Κύτταρα NIH-3T3: Προώθηση των μελετών για τους ινοβλάστες και των εφαρμογών των NIH-3T3
Η κυτταρική σειρά NIH-3T3, η οποία δημιουργήθηκε το 1962 από ιστό εμβρύου ποντικού Swiss Albino ηλικίας 17 ημερών από τους Howard Green και George Todaro στη Σχολή Ιατρικής του Πανεπιστημίου της Νέας Υόρκης, έχει καταστεί θεμελιώδης πόρος στη βιοϊατρική έρευνα. Αναγνωρισμένα για την υψηλή τους ευαισθησία στον σχηματισμό εστιών του ιού της λευχαιμίας και του ιού του σαρκώματος, τα κύτταρα NIH-3T3 χρησιμεύουν ως κρίσιμο εργαλείο για μια πληθώρα επιστημονικών ερευνών, συμπεριλαμβανομένων των μελετών ιογενούς ογκολογίας, της ανάλυσης της γονιδιακής έκφρασης και της διερεύνησης της δυναμικής της κυτταρικής ανάπτυξης. Η ονομασία «3T3» αντανακλά τη μέθοδο κυτταρικής καλλιέργειας, υποδηλώνοντας ένα διάστημα «μεταφοράς 3 ημερών» με αρχική πυκνότητα σποράς 3 × 10^5 κύτταρα, τονίζοντας τις τυποποιημένες συνθήκες υπό τις οποίες αυτά τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν και πολλαπλασιάστηκαν για πρώτη φορά.
- Μέσο ανάπτυξης
- Δείτε τη σελίδα του προϊόντος
- Χρόνος διπλασιασμού
- Δείτε τη σελίδα του προϊόντος
- Τύπος ανάπτυξης
- Προσκολλητική
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διαθέσιμο από
- Cytion — Παραγγελία NIH-3T3
Διαφορετικές μορφολογίες και εφαρμογές των κυττάρων NIH-3T3
Ένα από τα χαρακτηριστικά γνωρίσματα των κυττάρων NIH-3T3 είναι η μορφολογική τους προσαρμοστικότητα, η οποία ποικίλλει σημαντικά ανάλογα με την πυκνότητα της καλλιέργειας. Σε χαμηλότερες πυκνότητες, αυτοί οι ινοβλάστες εμφανίζουν μια σπειροειδή, μεμονωμένη κυτταρική δομή, η οποία εξελίσσεται σε πυκνά, σπειροειδή μοτίβα καθώς ο πληθυσμός φτάνει στην πλήρη κάλυψη. Με μέση διάμετρο περίπου 18 μm, τα κύτταρα NIH-3T3 προσφέρουν ένα ευέλικτο μοντέλο για σε βάθος μελέτες κυτταρικής βιολογίας, που εκτείνονται από τους μηχανισμούς αποκατάστασης ιστών έως τις περίπλοκες οδούς ρύθμισης του κυτταρικού κύκλου.
Πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια
Βασικές λεπτομέρειες καλλιέργειας:
Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού: Περίπου 20 ώρες.
Τύπος ανάπτυξης: Προσκολλητικές καλλιέργειες.
Πυκνότητα σποράς: Συνιστώμενη: 3 έως 4 x 10^4 κύτταρα/cm^2.
Μέσο ανάπτυξης: DMEM ή Ham's F12, συμπληρωμένο με 5% FBS και 2,5 mM L-γλουταμίνη.
Συνθήκες ανάπτυξης: Διατηρήστε σε θερμοκρασία 37 °C σε υγραντικό επωαστήρα με 5% CO2.
Αποθήκευση: Διατηρείται σε θερμοκρασίες κάτω των -195 °C στην ατμοσφαιρική φάση του υγρού αζώτου.
Μέθοδος κατάψυξης: Χρησιμοποιήστε μέσο CM-1 ή CM-ACF· εφαρμόστε μέθοδο αργής κατάψυξης (πτώση θερμοκρασίας κατά 1 °C).
