Κύτταρα B16 - Θεμελιώδης οδηγός για τα κύτταρα μελανώματος B16 στην ογκολογική έρευνα

Το Β16 είναι η κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος (μελάνωμα) ποντικού προέλευσης. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ένα αποτελεσματικό in vitro μοντέλο για τη μελέτη των ανθρώπινων καρκίνων του δέρματος. Χρησιμοποιείται συχνά για τη διερεύνηση του σχηματισμού συμπαγών όγκων και της μετάστασης των καρκινικών κυττάρων.

Αυτό το άρθρο θα σας βοηθήσει να κατανοήσετε τα βασικά στοιχεία της κυτταρικής σειράς μελανώματος Β16. Συγκεκριμένα, θα εξετάσει τα εξής:

1.γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση της κυτταρικής σειράς B16

Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει τα χαρακτηριστικά γνωρίσματα της κυτταρικής σειράς μελανώματος Β16. Θα μάθετε τις απαντήσεις στις ακόλουθες συχνές ερωτήσεις. Όπως: Τι είναι η καρκινική κυτταρική σειρά B16 Από πού προέρχονται τα κύτταρα B16 Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων B16

Η κυτταρική σειρά B16 δημιουργήθηκε το 1954. Τα κύτταρα αυτά προήλθαν από ποντίκια C57BL/6J τα οποία εμφάνισαν αυθόρμητα όγκο στο δέρμα στα εργαστήρια Jackson στο Μέιν.
Πρόκειται για επιθηλιακά κύτταρα που παράγουν μελανίνη και έχουν την ικανότητα να κάνουν μεταστάσεις στον σπλήνα, το ήπαρ και τους πνεύμονες.
Τα κύτταρα του μελανώματος Β16 αναπτύσσονται ως μονοστρωματικά και παρουσιάζουν επιθηλιοειδή και ατρακτοειδή κυτταρική μορφολογία.
Το μέγεθος της κυτταρικής σειράς Β16 είναι περίπου 15,4 μm.
Υπάρχουν διακριτοί υποκλώνοι των κυττάρων B16, συμπεριλαμβανομένων των B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 και B16F10. Αυτές οι υποσειρές διαφέρουν από τα μητρικά κύτταρα B16 και διατηρούν ορισμένα ειδικά χαρακτηριστικά. Όπως, διαθέτουν διαφορά στη μορφολογία, το μέγεθος των κυττάρων και άλλες ιδιότητες. Η B16F10 έχει υψηλή μεταστατική ικανότητα στους πνεύμονες και η B164A5 είναι η πιο επιθετική κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος σε σύγκριση με τις B16F10, B16-GMCSF και B16FLT3 [1].

τρισδιάστατη κινούμενη εικόνα από κοντά ενός αναπτυσσόμενου καρκίνου του δέρματος, όπως το κακοήθες μελάνωμα, ο οποίος φλεγμαίνει τον περιβάλλοντα ιστό.

2.πληροφορίες καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς B16

Πριν από τη διατήρηση ή την καλλιέργεια μιας κυτταρικής σειράς, μπορεί να αναζητήσετε βασικές πληροφορίες σχετικά με το χρόνο διπλασιασμού, τον τύπο των κυττάρων, τα μέσα ανάπτυξης, τις συνθήκες καλλιέργειας κ.λπ. Εδώ αυτή η ενότητα περιέχει όλες τις απαραίτητες πληροφορίες για την καλλιέργεια των κυττάρων B16.

