Κυτταρική σειρά Neuro-2a
Η Neuro-2a είναι μια νευρική κυτταρική σειρά ποντικού που χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα των νευροεπιστημών. Κυρίως, αυτά τα κύτταρα χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της νευρικής ανάπτυξης, της διαφοροποίησης, της νευροτοξικότητας, των οδών κυτταρικής σηματοδότησης και της ανάπτυξης των αξόνων. Επιπλέον, χρησιμοποιούνται για την ανάπτυξη φαρμάκων και για σκοπούς διαλογής.
Το παρόν άρθρο επικεντρώνεται σε σημαντικές πτυχές των κυττάρων νευροβλαστώματος Neuro-2a που θα μπορούσαν να σας βοηθήσουν πριν ξεκινήσετε την εργασία σας με αυτά. Θα καλύψει κυρίως:
- Τα γενικά χαρακτηριστικά και την προέλευση των κυττάρων Neuro-2a
- Πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
- Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα Neuro-2a
- Πόροι για τα κύτταρα Neuro-2a: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων Neuro-2a
Αυτό το μέρος του άρθρου θα καλύψει το ιστορικό και τα βασικά χαρακτηριστικά της κυτταρικής σειράς Neuro-2a, τα οποία είναι απαραίτητο να γνωρίζετε πριν εργαστείτε με αυτήν. Εδώ, θα μάθετε: Τι είναι η κυτταρική σειρά Neuro-2a; Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς Neuro-2a; Τι είναι η διαφοροποίηση των κυττάρων Neuro-2a; Ποιο είναι το μέγεθος ενός κυττάρου Neuro-2a; Ποια είναι η μορφολογία των κυττάρων Neuro-2a;
- Τα κύτταρα Neuro-2a προήλθαν από έναν αυθόρμητο όγκο (νευροβλάστωμα) ενός ποντικιού αλμπίνο (στέλεχος Α). Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε από τους R.J. Klebe και F.H. Ruddle.
- Τα κύτταρα νευροβλαστώματος Neuro-2a παρουσιάζουν μορφολογία νευρωνικών και αμοιβαδοειδών βλαστικών κυττάρων.
- Το ύψος των κυττάρων Neuro-2a είναι 12 μικρομέτρα [1].
- Ο αριθμός των χρωμοσωμάτων των κυττάρων Neuro-2a μπορεί να κυμαίνεται από 59 έως 193, με μέσο αριθμό τα 95. Ο καρυότυπος αυτών των κυττάρων νευροβλαστώματος είναι ασταθής, κυμαινόμενος από 94 έως 98 χρωμοσώματα.
Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
Τα κύτταρα Neuro-2a χρησιμοποιούνται ευρέως σε ερευνητικά εργαστήρια νευροεπιστημών. Πριν ξεκινήσετε την εργασία με αυτά τα κύτταρα, θα πρέπει να ενημερωθείτε για τις απαραίτητες πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια κυττάρων που αναφέρονται παρακάτω. Αυτό μπορεί να σας βοηθήσει να προχωρήσετε πιο εύκολα. Θα μάθετε: Τι είναι το Neuro-2a , ένα μέσο καλλιέργειας κυττάρων; Πώς καλλιεργούνται τα κύτταρα Neuro-2a; Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων Neuro-2a; Ποια είναι η πυκνότητα σποράς των Neuro-2a ; Ποιο είναι το πρωτόκολλο καλλιέργειας των κυττάρων Neuro-2a; Ποια είναι τα καλλιεργητικά μέσα για τα κύτταρα Neuro-2a;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων Neuro-2a
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων Neuro-2a είναι περίπου 70 ώρες.
Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:
Τα Neuro-2a αποτελούν μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.