Πρωτόκολλο απόψυξης: ταχεία θέρμανση σε υδατόλουτρο στους 37 °C, ακολουθούμενη από φυγοκέντρηση για την απομάκρυνση του μέσου κατάψυξης και, στη συνέχεια, επαναδιασπορά σε μέσο ανάπτυξης.
Επίπεδο βιοασφάλειας: Η καλλιέργεια απαιτεί περιβάλλον βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Ελβετικό αλμπίνο ποντίκι σε εργαστήριο.
Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της χρήσης κυττάρων NIH 3T3
Πλεονεκτήματα
Αποτελεσματικότητα μεταφοράς: Γνωστά για τα υψηλά ποσοστά μεταφοράς τους, τα κύτταρα NIH-3T3 είναι εξαιρετικά τόσο για μελέτες παροδικής όσο και για σταθερής γονιδιακής έκφρασης, καθώς υποστηρίζουν μια ποικιλία τεχνικών μεταφοράς.
Χρησιμότητα ως στρώμα υποστήριξης: Αυτά τα κύτταρα χρησιμεύουν συχνά ως στρώμα υποστήριξης για συν-καλλιέργειες με κύτταρα όπως τα κερατινοκύτταρα και τα βλαστοκύτταρα, χάρη στην απελευθέρωση αυξητικών παραγόντων που προάγουν την ανάπτυξη των κυττάρων της συν-καλλιέργειας.
Έρευνα βλαστικών κυττάρων: Τα κύτταρα NIH-3T3 αποτελούν την προτιμώμενη επιλογή στην έρευνα βλαστικών κυττάρων για την πρόκληση πολυδυναμίας χωρίς γενετική τροποποίηση και την παροχή ενός ευνοϊκού περιβάλλοντος για τη διαφοροποίηση των βλαστικών κυττάρων.
Σταθερότητα καλλιέργειας: Τα κύτταρα NIH-3T3 είναι γνωστά για τη σταθερότητά τους και τη χαμηλή συχνότητα αυθόρμητου μετασχηματισμού. Ωστόσο, υπό ορισμένες συνθήκες ή μετά από έκθεση σε συγκεκριμένα ογκογονίδια ή μεταλλαξιογόνα, τα κύτταρα NIH-3T3 μπορούν να υποστούν αυθόρμητο μετασχηματισμό. Αυτός ο μετασχηματισμός μπορεί να οδηγήσει στην απόκτηση καρκινικών ιδιοτήτων, όπως η ανεξέλεγκτη ανάπτυξη, η απώλεια της αναστολής επαφής και η ικανότητα σχηματισμού όγκων όταν εγχύονται σε ευαίσθητους ξενιστές.
Μειονεκτήματα
Ασυνεπές μέγεθος κυττάρων: Η επιμήκης, ατράκτου μορφολογία των κυττάρων NIH-3T3 μπορεί να ποικίλλει, περιπλέκοντας τις αναλύσεις εικόνων στις δοκιμασίες.
Ευαισθησία σε λοιμώξεις: Αυτά τα κύτταρα είναι επιρρεπή σε βακτηριακές και μυκοπλασματικές λοιμώξεις εάν δεν διατηρούνται υπό αυστηρές ασηπτικές συνθήκες, γεγονός που ενδέχεται να επηρεάσει την ακεραιότητα του πειράματος.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NIH-3T3
Μελέτες μεταφοράς DNA: Η ανθεκτικότητα των κυττάρων NIH-3T3 τα καθιστά ιδανικά για την εισαγωγή και τη μελέτη της λειτουργίας διαφόρων γονιδίων, όπως αποδείχθηκε σε έρευνες που εξέτασαν πρωτεΐνες όπως η NAB2-STAT6 και ο ρόλος τους στις κυτταρικές διεργασίες.