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων B16

Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού:	Ο μέσος χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού για τα κύτταρα B16 εκτιμάται σε 24 ώρες.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:	Τα κύτταρα B16 είναι προσκολλημένα και αναπτύσσονται σε μονοστρώματα.
Πυκνότητα σποράς:	B16 συνιστάται η σπορά σε πυκνότητα κυττάρων 1 έως 2 x¹⁰⁴ ^{κύτταρα/cm2}. Τα προσκολλημένα κύτταρα B16 ξεπλένονται με 1 x PBS και διαχωρίζονται από την επιφάνεια με τη χρήση διαλύματος Accutase. Τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται και το κυτταρικό σφαιρίδιο επαναιωρείται στο μέσο ανάπτυξης. Αργότερα τα κύτταρα αυτά διανέμονται σε νέα φιάλη για ανάπτυξη.
Μέσο ανάπτυξης:	Τα κύτταρα B16 καλλιεργούνται σε μέσο EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) που περιέχει 10 % εμβρυϊκό ορό βοοειδών (FBS). Το μέσο ανάπτυξης πρέπει να ανανεώνεται 2-3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:	Για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς B16 χρησιμοποιείται υγροποιημένος επωαστήρας με παροχή 5 %_CO2 και θερμοκρασία 37 °C.
Αποθήκευση:	Τα κύτταρα αυτά αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C ή σε φάση ατμών υγρού αζώτου για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:	Το μέσο κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF χρησιμοποιείται για την κατάψυξη των κυττάρων B16 χρησιμοποιώντας μια αργή διαδικασία κατάψυξης.
Διαδικασία απόψυξης:	Τα κατεψυγμένα κύτταρα B16 αποψύχονται στους 37 °C σε υδατόλουτρο που περιέχει αντιμικροβιακό παράγοντα. Τα αποψυγμένα κύτταρα μπορούν να καλλιεργηθούν απευθείας με τη διανομή τους σε φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης. Εκτός αυτού, τα κύτταρα αυτά μπορούν να φυγοκεντρηθούν για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης και στη συνέχεια να καλλιεργηθούν σε νέο μέσο.
Επίπεδο βιοασφάλειας:	Η κυτταρική σειρά B16 πρέπει να χειρίζεται ή να διατηρείται σε εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1.

Ημι-συγχυτικό στρώμα κυττάρων μελανώματος B16 σε μεγέθυνση 10x και 20x.

3. κυτταρική σειρά B16: Μ1616 : Πλεονεκτήματα & μειονεκτήματα

Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, η B16 διαθέτει ένα μοναδικό μείγμα πλεονεκτημάτων και μειονεκτημάτων. Ορισμένα σημαντικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα αυτής της κυτταρικής γραμμής μελανώματος παρατίθενται σε αυτή την ενότητα.

Πλεονεκτήματα

Η B16 είναι το πρώτο αποτελεσματικό εργαλείο ποντικού που χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα της μετάστασης λόγω των πλεονεκτημάτων που προσφέρει. Ορισμένα πλεονεκτήματα αυτής της κυτταρικής σειράς καρκίνου του δέρματος είναι τα εξής:

Εύκολη ανάπτυξη	Η κυτταρική σειρά B16 είναι εύκολο να καλλιεργηθεί στα ερευνητικά εργαστήρια. Χρησιμοποιείται ευρέως για τη μελέτη της βιολογίας των καρκινικών κυττάρων, των μονοπατιών σηματοδότησης και άλλα.
Γρήγορη ανάπτυξη	Η κυτταρική σειρά μελανώματος B16 παρουσιάζει υψηλό ρυθμό πολλαπλασιασμού, γεγονός που την καθιστά κατάλληλη για τη μελέτη των διαδικασιών κυτταρικής διαίρεσης και ανάπτυξης.
Ογκογονικότητα	Η B16 είναι μια καρκινογόνος κυτταρική σειρά με ιδιότητες που μοιάζουν με τους όγκους, όπως η εισβολή, η μετανάστευση και ο πολλαπλασιασμός. Είναι πολύτιμη για τη μελέτη του σχηματισμού, της εξέλιξης και της μετάστασης των όγκων.

Μειονεκτήματα

Τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με την κυτταρική σειρά B16 είναι τα εξής:

Έλλειψη ανθρώπινης συνάφειας	Λόγω του ότι η B16 είναι μια κυτταρική σειρά μελανώματος ποντικού μπορεί να μην αντιπροσωπεύει με ακρίβεια τη βιολογία του ανθρώπινου καρκίνου του δέρματος, περιορίζοντας τη μεταφρασιμότητα των ερευνητικών ευρημάτων.
Ετερογένεια	Τα κύτταρα B16 είναι ετερογενή, εμφανίζοντας ποικίλες γενετικές και φαινοτυπικές ιδιότητες εντός της ίδιας καλλιέργειας. Αυτό μπορεί να επηρεάσει την αξιοπιστία και την αναπαραγωγιμότητα των αποτελεσμάτων.

