Κύτταρα NCI-H460 – Εξερεύνηση της έρευνας για τον καρκίνο του πνεύμονα με πληροφορίες για την κυτταρική σειρά NCI-H460

Πληροφορίες για την καλλιέργεια κυττάρων NCI-H460

Πρέπει να γνωρίζετε τα ακόλουθα βασικά σημεία για τον σωστό χειρισμό και τη συντήρηση της κυτταρικής σειράς NCI-H460. Θα ενημερωθείτε σχετικά με τον χρόνο διπλασιασμού των NCI-H460, το μέσο καλλιέργειας των NCI-H460 και τις βασικές διαδικασίες καλλιέργειας κυττάρων για τα καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα NCI-H460.

Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων NCI-H460

Χρόνος διπλασιασμού:

Ο χρόνος διπλασιασμού των NCI-H460 είναι περίπου 33 ώρες.

Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:

Τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 είναι προσκολλητικά.

Αναλογία υποκαλλιέργειας:

Η αναλογία υποκαλλιέργειας που συνιστάται για την κυτταρική σειρά NCI-H460 είναι 1:2 και 1:4. Μετά την αφαίρεση του παλαιού μέσου, τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1 x φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα. Στη συνέχεια, τα κύτταρα επωάζονται με διάλυμα μεταφύτευσης Accutase για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Τα αποσυνδεδεμένα κύτταρα επαναδιαλύονται σε μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται. Τα συλλεγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται και μεταφέρονται σε νέα φιάλη για καλλιέργεια.

Μέσο ανάπτυξης:

Ως μέσο καλλιέργειας για το NCI-H460 χρησιμοποιείται το RPMI 1640. Συμπληρώνεται με 10% εμβρυϊκό βοοειδές ορό, 2,1 mM σταθερή γλουταμίνη και 2,0 g/L NaHCO3. Τα μέσα πρέπει να αντικαθίστανται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.

Συνθήκες ανάπτυξης:

Οι καλλιέργειες NCI-H460 διατηρούνται σε θερμοκρασία 37°C σε υγρανθέντα επωαστήρα με συνεχή παροχή 5% CO2.

Αποθήκευση:

Τα καρκινικά κύτταρα πνεύμονα NCI-H460 μπορούν να αποθηκευτούν μακροπρόθεσμα στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας.

Διαδικασία κατάψυξης και θρεπτικό μέσο:

Για την κατάψυξη και αποθήκευση των κυττάρων NCI-H460 χρησιμοποιείται το μέσο CM-1 ή CM-ACF. Συνιστάται η χρήση μεθόδου αργής κατάψυξης για τη διατήρηση της μέγιστης βιωσιμότητας των κυττάρων.

Διαδικασία απόψυξης:

Τα κατεψυγμένα κύτταρα NCI-H460 αποψύχονται σε προθερμασμένο υδατόλουτρο (σε θερμοκρασία 37°C) για 40 έως 60 δευτερόλεπτα, έως ότου απομείνει ένας μικρός σβώλος πάγου. Στα αποψυγμένα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο καλλιέργειας και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το συλλεγόμενο ίζημα κυττάρων επαναδιαλύεται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο καλλιέργειας. Τα κύτταρα NCI-H460 ενδέχεται να χρειαστούν σχεδόν 24 ώρες για να προσκολληθούν στην επιφάνεια της φιάλης.

Επίπεδο βιοασφάλειας:

Τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460 χειρίζονται και διατηρούνται σε εργαστήρια βιοασφάλειας επιπέδου 1.

Δημοσίευση: 2023 | Τελευταία αναθεώρηση: Μάιος 2026

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων NCI-H460

Το NCI-H460 είναι μια κυτταρική σειρά που χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα. Σε αυτή την ενότητα θα εξεταστούν τα γενικά πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα που σχετίζονται με τα καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα NCI-H460.

Πλεονεκτήματα

Τα πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς NCI-H460 για τον μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα είναι:

• Προέλευση του όγκου

  Η κυτταρική σειρά NCI-H460 προήλθε από ασθενή με καρκίνωμα πνεύμονα μεγάλων κυττάρων, αντιπροσωπεύοντας αυτόν τον συγκεκριμένο τύπο καρκίνου του πνεύμονα. Χρησιμοποιούνται ως μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα και την ανάπτυξη νέων και αποτελεσματικών θεραπειών. Τα κύτταρα NCI-H460 έχουν ογκογόνο δυναμικό και μπορούν να εγχυθούν σε ποντίκια με ανοσοανεπάρκεια για τη δημιουργία in vivo μοντέλων όγκων με σκοπό τη μελέτη της ανάπτυξης και της εξέλιξης του όγκου, καθώς και της αποτελεσματικότητας πιθανών φαρμάκων.

