Κύτταρα B16-F10 – Διερεύνηση της κυτταρικής σειράς μελανώματος B16-F10 στην έρευνα για τις μεταστάσεις
Τα κύτταρα B16-F10 αποτελούν μια κυτταρική σειρά μελανώματος που προέρχεται από ποντίκι C57BL/6J. Χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του δέρματος. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να μελετήσουν την ανάπτυξη και την εξέλιξη των όγκων, καθώς και τις θεραπευτικές παρεμβάσεις. Αυτό το άρθρο θα καλύψει τις βασικές πτυχές των κυττάρων μελανώματος B16-F10. Συγκεκριμένα, θα περιλαμβάνει:
- Μέσο ανάπτυξης
- Τα κύτταρα B16-F10 καλλιεργούνται σε μέσο DMEM. Το μέσο συμπληρώνεται με 10% FBS, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L γλυκόζη και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο για ιδανική κυτταρική ανάπτυξη. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων B16-F10 είναι περίπου 20,1 ώρες. Μπορεί να κυμαίνεται από 17 έως 21 ώρες, ανάλογα με τις συνθήκες καλλιέργειας.
- Τύπος ανάπτυξης
- Το B16-F10 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά. Τα κύτταρα αναπτύσσονται γρήγορα και σχηματίζουν μονοστρωματικές καλλιέργειες.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διαθέσιμο από
- Cytion — Παραγγελία B16-F10
- Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς B16-F10
- Πληροφορίες καλλιέργειας των κυττάρων B16-F10
- Κύτταρα B16-F10: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα
- Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων B16-F10
- Δημοσιεύσεις που αναφέρονται στη κυτταρική σειρά B16-F10
- Πόροι για τη κυτταρική σειρά B16-F10: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς B16-F10
- Πληροφορίες καλλιέργειας των κυττάρων B16-F10
- Κύτταρα B16-F10: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα
- Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων B16-F10
- 5. Δημοσιεύσεις που αναφέρονται στη κυτταρική σειρά B16-F10
- Πόροι για τη κυτταρική σειρά B16-F10: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις
Προέλευση και γενικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς B16-F10
Αυτή η ενότητα θα σας δώσει πληροφορίες σχετικά με την προέλευση και τα διακριτικά χαρακτηριστικά των καρκινικών κυττάρων μελανώματος B16F10. Θα σας βοηθήσει να χρησιμοποιήσετε αποτελεσματικά τη κυτταρική σειρά στην ερευνητική σας εργασία. Κυρίως, θα μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα B16-F10; Από πού προέρχεται η B16F10; Ποια είναι η μορφολογία της κυτταρικής σειράς B16F12; Ποιο είναι το μέγεθος του κυττάρου B16F10;
- Η B16-F10 είναι ένας υποκλώνος της κυτταρικής σειράς καρκινικών κυττάρων B16 που προέρχεται από ιστό δέρματος ποντικών C57BL/6J. Εδώ, τα κύτταρα μελανώματος B16F10 αναπτύχθηκαν μετά από ενδοφλέβια έγχυση της σειράς B16 σε ποντίκια με ανοσοκαταστολή ή συγγενή ποντίκια. Αυτά τα κύτταρα επιλέχθηκαν για την ικανότητά τους να σχηματίζουν μεταστατικές αποικίες στους πνεύμονες in vivo και στη συνέχεια καθιερώθηκαν μετά από δέκα κύκλους σχηματισμού αποικιών στους πνεύμονες in vitro [1]. Αναπτύχθηκε από τον Fidler και τους συνεργάτες του το 1976.
- Οι κυτταρικές σειρές B16-F10 έχουν επιθηλιακή εμφάνιση και σχήμα ατράκτου.
- Το κατά προσέγγιση μέγεθος των κυττάρων B16-F10 είναι 15,4 ± 1,4 μm [2].
