Κύτταρα NCI-H1299: Έρευνα και κλινικές επιπτώσεις των κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299
Το NCI-H1299 είναι μια αθανατοποιημένη ανθρώπινη κυτταρική σειρά μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα που χρησιμοποιείται ευρέως στην ανοσοογκολογία, την έρευνα για τον καρκίνο και την ανακάλυψη φαρμάκων. Επιπλέον, οι ερευνητές χρησιμοποίησαν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν την ευαισθησία στα φάρμακα, τις υποκείμενες οδούς σηματοδότησης και τους μοριακούς μηχανισμούς που σχετίζονται με τον καρκίνο του πνεύμονα. Εξάλλου, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται για τη μελέτη ιογενών λοιμώξεων, όπως ο SARS-CoV-2.
- Μέσο ανάπτυξης
- Το RPM1 1640 είναι ένα ιδανικό μέσο καλλιέργειας για τα κύτταρα NCI-H1299. Εμπλουτίζεται με 10% εμβρυϊκό βοοειδές ορό, 4500 mg/L γλυκόζη, 2,0 mM L-γλουταμίνη, 1 mM πυρουβικό νάτριο, 1500 mg/L NaHCO3 και 10 mM HEPES. Το μέσο πρέπει να ανανεώνεται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού των NCI-H1299 κυμαίνεται μεταξύ 22-30 ωρών.
- Τύπος ανάπτυξης
- Το NCI-H1299 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διατίθεται από
- Cytion — Παραγγελία NCI-H1299
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων NCI-H1299
- Πληροφορίες καλλιέργειας
- Αγοράστε τη κυτταρική σειρά NCI-H1299: Εργαλεία έρευνας υψηλής ποιότητας για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα
- Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων NCI-H1299
- Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NCI-H1299
- Ερευνητικές δημοσιεύσεις με θέμα τα κύτταρα NCI-H1299
- Πόροι για την κυτταρική σειρά NCI-H1299: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις σχετικά με την κυτταρική σειρά NCI-H1299
- Αναφορές
- Συχνές ερωτήσεις
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων NCI-H1299
Το πρώτο πράγμα που πρέπει να γνωρίζετε για μια κυτταρική σειρά είναι η προέλευσή της και τα γενικά χαρακτηριστικά της, καθώς αυτά σας βοηθούν να σχεδιάσετε τη χρήση της στην έρευνά σας. Αυτή η ενότητα του άρθρου θα σας βοηθήσει να μάθετε ορισμένες σημαντικές πληροφορίες σχετικά με την προέλευση και τα χαρακτηριστικά της NCI-H1299. Για παράδειγμα, τι είναι τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299; Τι είδους κύτταρα είναι τα NCI-H1299; Ποιο είναι το μέγεθος των κυττάρων NCI-H1299; Ποια είναι η διαφορά μεταξύ των κυττάρων A549 και NCI-H1299;
- Η κυτταρική σειρά NCI-H1299 προήλθε από μετάσταση σε λεμφαδένα του πνεύμονα ενός 43χρονου λευκού άνδρα ασθενούς με καρκίνο.
- Αυτά τα κύτταρα παρουσιάζουν ομόζυγη μερική διαγραφή του γονιδίου p53· επομένως, δεν εκφράζουν την πρωτεΐνη p53. Η έλλειψη έκφρασης της πρωτεΐνης p53 στα NCI-H1299 συμβάλλει στην πολλαπλασιαστική τάση των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα H1299.
- Εκτός από το p53, έχει αναφερθεί ότι αυτά τα αθανατοποιημένα κύτταρα φέρουν τη μετάλλαξη KRAS του NCI-H1299, η οποία ευθύνεται για τις ιδιότητες ανάπτυξης, πολλαπλασιασμού, μετανάστευσης και διήθησης τους.
- Ο καρυότυπος του NCI-H1299 είναι σχεδόν διπλοειδής.
- Τα κύτταρα NCI-H1299 έχουν μορφολογία παρόμοια με αυτή των επιθηλιακών κυττάρων.
- Αυτά τα κύτταρα είναι πεπλατυσμένα και έχουν πάχος μικρότερο από 5 µm.
NCI-H1299 και A549
Τα NCI-H1299 και A549 είναι κυτταρικές σειρές μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα. Τα κύτταρα NCI-H1299 είναι πιο επιθετικά και ευαίσθητα σε σύγκριση με τα A549. Και τα δύο παρουσιάζουν σχετικά παρόμοιες μεταλλάξεις, όπως η KRAS. Ωστόσο, σε αντίθεση με τα κύτταρα NCI-H1299, τα κύτταρα A549 εκφράζουν το γονίδιο P53.