Δοκιμασίες με βάση τα κύτταρα: Η αξιοπιστία τους επεκτείνεται σε διάφορες δοκιμασίες, συμπεριλαμβανομένων των δοκιμασιών βιωσιμότητας, απόπτωσης και σχηματισμού εστιών, προσφέροντας πληροφορίες σχετικά με τις κυτταρικές αποκρίσεις υπό διαφορετικές πειραματικές συνθήκες.
Έρευνα του κυτταρικού κύκλου: Ο απλός χειρισμός του κυτταρικού κύκλου της κυτταρικής σειράς μέσω των επιπέδων ορού την καθιστά ένα ισχυρό μοντέλο για τη μελέτη της ρύθμισης του κυτταρικού κύκλου και των ανωμαλιών του σε πλαίσιο ασθενειών.
Βελτιώστε την έρευνά σας με κύτταρα NIH-3T3
Επισκόπηση σημαντικών μελετών που αφορούν τη κυτταρική σειρά ινοβλαστών NIH 3T3
Η κυτταρική σειρά NIH-3T3 έχει διαδραματίσει καθοριστικό ρόλο σε πολυάριθμα ερευνητικά προγράμματα, που καλύπτουν διάφορες πτυχές της κυτταρικής βιολογίας. Ακολουθούν μερικές σημαντικές μελέτες στις οποίες χρησιμοποιήθηκαν αυτά τα κύτταρα:
- Διερεύνηση της πρωτεΐνης σύντηξης NAB2-STAT6: Η μελέτη αυτή, που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Biochemical and Biophysical Research Communications», εξετάζει τον τρόπο με τον οποίο η πρωτεΐνη σύντηξης NAB2-STAT6 επηρεάζει τα κύτταρα NIH-3T3, και συγκεκριμένα τον ρόλο της στην ενίσχυση της κυτταρικής ανάπτυξης και μετανάστευσης μέσω της ρύθμισης του EGR-1.
- Διερεύνηση του APOBEC3 και του ιού της λευχαιμίας των ποντικών: Αυτή η έρευνα, που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Virology, εξετάζει την υπερμετάλλαξη του ιού της λευχαιμίας των ποντικών (AKV) σε κύτταρα NIH-3T3 που εκφράζουν το γονίδιο APOBEC3 του ποντικού.
- Αξιολόγηση του αντιμεταστατικού δυναμικού των επιγενετικών φαρμάκων: Στο περιοδικό «Oncotargets and Therapy», η μελέτη αυτή αξιολογεί τις αντιμεταστατικές επιδράσεις της υδραλαζίνης και του βαλπροϊκού οξέος σε κύτταρα NIH-3T3 που έχουν υποστεί μετασχηματισμό από το RAS.
- Επίδραση της βαϊκαλεΐνης στον πολλαπλασιασμό των NIH-3T3 και στη σύνθεση κολλαγόνου: Η έρευνα αυτή χρησιμοποιεί κύτταρα NIH-3T3 για να διερευνήσει πώς η βαϊκαλεΐνη επηρεάζει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και την παραγωγή κολλαγόνου μέσω της ρύθμισης του άξονα miR-9/ινσουλινοειδούς αυξητικού παράγοντα-1.
- Μελέτη της έλλειψης ριβοφλαβίνης και της ογκογένεσης: Η μελέτη αυτή παρουσιάζει ευρήματα σχετικά με τον τρόπο με τον οποίο η έλλειψη ριβοφλαβίνης στα κύτταρα NIH-3T3 συμβάλλει στην ογκογένεση, προωθώντας τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και διαταράσσοντας τη ρύθμιση των γονιδίων του κυτταρικού κύκλου.
Βασικοί πόροι για την έρευνα με κύτταρα NIH-3T3
Για τους ερευνητές που ενδιαφέρονται να εργαστούν με κύτταρα NIH-3T3, διατίθενται διάφοροι πόροι που καθοδηγούν τα πρωτόκολλα καλλιέργειας και τα πειραματικά πρωτόκολλα:
- Σχηματισμός σφαιροειδών σε κύτταρα NIH-3T3: Αυτό το βίντεο παρέχει μια λεπτομερή περιγραφή του σχηματισμού σφαιροειδών, μιας τεχνικής τρισδιάστατης κυτταρικής καλλιέργειας που συγκεντρώνει τα κύτταρα NIH-3T3 σε συστάδες, προσφέροντας ένα πιο φυσιολογικά σχετικό μοντέλο για μελέτες.
