Κύτταρα P19 – Έρευνα για το εμβρυϊκό καρκίνωμα με χρήση κυττάρων P19
Τα P19 είναι μια κυτταρική σειρά εμβρυϊκού καρκινώματος ποντικού. Χρησιμοποιούνται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα, κυρίως για τη μελέτη της αναπτυξιακής βιολογίας, της βιολογίας των βλαστικών κυττάρων, της κυτταρικής διαφοροποίησης και της διαλογής φαρμάκων. Δεδομένου ότι τα κύτταρα P19 διαθέτουν ικανότητα διαφοροποίησης, μπορούν να αποδειχθούν χρήσιμα στη διερεύνηση σύνθετων βιολογικών διεργασιών, όπως ο σχηματισμός ιστών και η πρώιμη εμβρυϊκή ανάπτυξη. Σε αυτό το άρθρο, θα εξετάσουμε τις βασικές αρχές των κυττάρων P19 που προέρχονται από ποντίκια.
- Μέσο ανάπτυξης
- Μέσο DMEM/Ham's F12 που περιέχει 5% εμβρυϊκό βόειο ορό, 3,1 g/L γλυκόζη, 1,6 mM L-γλουταμίνη, 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, 15 mM HEPES και 1,2 g/L NaHCO3 χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια των κυττάρων P19.
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού που έχει αναφερθεί για την κυτταρική σειρά P19 είναι περίπου 2 έως 3 ημέρες.
- Τύπος ανάπτυξης
- Η εμβρυϊκή καρκινική κυτταρική σειρά P19 είναι προσκολλητική.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διατίθεται από
- Cytion — Παραγγελία P19
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων P19
- Πληροφορίες καλλιέργειας για τα κύτταρα P19
- Κυτταρική σειρά P19: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα
- Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων P19
- Αγοράστε σήμερα τη σειρά κυττάρων P19
- Κύτταρα P19: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
- Πόροι για τη σειρά κυττάρων P19: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Εξερεύνηση της κυτταρικής σειράς P19: Συχνές ερωτήσεις
- Αναφορές
- Συχνές ερωτήσεις
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων P19
Η γνώση των γενικών χαρακτηριστικών και της προέλευσης μιας κυτταρικής σειράς είναι απαραίτητη πριν ξεκινήσετε να εργάζεστε με αυτήν. Αυτή η ενότητα θα καλύψει τα εξής: Τι είναι η κυτταρική σειρά P19; Ποιο είναι το μέγεθος του κυττάρου P19; Ποια είναι η προέλευση των κυττάρων P19;
- Η P19 είναι ένας τύπος πολυδύναμων κυττάρων εμβρυϊκού καρκινώματος που προήλθαν αρχικά από τερατοκαρκίνωμα που αναπτύχθηκε σε ποντίκι C3H/He. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε για πρώτη φορά το 1982 από τους McBurney και Rogers.
- Τα κύτταρα P19 μπορούν να αναπτυχθούν συνεχώς σε καλλιεργητικά μέσα εμπλουτισμένα με ορό. Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε άλλους τύπους κυττάρων όταν εκτίθενται σε μη τοξικά φάρμακα, όπως το ρετινοϊκό οξύ και το διμεθυλοσουλφοξείδιο (DMSO) [1].
- Αυτά τα καρκινικά κύτταρα ποντικού παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία.
- Η κυτταρική σειρά P19 έχει ευπλοειδή αρσενικό καρυότυπο (n=40; XY).
Πληροφορίες για την καλλιέργεια των κυττάρων P19
Η κυτταρική σειρά P19 καλλιεργείται ευρέως σε ερευνητικά εργαστήρια λόγω των μοναδικών χαρακτηριστικών της. Η καλλιέργειά της είναι εύκολη και διαχειρίσιμη. Σε αυτή την ενότητα αναφέρονται όλες οι βασικές πληροφορίες που χρειάζεστε για τη διατήρηση και την ανάπτυξη της κυτταρικής καλλιέργειας P19. Θα μάθουμε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων P19; Πώς καλλιεργείται η κυτταρική σειρά P19; Είναι η P19 μια προσκολλητική κυτταρική σειρά;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων P19
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού που έχει αναφερθεί για τη κυτταρική σειρά P19 είναι περίπου 2 έως 3 ημέρες.
