Κυτταρική γραμμή KG-1
Τα κύτταραKG-1 αποτελούν μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά λευχαιμίας που χρησιμοποιείται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα. Προσφέρουν ποικίλες εφαρμογές στην ανοσολογία, τον καρκίνο και την τοξικολογική έρευνα. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για τη μελέτη μηχανισμών ασθενειών και τη δοκιμή πιθανών θεραπειών. Αυτό το άρθρο θα παράσχει ολοκληρωμένες πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά KG-1 που μπορεί να σας βοηθήσουν στην εργασία σας. Ειδικότερα, θα συζητήσει:
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση της κυτταρικής σειράς KG-1
- Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς KG-1
- Κυτταρική σειρά KG-1: KG-1: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων KG-1 στην έρευνα
- Δημοσιεύσεις για τα κύτταρα KG-1
- Πηγές για την κυτταρική σειρά KG-1: KG-1: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
1. Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων KG-1
Η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά μιας κυτταρικής γραμμής βοηθούν έναν ερευνητή να αποφασίσει τη χρήση της στην εργασία του. Μπορείτε να διερευνήσετε αυτές τις πληροφορίες προτού αρχίσετε να εργάζεστε σε αυτήν. Αυτή η ενότητα του άρθρου αναφέρεται στην προέλευση και τα χαρακτηριστικά των μακροφάγων KG-1. Εδώ, θα μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα KG-1 Τι είναι η κυτταρική σειρά KG-1a Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς KG-1 Ποια είναι η μορφολογία των KG-1
- Η KG-1 είναι μια κυτταρική σειρά που μοιάζει με λεμφοβλάστες και προέρχεται από την αναρρόφηση μυελού των οστών ενός καυκάσιου άνδρα (59 ετών) με οξεία μυελογενή λευχαιμία. Δημιουργήθηκε από τους Koeffler και Golde το 1978. Τα κύτταρα αυτά βρίσκονται κυρίως στο στάδιο ωρίμανσης προμυελοκυττάρων ή μυελοβλαστών [1].
- Τα κύτταρα KG-1 διαθέτουν μορφολογία που μοιάζει με λεμφοβλάστη.
- Ο καρυότυπος της κυτταρικής σειράς KG-1 εμφανίζει ψευδοδιπλοειδή αριθμό χρωμοσωμάτων.
KG-1 και KG-1a
Η KG-1a είναι υπογραμμή των γονικών κυττάρων KG-1. Αναπτύχθηκε μετά από 35 περάσματα της κυτταρικής σειράς KG1. Είναι λιγότερο διαφοροποιημένη σε σύγκριση με την κυτταρική σειρά KG-1. Επιπλέον, αυτή η υπογραμμή είναι κυτταροχημικά, μορφολογικά και λειτουργικά λιγότερο ώριμη σε σύγκριση με τη μητρική κυτταρική γραμμή (KG-1).
2. Πληροφορίες καλλιέργειας για την κυτταρική σειρά KG-1
Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει όλες τις επιτακτικές πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια των κυττάρων KG-1 που μπορούν να διευκολύνουν την εργασία σας. Εδώ θα μάθετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της κυτταρικής σειράς KG 1 Ποιες είναι οι συνθήκες καλλιέργειας των μακροφάγων KG-1 Πώς καλλιεργείτε τα κύτταρα KG-1
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων KG-1
|
Χρόνος διπλασιασμού: |
Ο χρόνος διπλασιασμού της KG-1 είναι περίπου 45 ώρες. Ωστόσο, μπορεί να διαφέρει ανάλογα με τις συνθήκες καλλιέργειας. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: |
Τα κύτταρα KG-1 αναπτύσσονται σε εναιώρημα. |
|
Κυτταρική πυκνότητα: |
Η βέλτιστη κυτταρική πυκνότητα για την κυτταρική σειρά KG1 είναι από 1 έως 3 x105 κύτταρα/ml. Για την υποκαλλιέργεια, το εναιώρημα κυττάρων μεταφέρεται σε αποστειρωμένο σωλήνα και φυγοκεντρείται. Στη συνέχεια, τα κύτταρα που συλλέγονται προστίθενται με φρέσκο μέσο και ανασυσσωματώνονται προσεκτικά. Στη συνέχεια, τα κύτταρα διανέμονται σε νέες φιάλες και καλλιεργούνται σε βέλτιστη κυτταρική πυκνότητα. Τα κύτταρα μπορούν να διαχωριστούν όταν φτάσουν σε μέγιστη κυτταρική πυκνότητα 1 - 2 x106 κύτταρα/ml. |
|
Μέσο ανάπτυξης: |
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) που περιέχει 10% FBS, 4,5 g/L γλυκόζη, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,0 mM πυρουβικό νάτριο και 3,0 g/L NaHCO3 χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια των κυττάρων KG-1. Το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται μετά από τρεις ημέρες. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης: |