Πυκνότητα σποράς:
Η βελτιστοποιημένη πυκνότητα σποράς για τη κυτταρική σειρά Neuro-2a είναι 1 x 10⁴ κύτταρα/cm². Για τη σπορά, τα κύτταρα πλένονται με φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα χωρίς μαγνήσιο και ασβέστιο (1x). Στη συνέχεια, προστίθεται διάλυμα μεταφύτευσης (Accutase) και τα κύτταρα επωάζονται για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Μετά τη διάσπαση των κυττάρων, προστίθεται φρέσκο μέσο καλλιέργειας και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται. Το συλλεγμένο ίζημα κυττάρων επαναδιαλύεται προσεκτικά και τα κύτταρα μεταφέρονται σε δοχείο καλλιέργειας για ανάπτυξη.
Μέσο ανάπτυξης:
Για την καλλιέργεια των κυττάρων Neuro-2a χρησιμοποιείται το EMEM. Περιέχει 10% FBS, 2 mM L-γλουταμίνη, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM πυρουβικό νάτριο και NEAA για ιδανική κυτταρική ανάπτυξη. Το μέσο καλλιέργειας πρέπει να αντικαθίσταται 1 έως 2 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Οι καλλιέργειες Neuro-2a διατηρούνται σε υγρανθέντα επωαστήρα στους 37°C, συνδεδεμένο με παροχή CO₂ 5%.
Αποθήκευση:
Τα κύτταρα πρέπει να αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας ή στη φάση ατμών υγρού αζώτου για μακροπρόθεσμη αποθήκευση.
Διαδικασία κατάψυξης και θρεπτικό μέσο:
Για την κατάψυξη των κυττάρων Neuro-2a χρησιμοποιούνται τα μέσα CM-1 ή CM-ACF. Τα κύτταρα καταψύχονται μέσω μιας διαδικασίας αργής κατάψυξης που επιτρέπει πτώση θερμοκρασίας μόλις 1 °C ανά λεπτό. Αυτό προστατεύει τα κύτταρα από θερμικό σοκ και διατηρεί τη βιωσιμότητά τους.
Διαδικασία απόψυξης:
Για την απόψυξη των κατεψυγμένων καλλιεργειών, το φιαλίδιο τοποθετείται σε υδατόλουτρο στους 37 °C για 40 έως 60 δευτερόλεπτα, έως ότου παραμείνει μόνο ένας μικρός σβώλος πάγου. Στη συνέχεια, προστίθεται καλλιεργητικό μέσο και τα κύτταρα υποβάλλονται σε φυγοκέντρηση. Αυτό το βήμα βοηθά στην απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το ίζημα των κυττάρων αναδιαλύεται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη γεμάτη με καλλιεργητικό μέσο. Στη συνέχεια, τα κύτταρα τοποθετούνται σε επωαστήρα στους 37 °C για τουλάχιστον 24 ώρες.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για τον χειρισμό και τη συντήρηση των καλλιεργειών Neuro-2a απαιτείται εργαστηριακό περιβάλλον βιοασφάλειας επιπέδου 1.
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
- Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
- Πληροφορίες για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων Neuro-2a
- 5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα Neuro-2a
- Πόροι για τα κύτταρα Neuro-2a: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις
Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
Τα κύτταρα Neuro-2a παρουσιάζουν ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που τα διακρίνουν από άλλες νευρωνικές κυτταρικές σειρές. Μερικά αξιοσημείωτα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα αυτών των κυττάρων παρατίθενται εδώ.
Πλεονεκτήματα
Τα πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς Neuro-2a ποντικού νευροβλαστώματος είναι:
-
Εύκολη συντήρηση:
Η κυτταρική σειρά Neuro-2a δεν απαιτεί πολύπλοκες ή περίπλοκες διαδικασίες κυτταρικής καλλιέργειας. Είναι εύκολο να καλλιεργηθούν και να διατηρηθούν σε ερευνητικά εργαστήρια.
-
Μοντέλο νευρωνικών κυττάρων in vitro:
Το Neuro-2a αποτελεί ένα βολικό μοντέλο νευρωνικών κυττάρων που χρησιμοποιείται ευρέως από ερευνητές σε μελέτες ανάπτυξης και διαφοροποίησης νευρώνων.