Κύτταρα B16-F1 και B16-F10
Τα κύτταρα B16-F1 και B16-F10 προήλθαν από τη μητρική κυτταρική σειρά B16. Και τα δύο προέρχονται από την ίδια πηγή και έχουν σχεδόν παρόμοια χαρακτηριστικά. Ωστόσο, η κύρια διαφορά είναι η μεταστατική τους ικανότητα. Τα κύτταρα B16-F10 έχουν υψηλό μεταστατικό δυναμικό, ενώ τα B16-F1 έχουν χαμηλό [3].
Πληροφορίες για την καλλιέργεια των κυττάρων B16-F10
Πριν από το χειρισμό και την καλλιέργεια μιας κυτταρικής σειράς, πρέπει να γνωρίζετε τον χρόνο διπλασιασμού, τα μέσα ανάπτυξης, τις συνθήκες και τα πρωτόκολλα κυτταρικής καλλιέργειας. Σε αυτή την ενότητα θα συζητηθούν τα εξής: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων B16-F10; Πώς καλλιεργούνται τα κύτταρα B16-F10; Ποια είναι τα μέσα καλλιέργειας των κυττάρων B16-F10; Ποιες συνθήκες καλλιέργειας συνιστώνται για τα κύτταρα B16-F10;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων B16-F10
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων B16-F10 είναι περίπου 20,1 ώρες. Μπορεί να κυμαίνεται από 17 έως 21 ώρες, ανάλογα με τις συνθήκες καλλιέργειας.
Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:
Το B16-F10 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά. Τα κύτταρα αναπτύσσονται γρήγορα και σχηματίζουν μονοστρωματικές καλλιέργειες.
Αναλογία διαίρεσης:
Τα κύτταρα B16-F10 υποκαλλιεργούνται με αναλογία διαίρεσης 1:2 έως 1:4. Τα κύτταρα πλένονται με φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα (1x) και στη συνέχεια επωάζονται με διάλυμα μεταφοράς Accutase για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Στα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται. Το συλλεγμένο ίζημα κυττάρων επαναδιαλύεται και τα κύτταρα διανέμονται σε νέα φιάλη που περιέχει φρέσκο μέσο καλλιέργειας σύμφωνα με την αναλογία διαίρεσης.
Μέσο ανάπτυξης:
Τα κύτταρα B16-F10 καλλιεργούνται στο μέσο DMEM. Το μέσο συμπληρώνεται με 10% FBS, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L γλυκόζη και 1,0 mM πυρουβικό νάτριο για ιδανική κυτταρική ανάπτυξη. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Τα κύτταρα B16-F10 καλλιεργούνται σε υγραντικό επωαστήρα στους 37 °C με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας ή στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου για τη διατήρηση της βιωσιμότητας των κυττάρων.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Τα κύτταρα B16-F10 καταψύχονται σε μέσο CM-1 ή CM-ACF για αποθήκευση. Για το σκοπό αυτό, συνιστάται μια διαδικασία αργής κατάψυξης που επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό, προκειμένου να αποφευχθεί οποιοσδήποτε σοκ στα κύτταρα.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα B16-F10 αποψύχονται σε προρυθμισμένο υδατόλουτρο στους 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Στη συνέχεια, τα κύτταρα προστίθενται σε φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Τα συλλεγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται σε μέσο ανάπτυξης και μεταφέρονται σε φιάλες για καλλιέργεια.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για τον χειρισμό και τη διατήρηση της κυτταρικής σειράς B16-F10 απαιτείται εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Κύτταρα B16-F10: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα
Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, έτσι και η B16-F10 παρουσιάζει ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Σε αυτή την ενότητα εξετάζονται μερικά σημαντικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα αυτής της κυτταρικής σειράς μελανώματος του δέρματος.
Πλεονεκτήματα
Η κυτταρική σειρά B16-F10 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο. Τα πλεονεκτήματα των κυττάρων B16-F10 είναι:
Μεταστατικό δυναμικό
Τα κύτταρα B16F10 του μελανώματος του δέρματος παρουσιάζουν υψηλό μεταστατικό δυναμικό, γεγονός που τα καθιστά πολύτιμα για τη μελέτη της μετάστασης του καρκίνου και των υποκείμενων μηχανισμών.
