχωρισμού). Μετά από 10 λεπτά, φυγοκεντρίζονται και συλλέγονται. Τα κύτταρα αυτά προστίθενται στη συνέχεια σε φιάλες με φρέσκο μέσο ανάπτυξης σύμφωνα με τη συνιστώμενη αναλογία διαχωρισμού.
Μέσο ανάπτυξης:	Το μέσο RPMI 1640 χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς BV2. Το BV2 RPMI συμπληρώνεται με 10% FBS, 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, 2,0 g/L NaHCO3 για ιδανική ανάπτυξη των κυττάρων. Το μέσο ανανεώνεται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:	Οι καλλιέργειες BV2 διατηρούνται σε επωαστικό κλίβανο με υγρασία 37°C και συνεχή παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:	Τα κατεψυγμένα φιαλίδια κυττάρων BV2 διατηρούνται κάτω από τη θερμοκρασία των -150 °C είτε σε φάση ατμών υγρού αζώτου είτε σε ηλεκτρικό καταψύκτη.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:	Συνιστώνται τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF για τις κυτταρικές σειρές BV2. Η κατάψυξη των κυττάρων γίνεται με αργή διαδικασία κατάψυξης που επιτρέπει πτώση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό, ώστε να διατηρείται η βιωσιμότητα των κυττάρων.
Διαδικασία απόψυξης:	Το κατεψυγμένο φιαλίδιο κυττάρων BV2 αναδεύεται ταχέως σε υδατόλουτρο (37°C) για 40 έως 60 δευτερόλεπτα έως ότου απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Τα αποψυγμένα κύτταρα προστίθενται με φρέσκο μέσο ανάπτυξης και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Τα συλλεχθέντα κύτταρα ανασυσσωματώνονται και πάλι και χύνεται σε φιάλη καλλιέργειας για ανάπτυξη.
Επίπεδο βιοασφάλειας:	Συνιστάται το επίπεδο βιοασφάλειας 1 για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς BV2.

Μικρογλοιακά κύτταρα BV2 στο μικροσκόπιο σε μεγέθυνση 40x και 20x.

3.πλεονεκτήματα & περιορισμοί των κυττάρων BV2

Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, τα κύτταρα BV2 συνδέονται επίσης με ορισμένα πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Μερικά από αυτά αναφέρονται εδώ.

Πλεονεκτήματα

Τα πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς BV2 περιλαμβάνουν:

Πρωτογενή χαρακτηριστικά που μοιάζουν με μικρογλοία

Τα κύτταρα BV2 διαθέτουν ορισμένα πρωτογενή χαρακτηριστικά που μοιάζουν με τη μικρογλοία και χρησιμοποιούνται ως εναλλακτικό μοντέλο για τη μελέτη των λειτουργιών και των αποκρίσεων των μικρογλοίων. Εκφράζουν τα F4/80, CD11b και Iba1, τα οποία αποτελούν βασικούς βιοδείκτες της πρωτογενούς μικρογλοίας.

Αθανατοποίηση

Τα κύτταρα BV2 είναι αθάνατα, επιτρέποντάς τους να υποβάλλονται σε συνεχή ανάπτυξη. Αυτό το χαρακτηριστικό τα καθιστά ιδανικά για πειράματα κυτταροκαλλιέργειας μακράς διάρκειας.

Περιορισμοί

Οι περιορισμοί που σχετίζονται με τα κύτταρα BV2 είναι οι εξής:

Κυτταρική σειρά προέλευσης ποντικού

Η κυτταρική σειρά BV2 προέρχεται από μικρογλοία ποντικού. Τα ερευνητικά ευρήματα που χρησιμοποιούν κύτταρα BV2 ενδέχεται να έχουν περιορισμένη εφαρμογή σε ειδικές για τον άνθρωπο ασθένειες και έρευνες.

Μοντέλο in vitro

Τα κύτταρα BV2 χρησιμεύουν ως in vitro μοντέλο για τη μελέτη των μικρογλοιακών λειτουργιών. Ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι ενδέχεται να μην αναπαράγουν πλήρως τα χαρακτηριστικά και την πολυπλοκότητα των μικρογλοιακών κυττάρων στον εγκέφαλο in vivo.

4.εφαρμογές της κυτταρικής σειράς BV2 στην έρευνα

Η κυτταρική σειρά BV2 προσφέρει διάφορες εφαρμογές στην έρευνα των νευροεπιστημών. Στην παρούσα ενότητα αναφέρονται ορισμένες συνήθεις ερευνητικές χρήσεις των κυττάρων BV2.

