Κύτταρα U87MG – Έρευνα για το γλοιοβλάστωμα με χρήση της σειράς U87MG και η επίδρασή της στις μελέτες για τον καρκίνο του εγκεφάλου

Η U-87 MG, η ανθρώπινη πρωτογενής κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος, χρησιμοποιείται ευρέως στη βιολογική έρευνα. Συγκεκριμένα, αυτά τα κύτταρα χρησιμοποιούνται στους τομείς της νευροεπιστήμης και της ανοσο-ογκολογίας.

Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση της κυτταρικής σειράς U-87 MG

Σε αυτή την ενότητα θα εξετάσουμε την προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς U87. Θα μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα U-87 MG; Από πού προέρχονται τα κύτταρα U87; Ποια είναι η πλήρης ονομασία του U-87 MG; Πόσο μεγάλα είναι τα κύτταρα U87; Ποια είναι η μορφολογία της κυτταρικής σειράς U87;

• Η κυτταρική σειρά U87 είναι μια κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος και αστροκυττάρου. Δημιουργήθηκε το 1966 στο Πανεπιστήμιο της Ουψάλα. Τα κύτταρα προήλθαν από έναν 44χρονο άνδρα καυκάσιας καταγωγής που έπασχε από γλοιοβλάστωμα. Αυτή η κυτταρική σειρά ονομάζεται επίσημα U 87 MG, που σημαίνει Uppsala 87 Malignant Glioma (Κακοήθες Γλοίωμα Ουψάλα 87).
• Τα κύτταρα U 87 MG παρουσιάζουν μορφολογία παρόμοια με αυτή των επιθηλιακών κυττάρων.
• Το μέγεθος των κυττάρων U 87 MG κυμαίνεται μεταξύ 12 και 14 µm σε διάμετρο.
• Αυτή η ανθρώπινη κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος είναι υποδιπλοειδής και παρουσιάζει μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 44 σε περίπου 48% του κυτταρικού πληθυσμού. Ωστόσο, υψηλότερες πλειοειδίες παρατηρούνται επίσης στο 5,9% του κυτταρικού πληθυσμού.

Πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων U-87 MG

Πριν ξεκινήσετε την εργασία με κύτταρα U 87 MG, θα πρέπει να ενημερωθείτε σχετικά με τα ακόλουθα βασικά σημεία για την καλλιέργεια αυτών των κυττάρων γλοιοβλαστώματος. Συγκεκριμένα, θα πρέπει να γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού των κυττάρων U 87 MG; Ποια καλλιεργητικά μέσα χρησιμοποιούνται για την καλλιέργεια των κυττάρων U87; Ποια είναι η πυκνότητα σποράς της κυτταρικής σειράς U-87 MG;

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων U-87 MG

Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού:

Τα κύτταρα U 87 MG έχουν χρόνο διπλασιασμού πληθυσμού που κυμαίνεται από 18 έως 38 ώρες.

Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:

Η U 87 MG είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά. Τα κύτταρα έχουν επιμήκη μορφή και αναπτύσσονται ως μονοστρωματικές καλλιέργειες.

Πυκνότητα σποράς:

Για τη σειρά κυττάρων γλοιοβλαστώματος U 87 MG συνιστάται η σπορά σε κυτταρική πυκνότητα 1 x 10^⁴ κύτταρα/cm². Τα προσκολλημένα κύτταρα U87 πλένονται με 1x PBS και επωάζονται με διάλυμα Accutase. Στη συνέχεια, τα αποσυνδεδεμένα κύτταρα φυγοκεντρώνονται και ανακτώνται. Τα κύτταρα επαναδιαλύονται προσεκτικά και προστίθενται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης.

Μέσο ανάπτυξης:

Η κυτταρική σειρά U 87 MG καλλιεργείται σε EMEM (ελάχιστο απαραίτητο μέσο του Eagle) εμπλουτισμένο με 1,0 g/L L-γλυκόζη, 2,0 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM πυρουβικό νάτριο και διάλυμα FBS 10%. Το μέσο πρέπει να ανανεώνεται κάθε 2 έως 3 ημέρες.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Τα κύτταρα U-87 MG απαιτούν υγραντικό επωαστήρα με παροχή 5% CO₂ και θερμοκρασία 37°C για βέλτιστη ανάπτυξη.

Αποθήκευση:

Τα κύτταρα U87 διατηρούνται είτε στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου είτε σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C, προκειμένου να διατηρηθεί η μέγιστη βιωσιμότητα των κυττάρων γλοιοβλαστώματος.

Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:

Τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF είναι κατάλληλα για την κατάψυξη των κυττάρων U 87 MG. Συνιστάται μια διαδικασία αργής κατάψυξης, καθώς αποτρέπει το σοκ στα κύτταρα και προστατεύει τη βιωσιμότητά τους.