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα των κυττάρων Neuro-2a είναι:
-
Προέλευση από ποντίκι:
Το Neuro-2a προέρχεται από ποντίκια και οι ερευνητές πρέπει να επιδεικνύουν προσοχή όταν εξάγουν συμπεράσματα από μελέτες που βασίζονται σε ποντίκια σχετικά με την υγεία και τις ασθένειες του ανθρώπου, καθώς η βιολογία των ποντικιών και των ανθρώπων μπορεί να διαφέρει σημαντικά.
Ερευνητικές εφαρμογές της κυτταρικής σειράς Neuro-2a
Τα κύτταρα Neuro-2a προσφέρουν πολλές εφαρμογές στον τομέα της νευροεπιστημονικής έρευνας. Μερικές από τις πολλά υποσχόμενες χρήσεις αυτής της κυτταρικής σειράς αναλύονται εδώ:
- Νευρική ανάπτυξη: Τα Neuro-2a αποτελούν ένα μοντέλο νευρωνικών κυττάρων in vitro που χρησιμοποιείται ευρέως για τη μελέτη της νευρωνικής ανάπτυξης και των σχετικών διεργασιών, όπως η διαφοροποίηση, η ανάπτυξη των αξόνων και ο σχηματισμός συνάψεων. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 χρησιμοποίησε κύτταρα Neuro-2a για να διερευνήσει τον ρόλο του μικροRNA-124 στη διαφοροποίηση των νευρωνικών κυττάρων που προκαλείται από το ρετινοϊκό οξύ [2]. Μια άλλη μελέτη διερεύνησε την έκφραση του υποδοχέα γάμμα του ρετινοϊκού οξέος (RARG) και του miRNA-124 στη κυτταρική σειρά νευροβλαστώματος (N2A). Η μελέτη αυτή πρότεινε ότι ο RARG αποτελεί στόχο του miR-124 και καταστέλλει την ανάπτυξη νευριτών [3].
- Νευροτοξικότητα: Τα κύτταρα Neuro-2a χρησιμοποιούνται επίσης για την αξιολόγηση των τοξικών επιδράσεων φαρμάκων, χημικών ουσιών ή περιβαλλοντικών παραγόντων στα νευρικά κύτταρα. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη από τον Zhihong Yin και τους συνεργάτες του διερεύνησε τη νευροτοξικότητα της δισφαινόλης Α (BPA), μιας περιβαλλοντικής χημικής ουσίας, χρησιμοποιώντας κύτταρα Neuro-2a. Παρατήρησαν ότι η BPA καταστέλλει τη διαφοροποίηση και τον πολλαπλασιασμό των νευρωνικών κυττάρων, διαταράσσοντας την κυτταρική και συναπτική τους ακεραιότητα [4].
- Διαλογή φαρμάκων: Τα κύτταρα Neuro-2a χρησιμοποιούνται επίσης για την αξιολόγηση της θεραπευτικής δράσης διαφόρων φαρμάκων, ενώσεων και φυσικών προϊόντων. Για παράδειγμα, σε μια μελέτη χρησιμοποιήθηκαν κύτταρα Neuro-2a για τη διερεύνηση του αντιοξειδωτικού δυναμικού του φυτικού εκχυλίσματος Gingko biloba. Επιπλέον, η έρευνα κατέληξε στο συμπέρασμα ότι προκαλεί μείωση της συσσωμάτωσης της Αβ και μπορεί να αποτελέσει πιθανή θεραπεία για τη νόσο του Αλτσχάιμερ [5].
5. Ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα Neuro-2a
Ακολουθούν μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές εργασίες που αφορούν τη κυτταρική σειρά Neuro-2a.
Αυτή η μελέτη, που δημοσιεύθηκε στο Journal of Natural Medicines το 2018, διερεύνησε τις θεραπευτικές επιδράσεις αλκαμιδών που απομονώθηκαν από το λευκό πιπέρι (P. nigrum) σε νευρωνικά κύτταρα Neuro-2a.