Προσκολλητική ή σε εναιώρημα:
Η εμβρυϊκή καρκινική κυτταρική σειρά P19 είναι προσκολλητική.
Αναλογία υποκαλλιέργειας:
Τα κύτταρα P19 πρέπει να υποκαλλιεργούνται κάθε 48 ώρες και πρέπει να διατηρείται αναλογία διαίρεσης 1:10 για αυτά τα κύτταρα. Τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα 1X και επωάζονται με Accutase έως ότου τα κύτταρα αποσυνδεθούν. Στα κύτταρα προστίθεται καλλιεργητικό μέσο και συλλέγονται μέσω φυγοκέντρησης. Τα συλλεγμένα κύτταρα επαναδιαλύονται προσεκτικά και μεταφέρονται σε νέες φιάλες.
Μέσο ανάπτυξης:
Μέσο DMEM/Ham's F12 που περιέχει 5% εμβρυϊκό βοοειδές ορό, 3,1 g/L γλυκόζη, 1,6 mM L-γλουταμίνη, 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, 15 mM HEPES και 1,2 g/L NaHCO3 χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια των κυττάρων P19.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Ένας υγρανόμενος επωαστήρας ρυθμισμένος στους 37°C με παροχή 5% CO₂ είναι απαραίτητος για την ανάπτυξη και την καλλιέργεια της εμβρυϊκής καρκινικής κυτταρικής σειράς P19.
Αποθήκευση:
Τα φιαλίδια με κατεψυγμένα κύτταρα P19 πρέπει να αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε καταψύκτη ή στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου, προκειμένου να διατηρηθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων μακροπρόθεσμα.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Μπορούν να χρησιμοποιηθούν τα μέσα CM-1 ή CM-ACF για την κατάψυξη των κυττάρων P19, χρησιμοποιώντας μια μέθοδο αργής κατάψυξης που προστατεύει τα κύτταρα από τυχόν σοκ και διατηρεί τη βιωσιμότητά τους.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα P19 μπορούν να αποψυχθούν σε υδατόλουτρο στους 37°C, ανακινώντας γρήγορα το φιαλίδιο για 40 έως 60 δευτερόλεπτα. Στα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των στοιχείων του μέσου κατάψυξης. Το μείγμα κυττάρων ανασυσσωματώνεται εκ νέου και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη για ανάπτυξη.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για τη κυτταρική σειρά P19 απαιτούνται εργαστηριακές συνθήκες βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Κυτταρική σειρά P19: Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα
Σε αυτή την ενότητα θα εξεταστούν τα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς P19.
Πλεονεκτήματα
- Δυνατότητα διαφοροποίησης: Τα κύτταρα P19 μπορούν να διαφοροποιηθούν σε διάφορους τύπους κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των καρδιομυοκυττάρων, των νευρώνων και των μικρογλοιακών κυττάρων. Για τη διαφοροποίησή τους απαιτούνται μη τοξικά φάρμακα, όπως το ρετινοϊκό οξύ και το διμεθυλοσουλφοξείδιο (DMSO). Το ρετινοϊκό οξύ προκαλεί την ανάπτυξη νευρώνων, μικρογλοιακών κυττάρων και αστρογλοιακών κυττάρων, ενώ το DMSO ενεργοποιεί την ανάπτυξη καρδιομυοκυττάρων που παλμούν και κυττάρων λείου μυός. Έτσι, τα κύτταρα P19 είναι χρήσιμα στη μελέτη της κυτταρικής διαφοροποίησης και των αναπτυξιακών διαδικασιών.
- Μοντέλο: Η πολυδύναμη σειρά κυττάρων εμβρυϊκού καρκινώματος P19 αποτελεί ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της πρώιμης εμβρυϊκής ανάπτυξης. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα P19 για να διασαφηνίσουν τις οδούς κυτταρικής σηματοδότησης καθώς και τους κυτταρικούς και μοριακούς μηχανισμούς που εμπλέκονται σε αυτές τις διαδικασίες.