Πληροφορίες για την καλλιέργεια
Η διατήρηση μιας κυτταρικής σειράς δεν είναι εύκολη υπόθεση, αν δεν γνωρίζετε όλες τις βασικές πληροφορίες σχετικά με αυτήν, όπως: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού του NCI-H1299; Ποια είναι η πυκνότητα σποράς του NCI-H1299; Ποιο είναι το κύτταρο-μέσο του NCI-H1299; Πώς καλλιεργούνται οι κυτταρικές σειρές NCI-H1299; Αυτή η ενότητα θα σας βοηθήσει να μάθετε τις απαντήσεις σε όλες αυτές τις ερωτήσεις σχετικά με την καλλιέργεια κυττάρων NCI-H1299.
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων NCI-H1299
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού του NCI-H1299 κυμαίνεται μεταξύ 22-30 ωρών.
Προσκολλητικά ή σε εναιώρημα:
Το NCI-H1299 είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.
Αναλογία υποκαλλιέργειας:
Τα κύτταρα NCI-H1299 υποκαλλιεργούνται σε συνιστώμενη αναλογία 1:3 έως 1:6. Για τη σπορά, τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με 1x PBS και επωάζονται με διάλυμα μεταφοράς Accutase για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Τα αποκολλημένα κύτταρα προστίθενται σε φρέσκο καλλιεργητικό μέσο και φυγοκεντρίζονται. Στη συνέχεια, το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης.
Μέσο ανάπτυξης:
Το RPM1 1640 αποτελεί το ιδανικό μέσο καλλιέργειας για τα κύτταρα NCI-H1299. Συμπληρώνεται με 10% εμβρυϊκό βοοειδές ορό, 4500 mg/L γλυκόζη, 2,0 mM L-γλουταμίνη, 1 mM πυρουβικό νάτριο, 1500 mg/L NaHCO3 και 10 mM HEPES. Το μέσο καλλιέργειας πρέπει να ανανεώνεται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Οι καλλιέργειες κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299 διατηρούνται σε υγρανόμενο επωαστήρα στους 37°C με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Η κυτταρική σειρά NCI-H1299 μπορεί να αποθηκευτεί μακροπρόθεσμα στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου ή σε καταψύκτες εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας σε θερμοκρασία κάτω των -150°C.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Τα CM-1 ή CM-ACF είναι μέσα κατάψυξης για τα κύτταρα NCI-H1299. Τα κύτταρα καταψύχονται χρησιμοποιώντας μια διαδικασία αργής κατάψυξης που επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 βαθμό ανά λεπτό, προκειμένου να προστατευθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα NCI-H1299 αναδεύονται γρήγορα σε προθερμασμένο υδατόλουτρο στους 37 βαθμούς Κελσίου για 40 έως 60 δευτερόλεπτα, έως ότου απομείνει ένα μικρό κομμάτι πάγου. Στα αποψυγμένα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο και μπορούν να καλλιεργηθούν απευθείας σε νέες φιάλες ή να υποβληθούν σε φυγοκέντρηση. Στην πρώτη περίπτωση, το μέσο πρέπει να αντικατασταθεί μετά από 24 ώρες επώασης. Η φυγοκέντρηση βοηθά στην απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Στη συνέχεια, τα συλλεγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται σε φρέσκο μέσο και μεταφέρονται στη νέα φιάλη για καλλιέργεια.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για τον χειρισμό της κυτταρικής καλλιέργειας NCI-H1299 απαιτείται εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Αγοράστε την κυτταρική σειρά NCI-H1299: Ερευνητικά εργαλεία υψηλής ποιότητας για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα
Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων NCI-H1299
Όπως και άλλες ανθρώπινες καρκινικές κυτταρικές σειρές, το NCI-H1299 διαθέτει επίσης ορισμένα διακριτά χαρακτηριστικά που συνδέονται με συγκεκριμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Εδώ, έχουμε συνοψίσει μερικά σημαντικά από αυτά.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς NCI-H1299 για τον μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα είναι:
-
Μοντέλο καρκίνου του πνεύμονα in vitro
Οι κυτταρικές σειρές NCI-H1299 έχουν αναπτυχθεί από μεταστάσεις σε λεμφαδένες καρκινώματος του πνεύμονα και, ως εκ τούτου, διαθέτουν σχετικά παρόμοιες ιδιότητες. Επομένως, αυτά τα κύτταρα μπορούν να χρησιμεύσουν ως μοντέλο in vitro για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα, των κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών, καθώς και για τον έλεγχο και τη δοκιμή πιθανών θεραπευτικών αγωγών.