4. εφαρμογές των κυττάρων B16

Η κυτταρική σειρά B16 χρησιμοποιείται εκτενώς σε ερευνητικές μελέτες. Μερικές υποσχόμενες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς είναι οι εξής:

Βιολογία όγκων: Αυτή η κυτταρική σειρά καρκίνου του δέρματος ποντικού είναι καρκινογόνος και χρησιμοποιείται ευρέως για την κατανόηση της βιολογίας των όγκων. Έχουν διεξαχθεί αρκετές μελέτες για τη διερεύνηση των κυτταρικών μηχανισμών που βρίσκονται πίσω από την ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό και τη μετάσταση των καρκινικών κυττάρων με τη χρήση κυττάρων B16. Μια ερευνητική μελέτη που διεξήχθη το 2020 χρησιμοποίησε κύτταρα B16 για να διερευνήσει τον ρόλο του μακρού μη κωδικοποιητικού RNA, LncRNA MEG3, στον σχηματισμό, την ανάπτυξη και τη μετάσταση του μελανώματος. Αυτή η έρευνα διαπίστωσε ότι το μη κωδικοποιούμενο RNA διαμορφώνει τον άξονα miRNA-21/E-Cadherin για να διεγείρει αυτά τα κυτταρικά συμβάντα [2]. Παρόμοια, διεξήχθη έρευνα για τη διερεύνηση του πιθανού ρόλου της σηματοδότησης Notch1 στην ανοσοκαταστολή που προκαλείται από τον όγκο με τη χρήση κυττάρων B16 [3].
Ανακάλυψη φαρμάκων: Τα κύτταρα B16 χρησιμοποιούνται για την επικύρωση και τη δοκιμή των πιθανών θεραπευτικών επιδράσεων των υποψήφιων φαρμάκων. Μια μελέτη αξιολόγησε την αντικαρκινική δράση του νεογαμβογικού οξέος, μιας φυσικής ένωσης, χρησιμοποιώντας μια σειρά κυττάρων B16. Τα αποτελέσματα της μελέτης αποκάλυψαν ότι αυτή η ένωση διαμορφώνει το μονοπάτι σηματοδότησης PI3K/Akt/mTOR για να προκαλέσει το θάνατο των καρκινικών κυττάρων [4]. Μια άλλη μελέτη διερεύνησε την επίδραση κατά του μελανώματος της Ginsenoside Rg3, μιας σαπωνίνης, χρησιμοποιώντας την κυτταρική σειρά B16. Η έρευνα πρότεινε ότι αυτή η φυσική ένωση προκάλεσε αντικαρκινική δράση μέσω της μείωσης των μονοπατιών ERK και Akt [5].

430,00 €*

Περιεχόμενο: 1.5 milliliter

Τιμές χωρίς φόρους συν έξοδα αποστολής

cryovial

Αριθμός προϊόντος: 305154

5.ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα B16

Ακολουθούν ορισμένες σημαντικές ερευνητικές δημοσιεύσεις που περιλαμβάνουν την κυτταρική σειρά μελανώματος B16.

Το LncRNA MEG3 προάγει την ανάπτυξη, τη μετάσταση και το σχηματισμό μελανώματος μέσω της διαμόρφωσης του άξονα miR-21/E-cadherin

Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό Cancer Cell International (2020), πρότεινε ότι το μακρύ μη κωδικοποιούμενο RNA MEG3 ενισχύει τον σχηματισμό, την ανάπτυξη και τη μετάσταση των κυττάρων μελανώματος B16 μέσω της διαμόρφωσης του άξονα miRNA-21/E-Cadherin.

Ένα νέο παράγωγο της ψωραλένης-MPFC ενισχύει τη μελανογένεση μέσω της ενεργοποίησης των σηματοδοτικών μονοπατιών p38 MAPK και PKA στα κύτταρα B16

Η εργασία αυτή δημοσιεύθηκε στο International Journal of Molecular Medicine το 2018. Αυτή η μελέτη διερεύνησε τη μελανογενετική επίδραση και τους μηχανισμούς ενός παραγώγου του ψωραλενίου- 4-μεθυλ-6-φαινυλ-2H-φουρο[3,2-g] χρωμεν-2-όνη (MPFC) σε κύτταρα B16. Η μελέτη πρότεινε ότι το εν λόγω παράγωγο προάγει τη μελανογένεση μέσω της διέγερσης της κυτταρικής σηματοδότησης PKA και p38 MAPK.