Διαδικασία απόψυξης:

Τα φιαλίδια της κατεψυγμένης κυτταρικής σειράς U-87 MG αποψύχονται σε υδατόλουτρο στους 37°C. Στα κύτταρα προστίθενται μέσα ανάπτυξης, ανασυσσωματώνονται και μεταφέρονται για καλλιέργεια σε νέες φιάλες. Αντίθετα, τα κύτταρα U87 μπορούν να φυγοκεντρηθούν για την απομάκρυνση του μέσου κατάψυξης και στη συνέχεια να καλλιεργηθούν.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Για τον χειρισμό των κυτταρικών καλλιεργειών U 87 MG απαιτείται επίπεδο βιοασφάλειας 1.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων U-87 MG

Όταν σκεφτόμαστε μια κυτταρική σειρά, το πρώτο πράγμα που μας έρχεται στο μυαλό είναι: Ποια είναι τα πλεονεκτήματα της χρήσης κυττάρων U-87 MG; Ποια είναι τα μειονεκτήματα των κυττάρων U-87 MG;

Πλεονεκτήματα

Οι κυτταρικές σειρές U-87 MG χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα. Μερικά από τα πλεονεκτήματα που σχετίζονται με αυτή την κυτταρική σειρά είναι:

Πλεονεκτήματα

• Εύκολη καλλιέργεια: Τα κύτταρα U-87 MG είναι εύκολο να διατηρηθούν σε καλλιέργεια. Δεν απαιτούν ιδιαίτερα απαιτητικές ή περίπλοκες συνθήκες καλλιέργειας.
• Ομοιογένεια: Η U-87 MG είναι μια ομοιογενής κυτταρική σειρά. Τα περισσότερα κύτταρα σε έναν πληθυσμό διαθέτουν την ίδια γενετική σύνθεση και, ως εκ τούτου, μοιράζονται παρόμοια χαρακτηριστικά. Αυτά τα κύτταρα χρησιμοποιούνται για τη μελέτη κυτταρικών διεργασιών, τον έλεγχο φαρμάκων και τη διεξαγωγή δοκιμών.
• Καλά χαρακτηρισμένη: Αυτή η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος έχει χαρακτηριστεί καλά ως προς τα χαρακτηριστικά ανάπτυξης, τη μορφολογία και τη γονιδιακή έκφραση, γεγονός που την καθιστά ένα πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο.

Μειονεκτήματα

• Περιορισμένη εφαρμογή: Η U-87 MG είναι μια κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος, οπότε οι εφαρμογές της περιορίζονται κυρίως στη μελέτη των γλοιοβλαστωμάτων και των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών. Ενδέχεται να μην είναι κατάλληλη για τη διερεύνηση άλλων τύπων καρκίνου.

Ερευνητικές εφαρμογές με κύτταρα U-87 MG

Η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος U87MG χρησιμοποιείται ευρέως σε μελέτες για τον καρκίνο, ιδιαίτερα στην έρευνα για το γλοιοβλάστωμα. Μερικές από τις ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων U 87 MG είναι:

• Έρευνα στη βιολογία του καρκίνου: Η κυτταρική σειρά U87 χρησιμοποιείται για τη μελέτη της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου, των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών, των οδών σηματοδότησης και του μικροπεριβάλλοντος του όγκου. Μια μελέτη που δημοσιεύθηκε το 2020 χρησιμοποίησε ένα in vitro μοντέλο γλοιοβλαστώματος, τη σειρά κυττάρων U-87 MG, για να διερευνήσει το γονίδιο BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) ως θεραπευτικό στόχο. Τα ευρήματα έδειξαν ότι το γονίδιο BMAL1 αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων του γλοιοβλαστώματος, καταστέλλοντας την έκφραση των γονιδίων της κυκλίνης Β1, της μεταλλοπρωτεϊνάσης-9 και της φωσφο-AKT [1]. Μια άλλη έρευνα που διεξήχθη το 2019 χρησιμοποίησε την κυτταρική σειρά U87 και διερεύνησε ότι η υπορύθμιση της έκφρασης του παράγοντα μεταγραφής LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor) μπορεί να ενισχύσει την ακτινοευαισθησία των κυττάρων του γλοιώματος μέσω της ρύθμισης προς τα πάνω της οδού FOXO-1. Ο LITAF είναι επίσης γνωστός ως γονίδιο 7 που επάγεται από το p53 (PIG7) [2].
• Ανακάλυψη και ανάπτυξη φαρμάκων: Τα κύτταρα U-87 MG μπορούν να χρησιμοποιηθούν για σκοπούς διαλογής και δοκιμής φαρμάκων, επιτρέποντας στους ερευνητές να εντοπίζουν νέα πιθανά αντικαρκινικά φάρμακα και να αξιολογούν την αποτελεσματικότητα και την τοξικότητά τους. Σε μια έρευνα χρησιμοποιήθηκε η κυτταρική σειρά γλοιοβλαστώματος U-87 MG για την αξιολόγηση του αντικαρκινικού και αντιοξειδωτικού δυναμικού του εκχυλίσματος Inula helenium (L.) [3]. Ομοίως, σε άλλη δημοσίευση αναφέρθηκε η χρήση της κυτταρικής σειράς U-87 για τη δοκιμή της κυτταροτοξικής και αποπτωτικής δράσης φυτικών εκχυλισμάτων [4]. Επιπλέον, έρευνα που δημοσιεύθηκε το 2018 μελέτησε την κυτταροτοξική δράση αλκαλοειδών σεσκιτερπενίου που εξήχθησαν από φυτά του γένους Nuphar σε ευαίσθητες και φαρμακοανθεκτικές κυτταρικές σειρές U-87 MG [5].

Παραγγείλετε σήμερα τη σειρά κυττάρων γλοιώματος U87 MG