-
Εύκολη καλλιέργεια
Τα κύτταρα NCI-H1299 είναι εύκολα στην καλλιέργεια και τη συντήρησή τους σε ερευνητικό εργαστήριο. Δεν υπάρχουν ιδιαίτερα απαιτητικές προδιαγραφές και διαδικασίες για την καλλιέργειά τους.
-
Μετάλλαξη P53 και KRAS στα κύτταρα NCI-H1299
Τα κύτταρα NCI-H1299 στερούνται έκφρασης του γονιδίου p53, γεγονός που επιτρέπει στα κύτταρα να πολλαπλασιάζονται έντονα. Επιπλέον, φέρουν τη μετάλλαξη KRAS, η οποία συμβάλλει στην ανάπτυξη, τον πολλαπλασιασμό, την εισβολή και τη μετανάστευση των κυττάρων. Λαμβάνοντας αυτά υπόψη, οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα H1299 για τη μελέτη μοριακών μηχανισμών που σχετίζονται με τις μεταλλάξεις KRAS και P53.
Μειονεκτήματα
Τα μειονεκτήματα των κυττάρων NCI-H1299 είναι:
-
Ιστοειδικότητα
Τα NCI-H1299 προέρχονται από πνευμονικό ιστό. Ως εκ τούτου, η εφαρμογή τους περιορίζεται κυρίως στην έρευνα για το καρκίνωμα του πνεύμονα. Ενδέχεται να μην αντιπροσωπεύουν πλήρως την ετερογένεια και τα γενικά χαρακτηριστικά άλλων τύπων καρκίνου.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων NCI-H1299
Η κυτταρική σειρά NCI-H1299 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα. Εδώ αναφέρονται μερικές πολλά υποσχόμενες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς.
- Βιολογία του καρκίνου: Τα κύτταρα NCI-H1299 αποτελούν ένα εξαιρετικό ερευνητικό εργαλείο για τη μελέτη της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου, καθώς και των σχετικών κυτταρικών και μοριακών μηχανισμών. Τα κύτταρα αυτά φέρουν συγκεκριμένες μεταλλάξεις, επιτρέποντας στους ερευνητές να διερευνήσουν τις σχετικές συμπεριφορές των καρκινικών κυττάρων, τις οδούς σηματοδότησης και τα προφίλ γονιδιακής έκφρασης. Αρκετές μελέτες έχουν χρησιμοποιήσει τη κυτταρική σειρά NCI-H1299 του μη μικροκυτταρικού καρκινώματος του πνεύμονα για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 διερεύνησε τη διαδρομή σηματοδότησης που εμπλέκεται στην απόπτωση των καρκινικών κυττάρων του πνεύμονα χρησιμοποιώντας κύτταρα NCI-H1299. Οι ερευνητές διαπίστωσαν ότι η οδός PI3K/AKT συμβάλλει στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και ότι η αναστολή της μπορεί να προκαλέσει τον θάνατο των καρκινικών κυττάρων [1]. Ομοίως, μια άλλη έρευνα διερεύνησε τους μηχανισμούς που εμπλέκονται στην επιθηλιο-μεσεγχυματική μετάβαση (EMT) της σειράς NCI-H1299. Η μελέτη αυτή πρότεινε ότι μια εξωκυτταρική πρωτεΐνη, η SPARC (εκκριόμενη πρωτεΐνη όξινη και πλούσια σε κυστεΐνη), συμβάλλει στην EMT και τη μετανάστευση των κυττάρων NCI-H1299, προωθώντας έτσι την ογκογένεση στα κύτταρα — η πρωτεΐνη SPARC λειτουργεί ως μεσολαβητής της σηματοδότησης του TGF-β1 [2].