Αυτή η έρευνα που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Acta Biochimica et Biophysica Sinica» το 2020 πρότεινε ότι το γονίδιο Nkx2.1 διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη του εγκεφάλου των ποντικών, ρυθμίζοντας την κασκάδα σηματοδότησης Shh.
Το άρθρο αυτό δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Toxicology and Industrial Health» (2023) και προτείνει ότι η περιβαλλοντική χημική ουσία δισφαινόλη Α προκαλεί νευροτοξικότητα στα κύτταρα neuro-2a και διαταράσσει τη λειτουργία των συνάψεων και του κυτταροσκελετού τους.
Αυτή η εργασία που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Pharmaceuticals (2021) προτείνει ότι ένα φάρμακο, η εξαρελίνη, ρυθμίζει τις αλυσιδωτές αντιδράσεις PI3K/AKT και MAPK σε κύτταρα νευροβλαστώματος (Neuro-2a) και αναστέλλει την απόπτωση των κυττάρων Neuro-2a που προκαλείται από το υπεροξείδιο του υδρογόνου.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο στο περιοδικό «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2021) προτείνει ότι το εκχύλισμα φρούτων του Emblica officinalis καταστέλλει τη νευροφλεγμονή στα κύτταρα Neuro-2a και, ως εκ τούτου, μπορεί να είναι ευεργετικό για τις νευροφλεγμονώδεις παθήσεις.
Πηγές για τα κύτταρα Neuro-2a: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν οι διαθέσιμες διαδικτυακές πηγές σχετικά με τα κύτταρα Neuro-2a. Περιλαμβάνουν πρωτόκολλο καλλιέργειας και μεταμόλυνσης των κυττάρων Neuro-2a.
- Πρωτόκολλο μεταμόλυνσης των Neuro-2a: Τα Neuro-2a αποτελούν κατάλληλο ξενιστή για μεταμόλυνση. Αυτός ο σύνδεσμος θα σας καθοδηγήσει σχετικά με το πρωτόκολλο μεταμόλυνσης της κυτταρικής σειράς. Η αποτελεσματικότητα της μεταμόλυνσης των Neuro-2a ποικίλλει ανάλογα με το αντιδραστήριο που χρησιμοποιείται.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων Neuro-2a.
- Πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων Neuro-2a: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο υποκαλλιέργειας των κυττάρων Neuro-2a.
- Κύτταρα Neuro-2a: Ο ιστότοπος περιέχει ολοκληρωμένες πληροφορίες σχετικά με τα μέσα καλλιέργειας των κυττάρων Neuro-2a, την πυκνότητα σποράς, καθώς και τα πρωτόκολλα υποκαλλιέργειας και χειρισμού κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαζόμενων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Lulevich, V., et al., Η μηχανική μονοκυττάρων παρέχει ένα ευαίσθητο και ποσοτικό μέσο για τη διερεύνηση των αλληλεπιδράσεων μεταξύ του πεπτιδίου αμυλοειδούς-βήτα και των νευρωνικών κυττάρων. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): σ. 13872-7.
- You, Q., et al., Ο ρόλος του miR-124 στη ρύθμιση της διαφοροποίησης των κυττάρων Neuro-2A που προκαλείται από το ρετινοϊκό οξύ. Neural Regen Res, 2020. 15(6): σ. 1133-1139.
- Su, X., et al., Ο υποδοχέας γάμμα του ρετινοϊκού οξέος αποτελεί στόχο του μικροRNA-124 και αναστέλλει την ανάπτυξη νευριτών. Neuropharmacology, 2020. 163: σ. 107657.
- Yin, Z., et al., Η έκθεση στη δισφαινόλη-Α προκάλεσε νευροτοξικότητα και σχετίζεται με τις συνάψεις και το κυτταροσκελετό στα κύτταρα Neuro-2A. Toxicology in Vitro, 2020. 67: σ. 104911.
- Chen, L., et al., Το εκχύλισμα Gingko biloba (EGb) αναστέλλει το οξειδωτικό στρες σε κύτταρα Neuro 2A που υπερεκφράζουν το APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.