Η σηματοδότηση Notch1 σε κύτταρα μελανώματος προώθησε την επαγόμενη από όγκο ανοσοκαταστολή μέσω της ρύθμισης του TGF-β1

Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε το 2018 στο Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Τα ευρήματα της μελέτης υποδηλώνουν ότι η ενεργοποίηση της σηματοδότησης Notch1 στα κύτταρα B16 μπορεί να αποτρέψει την αντικαρκινική ανοσία μέσω της ανύψωσης της έκφρασης του γονιδίου TGF-β1.

Το νεογαμβογικό οξύ επάγει την απόπτωση των κυττάρων μελανώματος B16 μέσω του σηματοδοτικού μονοπατιού PI3K/Akt/mTOR

Η μελέτη αυτή διεξήχθη από τον Chunlan Wu και τους συναδέλφους του το 2020 και δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Acta Biochimica Polonica. Η έρευνα αυτή αναφέρει ότι το νεογαμβογικό οξύ, μια φυσική ένωση, μπορεί να προκαλέσει το θάνατο των κυττάρων του μελανώματος B16 μέσω της διαμόρφωσης του καταρράκτη σηματοδότησης PI3K/Akt/mTOR.

Ένα σύμπλοκο ιριδίου (III) ως ισχυρός αντικαρκινικός παράγοντας επάγει απόπτωση και αυτοφαγία σε κύτταρα B16 μέσω αναστολής του μονοπατιού AKT/mTOR

Αυτή η ερευνητική εργασία δημοσιεύθηκε στο European Journal of Medicinal Chemistry το 2018. Σε αυτή τη μελέτη, οι ερευνητές διερεύνησαν την αντικαρκινική δράση μιας ένωσης, του συμπλόκου ιριδίου (III), χρησιμοποιώντας κύτταρα μελανώματος B16.

Η αϊλανθόνη επάγει τη διακοπή του κυτταρικού κύκλου και την απόπτωση στα κύτταρα μελανώματος B16 και A375

Η μελέτη αυτή πρότεινε ότι μια φυτική βιοδραστική ουσία, η Αιλάνθονη, διαθέτει αντικαρκινικό δυναμικό, καθώς μπορεί να προκαλέσει απόπτωση και διακοπή του κυτταρικού κύκλου σε κύτταρα μελανώματος B16 και A375. Η εργασία αυτή δημοσιεύθηκε στο Biomolecules το 2019.

6. πηγές για την κυτταρική σειρά B16: Μ1616: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Υπάρχουν περιορισμένοι πόροι για την κυτταρική σειρά B16 που εξηγούν τα πρωτόκολλα καλλιέργειας και διαμόλυνσης.

Καλλιέργεια κυττάρων μελανώματος: Αυτό το βίντεο παρέχει πολύτιμες συμβουλές για την καλλιέργεια κυτταρικών σειρών μελανώματος.
Υποκαλλιέργεια μιας κυτταρικής σειράς: Αυτό το βίντεο εξηγεί ένα γενικό πρωτόκολλο υποκαλλιέργειας για μια κυτταρική σειρά.
Μεταμόλυνση της κυτταρικής σειράς B16F10: Αυτό το βίντεο εξηγεί το πρωτόκολλο μεταμόλυνσης για μια υπογραμμή κυττάρων μελανώματος B16. Μπορεί να σας βοηθήσει να βελτιστοποιήσετε το πρωτόκολλο διαμόλυνσης για κύτταρα B16.

Ακολουθούν ορισμένα πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων για κύτταρα B16.

Καλλιέργεια κυττάρων B16: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει όλες τις απαραίτητες πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων B16, συμπεριλαμβανομένων των μέσων ανάπτυξης, της υποκαλλιέργειας, της απόψυξης και της κατάψυξης των κυττάρων.

Αναφορές

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J δέρματος. Διεθνές περιοδικό πειραματικής παθολογίας, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., Το LncRNA MEG3 προάγει την ανάπτυξη, τη μετάσταση και το σχηματισμό μελανώματος μέσω της διαμόρφωσης του άξονα miR-21/E-cadherin. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Η σηματοδότηση Notch1 στα κύτταρα μελανώματος προωθεί την ανοσοκαταστολή που προκαλείται από τον όγκο μέσω της ρύθμισης του TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Το νεογαμβογικό οξύ επάγει την απόπτωση των κυττάρων μελανώματος B16 μέσω του σηματοδοτικού μονοπατιού PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Antitumor activity of ginsenoside Rg3 in melanoma through downregulation of the ERK and Akt pathways. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.