Η κυτταρική σειρά KG1 AML καλλιεργείται σε υγροποιημένο επωαστήρα σε θερμοκρασία 37°C και με παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: |
Τα κατεψυγμένα κύτταρα διατηρούνται σε φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών για την προστασία της βιωσιμότητας των κυττάρων. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: |
CM-1 ή CM-ACF είναι κατάλληλα για την κατάψυξη κυττάρων KG-1. Τα κύτταρα καταψύχονται με αργή διαδικασία κατάψυξης για την προστασία των κυττάρων από οποιοδήποτε σοκ. Η μέθοδος αυτή επιτρέπει σταδιακή πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C ανά λεπτό. |
|
Διαδικασία απόψυξης: |
Τα κύτταρα αποψύχονται σε προθερμασμένο υδατόλουτρο στους 37 °C έως ότου απομείνει μια μικρή μάζα πάγου. Τα αποψυγμένα κύτταρα προστίθενται με το φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το κυτταρικό σφαιρίδιο ανασυσσωματώνεται προσεκτικά και χύνεται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: |
Το εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1 είναι απαραίτητο για τη διατήρηση των κυτταρικών καλλιεργειών KG-1. |
3. KG-1 κυτταρική σειρά: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, η κυτταρική σειρά KG-1 μυελοειδούς λευχαιμίας συνδέεται επίσης με πολλά πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Σε αυτή την ενότητα, θα μάθουμε για ορισμένα αξιοσημείωτα από αυτά που μπορεί να είναι κρίσιμα για να αποφασίσετε τη χρήση της στην έρευνά σας.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα των κυττάρων KG-1 είναι τα εξής:
-
Ευκολία στην καλλιέργεια
Τα κύτταρα KG-1 καλλιεργούνται εύκολα στα ερευνητικά εργαστήρια, διαθέτοντας απλές απαιτήσεις κυτταροκαλλιέργειας. Η εύκολη συντήρησή τους και οι συνθήκες ανάπτυξής τους παρέχουν πρόσβαση σε ένα ευρύ φάσμα ερευνητών με βασικές εγκαταστάσεις κυτταροκαλλιέργειας.
-
Μοντέλο οξείας μυελοειδούς λευχαιμίας (AML)
Προερχόμενη από έναν άνδρα ασθενή με οξεία μυελογενή λευχαιμία (ΟΜΛ), η κυτταρική σειρά KG-1 AML χρησιμεύει ως πολύτιμο εργαλείο για τη διερεύνηση της βιολογίας της ΟΜΛ και τη διεξαγωγή έρευνας σχετικά με πιθανά θεραπευτικά μέσα, προσφέροντας πληροφορίες για τους υποκείμενους μηχανισμούς και τις στρατηγικές θεραπείας αυτής της νόσου.
περιορισμοί
Οι περιορισμοί που σχετίζονται με την κυτταρική σειρά KG1 είναι οι εξής:
-
Μοντέλο in vitro
Τα κύτταρα KG-1 αποτελούν πολύτιμο in vitro μοντέλο για την έρευνα της AML- ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι ενδέχεται να μην αναπαράγουν πλήρως την πολυπλοκότητα της νόσου in vivo, χρησιμεύοντας ως απλουστευμένο κυτταρικό μοντέλο που ενδέχεται να μην περιλαμβάνει όλες τις πτυχές της βιολογίας της AML.
4. Εφαρμογές των κυττάρων KG-1 στην έρευνα
Το KG-1 προσφέρει αρκετές υποσχόμενες εφαρμογές στη βιοϊατρική έρευνα. Ορισμένες από τις σημαντικές ερευνητικές χρήσεις των μακροφάγων KG1 περιλαμβάνουν:
- Έρευνα για τον καρκίνο: KG-1 προέρχονται από ασθενή με οξεία μυελογενή λευχαιμία και ως εκ τούτου θεωρούνται πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο για τη διερεύνηση της βιολογίας της ΟΜΛ. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να μελετήσουν τους κυτταρικούς και μοριακούς μηχανισμούς που οδηγούν στην ανάπτυξη, την ανάπτυξη και την αντίσταση στα φάρμακα της AML. Αυτό περιλαμβάνει επίσης τον εντοπισμό και την ανακάλυψη νέων βιοδεικτών, γενετικών μεταλλάξεων και σηματοδοτικών μονοπατιών που σχετίζονται με την AML. Όπως, μια μελέτη που διεξήχθη το 2019 διερεύνησε ότι το μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA linc00239 διευκολύνει την αντίσταση στη δοξορουβικίνη και την κακοήθη συμπεριφορά σε κύτταρα οξείας μυελοειδούς λευχαιμίας, KG-1. Περαιτέρω μελέτη αποκάλυψε ότι το lncRNA ενεργοποιεί τη σηματοδότηση PI3K/Akt/mTOR για την άσκηση αυτών των επιδράσεων σε κύτταρα AML [2].