Έρευνα νευροεκφυλιστικών ασθενειών: Η κυτταρική σειρά μικρογλοιακών κυττάρων ποντικού, BV2 είναι ένα πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο για τη μελέτη νευροεκφυλιστικών ασθενειών, όπως η νόσος του Πάρκινσον, η νόσος του Αλτσχάιμερ και η σκλήρυνση κατά πλάκας. Οι ερευνητές έχουν μελετήσει τη νευροτοξικότητα και την παθολογία της νόσου και έχουν αξιολογήσει θεραπευτικούς παράγοντες χρησιμοποιώντας κυτταρικές σειρές BV2. Όπως, μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 αξιολόγησε την αντιφλεγμονώδη και νευροπροστατευτική δράση μιας φυσικής υδροξυστυλβίνης, της ραποντικίνης, που υπάρχει στο φυτό Rheum rhaponticum, χρησιμοποιώντας ενεργοποιημένα με λιποπολυσακχαρίτη κύτταρα BV2 ως μοντέλο της νόσου του Πάρκινσον. Η ένωση αμβλύνει την ενεργοποίηση των BV2 με τη μεσολάβηση λιποπολυσακχαρίτη (LPS) αναστέλλοντας τη συνθάση του μονοξειδίου του αζώτου και μειώνοντας τα δραστικά είδη οξυγόνου και τους προφλεγμονώδεις μεσολαβητές. Εν συντομία, η ραποντικίνη ασκεί αντιφλεγμονώδη και νευροπροστατευτικά αποτελέσματα στο μοντέλο μικρογλοίων που προκαλείται από LPS (BV2) [3]. Ομοίως, μια μελέτη διερεύνησε τη συμμετοχή των σηματοδοτικών μονοπατιών στη νευροφλεγμονή. Οι ερευνητές ανέπτυξαν ένα μοντέλο φλεγμονής μέσω της ενεργοποίησης του BV2 με τη μεσολάβηση λιποπολυσακχαρίτη. Διαπίστωσαν ότι ο άξονας σηματοδότησης AKT/Nrf-2/HO-1-NF-κB εμπλέκεται στη νευροφλεγμονή. Εκτός αυτού, αξιολόγησαν επίσης τη β-ναφθοφλαβόνη (BNF), ένα φυσικό φλαβονοειδές, για τις αντιφλεγμονώδεις και νευροπροστατευτικές επιδράσεις της με τη χρήση αυτού του μοντέλου. Η ένωση άσκησε αυτές τις θεραπευτικές επιδράσεις αναστέλλοντας την ενεργοποίηση του BV2 [4]. Ομοίως, η έρευνα χρησιμοποίησε κύτταρα BV2 και μελέτησε τη βελτιωτική επίδραση του φαρμάκου zonisamide στη μιτοχονδριακή δυσλειτουργία σε μικρογλοιακά κύτταρα. Τα ευρήματα αυτής της μελέτης υποστηρίζουν την κλινική χρήση της ζονισαμίδης για τη θεραπεία της νόσου του Πάρκινσον [5].

650,00 €*

Περιεχόμενο: 1.5 milliliter

Τιμές χωρίς φόρους συν έξοδα αποστολής

cryovial

Αριθμός προϊόντος: 305156

5.κύτταρα BV2: BV2: Ερευνητικές δημοσιεύσεις

Ακολουθούν ορισμένες ενδιαφέρουσες και πιο αναφερόμενες ερευνητικές μελέτες που περιλαμβάνουν κύτταρα BV2.

Τα μιτοχονδριακά λυσάρια προκαλούν φλεγμονή και αλλαγές σχετικές με τη νόσο Alzheimer σε μικρογλοιακά και νευρωνικά κύτταρα

Αυτή η έρευνα δημοσιεύεται στο Journal of Alzheimer's Disease (2015). Η μελέτη πρότεινε ότι το μόριο mtDNA που προέρχεται από μιτοχονδριακή βλάβη DAMP (damage-associated molecular pattern) μπορεί να προκαλέσει φλεγμονώδεις αλλαγές σε μικρογλοιακά κύτταρα (BV2). Έτσι, μπορεί επίσης να συμβάλλουν στη νευροφλεγμονή της νόσου Alzheimer.

Η θεραπευτική επίδραση του αφεψήματος huanglian jiedu στη νόσο Alzheimer μέσω της ρύθμισης της φαγοκυττάρωσης που προκαλείται από το αβ στα μικρογλοιακά κύτταρα bv-2

Αυτό το άρθρο που δημοσιεύθηκε στο FARMACIA (2021) χρησιμοποίησε κύτταρα BV2 και προσδιόρισε τη θεραπευτική επίδραση του αφέψημα Huanglian Jiedu (HLJDD) στη νόσο Alzheimer. Η μελέτη διαπίστωσε ότι το HLJDD προάγει τη φαγοκυττάρωση του αμυλοειδούς βήτα των BV2 μέσω της ανύψωσης της έκφρασης της πρωτεΐνης Trm2, όπως επικυρώθηκε μέσω της ανάλυσης Western Blot των BV2.

