Πηγαίνετε στην αρχική σελίδα

Κύτταρα B16 - Βασικός οδηγός για τα κύτταρα μελανώματος B16 στην ογκολογική έρευνα

Το B16 είναι μια κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος (μελανώματος) ποντικού προέλευσης. Αυτή η κυτταρική σειρά αποτελεί ένα αποτελεσματικό in vitro μοντέλο για τη μελέτη των καρκίνων του ανθρώπινου δέρματος. Χρησιμοποιείται συχνά για τη διερεύνηση του σχηματισμού συμπαγών όγκων και της μετάστασης καρκινικών κυττάρων.

📋 Κυτταρική σειρά B16 — Σύντομα στοιχεία
Μέσο ανάπτυξης
Τα κύτταρα B16 καλλιεργούνται σε μέσο EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) που περιέχει 10 % εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS). Το μέσο ανάπτυξης πρέπει να ανανεώνεται 2-3 φορές την εβδομάδα.
Χρόνος διπλασιασμού
Ο μέσος χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού των κυττάρων B16 εκτιμάται σε 24 ώρες.
Τύπος ανάπτυξης
Τα κύτταρα B16 είναι προσκολλητικά και αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες.
Επίπεδο βιοασφάλειας
BSL-1
Διαθέσιμο από
Cytion — Παραγγελία B16

Αυτό το άρθρο θα σας βοηθήσει να κατανοήσετε τα βασικά στοιχεία της κυτταρικής σειράς μελανώματος B16. Συγκεκριμένα, θα εξετάσει τα εξής:

Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση της κυτταρικής σειράς B16

Αυτό το τμήμα του άρθρου θα καλύψει τα χαρακτηριστικά γνωρίσματα της κυτταρικής σειράς μελανώματος B16. Θα μάθετε τις απαντήσεις στις ακόλουθες συχνές ερωτήσεις. Όπως: Τι είναι η κυτταρική σειρά καρκίνου B16; Από πού προέρχονται τα κύτταρα B16; Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων B16;

  • Η κυτταρική σειρά B16 δημιουργήθηκε το 1954. Αυτά τα κύτταρα προήλθαν από ποντίκια C57BL/6J που ανέπτυξαν αυθόρμητα όγκο στο δέρμα στα εργαστήρια Jackson Laboratories στο Μέιν.
  • Πρόκειται για επιθηλιακά κύτταρα που παράγουν μελανίνη και έχουν την ικανότητα να μετασταθούν στον σπλήνα, το ήπαρ και τους πνεύμονες.
  • Τα κύτταρα μελανώματος B16 αναπτύσσονται ως μονοστρωματικά και παρουσιάζουν επιθηλιακή και σπειροειδή κυτταρική μορφολογία.
  • Το μέγεθος της κυτταρικής σειράς B16 είναι περίπου 15,4 μm.
  • Υπάρχουν διακριτοί υποκλώνοι κυττάρων B16, συμπεριλαμβανομένων των B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 και B16F10. Αυτές οι υποσειρές διαφέρουν από τα γονικά κύτταρα B16 και διατηρούν ορισμένα συγκεκριμένα χαρακτηριστικά. Για παράδειγμα, παρουσιάζουν διαφορές στη μορφολογία, το μέγεθος των κυττάρων και άλλες ιδιότητες. Το B16F10 έχει υψηλή ικανότητα πνευμονικής μετάστασης, ενώ το B164A5 είναι η πιο επιθετική κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος σε σύγκριση με τα B16F10, B16-GMCSF και B16FLT3 [1].

Τρισδιάστατη απεικόνιση κοντινού πλάνου ενός καρκίνου του δέρματος σε εξέλιξη, όπως το κακοήθες μελάνωμα, ο οποίος προκαλεί φλεγμονή στον περιβάλλοντα ιστό.

Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς B16

Πριν από τη διατήρηση ή την καλλιέργεια μιας κυτταρικής σειράς, ίσως αναζητήσετε βασικές πληροφορίες σχετικά με τον χρόνο διπλασιασμού, τον τύπο των κυττάρων, τα μέσα ανάπτυξης, τις συνθήκες καλλιέργειας κ.λπ. Αυτή η ενότητα περιέχει όλες τις απαραίτητες πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων B16.

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων B16

Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού:

Ο μέσος χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού για τα κύτταρα B16 εκτιμάται σε 24 ώρες.

Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:

Τα κύτταρα B16 είναι προσκολλημένα και αναπτύσσονται σε μονοστρωματικές καλλιέργειες.

Πυκνότητα σποράς:

Συνιστάται η σπορά των κυττάρων B16 σε πυκνότητα 1 έως 2 x 104 κύτταρα/cm2. Τα προσκολλημένα κύτταρα B16 ξεπλένονται με 1 x PBS και αποσυνδέονται από την επιφάνεια χρησιμοποιώντας διάλυμα Accutase. Τα κύτταρα φυγοκεντρώνονται και το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται στο μέσο ανάπτυξης. Στη συνέχεια, αυτά τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη για ανάπτυξη.

Μέσο ανάπτυξης:

Τα κύτταρα B16 καλλιεργούνται σε μέσο EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) που περιέχει 10 % εμβρυϊκό βόειο ορό (FBS). Το μέσο ανάπτυξης πρέπει να ανανεώνεται 2-3 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς B16 χρησιμοποιείται υγραντικός επωαστήρας με παροχή 5 % CO2 και θερμοκρασία 37 °C.

Αποθήκευση:

Αυτά τα κύτταρα αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C ή στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Χρησιμοποιείται μέσο κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF για την κατάψυξη των κυττάρων B16 με τη χρήση μιας διαδικασίας αργής κατάψυξης.

Διαδικασία απόψυξης:

Τα κατεψυγμένα κύτταρα B16 αποψύχονται στους 37 °C σε υδατόλουτρο που περιέχει αντιμικροβιακό παράγοντα. Τα αποψυγμένα κύτταρα μπορούν να καλλιεργηθούν άμεσα, τοποθετώντας τα σε φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης. Επιπλέον, αυτά τα κύτταρα μπορούν να φυγοκεντρηθούν για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης και στη συνέχεια να καλλιεργηθούν σε νέο μέσο.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Η κυτταρική σειρά B16 πρέπει να χειρίζεται ή να διατηρείται σε εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1.

B16 cells

Ημι-συγκεντρωμένο στρώμα κυττάρων μελανώματος B16 υπό μεγέθυνση 10x και 20x.

Κυτταρική σειρά B16: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα

Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, η B16 διαθέτει ένα μοναδικό συνδυασμό πλεονεκτημάτων και μειονεκτημάτων. Σε αυτή την ενότητα παρατίθενται ορισμένα σημαντικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα αυτής της κυτταρικής σειράς μελανώματος.

Πλεονεκτήματα

Η B16 είναι το πρώτο αποτελεσματικό εργαλείο ποντικών που χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τις μεταστάσεις, λόγω των πλεονεκτημάτων που προσφέρει. Μερικά πλεονεκτήματα αυτής της κυτταρικής σειράς καρκίνου του δέρματος είναι:

Εύκολη καλλιέργεια

Η κυτταρική σειρά B16 είναι εύκολη στην καλλιέργεια σε ερευνητικά εργαστήρια. Χρησιμοποιείται ευρέως για τη μελέτη της βιολογίας των καρκινικών κυττάρων, των οδών σηματοδότησης και άλλων.

Ταχεία ανάπτυξη

Η κυτταρική σειρά μελανώματος B16 παρουσιάζει υψηλό ρυθμό πολλαπλασιασμού, γεγονός που την καθιστά κατάλληλη για τη μελέτη της κυτταρικής διαίρεσης και των διαδικασιών ανάπτυξης.

Ογκογένεση

Η B16 είναι μια ογκογόνος κυτταρική σειρά με ιδιότητες παρόμοιες με αυτές των όγκων, όπως εισβολή, μετανάστευση και πολλαπλασιασμός. Είναι πολύτιμη για τη μελέτη του σχηματισμού, της εξέλιξης και της μετάστασης των όγκων.

 

Μειονεκτήματα

Τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με τη κυτταρική σειρά B16 είναι:

Έλλειψη σχετικότητας με τον άνθρωπο

Δεδομένου ότι η B16 είναι μια κυτταρική σειρά μελανώματος ποντικού, ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύει με ακρίβεια τη βιολογία του καρκίνου του δέρματος στον άνθρωπο, περιορίζοντας τη μεταφραστικότητα των ερευνητικών ευρημάτων.

Ετερογένεια

Τα κύτταρα B16 είναι ετερογενή, παρουσιάζοντας ποικίλες γενετικές και φαινοτυπικές ιδιότητες εντός της ίδιας καλλιέργειας. Αυτό μπορεί να επηρεάσει την αξιοπιστία και την αναπαραγωγιμότητα των αποτελεσμάτων.