Μοντέλο όγκου in vitro
Τα κύτταρα B16-F10 χρησιμεύουν ως in vitro μοντέλο για τη μελέτη της εξέλιξης και της ανάπτυξης του καρκίνου, βοηθώντας τους ερευνητές να κατανοήσουν τους κυτταρικούς και μοριακούς μηχανισμούς που οδηγούν στον καρκίνο.
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με την κυτταρική σειρά B16-F10 είναι:
Κυτταρική σειρά προερχόμενη από ποντίκι
Η B16-F10 είναι μια κυτταρική σειρά που προέρχεται από ποντίκια, γεγονός που περιορίζει την εφαρμογή της σε μελέτες που αφορούν αποκλειστικά τον άνθρωπο. Τα ερευνητικά ευρήματα από αυτά τα κύτταρα ενδέχεται να μην μεταφράζονται πάντα πιστά στην ανθρώπινη βιολογία.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων B16-F10
Η κυτταρική σειρά B16-F10 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο. Μερικές πολλά υποσχόμενες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς συζητούνται εδώ.
- Έρευνα για τον καρκίνο: Η κυτταρική σειρά B16-F10 αποτελεί ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη των διαδικασιών των καρκινικών κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων του πολλαπλασιασμού, της εισβολής, της μετανάστευσης και του κυτταρικού θανάτου ή της απόπτωσης. Επιπλέον, βοηθά τους ερευνητές να αποκτήσουν γνώσεις σχετικά με τους μοριακούς μηχανισμούς και τις οδούς που καθοδηγούν αυτές τις κυτταρικές διαδικασίες. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 διερεύνησε τον ρόλο του CCR5 (υποδοχέας χημειοκίνης τύπου 5) στη μετάπτωση των κυττάρων του μελανώματος από επιθηλιακά σε μεσεγχυματικά και στη μετάσταση. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι η ανεπάρκεια του CCR5 περιορίζει την ανάπτυξη του όγκου και τη μετάσταση, ενώ η υψηλή έκφραση οδηγεί σε ενισχυμένη ανάπτυξη και μετάσταση των κυττάρων B16-F10. Περαιτέρω έρευνα ανέφερε ότι ο CCR5 ρυθμίζει την έκφραση του TGFβ1, ο οποίος ρυθμίζει τη σηματοδότηση PI3K/AKT/GSK3β για την προώθηση της μετάπτωσης από επιθηλιακά σε μεσεγχυματικά κύτταρα και της κυτταρικής μετανάστευσης [4].
- Δοκιμές και ανάπτυξη φαρμάκων: Τα καρκινικά κύτταρα μελανώματος B16F10 είναι εξαιρετικά επιθετικά και, ως εκ τούτου, κατάλληλα για τη δοκιμή πιθανών αντικαρκινικών φαρμάκων και θεραπειών. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα και αξιολογούν την επίδραση διαφορετικών ενώσεων στην κυτταρική ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό και τη μετάσταση, συμβάλλοντας στην ανάπτυξη φαρμάκων. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 από τη Valentina Nanni και τους συνεργάτες της διερεύνησε τις θεραπευτικές επιδράσεις του υδροαλκοολικού εκχυλίσματος λουλουδιών Spartium junceum. Η μελέτη πρότεινε ότι το εκχύλισμα λουλουδιών ήταν αποτελεσματικό στην πρόκληση γήρανσης στα κύτταρα B16-F10, γεγονός που οδηγεί στην καταστολή της κυτταρικής ανάπτυξης και της μελανογένεσης και, ως εκ τούτου, μπορεί να ασκήσει πιθανές αντικαρκινικές δράσεις [5].
5. Δημοσιεύσεις που αφορούν τη κυτταρική σειρά B16-F10
Ακολουθούν μερικές σημαντικές ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τη κυτταρική σειρά μελανώματος B16-F10:
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Nutrients (2020). Προτείνει ότι το αιθανολικό εκχύλισμα του Sorghum bicolor έχει αντιμελανογενετική δράση στα κύτταρα μελανώματος του δέρματος B16F10.