Μειονεκτήματα
- Ποντική προέλευση: Η P19 είναι μια ποντική κυτταρική σειρά εμβρυϊκού καρκινώματος. Κατά συνέπεια, τα ευρήματα από μελέτες που χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα ενδέχεται να μην μεταφράζονται πλήρως στην ανθρώπινη βιολογία και τις ανθρώπινες διαδικασίες.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων P19
Τα κύτταρα P19 έχουν διάφορες ερευνητικές εφαρμογές λόγω της ικανότητάς τους για διαφοροποίηση και της συνάφειάς τους με τη βιολογία της ανάπτυξης και την έρευνα των βλαστικών κυττάρων. Μερικές από τις σημαντικές ερευνητικές εφαρμογές των εμβρυϊκών καρκινωματικών κυττάρων P19 περιλαμβάνουν:
- Μελέτες κυτταρικής διαφοροποίησης: Όπως είναι γνωστό, τα κύτταρα P19 μπορούν να διαφοροποιηθούν σε νευρώνες, μικρογλοιακά κύτταρα, κύτταρα λείου μυός και καρδιομυοκύτταρα· ως εκ τούτου, χρησιμοποιούνται ευρέως για τη μελέτη των διαδικασιών κυτταρικής διαφοροποίησης. Επιπλέον, συμβάλλουν στην έρευνα σχετικά με τη νευρική και καρδιακή ανάπτυξη και τους υποκείμενους μηχανισμούς. Μια μελέτη που διεξήχθη το 2018 διαπίστωσε ότι οι αντιδραστικές μορφές οξυγόνου (ROS) κατευθύνουν τη διαφοροποίηση των κυττάρων P19 σε συγκεκριμένους κυτταρικούς τύπους και εμποδίζουν την επαγωγή άλλων [3]. Μια άλλη μελέτη διερεύνησε τη διαδικασία της νευρικής διαφοροποίησης που μεσολαβείται από το ρετινοϊκό οξύ και διαπίστωσε τη συμμετοχή της οδού σηματοδότησης PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Αναπτυξιακή βιολογία: Τα κύτταρα P19 αποτελούν ένα ανεκτίμητο μοντέλο για τη μελέτη της πρώιμης εμβρυϊκής ανάπτυξης. Βοηθούν τους ερευνητές να κατανοήσουν πολύπλοκες βιολογικές διεργασίες, όπως ο σχηματισμός ιστών κατά τη διάρκεια της εμβρυϊκής ανάπτυξης. Η έρευνα χρησιμοποίησε κύτταρα P19 και μελέτησε τους μοριακούς παράγοντες που συμβάλλουν στον σχηματισμό του ελλείμματος του κοιλιακού διαφράγματος (VSD). Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι ένα μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA, το SNHG6, συμβάλλει στο VSD ρυθμίζοντας αρνητικά το miRNA-101 και ενεργοποιώντας την οδό Wnt/β-κατενίνης [5].
- Δοκιμές φαρμάκων: Η κυτταρική σειρά P19 εμβρυϊκού καρκινώματος ποντικού χρησιμοποιείται επίσης για τον έλεγχο πιθανών υποψήφιων φαρμάκων. Σε μια μελέτη χρησιμοποιήθηκαν διαφοροποιημένοι νευρώνες κυττάρων P19 και διερευνήθηκαν οι νευροπροστατευτικές επιδράσεις αναστολής της ακετυλοχολινεστεράσης από τη συνθετική L-Dopa και το υδατικό εκχύλισμα σπόρων Mucuna pruriens. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το φυτικό εκχύλισμα παρουσίασε πολλά υποσχόμενα αποτελέσματα σε σύγκριση με την L-Dopa [6].
Αγοράστε σήμερα την κυτταρική σειρά P19
Κύτταρα P19: Ερευνητικές δημοσιεύσεις
Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις που αφορούν τα κύτταρα P19.
Το άρθρο αυτό δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Oncology Reports το 2017. Η μελέτη πρότεινε ότι οι ορμόνες του φύλου της υπόφυσης καθοδηγούν την προσκόλληση, τον πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση των κυτταρικών σειρών τερατοκαρκινώματος, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων P19.
Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό Experimental & Molecular Medicine (2018) χρησιμοποίησε κύτταρα P19 και μελέτησε τη λειτουργία του μακρού μη κωδικοποιημένου RNA uc.4. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι το uc.4 επηρεάζει την κυτταρική διαφοροποίηση μέσω της ρύθμισης της οδού σηματοδότησης TGF-β.
Αυτό το ερευνητικό άρθρο δημοσιεύθηκε το 2018 στο περιοδικό «Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine». Η μελέτη διαπίστωσε ότι το φυσικό εκχύλισμα εγκεφαλικού ιστού και η τρισδιάστατη κυτταρική καλλιέργεια μπορούν να επιταχύνουν τη διαφοροποίηση των κυττάρων εμβρυϊκού καρκινώματος P19 σε νευρικά κύτταρα.
Η μελέτη αυτή δημοσιεύθηκε το 2020 στο περιοδικό «Journal of Ethnopharmacology». Η μελέτη πρότεινε ότι το εκχύλισμα φύλλων Cichorium intybus L. μπορεί να προκαλέσει τη διαφοροποίηση των κυττάρων εμβρυϊκού καρκινώματος P19 σε β-κύτταρα του παγκρέατος που παράγουν ινσουλίνη.
Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Molecules» (2022). Η μελέτη αυτή διερεύνησε τις νευροπροστατευτικές και ανασταλτικές επιδράσεις της ακετυλοχολινεστεράσης που ασκεί το εκχύλισμα σπόρων Mucuna pruriens στους νευρώνες της κυτταρικής σειράς P19.
Πηγές για τη σειρά κυττάρων P19: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικές πηγές σχετικά με τα κύτταρα P19.
- Πρωτόκολλο νευρωνικής διαφοροποίησης των κυττάρων P19: Αυτό το άρθρο περιέχει το πρωτόκολλο νευρωνικής διαφοροποίησης των κυττάρων P19 και άλλες χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τη διαφοροποίηση των κυττάρων P19.
- Μεταφορά γονιδιακού υλικού στα κύτταρα P19: Αυτός ο σύνδεσμος θα σας βοηθήσει να μάθετε το πρωτόκολλο μεταφοράς γονιδιακού υλικού στα κύτταρα P19.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας των κυττάρων P19.
- Κύτταρα P19: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει όλες τις χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με τη κυτταρική σειρά P19, συμπεριλαμβανομένων των συνθηκών καλλιέργειας, των μέσων καλλιέργειας των κυττάρων P19, της διαίρεσης των κυττάρων και πολλών άλλων.
Εξερεύνηση της κυτταρικής γραμμής P19: P19: Συχνές Ερωτήσεις
Βιβλιογραφία
- McBurney, M.W., Κυτταρική σειρά εμβρυϊκού καρκινώματος P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): σ. 135-40.
- Bressler, J., et al., Γραμμή κυττάρων εμβρυϊκού καρκινώματος P19: Ένα μοντέλο για τη μελέτη των αλληλεπιδράσεων γονιδίου-περιβάλλοντος. Cell Culture Techniques, 2011: σ. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey, και G. Rödel, Τα μιτοχονδριακά ROS κατευθύνουν τη διαφοροποίηση των πολυδύναμων κυττάρων P19 ποντικού. Stem Cell Research, 2018. 30: σ. 180-191.
- Fu, F., et al., Το ολ-τρανς-ρετινοϊκό οξύ προκαλεί τη διαφοροποίηση των κυττάρων P19 σε νευρώνες που εμπλέκονται στην οδό σηματοδότησης PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): σ. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., Το μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA SNHG6 συμβάλλει στον σχηματισμό κοιλιακού διαφραγματικού ελλείμματος μέσω της αρνητικής ρύθμισης του miR-101 και της ενεργοποίησης της οδού Wnt/β-κατενίνης. Die Pharmazie – Διεθνές Περιοδικό Φαρμακευτικών Επιστημών, 2019. 74(1): σ. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., Το υδατικό εκχύλισμα σπόρων Mucuna pruriens παρουσίασε βελτιωμένες νευροπροστατευτικές και ανασταλτικές επιδράσεις στην ακετυλοχολινεστεράση σε σύγκριση με τη συνθετική L-dopa. Molecules, 2022. 27(10): σ. 3131.