- Παρακολούθηση της ανάπτυξης των κυττάρων NIH-3T3: Μέσω του συστήματος απεικόνισης ζωντανών κυττάρων JuLI Br, αυτό το βίντεο καταγράφει τη δυναμική ανάπτυξης των κυττάρων NIH-3T3 σε διάστημα 65 ωρών, παρουσιάζοντας τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε πραγματικό χρόνο.
Αυτοί οι πόροι έχουν ως στόχο να υποστηρίξουν τις ερευνητικές σας προσπάθειες με κύτταρα NIH-3T3, παρέχοντας τα θεμέλια για επιτυχημένα πειράματα και ανακαλύψεις.
Συχνές ερωτήσεις σχετικά με τα κύτταρα NIH-3T3
Βιβλιογραφία
- Rahimi, A.M., M. Cai και S. Hoyer-Fender, «Heterogeneity of the NIH3T3 Fibroblast Cell Line». Cells, 2022. 11(17): σ. 2677.
- Leibiger, C., et al., Πρώτος μοριακός-κυτταρογενετικός χαρακτηρισμός υψηλής ανάλυσης της κυτταρικής σειράς NIH 3T3 με τη μέθοδο της πολυχρωματικής χρώσης ποντικών. Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4): σ. 306-312.
- Wang, H.-X., et al., Συγκριτική ανάλυση διαφορετικών στρωμάτων τροφοδοσίας με ινοβλάστες 3T3 για την καλλιέργεια βλαστικών κυττάρων του κερατοειδούς κύκλου κουνελιών. International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7): σ. 1021.
- Wang, Z., et al., Διαφοροποίηση νευρωνικών κυττάρων από ινοβλάστες NIH/3T3 υπό καθορισμένες συνθήκες. Development, growth & differentiation, 2011. 53(3): σ. 357-365.
- Park, Y.-S., et al., Η πρωτεΐνη σύντηξης NAB2-STAT6 μεσολαβεί στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και την ογκογενετική εξέλιξη μέσω της ρύθμισης του EGR-1. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020. 526(2): σ. 287-292.
- Mattsson, M., Έκφραση της Sloppymerase™ σε κύτταρα NIH/3T3: Διερεύνηση της ευελιξίας μιας πολυμεράσης σύντηξης επιρρεπούς σε σφάλματα. 2021.
- Sahinturk, V., et al., Η ακρυλαμίδη ασκεί την κυτταροτοξικότητά της σε ινοβλάστες NIH/3T3 μέσω απόπτωσης. Toxicology and Industrial Health, 2018. 34(7): σ. 481-489.
- Lusi, E.A. και F. Caicci, Ανακάλυψη του πρώτου ανθρώπινου ρετρο-γιγαντικού ιού: Περιγραφή της μορφολογίας του, της ρετροϊικής κινάσης και της ικανότητάς του να προκαλεί όγκους σε ποντίκια. bioRxiv, 2019: σ. 851063.
- Endo, M., et al., Η σηματοδότηση E2F1‐Ror2 μεσολαβεί στη συντονισμένη μεταγραφική ρύθμιση για την προώθηση της μετάβασης από τη φάση G1 στη φάση S σε ινοβλάστες NIH/3T3 που διεγείρονται με bFGF. The FASEB Journal, 2020. 34(2): σ. 3413-3428.
- Long, L., et al., Η εξάντληση της ριβοφλαβίνης προάγει την ογκογένεση σε κύτταρα HEK293T και NIH3T3, διατηρώντας τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και ρυθμίζοντας τη μεταγραφή γονιδίων που σχετίζονται με τον κυτταρικό κύκλο. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6): σ. 834-843.