- Τοξικολογία: Η κυτταρική σειρά KG1 χρησιμοποιείται ευρέως στην τοξικολογική έρευνα. Οι ερευνητές δοκιμάζουν την τοξικότητα και την αποτελεσματικότητα δυνητικών θεραπευτικών παραγόντων, συμπεριλαμβανομένων χημειοθεραπευτικών φαρμάκων και στοχευμένων θεραπειών σε κύτταρα μυελοειδούς λευχαιμίας KG1, για να εντοπίσουν υποσχόμενους υποψήφιους φαρμακευτικούς παράγοντες για μελλοντικές προκλινικές και κλινικές αξιολογήσεις. Η έρευνα που διεξήχθη το 2018 ανέλυσε την τοξικότητα των νανο-νηοσωμάτων που περιέχουν δοξορουβικίνη στην κυτταρική σειρά KG1 AML. Η μελέτη πρότεινε ότι το νανο-νιόσωμα είναι κατάλληλος φορέας για τη χορήγηση φαρμάκων, καθώς ενισχύει την αποτελεσματικότητα της θεραπείας [3]. Σε μια άλλη έρευνα, οι ερευνητές διερεύνησαν τις θεραπευτικές επιδράσεις του τσαγιού τσουκνίδας που παρασκευάζεται από τα φύλλα του φυτού Urtica dioica. Η μελέτη αποκάλυψε ότι αυτό το υδατικό εκχύλισμα φύλλων του φυτού ασκεί αντικαρκινικές επιδράσεις σε κύτταρα οξείας μυελοειδούς λευχαιμίας, KG-1 και U937 [4].
5. Δημοσιεύσεις για τα κύτταρα KG-1
Σε αυτό το τμήμα του άρθρου παρατίθενται μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα KG-1.
Αυτή η εργασία δημοσιεύθηκε στο Journal of Cellular Physiology (2019). Η μελέτη πρότεινε ότι η ένωση κερκετίνη ευαισθητοποιεί την κυτταρική σειρά KG1 AML έναντι του συνδέτη που προκαλεί απόπτωση και σχετίζεται με τον TNF (TRAIL) και μπορεί να αναβαθμίσει την επίδραση της κυτταροτοξικότητας που προκαλείται από το TRAIL στα κύτταρα.
Αυτό το άρθρο στο Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) πρότεινε ότι η μείωση του μεταγραφικού παράγοντα 8 τύπου krüppel καταστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων της AML και τη γλυκόλυση, ενθαρρύνοντας την απόπτωση μέσω της ρύθμισης της σηματοδοτικής οδού AKT/mTOR.
Αυτή η μελέτη στο Cell Journal (Yakhteh) (2020) διερεύνησε τις πιθανές επιδράσεις του τριοξειδίου του αρσενικού και της σοραφενίμπης στα κύτταρα U937 και KG-1.
Αυτή η μελέτη που δημοσιεύθηκε στο Medical Oncology (2020) αξιολόγησε το OXPHOS και τη γλυκόλυση ως θεραπευτικούς στόχους στην κυτταρική σειρά AML, KG-1.
Αυτή η δημοσίευση Drug Design, Development, and Therapy, 2020 πρότεινε ότι οι ενώσεις κουρκουμίνης και θαλιδομίδης ασκούν συνεργιστικά αποπτωτικά αποτελέσματα στα κύτταρα KG-1 μέσω της μείωσης της έκφρασης των STAT3 και Bcl-xL.
6. Πόροι για την κυτταρική σειρά KG-1: KG-1: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικοί διαδικτυακοί πόροι που είναι διαθέσιμοι για τα κύτταρα KG-1.
- Υποκαλλιέργεια κυττάρων εναιωρήματος: Αυτό το βίντεο περιγράφει το πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια καλλιεργειών κυττάρων εναιωρήματος όπως η KG-1.
Ο ακόλουθος σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων KG-1:
- Κυτταρική σειρά KG-1: Αυτός ο δικτυακός τόπος είναι γεμάτος με βασικές πληροφορίες για την κυτταρική καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς KG-1. Περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με τα μέσα της κυτταρικής σειράς και πρωτόκολλα για την υποκαλλιέργεια και τον χειρισμό κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαστικών καλλιεργειών.
Αναφορές
- Pelliccia, F., V. Ubertini, and N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis prior to using cell lines in research: Η περίπτωση της κυτταρικής σειράς λευχαιμίας KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Longnon-coding RNA linc00239 promotes malignant behaviors and chemoresistance against doxorubicin partially via activation of the PI3K/Akt/mTOR pathway in acute myeloid leukaemia cells. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Παρασκευή και μελέτη νανο-νηοσωμάτων που περιέχουν δοξορουβικίνη και αξιολόγηση της τοξικότητάς τους στην κυτταρική σειρά KG-1 της οξείας μυελοβλαστικής λευχαιμίας. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Το τσάι τσουκνίδας αναστέλλει την ανάπτυξη των κυττάρων οξείας μυελοειδούς λευχαιμίας in vitro προωθώντας την απόπτωση. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.