• Υψηλοί ρυθμοί πολλαπλασιασμού

  Η σειρά NCI-H460 παρουσιάζει υψηλότερους ρυθμούς ανάπτυξης σε σύγκριση με άλλες κυτταρικές σειρές μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα, όπως η A549. Αυτό το πλεονέκτημα αυξάνει τη διαθεσιμότητά τους και βοηθά τους ερευνητές να διεξάγουν επαναλήψιμα πειράματα που απαιτούν άμεση δράση.

Μειονεκτήματα

Τα μειονεκτήματα που σχετίζονται με τα καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα NCI-H460 είναι:

• Ομοιογένεια

  Τα κύτταρα NCI-H460 είναι ομοιογενή, καθώς προέρχονται από όγκο ενός μόνο ασθενούς. Ως εκ τούτου, γενικά στερούνται της πολυπλοκότητας και της ετερογένειας που παρατηρούνται στους όγκους των ασθενών.

Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NCI-H460

Τα καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα NCI-H460 χρησιμοποιούνται ευρέως σε μελέτες που σχετίζονται με το καρκίνωμα του πνεύμονα. Ακολουθούν μερικές από τις σημαντικές ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NCI-H460:

• Έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα: Τα κύτταρα NCI-H460 αποτελούν ένα ανεκτίμητο μοντέλο για τη διερεύνηση των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών που εμπλέκονται στην ανάπτυξη, την εξάπλωση και τη μετάσταση του όγκου. Επιπλέον, χρησιμοποιούνται για τη μελέτη κρίσιμων οδών σηματοδότησης, μοριακών στόχων και διαφόρων γενετικών μεταλλάξεων που σχετίζονται με την εξέλιξη του καρκίνου του πνεύμονα. Έχουν διεξαχθεί αρκετές μελέτες στα κύτταρα NCI-H460 για την αποτελεσματική διερεύνηση αυτών των παραγόντων. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2019 πρότεινε ότι η υπερέκφραση της πυρηνικής πανταχού παρούσας καζεΐνης και του υποστρώματος των κυκλίν-εξαρτώμενων κινάσεων (NUCKS) εμπλέκεται στην ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων μέσω της ρύθμισης της οδού σηματοδότησης PI3K/AKT [1]. Ομοίως, μια μελέτη in vitro και in vivo χρησιμοποίησε κύτταρα NCI-H460 για τη μελέτη του ρόλου του γονιδίου eIF4E. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι το γονίδιο eIF4E εμπλέκεται στην ανάπτυξη του καρκινώματος του πνεύμονα και στην αγγειογένεση, και μπορεί να αποτελέσει στόχο για την ανάπτυξη πολλά υποσχόμενων φαρμάκων κατά του καρκίνου του πνεύμονα [2].
• Ανακάλυψη και ανάπτυξη φαρμάκων: Η NCI-H460, μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του πνεύμονα, χρησιμοποιείται ευρέως σε μελέτες ανακάλυψης και ανάπτυξης φαρμάκων. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν την τοξικότητα και την αποτελεσματικότητα νέων υποψήφιων φαρμάκων, στοχευμένων θεραπειών και θεραπειών που στοχεύουν κυρίως τις μεταλλάξεις KRAS της NCI-H460. Μια μελέτη που διεξήχθη από τον Haoyue Hu και τους συνεργάτες του το 2023 χρησιμοποίησε κύτταρα NCI-H460 για τη μελέτη των αντικαρκινικών επιδράσεων του φαρμάκου anlotinib. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το anlotinib επηρέασε εν μέρει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα με μετάλλαξη KRAS, αναστέλλοντας την κασκάδα σηματοδότησης MEK/ERK [3]. Ομοίως, μια φαινολική ένωση, το καρνοσικό οξύ, υποβλήθηκε σε έλεγχο για αντιπολλαπλασιαστικές και προαποπτωτικές δραστηριότητες χρησιμοποιώντας κύτταρα NCI-H460 [4].
• Αντοχή στα φάρμακα: Η κυτταρική σειρά NCI-H460 είναι ιδανική για τη μελέτη του μηχανισμού αντοχής του καρκίνου του πνεύμονα στα φάρμακα. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για την ανάπτυξη μοντέλων αντοχής στα φάρμακα, με σκοπό τον εντοπισμό των υποκείμενων γονιδίων, των μοριακών παραγόντων και των οδών σηματοδότησης. Για παράδειγμα, σε μια μελέτη αναπτύχθηκαν κύτταρα NCI-H460 ανθεκτικά στο Pemetrexed, έναν πολυστόχο αντιφολικό παράγοντα, προκειμένου να μελετηθούν οι υποκείμενοι μοριακοί μηχανισμοί της αντοχής στο pemetrexed σε κύτταρα μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα [5].

Ερευνητικές δημοσιεύσεις με θέμα τα κύτταρα NCI-H460

Ακολουθούν μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τη σειρά κυττάρων καρκινώματος του πνεύμονα NCI-H460.