 

Εφαρμογές των κυττάρων B16

Η κυτταρική σειρά B16 χρησιμοποιείται ευρέως σε ερευνητικές μελέτες. Μερικές πολλά υποσχόμενες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς είναι:

  • Βιολογία όγκων: Αυτή η κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος ποντικού είναι ογκογόνος και χρησιμοποιείται ευρέως για την κατανόηση της βιολογίας των όγκων. Έχουν διεξαχθεί αρκετές μελέτες για τη διερεύνηση των κυτταρικών μηχανισμών που κρύβονται πίσω από την ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό και τη μετάσταση των καρκινικών κυττάρων με τη χρήση κυττάρων B16. Μια ερευνητική μελέτη που διεξήχθη το 2020 χρησιμοποίησε κύτταρα B16 για να διερευνήσει τον ρόλο του μακρού μη κωδικοποιημένου RNA, LncRNA MEG3, στη δημιουργία, την ανάπτυξη και τη μετάσταση του μελανώματος. Η έρευνα αυτή διαπίστωσε ότι το μη κωδικοποιητικό RNA ρυθμίζει τον άξονα miRNA-21/E-Cadherin για να διεγείρει αυτά τα κυτταρικά γεγονότα [2]. Ομοίως, διεξήχθη έρευνα για τη διερεύνηση του πιθανού ρόλου της σηματοδότησης Notch1 στην επαγόμενη από τον όγκο ανοσοκαταστολή χρησιμοποιώντας κύτταρα B16 [3].
  • Ανακάλυψη φαρμάκων: Τα κύτταρα B16 χρησιμοποιούνται για την επικύρωση και τη δοκιμή των πιθανών θεραπευτικών αποτελεσμάτων υποψήφιων φαρμάκων. Μια μελέτη αξιολόγησε την αντικαρκινική δράση του νεογαμβογικού οξέος, μιας φυσικής ένωσης, χρησιμοποιώντας μια κυτταρική σειρά B16. Τα αποτελέσματα της μελέτης αποκάλυψαν ότι αυτή η ένωση ρυθμίζει την οδό σηματοδότησης PI3K/Akt/mTOR για να προκαλέσει τον θάνατο των καρκινικών κυττάρων [4]. Μια άλλη μελέτη διερεύνησε την αντικαρκινική δράση της γινσενοσίδης Rg3, μιας σαπωνίνης, χρησιμοποιώντας τη σειρά κυττάρων B16. Η έρευνα πρότεινε ότι αυτή η φυσική ένωση προκάλεσε αντικαρκινική δράση μέσω της καταστολής των οδών ERK και Akt [5].

 

5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις με θέμα τα κύτταρα B16

Ακολουθούν μερικές σημαντικές ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τη σειρά κυττάρων μελανώματος B16.

Το LncRNA MEG3 προάγει την ανάπτυξη, τη μετάσταση και τον σχηματισμό του μελανώματος μέσω της ρύθμισης του άξονα miR-21/E-cadherin

Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό Cancer Cell International (2020) πρότεινε ότι το μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA MEG3 ενισχύει τον σχηματισμό, την ανάπτυξη και τη μετάσταση των κυττάρων μελανώματος B16 μέσω της ρύθμισης του άξονα miRNA-21/E-Cadherin.

Ένα νέο παράγωγο ψωραλενίου, το MPFC, ενισχύει τη μελανογένεση μέσω της ενεργοποίησης των σηματοδοτικών οδών p38 MAPK και PKA στα κύτταρα B16

Αυτή η εργασία δημοσιεύθηκε στο International Journal of Molecular Medicine το 2018. Η μελέτη αυτή διερεύνησε τη μελανογενετική δράση και τους μηχανισμούς ενός παραγώγου ψωραλενίου, της 4-μεθυλ-6-φαινυλ-2H-φουρο[3,2-g]χρωμεν-2-όνης (MPFC), σε κύτταρα B16. Η μελέτη πρότεινε ότι αυτό το παράγωγο προάγει τη μελανογένεση διεγείροντας τη σηματοδότηση των κυττάρων PKA και p38 MAPK.