- Ανακάλυψη και διαλογή φαρμάκων: Η NCI-H1299, μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του πνεύμονα, χρησιμοποιείται ευρέως για την αξιολόγηση της τοξικότητας και της αποτελεσματικότητας πιθανών φαρμάκων. Επιπλέον, χρησιμοποιείται από ερευνητές για τη διερεύνηση του μηχανισμού δράσης των αντικαρκινικών φαρμάκων. Μελέτες έχουν επίσης χρησιμοποιήσει αυτά τα κύτταρα για τον εντοπισμό πιθανών φαρμακευτικών στόχων και μηχανισμών αντοχής. Για παράδειγμα, έρευνα που διεξήχθη από τον Xiao-Yun Shen και τους συνεργάτες του διερεύνησε το αντικαρκινικό δυναμικό της φυσικής ένωσης bruceine D (BD). Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι η BD παρεμποδίζει σημαντικά τον πολλαπλασιασμό, την εισβολή και τη μετανάστευση των κυττάρων NCI-H1299. Ως εκ τούτου, μπορεί να θεωρηθεί ως πιθανή συμπληρωματική θεραπεία για τη θεραπεία του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα [3]. Ομοίως, μια μελέτη αξιολόγησε τις κυτταροτοξικές επιδράσεις της ξανθοουμόλης, τόσο μεμονωμένα όσο και σε συνδυασμό με το χημειοθεραπευτικό φάρμακο σισπλατίνη, σε κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα NCI-H1299 [4].
Ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα NCI-H1299
Ακολουθούν μερικές σημαντικές και από τις πιο συχνά αναφερόμενες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τη σειρά κυττάρων καρκινώματος του πνεύμονα NCI-H1299.
Το άρθρο αυτό δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Human and Experimental Toxicology (2021). Η μελέτη πρότεινε ότι η ινδόλη-3-καρβινόλη προκαλεί απόπτωση στα κύτταρα H1299 μέσω της αύξησης των επιπέδων των αντιδραστικών ειδών οξυγόνου (ROS).
Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε το 2018 στο περιοδικό «Cellular Physiology and Biochemistry». Τα ευρήματα της έρευνας αποκάλυψαν ότι ο συνδυασμός καφεϊκού οξέος και πακλιταξέλης ασκεί συνεργιστική αντικαρκινική δράση στη κυτταρική σειρά του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα, NCI-H1299.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Molecular Medicine Reports» (2018). Η μελέτη αξιολόγησε την αντικαρκινική δράση της tubeimoside-1, μιας τριτερπενοειδούς σαπωνίνης, καθώς και τους υποκείμενους μηχανισμούς στην κυτταρική σειρά NCI-H1299.
Αυτό το άρθρο, που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Journal of Cancer (2020), πρότεινε ότι η πριστιμερίνη, μια φυσική ένωση, καταστέλλει τον πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση των κυττάρων NCI-H1299.
Αυτή η μελέτη στο περιοδικό Medical Oncology (2019) διερεύνησε τις πιθανές επιδράσεις της υπερέκφρασης του γονιδίου VIPR1 στη κυτταρική σειρά αδενοκαρκινώματος NCI-H1299.
Πηγές για τη κυτταρική σειρά NCI-H1299: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που αφορούν τα κύτταρα NCI-H1299.
- Μεταφορά γονιδίου στο NCI-H1299: Αυτό το βίντεο εξηγεί το πρωτόκολλο παροδικής μεταφοράς γονιδίου για τις κυτταρικές σειρές NCI-H1299.
- Υποκαλλιέργεια προσκολλητικής κυτταρικής σειράς: Αυτό το βίντεο θα σας βοηθήσει να μάθετε μια γενική διαδικασία υποκαλλιέργειας για μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια των κυττάρων NCI-H1299.
- Κυτταρική σειρά NCI-H1299: Αυτός ο σύνδεσμος μπορεί να σας βοηθήσει να ενημερωθείτε σχετικά με το πρωτόκολλο ανακαλλιέργειας και μεταμόλυνσης των κυττάρων NCI-H1299.
Συχνές ερωτήσεις σχετικά με την κυτταρική γραμμή NCI-H1299
Βιβλιογραφικές αναφορές
- Gu, J., et al., Μελέτη της απόπτωσης που προκαλείται από την EGCG σε κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα μέσω της αναστολής της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): σ. 4557-4563.
- Sun, W., et al., Το SPARC δρα ως μεσολαβητής του TGF‐β1 στην προώθηση της επιθηλιακής προς μεσεγχυματική μετάβαση σε κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα A549 και H1299. Biofactors, 2018. 44(5): σ. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Μια μελέτη σχετικά με τον μηχανισμό δράσης της βρουκεΐνης D στη θεραπεία των κυττάρων H1299 του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): σ. 500.
- Long, B., et al., Κυτταροτοξικές επιδράσεις της ξανθοουμόλης και του συνδυασμού της με την σισπλατίνη σε ανθρώπινα κύτταρα μεταστατικού καρκίνου του πνεύμονα H1299. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): σ. 1-15.