Μια φυσική γλυκάνη από μαύρα φασόλια αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων μέσω των οδών PI3K-Akt και MAPK

Αυτή η μελέτη που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Molecules (2023) πρότεινε ότι μια φυσική α-1,6-γλυκάνη, η BBWPW, από μαύρα φασόλια αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων NCI-H460 μέσω της ρύθμισης της οδού PI3K/AKT/MAPK.

Η διοσκίνη-6′-Ο-οξική αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα μέσω της πρόκλησης διακοπής του κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης που εξαρτάται από την κασπάση

Αυτό το άρθρο στο περιοδικό «Phytomedicine» (2019) διερεύνησε ότι η διοσκίνη-6′-Ο-οξική, μια νέα φυσική ένωση, ασκεί αντιπολλαπλασιαστική δράση στα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H460.

Το miRNA-425-5p ενισχύει την ανάπτυξη του καρκίνου του πνεύμονα μέσω του άξονα σηματοδότησης PTEN/PI3K/AKT

Έρευνα που δημοσιεύθηκε στο BMC Pulmonary Medicine (2020) αναφέρει ότι το microRNA-425-5p ενισχύει την ογκογένεση του καρκίνου του πνεύμονα μέσω της οδού PTEN/PI3K/AKT.

Η κινάλιζαρη ασκεί αντικαρκινική δράση στα κύτταρα A549 του καρκίνου του πνεύμονα, ρυθμίζοντας τις οδούς σηματοδότησης Akt, MAPK, STAT3 και p53

Αυτό το άρθρο στο Molecular Medicine Reports (2017) πρότεινε το αντικαρκινικό δυναμικό και τους υποκείμενους μηχανισμούς της ένωσης κιναιλιζαρίνης στα κύτταρα NCI-H460 και σε άλλα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα.

Το εκχύλισμα αφέψημα του Eucalyptus globulus Labill. αναστέλλει την ανάπτυξη των κυττάρων NCI-H460 αυξάνοντας τα επίπεδα του p53 και μεταβάλλοντας το προφίλ του κυτταρικού κύκλου

Αυτή η έρευνα που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Food and Function (2019) υπογραμμίζει την πιθανή αντικαρκινική δράση του εκχυλίσματος του Eucalyptus globulus Labill. χρησιμοποιώντας κύτταρα NCI-H460. Τα ευρήματα έδειξαν ότι το φυτικό εκχύλισμα επέδειξε αυτές τις επιδράσεις αυξάνοντας την έκφραση του p53 στα κύτταρα NCI-H460 και ρυθμίζοντας το προφίλ του κυτταρικού κύκλου.

Πηγές για τη κυτταρική σειρά NCI-H460: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα

Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που αφορούν τα καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα NCI-H460.

• Μεταφορά γονιδιακού υλικού στα κύτταρα NCI-H460: Αυτό το εκπαιδευτικό βίντεο αποτελεί έναν αναλυτικό οδηγό για τη μεταφορά πλασμιδιακού DNA στα κύτταρα NCI-H460.

Οι παρακάτω σύνδεσμοι περιέχουν απαραίτητες πληροφορίες για την καλλιέργεια των κυττάρων H460. 

• Κύτταρα NCI-H460: Αυτός ο ιστότοπος παρέχει σημαντικές πληροφορίες σχετικά με τα μέσα καλλιέργειας των κυττάρων NCI-H460, καθώς και τις διαδικασίες υποκαλλιέργειας, κατάψυξης και απόψυξης.
• Ανακαλλιέργεια κυττάρων NCI-H460: Αυτό το έγγραφο θα σας καθοδηγήσει σχετικά με την ανακαλλιέργεια και τη δευτεροκαλλιέργεια της κυτταρικής σειράς NCI-H460. Επιπλέον, θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο μεταμόλυνσης για τα κύτταρα NCI-H460.

Βιβλιογραφία

1. Hu, C., et al., Το NUCKS προάγει τον πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την εισβολή των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα μέσω της οδού σηματοδότησης Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): σ. E55-61.
2. Qi, X., et al., Το EGPI-1, ένας νέος αναστολέας της αλληλεπίδρασης eIF4E/eIF4G, αναστέλλει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα και την αγγειογένεση μέσω της οδού σηματοδότησης Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: σ. 109773.
3. Hu, H., et al., Το Anlotinib ασκεί αντικαρκινική δράση σε καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα με μετάλλαξη στο γονίδιο KRAS μέσω της καταστολής της οδού MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: σ. 3579-3587.
4. Corveloni, A.C., et al., Το καρνοσικό οξύ εμφανίζει αντιπολλαπλασιαστικές και προαποπτωτικές επιδράσεις σε καρκινικά κύτταρα πνεύμονα NCI-H460 και μη καρκινικά κύτταρα πνεύμονα IMR-90. Journal of Toxicology and Environmental Health, Μέρος Α, 2020. 83(10): σ. 412-421.
5. Xu, Y.-L., et al., Δημιουργία και χαρακτηρισμός κυττάρων NCI-H460/PMT ανθεκτικών στην πεμετρεξέδη. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (πρώην Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): σ. 731-739.