Η α-συνουκλεΐνη ενεργοποιεί τη μικρογλοία BV2 ανάλογα με την κατάσταση συσσωμάτωσής της

Αυτό το ερευνητικό άρθρο που δημοσιεύθηκε στην επιθεώρηση Biochemical and Biophysical Research Communications (2016) πρότεινε ότι η α-συνουκλεΐνη, μια διαλυτή πρωτεΐνη στο κεντρικό νευρικό σύστημα των ενηλίκων, μπορεί να ενεργοποιήσει τα κύτταρα BV2 ανάλογα με την κατάσταση συσσωμάτωσής τους.

Εξωσώματα των κυττάρων BV-2 που επάγονται από την α-συνουκλεΐνη: σημαντικός μεσολαβητής της νευροεκφύλισης στην ΠΝΠ

Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε στο Neuroscience Letters το 2013. Η μελέτη αυτή αναφέρει ότι τα εξωσώματα που εκκρίνονται από μικρογλοιακά κύτταρα BV2 που ενεργοποιούνται από την α-συνουκλεΐνη μπορούν να αποτελέσουν ουσιαστικούς μεσολαβητές της νευροεκφύλισης στη νόσο του Πάρκινσον.

Η ιδεβενόνη ανακουφίζει τη νευροφλεγμονή και διαμορφώνει την πόλωση των μικρογλοίων σε διεγερμένα με LPS κύτταρα BV2 και σε ποντίκια που πάσχουν από τη νόσο του Πάρκινσον λόγω MPTP

Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο Frontiers Cellular Neuroscience (2019). Πρότεινε ότι η ιδεβενόνη, ένα αντιοξειδωτικό, διαμορφώνει την πόλωση των μικρογλοίων και μειώνει τη φλεγμονή σε ενεργοποιημένα με λιποπολυσακχαρίτη κύτταρα BV2 και στο μοντέλο ποντικιών με νόσο του Πάρκινσον που προκαλείται από 1-μεθυλ-4-φαινυλ-1,2,3,6-τετραϋδροπυριδίνη (MPTP).

6.πόροι για την κυτταρική σειρά BV2: BV2: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Οι διαθέσιμοι διαδικτυακοί πόροι για την BV2 είναι περιορισμένοι. Ακολουθούν ορισμένοι από αυτούς.

Υποκαλλιέργεια της κυτταρικής σειράς BV2: Αυτός ο σύνδεσμος του ιστότοπου αποτελείται από ένα σύντομο πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια των κυτταρικών σειρών BV2.
Απόψυξη κατεψυγμένων κυττάρων: Αυτό το βίντεο σας βοηθά να μάθετε το βασικό πρωτόκολλο απόψυξης και καλλιέργειας κατεψυγμένων κυττάρων.

Το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων για κύτταρα BV2 αναφέρεται εδώ.

Καλλιέργεια κυττάρων BV2: Αυτός ο σύνδεσμος στον ιστότοπο περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων BV2. Επιπλέον, παρέχει επίσης μέσα καλλιέργειας κυττάρων και συνθέσεις μέσων κατάψυξης για την κυτταρική σειρά BV2.

Αναφορές

Wang, Y., Y. Peng, και H. Yan, Σχόλιο: Neuroinflammatory In Vitro Cell Culture Models and the Potential Applications for Neurological Disorders. Front Pharmacol, 2021. 12: p. 792614.
Sarkar, S., et al., Characterization and comparative analysis of a new mouse microglial cell model for studying neuroinflammatory mechanisms during neurotoxic insults. Neurotoxicology, 2018. 67: p. 129-140.
Zhao, F., et al., Νευροπροστατευτική δράση της ραποντικίνης έναντι της νόσου του Πάρκινσον: Insights from in vitro BV-2 model and in vivo MPTP-induced mice model. Journal of Biochemical and Molecular Toxicology, 2021. 35(1): p. e22631.
Gao, X., et al., Η β-ναφθοφλαβόνη αναστέλλει τη φλεγμονή που προκαλείται από LPS σε κύτταρα BV-2 μέσω του άξονα σηματοδότησης AKT/Nrf-2/HO-1-NF-κB. Immunobiology, 2020. 225(4): p. 151965.
Tada, S., et al., Zonisamide Ameliorates Microglial Mitochondriopathy in Parkinson's Disease Models. Επιστήμες του εγκεφάλου, 2022. 12(2): p. 268.