Η σηματοδότηση Notch1 σε κύτταρα μελανώματος προώθησε την επαγόμενη από τον όγκο ανοσοκαταστολή μέσω της ρύθμισης προς τα πάνω του TGF-β1

Αυτή η έρευνα δημοσιεύθηκε το 2018 στο Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Τα ευρήματα της μελέτης υποδηλώνουν ότι η ενεργοποίηση της σηματοδότησης Notch1 στα κύτταρα B16 μπορεί να εμποδίσει την αντικαρκινική ανοσία αυξάνοντας την έκφραση του γονιδίου TGF-β1.

Το νεογαμβογικό οξύ προκαλεί απόπτωση των κυττάρων μελανώματος B16 μέσω της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt/mTOR

Η μελέτη αυτή διεξήχθη από τον Chunlan Wu και τους συνεργάτες του το 2020 και δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Acta Biochimica Polonica. Η έρευνα αυτή αναφέρει ότι το νεογαμβογικό οξύ, μια φυσική ένωση, μπορεί να προκαλέσει τον θάνατο των κυττάρων μελανώματος B16 μέσω της ρύθμισης της σηματοδοτικής αλυσίδας PI3K/Akt/mTOR.

Ένα σύμπλοκο ιριδίου (III) ως ισχυρός αντικαρκινικός παράγοντας προκαλεί απόπτωση και αυτοφαγία στα κύτταρα B16 μέσω της αναστολής της οδού AKT/mTOR

Αυτή η ερευνητική εργασία δημοσιεύθηκε στο European Journal of Medicinal Chemistry το 2018. Σε αυτή τη μελέτη, οι ερευνητές διερεύνησαν την αντικαρκινική δράση μιας ένωσης, του συμπλόκου ιριδίου (III), χρησιμοποιώντας κύτταρα μελανώματος B16.

Η αιλανθόνη προκαλεί διακοπή του κυτταρικού κύκλου και απόπτωση σε κύτταρα μελανώματος B16 και A375

Η μελέτη αυτή πρότεινε ότι μια φυτική βιοδραστική ουσία, η αιλανθόνη, διαθέτει αντικαρκινικό δυναμικό, καθώς μπορεί να προκαλέσει απόπτωση και διακοπή του κυτταρικού κύκλου σε κύτταρα μελανώματος B16 και A375. Η εργασία αυτή δημοσιεύθηκε στο Biomolecules το 2019.

Πόροι για τη κυτταρική σειρά B16: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Υπάρχουν περιορισμένοι πόροι σχετικά με τη κυτταρική σειρά B16 που εξηγούν τα πρωτόκολλα καλλιέργειας και μεταμόλυνσης.

Ακολουθούν ορισμένα πρωτόκολλα κυτταροκαλλιέργειας για κύτταρα B16. 

  • Καλλιέργεια κυττάρων B16: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει όλες τις απαραίτητες πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων B16, συμπεριλαμβανομένων των μέσων ανάπτυξης, της υποκαλλιέργειας, της απόψυξης και της κατάψυξης των κυττάρων.

Αναφορές

  1. Danciu, C., et al., Συμπεριφορά τεσσάρων διαφορετικών υποσειρών κυττάρων μελανώματος ποντικού B 16: δέρμα C57 BL/6J. Διεθνές περιοδικό πειραματικής παθολογίας, 2015. 96(2): σ. 73-80.
  2. Wu, L., et al., Το LncRNA MEG3 προάγει την ανάπτυξη, τη μετάσταση και τον σχηματισμό μελανώματος μέσω της ρύθμισης του άξονα miR-21/E-cadherin. Cancer cell international, 2020. 20: σ. 1-14.
  3. Yang, Z., et al., Η σηματοδότηση Notch1 σε κύτταρα μελανώματος προώθησε την επαγόμενη από τον όγκο ανοσοκαταστολή μέσω της ρύθμισης προς τα πάνω του TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): σ. 1-13.
  4. Wu, C., et al., Το νεογαμβογικό οξύ προκαλεί απόπτωση των κυττάρων μελανώματος B16 μέσω της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): σ. 197-202.
  5. Meng, L., et al., Αντικαρκινική δράση της γινσενοσίδης Rg3 στο μελάνωμα μέσω της υπορύθμισης των οδών ERK και Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): σ. 2069-2079.

 

Εντοπίσαμε ότι βρίσκεστε σε διαφορετική χώρα ή χρησιμοποιείτε διαφορετική γλώσσα του προγράμματος περιήγησης από την τρέχουσα επιλεγμένη. Θα θέλατε να αποδεχτείτε τις προτεινόμενες ρυθμίσεις

Κλείστε το