Η καλσιτριόλη αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό και ενδεχομένως προκαλεί απόπτωση στα κύτταρα B16–F10
Η έρευνα που δημοσιεύθηκε στο Medical Science Monitor Basic Research (2022) πρότεινε ότι το φάρμακο καλσιτριόλη ασκεί αντικαρκινική δράση στα κύτταρα μελανώματος B16-F10 αναστέλλοντας τον πολλαπλασιασμό και προκαλώντας απόπτωση.
Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στο Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι τα καρδόλη, λιπίδια ρεσορκινόλης, ασκούν έντονη κυτταροτοξικότητα στη κυτταρική σειρά B16-F10.
Η μελέτη που δημοσιεύθηκε στο Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) διερεύνησε το αντιμεταστατικό δυναμικό του εκχυλίσματος εξωκαρπίου Ginkgo biloba χρησιμοποιώντας κύτταρα B16-F10.
Αυτή η έρευνα στο World Neurosurgery (2018) πρότεινε ότι η θυμοκινόνη μπορεί να αποτελέσει μια αποτελεσματική θεραπεία κατά των ενδοεγκεφαλικών μεταστατικών βλαβών, καθώς καταστέλλει την ανάπτυξη των κυττάρων B16-F10 και προκαλεί απόπτωση.
Πόροι για τη σειρά κυττάρων B16-F10: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Τα ενδοθηλιακά κύτταρα B16F10 χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του δέρματος. Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που εξηγούν τα πρωτόκολλα καλλιέργειας και μεταμόλυνσης:
- Μεταφορά γονιδίου σε κύτταρα μελανώματος B16F10: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο μπορεί να σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο μεταφοράς γονιδίου για τα κύτταρα B16-F10.
- Μεταφορά B16-F10: Αυτό το έγγραφο εξηγεί το πρωτόκολλο μεταφοράς DNA in vitro για τα κύτταρα μελανώματος του δέρματος B16F10.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο κυτταρικής καλλιέργειας για τα κύτταρα B16-F10:
- Υποκαλλιέργεια B16-F10: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τα καρκινικά κύτταρα μελανώματος B16F10. Περιλαμβάνει μέσα ανάπτυξης, χρόνο διπλασιασμού, συνθήκες καλλιέργειας και πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια κυττάρων, καθώς και χειρισμό κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαστικών καλλιεργειών.
Αναφορές
- Poste, G., et al., Σύγκριση των μεταστατικών ιδιοτήτων κλώνων μελανώματος B16 που απομονώθηκαν από καλλιεργημένες κυτταρικές σειρές, υποδόριους όγκους και μεμονωμένες πνευμονικές μεταστάσεις. Cancer Research, 1982. 42(7): σ. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono, και S. Sugita, Μηχανική φαινοτυπική ανάλυση παραλλαγών κυττάρων μελανώματος B16 για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας με (-)-επιγαλλοκατεχίνη γαλλική χρησιμοποιώντας μια κωνική μικρορευστομηχανική συσκευή. Micromachines, 2019. 10(3): σ. 207.
- Danciu, C., et al., Συμπεριφορά τεσσάρων διαφορετικών υποσειρών κυττάρων μελανώματος ποντικού B16: δέρμα C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): σ. 73-80.
- Liu, J., et al., Η υψηλή έκφραση του CCR5 στο μελάνωμα ενισχύει την επιθηλιο-μεσεγχυματική μετάβαση και τη μετάσταση μέσω του TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): σ. 481-493.
- Nanni, V., et al., Το υδροαλκοολικό εκχύλισμα των λουλουδιών του Spartium junceum L. αναστέλλει την ανάπτυξη και τη μελανογένεση στα κύτταρα B16-F10 προκαλώντας γήρανση. Phytomedicine, 2018. 46: σ. 1-10.